CN107847602A - 免疫诱导促进组合物和疫苗药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供免疫诱导促进组合物和含有其的疫苗药物组合物，所述免疫诱导促进组合物具有作为药物或药物添加剂的使用成果，能够安全且有效地诱导细胞免疫应答。本发明涉及一种免疫诱导促进组合物，其特征在于，其包含将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂。

Description

免疫诱导促进组合物和疫苗药物组合物

技术领域

本发明涉及免疫诱导促进组合物和含有其的疫苗药物组合物。更具体而言，本发明涉及诱导细胞免疫的免疫诱导促进组合物和含有其的疫苗药物组合物。或本发明涉及包含该疫苗药物组合物的经皮给药制剂和贴剂。

背景技术

通常广泛使用的疫苗是为了诱导免疫而对微生物或病毒等病原体或其一部分进行给药的物质。除此以外有使细胞免疫机构识别癌细胞特异性抗原，以诱导通过免疫系统对癌细胞的特异性攻击为目的的癌疫苗，作为癌治疗方法之一使用。

通常微生物、病毒由于其大小而被皮肤阻止其侵入，因此疫苗需要侵入式地给药至体内。因此，疫苗的给药通常使用注射。然而，通过注射向皮下或皮内的给药存在如下问题：如疼痛、恐惧、注射痕迹和随后的疤痕、只适用于医务人员；免疫效果高的皮内注射的给药技术难；医务人员有针刺感染事故的风险；进行重复给药时去医院给患者带来生活上的负担；产生注射针等需要特殊废弃的医疗废弃物等，因此未必可以说是最适合的给药路径。

作为疫苗的给药路径，通过注射向皮下或皮内的给药最为普遍，但除此以外还尝试了各种给药路径，通过例如经皮给药(专利文献1)、颊侧、经鼻、舌下等(专利文献2和专利文献3)的免疫诱导。

另外，作为在通过注射的疫苗给药中通常使用的佐剂，氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝之类的铝盐、MF59、ASO3之类的包含鲨烯的乳液等已实际使用，除此以外广泛研究了鞭毛成分、核酸、细胞因子、阳离子聚合物、多肽等。作为通过注射的皮下或皮内以外的疫苗给药路径，例如有向经皮、经粘膜的疫苗给药；作为所研究的佐剂，可列举出：氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝之类的铝盐、霍乱毒素、大肠杆菌不耐热毒素之类的毒素类等，但尚未投入实际使用。这些中的绝大多数作为诱导用于预防源自病毒、细菌等的感染而产生抗体的液性免疫的佐剂而使用。另一方面，若限于细胞免疫诱导，则对于注射而言，研究了弗罗因德氏佐剂、Montanide、GM-CSF、IL-2、IL-12、IFN-γ，但尚未投入实际使用；对于经皮给药、粘膜给药，则霍乱毒素、大肠杆菌不耐热毒素之类的毒素类、核酸类也限于很少量报道的程度。

另外，洛索洛芬(Loxoprofen)、阿司匹林之类的抗炎症剂根据大规模的免疫学研究发现，对于各自的服用患者有癌发生率低这样的报道，但其作用机理尚不明确，可认为其原因之一是抑制癌细胞在转移时释放的PGE2的产生。

一直以来使用的细胞免疫诱导促进剂是促进向Th1细胞的分化之类的Toll样受体配体之类的Th1佐剂、IL-12之类的Th1细胞因子、作为利用抗原的徐放性来提高效果之类的油脂系佐剂的弗罗因德氏佐剂这样有限的种类，其安全性和效果的平衡方面存在问题。另外，若配混没有或几乎没有作为上述那样的药物或药物添加剂的使用成果的物质，则使疫苗的安全性·稳定性变得难以预测，在开发上成为主要障碍。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：美国专利申请公开第2008/0193487号说明书

专利文献2：日本特表2002-531415号公报

专利文献3：美国专利申请公开第2008/0112974号说明书

发明内容

发明要解决的问题

鉴于上述现状，本发明的目的在于提供免疫诱导促进组合物和含有其的疫苗药物组合物，所述免疫诱导促进组合物具有作为药物或药物添加剂的使用成果，能够安全且有效地诱导细胞免疫应答。

用于解决问题的方案

本发明人等为了解决上述课题而进行了深入研究，结果发现通过使用作为药物之一的抗微生物药作为免疫诱导促进剂的有效成分，从而能够制备能安全且有效地诱导细胞免疫应答的免疫诱导促进组合物，以至完成了本发明。

另外，这样的本发明的抗微生物药具有作为药物或药物添加剂的使用成果，因此也适合用作疫苗药物组合物。

即，本发明为一种免疫诱导促进组合物，其特征在于，其包含将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂。

上述抗微生物药优选为选自由抑制细菌的细胞壁合成的化合物、抑制细菌的蛋白质合成的化合物、抑制细菌的核酸合成的化合物、具有抗真菌活性的化合物和具有抗病毒活性的化合物组成的组中的至少一种。

优选的是，上述抑制细菌的细胞壁合成的化合物具有β内酰胺骨架和/或磷霉素骨架，上述抑制细菌的蛋白质合成的化合物具有选自由氨基糖苷类骨架、四环素骨架、大环内酯骨架和酰胺醇骨架组成的组中的至少一种，上述抑制细菌的核酸合成的化合物具有喹诺酮骨架，上述具有抗真菌活性的化合物具有灰黄霉素骨架和/或唑骨架，上述具有抗病毒活性的化合物具有嘌呤骨架和/或金刚烷骨架。

优选的是，上述具有β内酰胺骨架的化合物为头孢呋辛，上述具有磷霉素骨架的化合物为磷霉素，上述具有氨基糖苷类骨架的化合物为新霉素和/或庆大霉素，上述具有四环素骨架的化合物为四环素和/或二甲胺四环素，上述具有大环内酯骨架的化合物为克拉霉素，上述具有酰胺醇骨架的化合物为氯霉素，上述具有喹诺酮骨架的化合物为诺氟沙星，上述具有灰黄霉素骨架的化合物为灰黄霉素，上述具有唑骨架的化合物为咪康唑，上述具有嘌呤骨架的化合物为阿糖腺苷，上述具有金刚烷骨架的化合物为金刚烷胺。

另外，本发明为一种疫苗药物组合物，其特征在于，其用于免疫诱导，其包含抗原和本发明的免疫诱导促进组合物。

本发明的疫苗药物组合物优选对体表面上给药。

另外，本发明的疫苗药物组合物优选通过皮内注射、皮下注射或肌肉注射进行给药。

另外，本发明的疫苗药物组合物优选用于诱导细胞免疫。

以下对本发明进行详细说明。

本发明是包含将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物。

作为上述抗微生物药，可列举出例如：抑制细菌的细胞壁合成的化合物、抑制细菌的蛋白质合成的化合物、抑制细菌的核酸合成的化合物、具有抗真菌活性的化合物、具有抗病毒活性的化合物等。其中，由于作为药物的开发史较长且适应症广泛而临床数据丰富，从而优选抑制细菌的细胞壁合成的化合物、抑制细菌的蛋白质合成的化合物和/或抑制细菌的核酸合成的化合物。进一步优选抑制细菌的细胞壁合成的化合物和/或抑制细菌的蛋白质合成的化合物、最优选抑制细菌的蛋白质合成的化合物。

作为上述抑制细菌的细胞壁合成的化合物，没有特别限定，例如可列举出：具有β内酰胺骨架的化合物、具有磷霉素骨架的化合物、具有异烟酸骨架的化合物和具有糖肽骨架的化合物等，其中优选具有β内酰胺骨架的化合物和/或具有磷霉素骨架的化合物。

作为上述抑制细菌的蛋白质合成的化合物，没有特别限定，例如可列举出：具有氨基糖苷类骨架的化合物、具有四环素骨架的化合物、具有大环内酯骨架的化合物、具有酰胺醇骨架的化合物等，其中更优选具有作用于30S核糖体亚单位的氨基糖苷类骨架的化合物和具有四环素骨架的化合物。

作为上述抑制细菌的核酸合成的化合物，没有特别限定，例如可列举出：具有喹诺酮骨架的化合物和具有氨基水杨酸骨架的化合物等，其中优选具有喹诺酮骨架的化合物。

作为上述具有抗真菌活性的化合物，没有特别限定，例如可列举出：具有灰黄霉素骨架的化合物、具有唑骨架的化合物和具有苄胺骨架的化合物等，其中优选具有灰黄霉素骨架的化合物和/或具有唑骨架的化合物、更优选具有灰黄霉素骨架的化合物。

作为上述具有抗病毒活性的化合物，没有特别限定，例如可列举出：具有嘌呤骨架的化合物和/或具有金刚烷骨架的化合物等，其中优选具有嘌呤骨架的化合物。

可用作上述抗微生物药的化合物优选为具有氨基糖苷类骨架的化合物、具有四环素骨架的化合物、具有β内酰胺骨架的化合物、具有灰黄霉素骨架的化合物、具有喹诺酮骨架的化合物、具有嘌呤骨架的化合物、具有磷霉素骨架的化合物、具有金刚烷骨架的化合物、具有唑骨架的化合物、具有大环内酯骨架的化合物和具有酰胺醇骨架的化合物，更优选为具有氨基糖苷类骨架的化合物、具有四环素骨架的化合物、具有β内酰胺骨架的化合物、具有灰黄霉素骨架的化合物、具有喹诺酮骨架的化合物、具有嘌呤骨架的化合物和具有磷霉素骨架的化合物，最优选为具有氨基糖苷类骨架的化合物和具有四环素骨架的化合物。

作为上述具有β内酰胺骨架的化合物，没有特别限定，例如可优选使用青霉素G、氨苄青霉素、邻氯青霉素、巴氨西林、头孢唑啉、氯氨苄青霉素、头孢氨苄、头孢替安、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢克肟、头孢地尼、头孢噻利、头孢美唑、头孢米诺、拉氢头孢、帕尼培南、美洛培南、法罗培南、噻肟单酰胺菌素、卡鲁莫南及它们的药学上允许的盐等。这些具有β内酰胺骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。其中，从对于β内酰胺酶稳定方面考虑，更优选头孢呋辛。

作为上述具有磷霉素骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：磷霉素等。这些具有磷霉素骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有异烟酸骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：异烟肼等。这些具有异烟酸骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有糖肽骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：万古霉素和替考拉宁等，其中优选万古霉素。这些具有糖肽骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有氨基糖苷类骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：链霉素、新霉素、卡那霉素、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、地贝卡星和阿贝卡星等，其中，优选新霉素和/或庆大霉素。这些具有氨基糖苷类骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有四环素骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：四环素、氯四环素、二甲胺四环素、多西环素、氧四环素和地美环素等，其中，优选四环素和/或二甲胺四环素。这些具有四环素骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有大环内酯骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：克拉霉素、交沙霉素、罗他霉素、红霉素、阿奇霉素、竹桃霉素、吉他霉素、交沙霉素、乙酰螺旋霉素和麦迪霉素等，其中优选克拉霉素。这些具有大环内酯骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有酰胺醇骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：氯霉素和甲砜氯霉素等，其中优选氯霉素。这些具有酰胺醇骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有喹诺酮骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：萘啶酸、吡咯酸、吡哌酸、诺氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、加雷沙星、氟罗沙星、西他沙星、托氟沙星、司氟沙星、加替沙星和莫西沙星等，其中优选诺氟沙星。这些具有喹诺酮骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有氨基水杨酸骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：磺胺甲恶唑和对氨基水杨酸等，其中优选磺胺甲恶唑。这些具有氨基水杨酸骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有灰黄霉素骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：灰黄霉素等。这些具有灰黄霉素骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有唑骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：咪康唑、氟康唑和伊曲康唑等，其中优选咪康唑。这些具有唑骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有苄胺骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：布替那芬等。这些具有苄胺骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有嘌呤骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：阿糖腺苷、阿昔洛韦和更昔洛韦等，其中优选阿糖腺苷。这些具有嘌呤骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

作为上述具有金刚烷骨架的化合物，没有特别限定，例如可列举出：金刚烷胺等。这些具有金刚烷骨架的化合物可以单独使用，也可以组合2种以上来使用。

另外，本发明还是一种疫苗药物组合物，其特征在于，其是用于免疫诱导的疫苗药物组合物，其包含抗原和本发明的免疫诱导促进组合物。

作为上述抗原，可列举出能诱导免疫应答的所有物质。上述抗原没有特别限定，例如可列举出：蛋白质、肽等。对于要求抗原的皮肤渗透性的经皮给药，优选使用分子量小的抗原，可以使用例如由约8～12个氨基酸形成的肽。

上述抗原没有特别限定，例如可列举出：癌抗原肽、源自感染性病原体的抗原。

在本说明书中使用时，术语“癌”是指癌基因的异常表达。作为上述癌，例如可列举出：造血器官肿瘤、实体癌等伴随过量表达的癌。

在本说明书中使用时，术语“基因的异常表达”是指在某细胞中的该基因的表达水平与相同组织的其它细胞相比，以例如2倍以上、4倍以上等的倍率显著上升或降低。

在本说明书中使用时，术语“过量表达”是指异常表达的表达水平的上升。基因的表达水平可以使用该技术领域中公知的任意方法容易地测定。

作为上述癌基因，例如可列举出：存活蛋白基因、GPC3基因、HER2/neu基因、MAGE3基因、MAGE A1基因、MAGE A3/A6基因、MAGE A4基因、MAGE12基因、蛋白酶-3基因、AFP基因、CA-125基因、CD44基因、CEA基因、c-Kit基因、c-met基因、c-myc基因、L-myc基因、COX2基因、Cyclin(细胞周期蛋白)D1基因、Cytokeratin(细胞角蛋白)-7基因、Cytokeratin-19基因、Cytokeratin-20基因、E2F1基因、E2F3基因、EGFR基因、Gli1基因、hCGβ基因、HIF-1α基因、HnRNP A2/B1基因、hTERT基因、MDM基因、MDR-1基因、MMP-2基因、MMP-9基因、Muc-1基因、Muc-4基因、Muc-7基因、NSE基因、ProGRP基因、PSA基因、RCAS1基因、SCC基因、抗胸腺细胞球蛋白(thymoglobulin)基因、VEGF-A基因、VEGF-A基因等。

在伴随上述存活蛋白基因的异常表达的癌中，包括恶性淋巴瘤、膀胱癌、肺癌、大肠癌等，但不限定于这些。在伴随上述GPC3基因的异常表达的癌中，包括肝癌、胆管癌、胃癌等，但不限定于这些。在伴随上述HER2/neu基因的异常表达的癌中，包括乳癌、胃癌、卵巢癌、子宫癌、膀胱癌、非小细胞肺癌、前列腺癌等，但不限定于这些。在伴随上述MAGE3基因的异常表达的癌中，包括黑色素瘤、肺癌、头颈部癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、肝癌等，但不限定于这些。在伴随上述蛋白酶-3基因的异常表达的癌中，包括急性骨髄性白血病、胰腺癌等，但不限定于这些。

在本说明书中使用时，术语“癌抗原”是指在肿瘤细胞或癌细胞特异性表达，能够诱导细胞性免疫应答的蛋白质、肽等物质。

在本说明书中使用时，术语“癌抗原肽”是源自癌抗原蛋白的部分肽，是能够诱导细胞性免疫应答的物质。通常，癌抗原肽通过作为癌基因的产物的癌抗原蛋白在癌细胞内分解而生成，通过MHC I类分子而在癌细胞的表面呈递。

上述癌抗原肽也可以是自癌细胞分离和纯化而成的内源性的癌抗原肽，也可以是具有与内源性的癌抗原肽相同的氨基酸序列的合成肽。作为上述癌抗原肽，具体而言，优选存活蛋白2B肽、GPC3肽、HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽、PR1肽、HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽、HER2/neu_E75肽、MUC1肽或它们的变异肽。

在本说明书中使用时，术语“存活素2B肽”是指由序列Ala Tyr Ala Cys Asn ThrSer Thr Leu(序列号1)组成的、源自癌基因产物存活素的肽。

在本说明书中使用时，术语“GPC3肽”是指由序列Glu Tyr Ile Leu Ser Leu GluGlu Leu(序列号2)组成的、源自癌基因产物GPC3的肽。

在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_A24肽”是指由序列Thr Tyr Leu Pro ThrAsn Ala Ser Leu(序列号3)组成的、源自癌基因产物HER2/neu的HLA-A24限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“MAGE3_A24肽”是指由序列Ile Met Pro Lys Ala GlyLeu Leu Ile(序列号4)组成的、源自癌基因产物MAGE3的HLA-A24限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“PR1肽”是指由序列Val Leu Gln Glu Leu Asn ValThr Val(序列号5)组成的、源自癌基因产物蛋白酶-3的肽。

在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_A02肽”是指由序列Lys Val Phe Gly SerLeu Ala Phe Val(序列号6)组成的、源自癌基因产物HER2/neu的HLA-A02限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“MAGE3_A02肽”是指由序列Lys Val Ala Glu Ile ValHis Phe Leu(序列号7)组成的、源自癌基因产物MAGE3的HLA-A02限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_E75肽”是指由序列Lys Ile Phe Gly SerLeu Ala Phe Leu(序列号8)组成的、源自癌基因HER2/neu的产物(HER2蛋白质)的肽。

在本说明书中使用时，术语“MUC1肽”是指由序列Ser Thr Ala Pro Pro Val HisAsn Val(序列号9)组成的、作为在多个癌细胞上高表达的源自糖蛋白质的MUC1蛋白质的肽。

在本说明书中使用时，术语“改性肽”是指肽的全部或一部分的氨基酸通过置换或修饰等改性而成的肽。

上述改性肽没有特别限定，例如可列举出：(a)肽的氨基酸序列中1个～多个(例如，1个、2个、3个、4个或5个)氨基酸进行了置换、缺失或添加的氨基酸序列的肽；(b)肽的氨基酸序列中全部或一部分氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)进行了修饰的氨基酸序列所组成的肽等。

上述变异肽可能具有的氨基酸的修饰没有特别限定，例如可列举出：乙酰化、甲基化等烷基化、糖基化(Glycosylation)、羟基化、羧基化，醛化、磷酸化、磺酰化、甲酰化、肉豆蔻酰化、棕榈酰化、硬脂酰化等脂肪链附加修饰；辛酰基化、酯化、酰胺化、脱酰胺化、胱氨酸修饰、谷胱甘肽修饰、巯基乙酸修饰等二硫键形成修饰、糖化、泛素化、琥珀酰亚胺形成、谷氨酰化和异戊烯化等。

上述变异肽也可为含有1个以上的氨基酸的置换、缺失或添加与1个以上的氨基酸的修饰组合的肽。

在本说明书中使用时，术语“源自感染性病原体的抗原”是指感染性病原体或其构成成分或源自它们的物质，是能诱导细胞免疫应答的物质。因此，通过将上述源自感染性病原体的抗原与将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂一起给药至对象，从而能够处置或预防感染性疾病。

作为上述源自感染性病原体的抗原，优选IPEP87肽、HBVenv肽或它们的变异肽。

在本说明书中使用时，术语“IPEP87肽”是指由序列Asp Leu Met Gly Tyr IlePro Ala Val(序列号10)组成的、源自丙型肝炎病毒(HCV)蛋白质的肽。

在本说明书中使用时，术语“HBVenv肽”是指由序列Trp Leu Ser Leu Leu ValPro Phe Val(序列号11)组成的、源自乙型肝炎病毒(HBV)蛋白质的肽。

在本说明书中使用时，术语“感染性疾病”是指由于感染性病原体的感染、增殖等而引起的疾病。

作为上述感染性疾病，没有特别限定，例如可列举出：甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、宫颈癌、尖锐湿疣、HIV感染、生殖道沙眼衣原体感染、单纯疱疹等。

上述肽可以是游离形态或药理学上允许的盐的任意盐的形态。

作为上述药理学上允许的盐的任意盐，例如可列举出：酸盐(例如，乙酸盐、TFA盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、氢溴酸盐、琥珀酸盐、硝酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、丙酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、苦味酸盐、苯磺酸盐、十二烷基硫酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、戊二酸盐、各个氨基酸盐)、金属盐(例如，碱金属盐(例如，钠盐、钾盐)、碱土金属盐(例如，钙盐、镁盐)、铝盐)、胺盐(例如，三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等)等。其中，优选乙酸盐或TFA盐。

上述肽可以使用利用公知方法合成或产生、分离和纯化而成的肽。

本发明的疫苗药物组合物中的包含将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物的含量没有特别限定，相对于上述抗原1重量份，优选的下限为0.001重量份、优选的上限为1000重量份。上述含量低于0.001重量份时，有时无法充分得到免疫诱导效果。上述含量超过1000重量份时，有时存在安全性问题。上述含量的更优选的下限为0.005重量份、更优选的上限为500重量份、更优选的下限为0.01重量份、更优选的上限为100重量份。

本发明的疫苗药物组合物优选除了含有将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂(以下也称为第一免疫诱导促进剂)之外，还含有作为辅助肽的第二免疫诱导促进剂。

通过组合使用作为上述辅助肽的第二免疫诱导促进剂，从而能够进一步促进细胞免疫。

在本说明书中使用时，术语“辅助肽”是指使辅助性T细胞活化的所有肽。

作为上述辅助肽的第二免疫诱导促进剂，例如可列举出：源自结核菌的辅助肽、源自麻疹病毒的辅助肽、源自乙型肝炎病毒的辅助肽、源自丙型肝炎病毒的辅助肽、源自沙眼衣原体的辅助肽、源自热带疟原虫孢子虫的辅助肽、源自钥孔虫戚血兰素(keyhole limpethaemocyanin)的辅助肽、源自破伤风毒素的辅助肽、源自百日咳毒素的辅助肽、源自白喉毒素的辅助肽、源自癌细胞的辅助肽(例如，IMA-MMP-001辅助肽、CEA-006辅助肽、MMP-001辅助肽、TGFBI-004辅助肽、HER-2/neu(aa776-790)辅助肽、AE36辅助肽、AE37辅助肽、MET-005辅助肽、BIR-002辅助肽)、通用辅助因子类似物(Universal helper analog)(例如，PADRE)、它们的变异肽等。其中，优选肽-25、变异肽-25、PADRE。作为上述变异肽-25，例如可列举出：肽-25B。

在本说明书中使用时，术语“肽-25”是指与由人型结合菌(Mycobacteriumtuberculosis)分泌的作为主要蛋白质之一的Ag85B的氨基酸残基240～254对应的、由序列Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Ala Gly Gly His Asn Ala Val Phe(序列号12)组成的15个氨基酸的肽。

在本说明书中使用时，术语“肽-25B”是为了提高免疫活化效果而改变了肽-25的一部分氨基酸的物质，是由序列Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Val His Ala Ala HisAla Val Phe(序列号13)组成的15个氨基酸的肽。

在本说明书中使用时，术语“PADRE”是指由序列D-Ala Lys cyclohexyl-Ala ValAla Ala Trp Thr Leu Lys Ala Ala D-Ala(序列号14)组成的13个氨基酸的肽。

本发明的疫苗药物组合物中的作为上述辅助肽的第二免疫诱导促进剂的含量没有特别限定，相对于上述抗原1重量份，优选的下限为0.01重量份、优选的上限为100重量份。上述含量低于0.01重量份时，有时无法充分促进细胞免疫。上述含量超过100重量份时，有时存在安全性问题。上述含量的更优选的下限为0.1重量份、更优选的上限为10重量份。

另外，本发明包含上述抗原和本发明的免疫诱导促进组合物，也是强力诱导相对于上述抗原的细胞免疫的对体表面上给药的疫苗药物组合物。通过同时将上述抗原和上述抗原微生物药向作为体表面上的经皮或经粘膜给药，从而与仅将抗原给药的情况相比，能够强力诱导细胞免疫。即，本发明的疫苗药物组合物也可以是皮内、皮下或肌肉给药用疫苗药物组合物，但优选为经皮给药用或经粘膜给药用疫苗药物组合物。将本发明的疫苗药物组合物通过经皮给药或经粘膜给药向对象给药，从而能够有效地诱导抗原特异性细胞免疫。

在本说明书中使用时，术语“对象”是指在实用阶段给予疫苗药物组合物并能够诱导免疫应答的任意动物。上述对象典型的是包括人在内的哺乳类(例如，小鼠、大鼠、犬、猫、兔子、马、牛、绵羊、猪、山羊、猴子、黑猩猩)。特别优选的对象是人。

＜经皮给药用疫苗药物组合物＞

上述经皮给药用疫苗药物组合物的剂型只要是通常用于经皮给药的任意制剂就没有特别限定，例如可列举出：擦剂、露剂等外用液体制剂；气溶胶剂等外用喷剂；凝胶剂、胶带剂、巴布剂等贴剂；软膏剂、硬膏剂、霜剂可以是。这些组合物的划分、定义、性质、制法等在本技术领域是公知的，可以参考例如日本药典第16版。另外，作为这些材料，没有特别限定，可以使现有公知的材料。

需要说明的是，上述剂型中，优选霜剂、软膏剂、贴剂(胶带剂、巴布剂)。

包含本发明的经皮疫苗药物组合物的经皮给药用制剂也是本发明之一。

上述经皮给药用疫苗药物组合物中(胶带剂的情况，为粘合剂层中)的包含上述抗原和将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物的含量没有特别限定，上述抗原的含量优选0.01～40重量％、更优选0.1～30重量％。上述免疫诱导促进组合物的含量优选0.001～30重量％、更优选0.01～20重量％。

作为用于上述擦剂的基剂，可列举出：水、乙醇、脂肪油、硬石蜡、软石蜡、液体石蜡、甘油、石蜡油、蜜蜡、金属皂、粘液(mucilage)、天然油(例如，杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油、橄榄油或它们的衍生物(例如，聚氧乙烯醚蓖麻油))、羊脂或其衍生物、脂肪酸和/或酯(例如，硬脂酸、油酸、肉豆蔻酸异丙酯)。

上述露剂是将配混成分(即，包含上述抗原、将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物等)微细地均匀分散在水性的液体中而得到的制剂，包括悬浮性露剂和乳浊性露剂。作为悬浮剂，例如可列举出：阿拉伯胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、膨润土等。作为乳化剂，例如可列举出：月桂基硫酸钠、失水山梨醇脂肪酸酯等。

作为用于上述软膏剂的基材，可列举出：脂类、蜡、烃化合物等通常用作疏水性基材的物质。具体而言，可列举出：黄色凡士林、白色凡士林、石蜡、液体石蜡、Plastibase、有机硅等矿物性基剂、蜜蜡、动植物性油脂等动植物性基剂等。

作为用于上述霜剂的基剂，可列举出：亲水性软膏、雪花膏等水/油型基剂；亲水性凡士林、纯化羊毛脂、阿夸弗尔、优塞林、那塞林(Neocerin)、含水羊毛脂、冷霜、亲水性Plastibase等油/水型基剂。

作为用于上述凝胶剂的基剂，可以使用：羧基乙烯基聚合物、凝胶基质、无脂肪性软膏、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素、淀粉、黄原胶、刺梧桐胶、海藻酸钠、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP)、乙酸邻苯二甲酸纤维素(CAP)、羧甲基乙基纤维素(CMEC)、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、黄蓍胶、阿拉伯胶、塔拉胶、罗望子胶、车前子胶、琼脂、结冷胶、葡甘露聚糖、刺槐豆胶、瓜尔豆胶、角叉菜胶、糊精、葡聚糖、直链淀粉、羧甲基纤维素钾、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、普鲁兰多糖、壳聚糖、羧甲基淀粉钠、车前属种皮、半乳甘露聚醣、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物RS、甲基丙烯酸共聚物L、甲基丙烯酸共聚物LD、甲基丙烯酸共聚物S、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、聚乙烯醇缩醛二乙基氨基乙酸酯、酪蛋白、海藻酸烷基酯、明胶、聚乙二醇等水凝胶基剂等。

作为用于上述巴布剂的基剂，可列举出：明胶、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚丙烯酸钠、高岭土、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、水等。

上述胶带剂优选具有：含有配混成分(即，包含上述抗原、将上述高微生物药将作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物等)的粘合剂层和支撑上述粘合剂层的支撑体。还可以进一步具有在使用前不使上述粘合剂层露出而在使用时能够容易从上述粘合剂层上剥离的剥离衬垫。

形成上述粘合剂层的粘合剂没有特别限定，例如可列举出：由丙烯酸系聚合物形成的丙烯酸系粘合剂；包含苯乙烯-二烯-苯乙烯嵌段共聚物(例如苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯(SIS)嵌段共聚物、苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物等)、聚异戊二烯、聚异丁烯(PIB)、丁基橡胶、聚丁二烯等橡胶系弹性体的橡胶系粘合剂；有机硅橡胶、二甲基硅氧烷基质、二苯基硅氧烷基质等有机硅系粘合剂；聚乙烯基甲醚、聚乙烯基乙醚、聚乙烯基异丁醚等乙烯基醚系粘合剂；乙酸乙烯酯-乙烯共聚物等乙烯基酯系粘合剂；对苯二甲酸二甲酯、间苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二甲酯等的羧酸成分与乙二醇等多元醇成分形成的聚酯系粘合剂等。其中，优选丙烯酸系粘合剂、橡胶系粘合剂、有机硅系粘合剂。

上述粘合剂层中的上述粘合剂的含量没有特别限定，作为固体成分，基于上述粘合剂层的总重量，优选包含10～90重量％、更优选包含20～80重量％。

作为上述丙烯酸系粘合剂，例如可列举出：以包含(甲基)丙烯酸C2～18烷基酯作为第一单体的聚合物作为主要成分的丙烯酸酯系粘合剂。

作为上述(甲基)丙烯酸烷基酯(第一单体)的例子，可列举出：具有烷基的碳数为1～18的直链状、支链状或环状烷基(例如，甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、环己基、庚基、辛基、2-乙基己基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基等)的(甲基)丙烯酸烷基酯等。其中，优选为具有烷基的碳数为4～18的直链状、支链状或环状烷基的(甲基)丙烯酸烷基酯。进而，为了在常温下赋与粘合性，更适合使用使聚合物的玻璃化转变温度降低的单体成分，从这方面考虑，更优选为具有烷基的碳数为4～8的直链状、支链状或环状烷基(例如可列举出：丁基、戊基、己基、环己基、庚基、辛基、2-乙基己基等，优选丁基、2-乙基己基、环己基，特别优选2-乙基己基)的(甲基)丙烯酸烷基酯。

作为上述(甲基)丙烯酸烷基酯(第一单体)，具体而言，优选丙烯酸丁酯、丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸2-乙基己酯、丙烯酸环己酯、甲基丙烯酸环己酯、特别优选丙烯酸2-乙基己酯。这些(甲基)丙烯酸烷基酯(第1单体)可以单独使用或组合2种以上来使用。

另外，上述丙烯酸系粘合剂可以含有能与上述(甲基)丙烯酸烷基酯(第一单体)共聚的第二单体，作为这样的第二单体，可列举出：使用交联剂时具有能够成为交联点的官能团的单体。作为能参与交联反应的官能团，可列举出：羟基、羧基、乙烯基等，优选为羟基、羧基。作为上述第二单体、具体而言，可列举出：(甲基)丙烯酸羟乙酯、(甲基)丙烯酸羟丙酯、N-羟烷基(甲基)丙烯酰胺、(甲基)丙烯酸、衣康酸、马来酸、马来酸酐、中康酸、柠康酸、戊烯二酸等。其中，从获得的容易性的观点出发，优选丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸羟乙酯(特别是丙烯酸2-羟乙酯)，特别优选丙烯酸。这些第二单体可以单独使用或组合使用2种以上。

进而，上述丙烯酸系粘合剂除了上述第一单体和第二单体以外还可以含有第三单体。作为第三单体，例如可列举出：乙酸乙烯酯、丙酸乙烯酯等乙烯基酯类；甲基乙烯基醚、乙基乙烯基醚等乙烯基醚类；N-乙烯基-2-吡咯烷酮、N-乙烯基己内酰胺等乙烯基酰胺类；(甲基)丙烯酸甲氧基乙酯、(甲基)丙烯酸乙氧基乙酯、(甲基)丙烯酸四氢糠基酯等(甲基)丙烯酸烷氧基酯；(甲基)丙烯酸羟丙基酯、丙烯酸α-羟甲酯等含羟基单体(由于是作为第三单体成分使用，因此不作为交联点)；(甲基)丙烯酰胺、二甲基(甲基)丙烯酰胺、N-丁基(甲基)丙烯酰胺、N-羟甲基(甲基)丙烯酰胺等具有酰胺基的(甲基)丙烯酸衍生物；(甲基)丙烯酸氨基乙酯、(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯、(甲基)丙烯酸叔丁基氨基乙酯等(甲基)丙烯酸氨基烷基酯；(甲基)丙烯酸甲氧基乙二醇酯、(甲基)丙烯酸甲氧基二乙二醇酯、(甲基)丙烯酸甲氧基聚乙二醇酯、(甲基)丙烯酸甲氧基聚丙二醇酯等(甲基)丙烯酸烷氧基亚烷基二醇酯；(甲基)丙烯腈；苯乙烯磺酸、烯丙基磺酸、(甲基)丙烯酸磺丙基酯、(甲基)丙烯酰氧基萘磺酸酯、丙烯酰胺甲基磺酸等具有磺酸的单体；乙烯基哌啶酮、乙烯基嘧啶、乙烯基哌嗪、乙烯基吡咯、乙烯基咪唑、乙烯基恶唑、乙烯基吗啉等含乙烯基单体等。其中，优选为乙烯基酯类、乙烯基酰胺类，乙烯基酯类优选为乙酸乙烯酯，乙烯基酰胺类优选为N-乙烯基-2-吡咯烷酮。这些第三单体可以单独使用或组合使用2种以上。

是上述(甲基)丙烯酸烷基酯(第一单体)与上述具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体(第二单体)的共聚物的情况下，上述(甲基)丙烯酸烷基酯与上述具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体的重量比优选为99～85：1～15、更优选为99～90：1～10。

是上述(甲基)丙烯酸烷基酯(第一单体)与具有能参与上述交联反应的官能团的乙烯基单体(第二单体)与除此以外的其它单体(第三单体)的共聚物的情况下，上述(甲基)丙烯酸烷基酯与上述具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体与除此以外的其它单体的重量比优选为40～94：1～15：5～50、更优选为50～89：1～10：10～40。

聚合反应没有特别限定，使用现有公知的方法即可，例如可列举出添加聚合引发剂(例如，过氧化苯甲酰、偶氮二异丁腈)在溶剂(例如，乙酸乙酯)中使上述单体在50～70℃下反应5～48小时的方法。

上述丙烯酸系粘合剂更优选含有丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸/N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚物、丙烯酸2-乙基己酯/N-(2-羟乙基)丙烯酰胺/N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚物、丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸2-羟乙酯/乙酸乙烯酯的共聚物、丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸的共聚物，特别优选含有丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸/N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚物。

可以对上述丙烯酸系粘合剂实施利用紫外线照射、电子射线照射等辐射线照射的物理交联处理，也可以实施使用了三官能性异氰酸酯等异氰酸酯系化合物、有机过氧化物、有机金属盐、金属醇盐、金属螯合化合物、多官能性化合物(例如，多官能性外部交联剂、二(甲基)丙烯酸酯等多官能性内部交联用单体)等交联剂的化学交联处理。

另外，上述丙烯酸系粘合剂优选不渗透细胞免疫诱导促进剂的物质，即，不会发生粘合剂层中所含的肽、细胞免疫诱导促进剂、添加剂等通过支撑体自背面流失而引起含量降低的物质。

作为形成上述橡胶系粘合剂的橡胶系弹性体，没有特别限定，可列举出：聚异丁烯-聚丁烯系、苯乙烯-二烯-苯乙烯嵌段共聚物、苯乙烯-丁二烯系、腈系、氯丁二烯系、乙烯基吡啶系、聚异丁烯系、丁基系、异戊二烯-异丁烯系等。其中，从对上述配混成分的溶解性和皮肤粘接性方面考虑，优选聚异丁烯(PIB)、苯乙烯-二烯-苯乙烯嵌段共聚物(例如，苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物(SBS)、苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯嵌段共聚物(SIS))。这些橡胶系弹性体可以单独使用或组合使用2种以上。

为了得到适度的粘合力和上述配混成分的溶解性，作为上述橡胶系粘合剂可以混合为相同成分或不同成分的、平均分子量不同的橡胶系弹性体来使用。例如，优选为平均分子量15万～550万的高分子量的聚异丁烯与平均分子量1万～15万的中分子量的聚异丁烯和/或平均分子量500～4000的低分子量的聚异丁烯的混合物。相对于聚异丁烯的总量，高分子量的聚异丁烯的配混量为10～80重量％、优选为20～70重量％。相对于聚异丁烯的总量，中分子量的聚异丁烯的配混量为0～90重量％、优选为10～80重量％。相对于聚异丁烯的总量，低分子量的聚异丁烯的配混量为0～80重量％、优选为10～60重量％。

在本说明书中使用时，术语“平均分子量”是指利用Flory的粘度式计算的粘均分子量，其是由20℃下的乌氏粘度计的毛细管1的流动时间利用Schulz-Blaschke式算出斯托丁格指数(Staudinger Index)(J₀)，使用该J₀值通过下述式求出的。

[数1]

(式)

J₀＝η_sp/c(1+0.31η_sp)(Schulz-Blaschke式)

η_sp＝t/t₀-1

t：溶液的流动时间(利用Hagenbach-couette校正式)

t₀：溶剂的流动时间(利用Hagenbach-couette校正式)

c：溶液的浓度(g/cm³)

粘均分子量

在上述橡胶系粘合剂中，为了赋予适度的粘合性，可以配混例如松香系树脂、聚萜烯树脂、香豆酮-茚树脂、石油系树脂、萜烯-酚醛树脂、二甲苯树脂、脂环族饱和烃树脂等增粘剂。这些增粘剂可以单独使用或组合使用2种以上。

上述增粘剂的含量以上述橡胶系粘合剂的总重量为基准优选50重量％以下、更优选5～40重量％。

作为上述有机硅系粘合剂，可列举出：包括有机聚硅氧烷系、聚二甲基硅氧烷系、聚二甲基二苯基硅氧烷系等的有机硅系粘合剂。其中，优选使用来自Dow CorningCorporation公司制造的BIO PSA这样的商业上能获得的有机硅系粘合剂。

上述粘合剂层还可以含有皮肤渗透性增强剂。

在本说明书中使用时，术语“皮肤渗透性增强剂”是指与不使用其的情况相比，能够改善经皮给药的抗原透过皮肤效率的所有物质。作为上述皮肤渗透性增强剂，优选在室温(25℃)下为液态(即，具有流动性)。在混合使用2种以上皮肤渗透性增强剂时，优选最终混合物在室温(25℃)下为液态、具有皮肤渗透促进效果。

作为这样的有机液态成分，从在上述粘合剂层中的相容性的观点出发，优选疏水性液态成分。

作为上述皮肤渗透性增强剂，可列举出：高级醇、脂肪酸酯、多元醇脂肪酸酯。作为上述高级醇，优选为碳数8～18的高级醇，更优选为碳数8～14的高级醇。作为上述脂肪酸酯，优选为碳数8～18的脂肪酸与碳数1～18的一元醇的脂肪酸酯，更优选为碳数12～16的脂肪酸与碳数1～18的一元醇的脂肪酸酯。其中，优选为脂肪酸酯，特别优选为肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、癸二酸二乙酯。

作为上述皮肤渗透性增强剂，可列举出：油醇、辛基十二烷醇等高级醇；甘油、乙二醇、聚丙二醇等多元醇；油酸、辛酸等高级脂肪酸；肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、油酸乙酯等脂肪酸酯；癸二酸二乙酯、己二酸二异丙酯等多元酸酯；三异硬脂酸二甘油酯、单油酸失水山梨醇酯、二辛酸丙二醇酯、单月桂酸聚乙二醇酯、四油酸聚氧乙烯失水山梨醇酯等多元醇脂肪酸酯；聚氧乙烯月桂基醚等聚氧乙烯烷基醚；角鲨烷、液体石蜡等烃；橄榄油、蓖麻油等植物油；硅油；N-甲基吡咯烷酮、N-十二烷基吡咯烷酮等吡咯烷酮类；癸基甲基亚砜等亚砜。

这些皮肤渗透性增强剂可以单独使用或组合使用2种以上。

在使用上述丙烯酸系粘合剂或上述橡胶系粘合剂时，作为上述皮肤渗透性增强剂，例如可以使用：聚乙烯吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚丙二醇、聚乙烯醇、羧基乙烯基聚合物、羟丙基纤维素或它们的混合物。其中优选为聚乙烯吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚丙二醇。

上述疫苗药物组合物中的上述皮肤渗透性增强剂的含量没有特别限定，优选上述疫苗药物组合物(胶带剂的情况，粘合剂层)的总重量的0.1～70重量％、更优选1～65重量％、进一步优选5～60重量％。上述皮肤渗透性增强剂的含量为0.1重量％以上时，可以得到高的皮肤渗透促进效果。上述皮肤渗透性增强剂的含量为70重量％以下时，上述疫苗药物组合物(胶带剂的情况，粘合剂层)整体的粘合力、聚集力降低的同时得到高的皮肤渗透促进效果。

上述粘合剂层的厚度没有特别限定，优选为10～1000μm。通过设为上述范围的厚度，从而使上述粘合剂层含有有效量的上述配混成分、使其发挥充分的粘合力、形成上述粘合剂层等变得容易。

上述支撑体没有特别限定，优选为实质上对上述配混成分具有不渗透性的物质，即不会发生上述粘合剂层中所含的上述抗原、以包含上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂为特征的免疫诱导促进组合物等通过支撑体自背面流失从而引起含量降低的物质。

作为上述支撑体，例如可列举出：聚酯、聚酰胺、聚偏氯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、乙烯-丙烯酸乙酯共聚物、聚四氟乙烯、离聚物树脂、金属箔等单独的薄膜或它们的层叠薄膜等。其中，为了使上述支撑体与上述粘合剂层的粘接性(锚固性)提高，而优选为由上述材质形成的无孔的塑料薄膜与多孔薄膜的层叠薄膜。在此情况下，上述粘合剂层优选形成于多孔薄膜侧。

作为上述多孔薄膜，只要提高与上述粘合剂层的锚固性就没有特别限定，例如可列举出：纸、织布、无纺布、编织物、实施了机械穿孔处理的片等。从操作性等的观点出发，优选为纸、织布、无纺布。上述多孔薄膜的厚度从锚固性提高、胶带剂的柔软性及贴附操作性等方面考虑，优选为1～200μm。另外，织布或无纺布时，上述多孔薄膜的单位面积重量优选为5～30g/m²，更优选为6～15g/m²。

特别是作为上述支撑体，优选厚度1.5～6μm的聚酯薄膜(优选为聚对苯二甲酸乙二酯薄膜)与单位面积重量6～15g/m²的聚酯(优选聚对苯二甲酸乙二酯)制无纺布的层叠薄膜。

作为上述剥离衬垫，只要能够实施剥离处理，并确保足够轻的剥离力就没有特别限定，例如可列举出：通过在与上述粘合剂层的接触面涂布有机硅树脂、氟树脂等而实施了剥离处理的聚酯、聚氯乙烯、聚偏氯乙烯、聚对苯二甲酸乙二酯等的薄膜、优质纸、玻璃纸等纸、优质纸或玻璃纸等与聚烯烃的层压薄膜等。

上述剥离衬垫的厚度优选为10～200μm，更优选为25～100μm。

特别是作为上述剥离衬垫，从阻隔性、价格等方面考虑，优选由聚酯(特别是聚对苯二甲酸乙二酯)树脂形成。在此情况下，从操作性方面考虑，厚度优选为25～100μm左右。

＜经粘膜给药用疫苗药物组合物＞

作为上述经粘膜给药，例如可列举出：舌下给药、鼻腔给药、颊侧给药、直肠给药、阴道给药等。

上述经粘膜给药用疫苗药物组合物的剂型例如可以是凝胶剂(啫喱剂)、霜剂、软膏剂、硬膏剂等的半固体制剂；液体制剂；散剂、细粒剂、颗粒剂、薄膜剂、片剂、口腔崩解片等的固体制剂；气溶胶剂等的粘膜用喷剂；吸引剂等。这些组合物的划分、定义、性质、制法等在本技术领域是公知的，可以参考例如日本药典第16版。另外，作为这些材料，没有特别限定，可以使现有公知的材料。

上述经粘膜给药用疫苗药物组合物中的包含上述抗原和将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物的含量没有特别限定，上述抗原的含量优选0.01～40重量％、更优选0.1～30重量％。将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的含量优选0.001～30重量％、更优选0.01～20重量％。

＜皮内、皮下或肌肉给药用疫苗药物组合物＞

上述皮内、皮下或肌肉给药用疫苗药物组合物的剂型只要是具有例如液体制剂、水溶性或疏水性的悬浮剂、霜剂等能够注射给予程度的流动性的剂型即可。这些组合物的划分、定义、性质、制法等在本技术领域是公知的，可以参考例如日本药典第16版。另外，作为这些材料没有特别限定，可以使用现有公知的材料。

上述皮内、皮下或肌肉给药用疫苗药物组合物中的包含上述抗原和将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物的含量没有特别限定，上述抗原的含量优选0.01～40重量％、更优选0.1～30重量％。将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的含量优选0.001～30重量％、更优选0.01～20重量％。

本发明的疫苗药物组合物根据需要还可以含有添加剂。上述添加剂根据与基剂的主要成分、包含上述抗原和将上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物的适应性、预期的给药方案等，例如可列举出：等渗剂、防腐·杀菌剂、抗氧化剂、溶解剂、溶解辅助剂、悬浮剂、填充剂、pH调节剂、稳定剂、吸收剂、释放速度控制剂、着色剂、增塑剂、交联剂粘合剂等。这些添加剂可以单独使用或组合2种以上来使用。

上述粘合剂层还可以含有皮肤渗透性增强剂。

在本说明书中使用时，术语“盐”可以是任意的有机酸或无机酸，但优选为药学上允许的盐。

在本说明书中使用时，术语“药理学上允许的盐”是指对给药对象不产生有害作用、且不使组合物中的配混成分的药理活性消失的盐，例如可列举出：无机酸盐(例如，盐酸盐、磷酸盐)、有机酸盐(例如，乙酸盐、苯二甲酸盐、TFA盐)、金属盐(碱金属盐(例如，钠盐、钾盐)、碱土金属盐(例如，钙盐、镁盐)、铝盐等)、胺盐(例如，三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐)等。

将本发明的疫苗药物组合物向对象给予时，上述抗原的对治疗有效的量根据疾病的严重程度、对象的年龄及相对的健康以及其它已知的因素等而可以大范围地变化，通常，1天用量约0.1μg～1g/kg体重能够得到令人满意的结果。包含上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物与上述抗原同时或依次给药，优选为同时给药。包含上述抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物的治疗上的有效量根据所使用的具体的免疫诱导促进剂、其它免疫诱导促进剂的有无等而可以大范围地变化，通常1天用量0.01μg～1g/kg体重能够得到令人满意的结果。

需要说明的是，1天用量可以1次给药，也可以分成2次以上(例如2次、3次、4次、5次等)多次给药。每次的连续给药时间优选在1分钟～7天的区间内适当选择。给药间隔根据患者的状态、疾病的严重程度、是治疗目的还是预防目的等，优选从每天～1年1次(例如，1天1次、2天1次、3天1次、1周1次、2周1次、1个月1次、3个月1次、6个月1次、1年1次)或比该范围更长的给药间隔中适当选择。通常，优选的是：出于实际具有重度疾病的患者的治疗的目的，以更高频率和/或高用量给予本发明的疫苗药物组合物；出于不患有疾病的患者的预防的目的，以更低频率和/或低用量给予本发明的疫苗药物组合物。

发明的效果

根据本发明，使用已经充分积累了作为药物的使用成果的包含将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂的免疫诱导促进组合物，因此能够安全且有效地诱导相对于抗原的细胞免疫。

另外，本发明的疫苗药物组合物为对体表面上给药的情况下，能够非侵入地给药(例如，经皮给药或经粘膜给药)，因此可以得到优异的应变性。即，使如疼痛、恐惧、注射痕迹和随后的疤痕、进行重复给药的情况下去医院给患者的生活带来负担等的从患者的QOL的观点出发的问题得以减少。另外，由于给药便捷而患者可以自己给予、能够回避医疗工作者的针扎感染事故的风险、不会产生注射针之类的需要特殊废弃的医疗废弃物。

另外，本发明的疫苗药物组合物的形态只要是胶带剂、巴布剂等的贴剂的形态，就具有如下优点：能够可靠地给予规定的给药量、能够任意控制药物释放速度、并且给药时不会附着在其它部位。进而，贴剂具有如下优点：由于能够容易贴附/撕除，因而还具有产生副作用时等自施用部位除去贴剂从而患者自己便能立即终止给药。

另外，与抗原的单独给药相比，通过给予本发明的疫苗药物组合物，从而能够显著提高细胞免疫诱导效果。进而，与注射给药相比，通过将本发明的疫苗药物组合物用于非侵入地体表面上给药(例如，经皮给药或经粘膜给药)，从而能够诱导强的免疫。

附图说明

图1是示出将实施例、比较例中得到的经皮给药用霜剂进行经皮给药时的细胞免疫诱导效果的图。

具体实施方式

以下示出实施例并更加详细且具体地说明本发明，但本发明不限定于这些实施例。

(实施例1～17、比较例1)

(经皮给药用霜剂的制备)

制备了具有下述表1的组成的经皮给药用霜剂。具体而言，以下述表1中所示的配混量来配混下述所示的抗原(肽或蛋白质)、将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂、辅助肽、二甲基亚砜(DMSO)15重量％，在其中加入基材(基质霜)使总量为100重量％，进行混和，得到经皮给药用霜剂。使用的基质霜是按照表2所示的组成配混材料并进行混和而制备得到的。白色凡士林、失水山梨醇单硬脂酸酯、异硬脂酸、苄醇、硬脂醇、吐温60、浓甘油、二甲基亚砜二甲基亚砜(DMSO)从和光纯药工业株式会社购买。鲸蜡醇从东京化成工业株式会社购买。

准备将PET薄膜/PET无纺布层叠品(面积0.7cm²)以PET薄膜侧为带侧贴合在固定用粘合带的中央部而得到的复合基材。将在该复合基材的无纺布部分涂布4mg霜剂而成的物质作为小鼠免疫实验的给予样品。

(将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂)

新霉素(和光纯药工业株式会社制)

庆大霉素(和光纯药工业株式会社制)

四环素(和光纯药工业株式会社制)

二甲胺四环素(和光纯药工业株式会社制)

头孢呋辛(和光纯药工业株式会社制)

灰黄霉素(和光纯药工业株式会社制)

诺氟沙星(和光纯药工业株式会社制)

阿糖腺苷(和光纯药工业株式会社制)

磷霉素(和光纯药工业株式会社制)

金刚烷胺(和光纯药工业株式会社制)

咪康唑(和光纯药工业株式会社制)

克拉霉素(和光纯药工业株式会社制)

氯霉素(和光纯药工业株式会社制)

异烟肼(和光纯药工业株式会社制)

布替那芬(和光纯药工业株式会社制)

万古霉素(和光纯药工业株式会社制)

磺胺甲恶唑(和光纯药工业株式会社制)

(抗原肽)

OVAp(OVA肽、序列Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu(序列号15)这8个氨基酸的肽)

＜评价＞

对于实施例、比较例中得到的经皮给药用霜剂，进行以下评价。

(细胞免疫诱导效果的评价)

依据以下步骤，使用经皮给药用霜剂来进行使用了免疫评价用模型动物的小鼠免疫试验。然后，利用ELISPOT法评价了抗原特异性细胞免疫的诱导水平。

(1)免疫评价用模型动物

此处所谓的“免疫评价用模型动物”是指用于评价疫苗药物组合物(此处为经皮给药用霜剂)的免疫诱导特性的模型动物，具体而言，是指用于评价经皮给药用霜剂的细胞免疫诱导水平的模型动物。

作为免疫评价用模型动物，考虑到经皮给药用霜剂中的抗原与动物的MHC类1分子的适应性，使用能够通过经皮给药用霜剂中的抗原进行细胞免疫诱导评价的动物。

(2)经皮给药用霜剂的小鼠免疫试验

剪去下述表1中所示的小鼠背部的毛，设定用于恢复由于剪毛导致的皮肤受损的饲养期间，然后对小鼠的背部皮肤进行24小时经皮给药用霜剂4mg给药并去除，进行6天饲养。自给药起经过6天后摘取脾脏，制备脾细胞悬浮液。将脾细胞(1×10⁶cells/we11)、和抗原肽(100μM)或抗原蛋白(100μg/mL)与培养液一起加入固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT孔板的孔中，在37℃、5％CO₂的培养条件下进行20小时共培养，利用ELISPOT法评价了IFN-γ产生细胞光斑数(光斑数/1×10⁶cells)。将IFN-γ产生细胞光斑数作为“免疫结果”示于下述表1。

[表1]

[表2]

如图1所示，通过包含将实施例1～17中所示的抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂，从而与仅将抗原经皮给药的情况相比更强力地诱导了细胞免疫。

产业上的可利用性

本发明的免疫诱导促进组合物和疫苗药物组合物使用已经充分积累了作为药物的使用成果的、将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂，从而能够安全且有效地诱导相对于各种抗原的细胞免疫、发挥高的细胞免疫诱导效果。

序列表

<110> 日东电工株式会社(NITTO DENKO CORPORATION)

<120> 免疫诱导促进组合物和疫苗药物组合物

<130> F7096WO

<150> JP 2015-156171

<151> 2015-08-06

<160> 15

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 1

Ala Tyr Ala Cys Asn Thr Ser Thr Leu

1 5

<210> 2

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 2

Glu Tyr Ile Leu Ser Leu Glu Glu Leu

1 5

<210> 3

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 3

Thr Tyr Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu

1 5

<210> 4

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 4

Ile Met Pro Lys Ala Gly Leu Leu Ile

1 5

<210> 5

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 5

Val Leu Gln Glu Leu Asn Val Thr Val

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 6

Lys Val Phe Gly Ser Leu Ala Phe Val

1 5

<210> 7

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 7

Lys Val Ala Glu Ile Val His Phe Leu

1 5

<210> 8

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 8

Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu

1 5

<210> 9

<211> 9

<212> PRT

<213> 人类(Homo sapiens)

<400> 9

Ser Thr Ala Pro Pro Val His Asn Val

1 5

<210> 10

<211> 9

<212> PRT

<213> 丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus)

<400> 10

Asp Leu Met Gly Tyr Ile Pro Ala Val

1 5

<210> 11

<211> 9

<212> PRT

<213> 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus)

<400> 11

Trp Leu Ser Leu Leu Val Pro Phe Val

1 5

<210> 12

<211> 15

<212> PRT

<213> 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)

<400> 12

Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Ala Gly Gly His Asn Ala Val Phe

1 5 10 15

<210> 13

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> PEPTIDE

<223> Peptide-25B

<400> 13

Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Val His Ala Ala His Ala Val Phe

1 5 10 15

<210> 14

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> PEPTIDE

<223> PADRE

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> D-丙氨酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> 环己基丙氨酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (13)..(13)

<223> D-丙氨酸

<400> 14

Ala Lys Ala Val Ala Ala Trp Thr Leu Lys Ala Ala Ala

1 5 10

<210> 15

<211> 8

<212> PRT

<213> 原鸡(Gallus gallus)

<400> 15

Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu

1 5

Claims (8)

1.一种免疫诱导促进组合物，其特征在于，其包含将抗微生物药作为有效成分的免疫诱导促进剂。

2.根据权利要求1所述的免疫诱导促进组合物，其中，抗微生物药是选自由抑制细菌的细胞壁合成的化合物、抑制细菌的蛋白质合成的化合物、抑制细菌的核酸合成的化合物、具有抗真菌活性的化合物和具有抗病毒活性的化合物组成的组中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的免疫诱导促进组合物，其中，抑制细菌的细胞壁合成的化合物具有β内酰胺骨架和/或磷霉素骨架，

抑制细菌的蛋白质合成的化合物具有选自由氨基糖苷类骨架、四环素骨架、大环内酯骨架和酰胺醇骨架组成的组中的至少一种，

抑制细菌的核酸合成的化合物具有喹诺酮骨架，

具有抗真菌活性的化合物具有灰黄霉素骨架和/或唑骨架，

具有抗病毒活性的化合物具有嘌呤骨架和/或金刚烷骨架。

4.根据权利要求3所述的免疫诱导促进组合物，其中，

具有β内酰胺骨架的化合物为头孢呋辛，

具有磷霉素骨架的化合物为磷霉素，

具有氨基糖苷类骨架的化合物为新霉素和/或庆大霉素，

具有四环素骨架的化合物为四环素和/或二甲胺四环素，

具有大环内酯骨架的化合物为克拉霉素，

具有酰胺醇骨架的化合物为氯霉素，

具有喹诺酮骨架的化合物为诺氟沙星，

具有灰黄霉素骨架的化合物为灰黄霉素，

具有唑骨架的化合物为咪康唑，

具有嘌呤骨架的化合物为阿糖腺苷，

具有金刚烷骨架的化合物为金刚烷胺。

5.一种疫苗药物组合物，其特征在于，其用于免疫诱导，

其包含抗原和权利要求1、2、3或4所述的免疫诱导促进组合物。

6.根据权利要求5所述的疫苗药物组合物，其对体表面上给药。

7.根据权利要求5所述的疫苗药物组合物，其通过皮内注射、皮下注射或肌肉注射进行给药。

8.根据权利要求5、6或7所述的疫苗药物组合物，其用于诱导细胞免疫。