CN107843541B - 一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法 - Google Patents
一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107843541B CN107843541B CN201711000294.8A CN201711000294A CN107843541B CN 107843541 B CN107843541 B CN 107843541B CN 201711000294 A CN201711000294 A CN 201711000294A CN 107843541 B CN107843541 B CN 107843541B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- photo
- chip
- conductive deposits
- induction conductive
- unicellular
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 29
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 20
- 125000004386 diacrylate group Chemical group 0.000 claims description 20
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 20
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 16
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 14
- 229910021417 amorphous silicon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 3
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 3
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 2
- WFCSWCVEJLETKA-UHFFFAOYSA-N 2-piperazin-1-ylethanol Chemical compound OCCN1CCNCC1 WFCSWCVEJLETKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 238000000059 patterning Methods 0.000 claims 1
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 238000004070 electrodeposition Methods 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-N hydroperoxyl Chemical compound O[O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 239000002210 silicon-based material Substances 0.000 description 2
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 2
- WGIAYBNWTYECJD-UHFFFAOYSA-N 1-ethoxypiperazine Chemical compound CCON1CCNCC1 WGIAYBNWTYECJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLOGSHMIAWCODV-UHFFFAOYSA-N 2-piperazin-4-ium-1-ylethanesulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCNCC1 NLOGSHMIAWCODV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-UHFFFAOYSA-N Hydrogen atom Chemical compound [H] YZCKVEUIGOORGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UELITFHSCLAHKR-UHFFFAOYSA-N acibenzolar-S-methyl Chemical compound CSC(=O)C1=CC=CC2=C1SN=N2 UELITFHSCLAHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940089468 hydroxyethylpiperazine ethane sulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001453 impedance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008560 physiological behavior Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000010148 water-pollination Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/1031—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N2015/1006—Investigating individual particles for cytology
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N2015/1022—Measurement of deformation of individual particles by non-optical means
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法。所述系统包括:光学投影仪、PC机、光诱导电沉积芯片、三维移动平台、信号发生器、阻抗分析仪、温度控制仪、微泵和摄像机;光学投影仪与PC机相连,将光图案投射到光诱导电沉积芯片上;光诱导电沉积芯片位于三维移动平台上,三维移动平台可以改变芯片的位置;信号发生器与芯片连接,提供交流电压;阻抗分析仪与芯片连接,测量阻抗;将芯片置于温度控制仪中,控制细胞连续培养的温度;微泵与芯片的溶液入口连接,提供细胞培养基;显微管位于芯片上方,摄像机与显微管连接,实时采集图像。采用本发明的装置或方法能够对贴壁单细胞进行全生命周期电学特性的实时监测和单细胞的定位寻址生长。
Description
技术领域
本发明涉及细胞监测领域,特别是涉及一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法。
背景技术
疾病的产生与细胞增殖、迁移和癌化等细胞行为息息相关。恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病,其发生的主要表现就是癌细胞失控的增殖、侵袭和转移。在传统的细胞研宄中,通常把细胞样品看成是均一稳定的,从而主要研究细胞群体,但是事实上细胞通常是异质性的,且很多疾病的产生,早期总是局部的极少数细胞发生癌变,这些癌变细胞的信号通常被大量正常细胞的信号所掩盖。因此对于单细胞的研究不仅有助于理解细胞间的生理差异性,更有助于疾病的早期诊断。电学特性作为一个重要的生物物性指标,是指示细胞生理行为机制、病理状态和实现细胞分型的有效参量。现如今单细胞电学特性的主要测量方法有微吸管、微流控等。基于微吸管的测量方法能够较准确的测得单细胞的尺寸、机械特性和电学特性,但是测量速度慢。基于微流控的测量方法能够实现单细胞的高通量测量。但是上述两种方法只能针对悬浮细胞进行检测,无法对贴壁状态的单细胞进行全生命周期电学特性的实时监测和单细胞的定位寻址生长。
发明内容
本发明的目的是提供一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法,实现了对贴壁状态的单细胞进行全生命周期电学特性的实时监测和单细胞的定位寻址生长。
为实现上述目的,本发明提供了如下方案:
一种单细胞生物物理特性的实时监测系统,其特征在于,所述系统包括:光学投影仪、PC机、光诱导电沉积芯片、三维移动平台、信号发生器、阻抗分析仪、温度控制仪、微泵和CCD摄像机;
所述光学投影仪与所述PC机相连,用于将PC机上的光图案投射到光诱导电沉积芯片上;
所述光诱导电沉积芯片位于所述三维移动平台上,所述三维移动平台,用于改变光诱导电沉积芯片的空间位置;
所述信号发生器与所述光诱导电沉积芯片的两端连接,用于提供交流电压;
所述阻抗分析仪与所述光诱导电沉积芯片的两端连接,用于测量阻抗;
所述温度控制仪装载所述光诱导电沉积芯片,用于控制细胞连续培养的温度环境;
所述微泵与所述光诱导电沉积芯片的溶液入口连接,用于提供细胞培养基;
所述显微管位于所述光诱导电沉积芯片的上方;
所述CCD摄像机与所述显微管连接,用于实时采集图像。
可选的,所述光诱导电沉积芯片包括上基板和下基板,所述上基板和下基板的材质均为ITO玻璃,所述上基板和下基板的形状完全相同,所述上下基板平行设置并且基板的两侧均对齐,所述下基板表面均匀涂抹光敏材料氢化非晶硅,所述上下基板之间是由双面胶构造的微通道,所述光诱导电沉积芯片的尺寸为3cm*3cm。
可选的,所述系统还包括聚光透镜和载物台,所述PC机上的图案进行投影时,得到的投影图案是发散的,所述聚焦透镜用于将发散的光图案聚焦到所述光诱导电沉积芯片上;所述光诱导电沉积芯片位于载物台上。
为实现上述目的,本发明还提供了如下方案:
一种单细胞生物物理特性的实时监测方法,所述方法应用到权利要求1所述的系统,其特征在于,所述方法包括:
通过光学投影仪连接PC机,将PC机上的光图案投影到光诱导电沉积芯片;
通过信号发生器连接光诱导电沉积芯片,对所述芯片两侧施加交流电压,形成图案化的水凝胶;
通过将光诱导电沉积芯片放置于温度控制仪内,维持细胞连续培养的温度环境;
通过微泵连接芯片中溶液入口,实时供给细胞培养基;
将细胞悬浮液通所述水凝胶中,自主移动三维平台使得单细胞与投影的光斑完全重合;
进行单细胞生物物理特性的测量;
所述三维移动平台利用图像反馈,移动到下一个单细胞,使得所述下一个单细胞与投影的光斑完全重合并进行所述单细胞生物物理特性的测量,再次移动所述三维移动平台直至完成所有单细胞生物物理特性的测量。
可选的,所述通过光学投影仪连接PC机,将PC机上的光图案进行投影,将所述投影后的光图案通过聚光透镜聚焦于载物台上的光诱导电沉积芯片。
可选的,所述通过信号发生器连接光诱导电沉积芯片,对所述芯片两侧施加交流电压,形成图案化的水凝胶,具体步骤包括:在所述光诱导电沉积芯片的微流通道里通入浓度为20%的聚乙二醇二丙烯酸酯溶液;光图案投影到所述光诱导电沉积芯片,所述光诱导电沉积芯片两端连接信号发生器,施加交流电压,使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液发生交联反应,形成图案化的水凝胶;将纯度99%的乙醇溶液以50ul/min的进液速度通入微流通道30s来冲洗未交联的聚乙二醇二丙烯酸酯溶液;以50ul/min的进液速度通入细胞培养液30s洗去乙醇溶液;通入细胞悬浮液,静止1h,让单个细胞粘附在制定区域,再持续通入混有4-羟乙基哌嗪乙磺酸的细胞培养基,进行细胞的连续培养。
可选的,所述三维移动平台利用图像反馈,移动到下一个单细胞,使得所述下一个单细胞与投影的光斑完全重合并进行所述单细胞生物物理特性的测量,再次移动所述三维移动平台直至完成所有单细胞生物物理特性的测量,具体步骤包括:对细胞进行连续培养,调整光斑投影大小与单细胞同等尺寸,利用光学投影仪将光斑投影到单细胞;将所述光诱导电沉积芯片两端引出电极丝连接阻抗分析仪,对批量的单细胞进行实时监测;记录阻抗谱数据,根据等效电路图分析测得单细胞的电学特性;利用CCD摄像机进行实时的图像采集,分析批量的单细胞行为过程中的尺寸和形状变化。
根据本发明提供的具体实施例,本发明公开了以下技术效果:
本发明提供了一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法,通过光诱导电沉积技术使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液交联并图案化,通过改变各种光图案,实现单细胞的定位寻址生长;在细胞培养过程中,通过三维移动平台的程序化移动,实现批量化单细胞行为过程中的多种生物物理参数的实时测量,如:电学特性、尺寸和形状。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1一种单细胞生物物理特性的实时监测系统结构图;
图2为本发明实施例1一种单细胞生物物理特性的实时监测方法流程图;
图3为本发明实施例1单细胞定位寻址示意图;
图4为本发明实施例1细胞的等效电路图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明的目的是提供一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法,实现了对贴壁状态的单细胞进行全生命周期电学特性的实时监测和单细胞的定位寻址生长。
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1为本发明实施例1一种单细胞生物物理特性的实时监测系统结构图,如图1所示,一种单细胞生物物理特性的实时监测系统,所述系统包括:光学投影仪、PC机、光诱导电沉积芯片、聚光透镜、载物台、三维移动平台、信号发生器、阻抗分析仪、温度控制仪、微泵和CCD摄像机;所述光学投影仪与所述PC机相连,用于将PC机上的光图案投射到光诱导电沉积芯片上,所述PC机上的图案进行投影时,得到的投影图案是发散的,所述聚焦透镜用于将发散的光图案聚焦到所述光诱导电沉积芯片上;所述光诱导电沉积芯片位于载物台上;所述光诱导电沉积芯片位于所述三维移动平台上,所述三维移动平台,用于改变光诱导电沉积芯片的空间位置;所述信号发生器与所述光诱导电沉积芯片的两端连接,用于提供交流电压;所述阻抗分析仪与所述光诱导电沉积芯片的两端连接,用于测量阻抗;所述温度控制仪装载光诱导电沉积芯片,用于控制细胞连续培养的温度环境;所述微泵与所述光诱导电沉积芯片的溶液入口连接,用于提供细胞培养基;所述显微管位于所述光诱导电沉积芯片的上方;所述CCD摄像机与所述显微管连接,用于实时采集图像。
所述光诱导电沉积芯片包括上基板和下基板,所述上基板和下基板的材质均为ITO玻璃,所述上基板和下基板的形状完全相同,所述上下基板平行设置并且基板的两侧均对齐,所述下基板表面均匀涂抹光敏材料氢化非晶硅,所述上下基板之间是由双面胶构造的微通道,所述光诱导电沉积芯片的尺寸为3cm*3cm。
为实现上述目的,本发明还提供了如下方案:
图2为本发明实施例1一种单细胞生物物理特性的实时监测方法流程图,如图2所示,一种单细胞生物物理特性的实时监测方法,所述方法应用到前边所述的系统,所述方法包括:
步骤201:通过光学投影仪连接PC机,将PC机上的光图案投影到光诱导电沉积芯片;
步骤202:通过信号发生器连接光诱导电沉积芯片,对所述芯片两侧施加交流电压,形成图案化的水凝胶;
步骤203:通过将光诱导电沉积芯片放置于温度控制仪内,维持细胞连续培养的温度环境;
步骤204:通过微泵连接芯片中溶液入口,实时供给细胞培养基;
步骤205:将细胞悬浮液通所述水凝胶中,自主移动三维平台使得单细胞与投影的光斑完全重合;
步骤206:进行单细胞生物物理特性的测量;
步骤207:所述三维移动平台利用图像反馈,移动到下一个单细胞,使得所述下一个单细胞与投影的光斑完全重合并进行所述单细胞生物物理特性的测量,再次移动所述三维移动平台直至完成所有单细胞生物物理特性的测量。
光斑的大小决定了氢化非晶硅所能产生虚拟局部电极的面积,当光斑的大小与细胞的大小相等时,能够确定所测量的是单个细胞的阻抗。之后在对细胞的连续培养过程中,通过芯片上下两个基板之间引出来的电极线与阻抗分析仪连接,可以实时的测得阻抗谱。
通过光诱导电沉积技术使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液交联并图案化,通过改变各种光图案,实现单细胞的定位寻址生长;在细胞培养过程中,通过三维移动平台的程序化移动,实现批量化单细胞行为过程中的多种生物物理参数的实时测量,如:电学特性、尺寸和形状。
所述通过光学投影仪连接PC机,将PC机上的光图案进行投影,将所述投影后的光图案通过聚光透镜聚焦于载物台上的光诱导电沉积芯片。
所述步骤202,具体包括:在所述光诱导电沉积芯片的微流通道里通入浓度为20%的聚乙二醇二丙烯酸酯溶液;光图案投影到所述光诱导电沉积芯片,所述光诱导电沉积芯片两端连接信号发生器,施加交流电压,使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液发生交联反应,形成图案化的水凝胶;将纯度99%的乙醇溶液以50ul/min的进液速度通入微流通道30s来冲洗未交联的聚乙二醇二丙烯酸酯溶液;以50ul/min的进液速度通入细胞培养液30s洗去乙醇溶液;通入细胞悬浮液,静止1h,让单个细胞粘附在制定区域,再持续通入混有4-羟乙基哌嗪乙磺酸的细胞培养基,进行细胞的连续培养。
所述步骤207,具体包括:对细胞进行连续培养,调整光斑投影大小与单细胞同等尺寸,利用光学投影仪将光斑投影到单细胞;将所述光诱导电沉积芯片两端引出电极丝连接阻抗分析仪,对批量的单细胞进行实时监测;记录阻抗谱数据,根据等效电路图分析测得单细胞的电学特性;利用CCD摄像机进行实时的图像采集,分析批量的单细胞行为过程中的尺寸和形状变化。
基于光诱导电沉积技术使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液发生交联反应,形成水凝胶图案化的原理主要是:
通过将光斑图案投影到氢化非晶硅材料,氢化非晶硅材料吸收光子,产生电子空穴对,从而形成“虚拟局部电极”;再将信号发生器连接光诱导电沉积芯片,施加交流电压,产生非均匀电场;聚乙二醇二丙烯酸酯溶液中的氢离子(H30+)被吸引到氢化非晶硅表面发生脱水反应,产生裸氢离子(H+);同时H+与氢化非晶硅中所产生的电子发生还原反应,生成还原性很强的氢自由基(H·),化学方程式:聚乙二醇二丙烯酸酯分子被吸引到氢化非晶硅表面,与还原性很强的氢自由基发生反应,破坏聚乙二醇二丙烯酸酯分子中的C-C键,重新发生聚合反应,形成强度更大的C-O键,使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液交联固化成图案化的水凝胶。
聚乙二醇二丙烯酸酯是一种常用的生物型水凝胶,具有很好的生物兼容性,可以在光诱导电场的作用下快速成型。且由于聚乙二醇二丙烯酸酯分子具有高度的亲水性,在水溶液中有较大的水动力学体积,所以聚乙二醇二丙烯酸酯分子有助于抑制蛋白粘附,使得聚乙二醇二丙烯酸酯能够改变细胞以特定模式生长。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处,各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。
本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想;同时,对于本领域的一般技术人员,依据本发明的思想,在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处。综上所述,本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (5)
1.一种单细胞生物物理特性的实时监测系统,其特征在于,所述系统包括:光学投影仪、PC机、光诱导电沉积芯片、三维移动平台、信号发生器、阻抗分析仪、温度控制仪、微泵和CCD摄像机;
所述光学投影仪与所述PC机相连,用于将PC机上的光图案投射到光诱导电沉积芯片上;
所述光诱导电沉积芯片位于所述三维移动平台上,所述三维移动平台,用于改变光诱导电沉积芯片的空间位置;
所述信号发生器与所述光诱导电沉积芯片的两端连接,用于提供交流电压;
所述阻抗分析仪与所述光诱导电沉积芯片的两端连接,用于测量阻抗;
所述温度控制仪装载所述光诱导电沉积芯片,用于控制细胞连续培养的温度环境;
所述微泵与所述光诱导电沉积芯片的溶液入口连接,用于提供细胞培养基;
显微管位于所述光诱导电沉积芯片的上方;
所述CCD摄像机与所述显微管连接,用于实时采集图像;
所述系统还包括聚光透镜和载物台,所述PC机上的图案进行投影时,得到的投影图案是发散的,所述聚光透镜用于将发散的光图案聚焦到所述光诱导电沉积芯片上;所述光诱导电沉积芯片位于载物台上。
2.根据权利要求1所述的系统,其特征在于,所述光诱导电沉积芯片包括上基板和下基板,所述上基板和所述下基板的材质均为ITO玻璃,所述上基板和所述下基板的形状完全相同,所述上基板和所述下基板平行设置并且所述上基板和所述下基板的两侧对齐,所述下基板表面均匀涂抹光敏材料氢化非晶硅,所述上基板和所述下基板之间是由双面胶构造的微通道,所述光诱导电沉积芯片的尺寸为3cm*3cm。
3.一种用于权利要求1所述的单细胞生物物理特性的实时监测系统的实时监测方法,其特征在于,所述方法包括:
通过光学投影仪连接PC机,将PC机上的光图案投影于光诱导电沉积芯片上;
通过信号发生器连接光诱导电沉积芯片,对所述芯片两侧施加交流电压,形成图案化的水凝胶;
通过将光诱导电沉积芯片置于温度控制仪内,维持细胞连续培养的温度环境;
通过微泵连接芯片中溶液入口,实时供给细胞培养基;
将细胞悬浮液通所述水凝胶中,自主移动三维平台使得单细胞与投影的光斑完全重合;
进行单细胞生物物理特性的测量;
所述三维移动平台利用图像反馈,移动到下一个单细胞,使得所述下一个单细胞与投影的光斑完全重合并进行所述单细胞生物物理特性的测量,再次移动所述三维移动平台直至完成所有单细胞生物物理特性的测量;
所述通过信号发生器连接光诱导电沉积芯片,对所述芯片两侧施加交流电压,形成图案化的水凝胶,具体步骤包括:在所述光诱导电沉积芯片的微流通道里通入浓度为20%的聚乙二醇二丙烯酸酯溶液;光图案投影到所述光诱导电沉积芯片,所述光诱导电沉积芯片两端连接信号发生器,施加交流电压,使得聚乙二醇二丙烯酸酯溶液发生交联反应,形成图案化的水凝胶;将纯度99%的乙醇溶液以50ul/min的进液速度通入微流通道30s来冲洗未交联的聚乙二醇二丙烯酸酯溶液;以50ul/min的进液速度通入细胞培养液30s洗去乙醇溶液;通入细胞悬浮液,静置1h,让单个细胞粘附在制定区域,再持续通入混有4-羟乙基哌嗪乙磺酸的细胞培养基,进行细胞的连续培养。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述通过光学投影仪连接PC机,将PC机上的光图案进行投影,将所述投影后的光图案通过聚光透镜聚焦于载物台上的光诱导电沉积芯片。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述三维移动平台利用图像反馈,移动到下一个单细胞,使得所述下一个单细胞与投影的光斑完全重合并进行所述单细胞生物物理特性的测量,再次移动所述三维移动平台直至完成所有单细胞生物物理特性的测量,具体步骤包括:对细胞进行连续培养,调整光斑投影大小与单细胞同等尺寸,利用光学投影仪将光斑投影到单细胞;将所述光诱导电沉积芯片两端引出电极丝连接阻抗分析仪,对批量的单细胞进行实时监测;记录阻抗谱数据,根据等效电路图分析测得单细胞的电学特性;利用CCD摄像机进行实时的图像采集,分析批量的单细胞行为过程中的尺寸和形状变化。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711000294.8A CN107843541B (zh) | 2017-10-24 | 2017-10-24 | 一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711000294.8A CN107843541B (zh) | 2017-10-24 | 2017-10-24 | 一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107843541A CN107843541A (zh) | 2018-03-27 |
CN107843541B true CN107843541B (zh) | 2019-08-30 |
Family
ID=61662967
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201711000294.8A Active CN107843541B (zh) | 2017-10-24 | 2017-10-24 | 一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107843541B (zh) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108318394B (zh) * | 2018-05-09 | 2024-04-16 | 南京安控易创计算机科技有限公司 | 一种微流控分选测量可吸入颗粒物的方法及装置 |
CN109182081B (zh) * | 2018-08-22 | 2021-09-21 | 长春长光辰英生物科学仪器有限公司 | 一种基于图像处理模型的单细胞分选系统 |
CN110314714B (zh) * | 2019-07-09 | 2021-06-25 | 大连海事大学 | 一种基于三维图像特征的细胞活性状态表征监测装置及方法 |
CN110804529B (zh) * | 2019-11-11 | 2023-04-07 | 南通大学 | 一种光敏性水凝胶微阀的芯片结构及单细胞筛选方法 |
CN113654971B (zh) * | 2021-07-21 | 2022-11-01 | 长春理工大学 | 一种测量生物细胞电特性的光诱导电极扫描显微镜及方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101135680A (zh) * | 2007-07-13 | 2008-03-05 | 东南大学 | 光诱导介电泳辅助单细胞介电谱自动测试装置及测试方法 |
CN101344518A (zh) * | 2008-08-15 | 2009-01-14 | 东南大学 | 微纳生物粒子的多模式集成化介电表征装置及方法 |
CN101275944B (zh) * | 2008-05-13 | 2013-01-02 | 东南大学 | 单细胞行波介电谱的高通量测试芯片及测试方法 |
CN104730051A (zh) * | 2015-03-06 | 2015-06-24 | 山东大学 | 微流控-激光诱导荧光系统检测单个细胞中谷胱甘肽含量的方法 |
CN105044192A (zh) * | 2015-08-14 | 2015-11-11 | 深圳大学 | 一种基于光诱导介电泳技术的细胞分类方法 |
-
2017
- 2017-10-24 CN CN201711000294.8A patent/CN107843541B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101135680A (zh) * | 2007-07-13 | 2008-03-05 | 东南大学 | 光诱导介电泳辅助单细胞介电谱自动测试装置及测试方法 |
CN101275944B (zh) * | 2008-05-13 | 2013-01-02 | 东南大学 | 单细胞行波介电谱的高通量测试芯片及测试方法 |
CN101344518A (zh) * | 2008-08-15 | 2009-01-14 | 东南大学 | 微纳生物粒子的多模式集成化介电表征装置及方法 |
CN104730051A (zh) * | 2015-03-06 | 2015-06-24 | 山东大学 | 微流控-激光诱导荧光系统检测单个细胞中谷胱甘肽含量的方法 |
CN105044192A (zh) * | 2015-08-14 | 2015-11-11 | 深圳大学 | 一种基于光诱导介电泳技术的细胞分类方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
《Extracellular-controlled breast cancer cell formation and growth using non-UV patterned hydrogels via optically-induced electrokinetics》;Na Liu et al.;《Lab Chip》;20141231;第1368页右栏倒数第1段到第1370页左栏第2段,图1 |
《面向微纳米自动化操控的光诱导电液动力学关键技术》;梁文峰 等.;《中国科学》;20131231;第58卷;第194-199页 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107843541A (zh) | 2018-03-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107843541B (zh) | 一种单细胞生物物理特性的实时监测系统和方法 | |
Schmid et al. | Electrical impedance spectroscopy for microtissue spheroid analysis in hanging-drop networks | |
CN101614729B (zh) | 用于细胞操作及电生理信号检测的微电极阵列器件及专用装置 | |
Kolb et al. | PatcherBot: a single-cell electrophysiology robot for adherent cells and brain slices | |
Kaji et al. | Microelectrochemical approach to induce local cell adhesion and growth on substrates | |
Cho et al. | Electric field–induced migration and intercellular stress alignment in a collective epithelial monolayer | |
CN104330172B (zh) | 一种基于电控液晶汇聚微透镜的波前测量芯片 | |
CN102156158B (zh) | 拓扑图式化神经细胞网络培养测量微流控芯片装置 | |
CN101343613B (zh) | 柔性高通量细胞电融合微电极阵列芯片装置 | |
CN102580794A (zh) | 可定位细胞及生物体的微流控芯片及其应用 | |
US20180357927A1 (en) | Contractile function measuring devices, systems, and methods of use thereof | |
CN107574163B (zh) | 一种基于光诱导介电泳装置筛选被磁性纳米粒子修饰细胞的方法 | |
CN102380170A (zh) | 植入式光电极采集调控装置 | |
JP4370082B2 (ja) | 神経細胞培養マイクロチャンバー | |
CN104311798B (zh) | 一种具有反蛋白石结构的导电聚合物薄膜的制备方法 | |
Li et al. | Photo-irresponsive molecule-amplified cell release on photoresponsive nanostructured surfaces | |
CN211311433U (zh) | 一种微组织结构的制造与组装集成平台 | |
CN105241940B (zh) | 一种基于介电泳力场的药效检测方法及其系统 | |
CN112986546A (zh) | 一种用于监测三维基质中群体细胞侵袭的阻抗传感方法 | |
CN107858289B (zh) | 一种细胞划痕芯片、装置及方法 | |
Li et al. | Porous Electrospun Films with Reversible Photoresponsive Microenvironmental Humidity Regulation: A Controllable Hydrogen-Bonding Synergistic Effect Exhibited by Acrylic Acid Segments | |
CN205120654U (zh) | 感光干膜-铟锡氧化物电极及细胞阻抗传感器 | |
CN218071637U (zh) | 一种生物组织在线三维成像系统 | |
CN215050149U (zh) | 一种基于微流控芯片的细胞分选与识别系统 | |
CN114197018B (zh) | 一种用于柔性电极的电化学修饰装置及其电化学修饰方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |