CN107802597A - 一种玻璃酸钠组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物组合物，特别涉及一种玻璃酸钠组合物，玻璃酸钠组合物包括平均分子量在40‑200万之间的高分子量玻璃酸钠和分子量在0.5‑2万的低分子量玻璃酸钠。本发明还提供了玻璃酸钠组合物的制备方法和应用。本发明提供的玻璃酸钠组合物滴眼液利用高分子量玻璃酸钠在眼表高效保湿能力，以及低分子量玻璃酸钠渗透能力和抗炎能力强的优势，两种玻璃酸钠协同作用，有着更好的干眼治疗效果。

Description

一种玻璃酸钠组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，特别涉及一种玻璃酸钠组合物滴眼液及其制备方法和应用。

背景技术

干眼症是指由于泪液的质和量的异常或泪液流体动力学异常引起的泪膜不稳定和眼表损害的一类疾病。该病原为年龄相关性病,近年来随着视频终端的广泛使用，环境污染的加剧,以及隐形眼镜的进一步推广，干眼病发病率逐年提升，且患者发病年龄有年轻化的趋势。日本眼科学会的一次调查结果也显示，每3名长期面对电脑屏幕的工作人员中,就有1名患干眼症,故此症引起国内外眼科临床界的广泛关注

干眼症的临床表现多种多样,有研究显示眼干涩为常见症(84.0％)，其次为视疲劳(72.0％),异物感(64.0％)和视力波动(56.0％)。但眼干燥症初期或在轻度眼干燥症中,这些症状常为非特异性且程度不等,因此常被忽视而被误诊为慢性结膜炎等病，使用一些抗生素类眼药水治疗。由于这些眼药水中含有防腐剂,会加速干眼症的发展,且滥用抗生素亦会影响到眼表面自身的抑菌环境。干眼所导致的泪液量的减少或成分的异常,泪膜的稳定性降低,泪膜破裂时间缩短，使得角膜和结膜直接暴露于空气中，失去了泪膜的保护,随着症状的发展,位于角膜和结膜外最外层的上皮细胞出现坏死和脱落，可引起患者更严重的眼不适症状。

玻璃酸(又名透明质酸)是广泛存在于生物体内的酸性黏多糖，普遍存在于人的皮肤、脐带、软骨、眼玻璃体和关节滑液中，有着润滑、保水、缓冲、年弹、创面修复、细胞调节等作用，商品化产品通常为其钠盐(玻璃酸钠或透明质酸钠)。由于玻璃酸钠直链轴上单糖之间氢键的作用，玻璃酸钠分子在空间上呈刚性的螺旋柱状结构，柱的内侧由于存在大量的羟基而产生强亲水性，而且玻璃酸钠分子将其结合的水分子锁定在其双螺旋柱状结构中，使水分不易流失，因此具有特殊的保水作用，保水能力理论上可高达500ml/g。玻璃酸钠作为一种高效保湿剂，可改善干眼病患者的角膜表面规则性，补充玻璃酸钠滴眼液是治疗干眼病患者最常用的治疗手段。玻璃酸钠滴眼液可以润滑眼表面，改善其刺激症状，如干涩感和异物感，还可以改善泪液质量，稳定泪膜状态，缓解干眼症状。

滴眼液用玻璃酸钠的分子量一般在80万以上，在此分子量范围的玻璃酸钠的作用主要有：(1)药物缓释作用，玻璃酸钠与眼球表面黏蛋白具有一种特殊的亲和力，称为生物黏附，其分子中的亲水性官能团与黏蛋白相互作用，能延缓药物的消除，提高利用度；(2)物理增黏作用，玻璃酸钠能提高药物在体内的滞留时间，具有提高药物疗效作用；(3)铺展润湿能力，玻璃酸钠能有效延长泪膜破裂时间，对眼球起润滑和保护作用，能缓解眼球干涩。然而，80万以上分子量的玻璃酸钠的在滴眼液的作用主要是表面保湿和润滑效果，因而对于治疗干眼的效果不够理想。

现有技术中关于不同分子量的玻璃酸钠或玻璃酸(透明质酸)混合使用的报道较多，例如：CN105233270A公开了一种用于水光治疗的药物组合物，是有高、中、低、寡4中分子量的玻璃酸钠及胶原蛋白、表皮生长因子和辅料组成的凝胶。4种分子量分别为130万-200万、50万-100万、5万-30万、0.3-0.8万，他们在凝胶中的最优含量分别为0.1％-0.2％、0.1％-0.2％、0.1％-0.5％、0.2％-0.6％。通过面部注射来改善干燥、细纹、老化等皮肤问题。

CN102114031A公开了一种治疗和预防炎症性肠疾病的透明质酸混合物，含有至少2种分子量的透明质酸，并进一步含有类固醇、免疫抑制剂或抗炎药等。2种透明质酸分子量分别是高分子量150万-500万(优选200万)，和低分子量50万-150万(优选100万)，两者的比例为20:80-80:20，最优比为1:1。两种分子量具有不同的流变性，发挥兼具速效和缓效的作用，并发挥组织支架和隔绝功能，通过为肠胃的伤口愈合作用和类固醇等药物的作用，达到治疗目的。

CN106109265A公开了一种透明质酸保湿组合物，含有分子量为110万的透明质酸或其盐60％-62％，分子量为40万的透明质酸或其盐18％-20％，分子量为0.6万的水解透明质酸或其盐18％-20％。透明质酸保湿组合物应用与皮肤清洁、护理、化妆产品中，通过高、低和微分子透明质酸的合理组合，具有真皮层、表皮层、角质层、皮肤表面的全层次立体保湿作用，同时也赋予了即时和长效保湿的效果。

CN101450028A公开了一种高效保湿的玻璃酸钠原液，由分子量260万以上的玻璃酸钠和分子量在1万以下的玻璃酸钠组成，其中高分子量玻璃酸钠为重量份的0.1％-0.5％，低分子量玻璃酸钠为重量份的0.5-1.0％，其余为蒸馏水。该玻璃酸钠原液，既能有效地渗透入真皮层，促进血液微循环，有利于皮肤对营养物质的吸收，起到美容抗皱的作用；又有较强的粘弹性和润滑性，涂于皮肤表面可形成保湿透气膜，保持皮肤滋润亮泽。

由于炎症是干眼症发生、发展的重要因素，炎症因子的产生不仅可刺激淋巴细胞增生对泪腺造成免疫攻击，自身也会干扰泪腺的正常分泌，因此抗炎是干眼症治疗的重点。目前关于玻璃酸钠治疗干眼病的研究，多数集中在玻璃酸钠联合抗炎药物的复配使用，而采用不同分子量玻璃酸钠复配，特别是利用高分子量的玻璃酸钠和小分子寡聚玻璃酸钠的深度渗透锁水和抗炎作用，以达到更好的干眼治疗效果的研究还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于解决现有高分子量玻璃酸钠滴眼液在治疗干眼症方面的不足，提供一种玻璃酸钠组合物及其制备方法和应用，其中，高分子量玻璃酸钠和低分子量玻璃酸钠以协同方式改善干眼症状，有着更好的干眼治疗效果。

本发明的技术方案为：一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括平均分子量在40-200万之间的高分子量玻璃酸钠、平均分子量在0.5-2万的低分子量玻璃酸钠、辅料和注射用水。

进一步地，所述玻璃酸钠组合物包括平均分子量在80-150万之间的高分子量玻璃酸钠和分子量在0.5-1万的低分子量玻璃酸钠。

进一步地，所述玻璃酸钠组合物包括0.05-0.5％(w/v)，优选为0.1-0.3％(w/v)的所述高分子量玻璃酸钠的，0.05-0.5％(w/v)，优选为0.1-0.3％(w/v)的所述低分子量玻璃酸钠，余量为辅料和注射用水。

进一步地，所述的辅料为等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂。

进一步地，所述等渗调节剂为甘露醇、山梨醇、氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硫酸钾、硝酸钠、硝酸钾、甘油、丙二醇和葡萄糖中的一种或多种。

进一步地，所述pH调节剂为磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、硼酸、硼砂、醋酸、醋酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、酒石酸、酒石酸钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸和磷酸中的一种或多种。

进一步地，所述稳定剂为亚硝酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素C、硫脲、抗坏血酸硬脂酸酯、生育酚乙酸酯、二丁基甲酚、半胱氨酸、二氨异氰、乙二胺四乙酸二钠、丁基化羟基苯甲醚、二巯基丙醇、甘油和甘露醇中的一种或多种。

进一步地，所述玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

进一步地，所述玻璃酸钠组合物的pH值为5-8，优选为6.5-7.2。

进一步地，所述玻璃酸钠组合物还包括药物活性成分，所述药物活性成分为抗生素、抗菌药和抗病毒药中的一种或多种，如氯霉素、红霉素、阿奇霉素、妥布霉素、林可霉素、那他霉素、克拉霉素、盐酸林可霉素、硫酸新霉素、硫酸庆大霉素、硫酸链霉素、四环素、利福平、氧氟沙星、左氧氟沙星、盐酸左氧氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星、盐酸环丙沙星、乳酸环丙沙星、盐酸洛美沙星、盐酸莫西沙星、加替沙星、盐酸贝西沙星、甲苯磺酸托氟沙星、甲磺酸帕珠沙星、氟比洛芬钠、普拉洛芬、吲哚美辛、双氯酚酸钠、奈帕芬胺、溴芬酸钠、酮咯酸氨丁三醇、醋酸氢化可的松、醋酸泼尼松、地塞米松、塞禾松、氟米龙和阿昔洛韦中的一种或多种，其用量按照药典的相关标准。

一种眼用玻璃酸钠组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)取注射用水，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取注射用水，加入等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂，得辅料液；

(3)所述辅料液过滤，作基础液备用；

(4)所述玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌，过滤；

(5)检测，灌装，封口，即得成品。

进一步地，步骤(1)中所述注射用水的量为额定体积的40-60％。

进一步地，步骤(2)中所述注射用水的量为额定体积的20-40％。

本发明还提供了所述的眼用玻璃酸钠组合物在制备滴眼液中的应用，所述滴眼液与可滤过组合瓶包装一起使用。

进一步地，所述滴眼液采用多剂量包装，体积范围为5-10mL/瓶。

进一步地，所述滴眼液采用单剂量包装，体积范围为0.2-1.0mL/瓶。

本发明通过筛选不同分子量的玻璃酸钠，采用高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，达到相互协同增效的技术效果；同时，高分子量玻璃酸钠和低分子量玻璃酸钠的合理配比，可以使高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，达到最佳的协同增效的技术效果。

本发明的有益效果为：采用高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠组合物制备的滴眼液，由于加入的低分子量玻璃酸钠和高分子量玻璃酸钠的相互作用，滴眼液能更好的渗透入角膜和结膜，进行深度保湿并发挥其抗炎和促进创伤愈合作用，低分子量玻璃酸钠与高分子量玻璃酸钠协同作用，更有效治疗干眼。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

实施例1

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.1％(w/v)平均分子量为80万的高分子量玻璃酸钠、0.1％(w/v)平均分子量为0.8万的低分子量玻璃酸钠，0.5％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.8)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为氯化钠；pH调节剂为氢氧化钠和盐酸；稳定剂为甘露醇。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取50％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积30％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌10min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

实施例2

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.1％(w/v)平均分子量为110万的高分子量玻璃酸钠、0.2％(w/v)平均分子量为1万的低分子量玻璃酸钠，0.3％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.5)和0.08％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为丙二醇；pH调节剂为磷酸二氢钠和硼酸；稳定剂为甘油。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取40％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积40％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌7min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

实施例3

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.1％(w/v)平均分子量为150万的高分子量玻璃酸钠、0.3％(w/v)平均分子量为1.5万的低分子量玻璃酸钠，0.5％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.7)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为甘油；pH调节剂为醋酸钠和柠檬酸；稳定剂为乙二胺四乙酸二钠。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取60％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积20％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌15min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

实施例4

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.3％(w/v)平均分子量为40万的高分子量玻璃酸钠、0.2％(w/v)平均分子量为2万的低分子量玻璃酸钠，0.4％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.2)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为甘油和山梨醇；pH调节剂为碳酸钠和醋酸；稳定剂为维生素C。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取55％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积25％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌12min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

实施例5

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.05％(w/v)平均分子量为200万的高分子量玻璃酸钠、0.5％(w/v)平均分子量为0.5万的低分子量玻璃酸钠，0.5％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.8)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为甘油和葡萄糖；pH调节剂为氢氧化钠和盐酸；稳定剂为甘露醇和乙二胺四乙酸二钠。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取50％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积35％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌10min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

实施例6

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.5％(w/v)平均分子量为80万的高分子量玻璃酸钠、0.05％(w/v)平均分子量为0.8万的低分子量玻璃酸钠，0.3％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.5)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为丙二醇和氯化钠；pH调节剂为磷酸二氢钠和盐酸；稳定剂为乙二胺四乙酸二钠和二巯基丙醇。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取55％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积35％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌8min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

对比例1

在实施例3玻璃酸钠组合物的基础上，添加0.03％的防腐剂苯扎氯铵，其制备方法为：

采用如下方法制备：

(1)称取60％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积20％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂、稳定剂和防腐剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌15min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

对比例2

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.2％(w/v)平均分子量为80万的高分子量玻璃酸钠，0.5％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.8)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为氯化钠；pH调节剂为氢氧化钠和盐酸；稳定剂为甘露醇。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取50％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入高分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积30％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌10min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

对比例3

一种眼用玻璃酸钠组合物，所述玻璃酸钠组合物包括0.2％(w/v)分子量为0.8万的低分子量玻璃酸钠，0.5％(w/v)等渗调节剂、pH调节剂(调节组合的pH为6.8)和0.1％(w/v)稳定剂，余量为注射用水。

其中，等渗调节剂为氯化钠；pH调节剂为氢氧化钠和盐酸；稳定剂为甘露醇。

本实施例的玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

采用如下方法制备：

(1)称取50％定额体积的注射用水，倒入搅拌釜中，加入低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取配制定额体积30％的注射用水置于不锈钢容器中，将等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂加入不锈钢容器中，搅拌溶解后，得辅料液；

(3)辅料液经0.22μm滤膜过滤，检查可见异物合格后作基础液备用；

(4)玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌10min，经0.22μm滤膜过滤；

(5)检测步骤(4)所得中间体，检测玻璃酸钠含量、pH值、渗透压、可见异物符合要求后，在百级环境下，灌装，封口，即得成品。

试验例1稳定性试验

取实施例3和对比例1制备的玻璃酸钠滴眼液采用市售样品的包装，检测于40℃±2℃，相对湿度75％±5％的条件下放置0个月、1个月、2个月、3个月、6个月，分别测量制剂的性状、pH值、有效成分含量和渗透压，测试结果见表1。

表1

由表1可以看出，经过6个月，对比例1中含防腐剂的滴眼液和实施例1的滴眼液的外观、pH值、有效成分含量和渗透压等指标，无显著变化，因此本申请的滴眼液在室温下放置具有良好的稳定性，是否添加防腐剂对其稳定性没有影响。

试验例2玻璃酸钠组合物制备滴眼液的安全性试验

短期多次给药眼刺激：选用成年健康新西兰兔5只，体重2.5-3.0kg，雌雄兼用。将每组动物眼睫毛剪去,每只动物左侧眼结膜囊内均滴由实施例3所制备的滴眼液(0.1ml/眼),右侧眼结膜囊内滴空白滴眼液为对照。每次给药时压迫鼻泪管,并使眼被动闭合5-10s。各组均每15min点眼一次,连续给药2h。记录给药后6h、24h、48h、72h至7d眼的局部刺激反应情况。

长期给药眼刺激试验：选用成年健康新西兰兔5只，体重2.5-3.0kg，雌雄兼用。将每组动物眼睫毛剪去,每只动物左侧眼结膜囊内均滴由实施例3所制备的滴眼液(0.1ml/眼),右侧眼结膜囊内滴空白滴眼液为对照。每次给药时压迫鼻泪管,并使眼被动闭合5-0s。每日5次,连续给药4周。

试验结果：短期多次给药眼刺激及长期给药眼刺激试验对兔眼均无明显影响,双眼角膜透明,无混浊，虹膜纹理清晰,结膜无充血,无水肿、无分泌物，这表明本发明的玻璃酸钠滴眼液是安全的。

试验例3滴眼液的干眼治疗效果疗效对比

以实施例1-6所制备的滴眼液与对比例2的0.2％高分子量玻璃酸钠滴眼液、对比例3的0.2％低分子量玻璃酸钠滴眼液、生理盐水进行干眼治疗效果对比。

3.1干眼模型的建立

取健康新西兰白兔，用3％戊巴比妥钠1.5mL/kg腹腔注射，全身麻醉。在手术显微镜下用纤细电刀直接灼烙睑板腺开口，每个约1s，然后手术摘除瞬膜。造模5周后，观察模型建立情况。

3.2分组及给药

将造模成功的兔眼(90只眼)随机分为9组，每组10只眼:治疗组8组,兔眼结膜囊内分别滴实施例1-6滴眼液、0.2％高分子量玻璃酸钠滴眼液，以及0.2％低分子量玻璃酸钠滴眼液；对照组兔眼结膜囊内滴生理盐水；均为4次/d(9时、11时、15时、17时)，1滴/次，连续治疗2周。

3.3观察指标

3.3.1荧光素染色(fluorescein staining,FLS)：1％荧光素钠10μL滴入兔结膜囊内，被动眨眼数次，裂隙灯钴蓝光下观察角膜荧光素的染色情况。将角膜分成上、中、下3部分，每部分按0～3计分。0代表无着色；1代表散在点染；2代表稍密集的荧光素染色点；3代表密集的点状或斑片状染色,共0-9分，每只眼累计得分后取平均值。

3.3.2虎红染色(rose bengal staining,RBS)：1％虎红10μL滴入兔结膜囊内，被动眨眼数次，裂隙灯观察鼻侧球结膜、角膜、颞侧球结膜染色情况。将睑裂区眼表分为鼻侧球结膜、角膜、颞侧球结膜3部分，每部分按0～3计分。0代表无着染；1代表示散在点染；2代表稍密集的斑点染色；3代表示密集的点状或斑片状染色，每只眼累计得分后取平均值。

3.3.3泪膜破裂时间(break-up time,BUT)：1％荧光素钠20μL滴入兔结膜囊内，被动眨眼数次后在裂隙灯钴蓝光下观察泪膜，记录泪膜出现干燥斑的时间，连续测3次，取平均值。

3.4结果

3.4.1FLS

结果见表2：

表2各组治疗前后FLS检查结果

^*表示与治疗前相比：P<0.05，有统计学差异。

由表2可见,治疗2周后，本发明实施例1-6组所制备的玻璃酸钠滴眼液均可明显降低FLS分值，各实施例组所制备的玻璃酸钠滴眼液的效果有差异，其中以实施例1-4组效果最为明显，说明本发明眼用组合物中各组分的含量及配比对其效果影响较大；0.2％高分子量组与0.2％低分子量组效果相当，相比实施例1-6组的玻璃酸钠滴眼液，其治疗干眼的效果较差，而生理盐水则对于干眼治疗无效果。

3.4.2RBS

结果见表3:

表3各组治疗前后RBS检查结果

^*表示与治疗前相比：P<0.05，有统计学差异

由表3可见，治疗2周后，本发明实施例1-6组所制备的玻璃酸钠滴眼液均可明显降低RBS分值，各实施例组所制备的玻璃酸钠滴眼液的效果有差异，其中以实施例1-4组效果最为明显，说明本发明眼用组合物中各组分的含量及配比对其效果影响较大；相比实施例1-6组的玻璃酸钠滴眼液，0.2％高分子量组与0.2％低分子量组较差，而生理盐水组治疗前后无显著性变化。3.4.3BUT

结果见表4：

表4各组治疗前后BUT检查结果

^*表示与治疗前相比：P<0.05，有统计学差异

由表4可见，用药2周后，本发明实施例1-6组所制备的玻璃酸钠滴眼液均可显著延长BUT，各实施例组所制备的玻璃酸钠滴眼液的效果有差异，其中以实施例1-4组效果最为明显，说明本发明眼用组合物中各组分的含量及配比对其效果影响较大；相比实施例1-6组的玻璃酸钠滴眼液，0.2％高分子量组与0.2％低分子量组延长BUT的效果较差。

综合以上结果，可得出结论：高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠滴眼液均可显著改善眼干燥症，而采用高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠组合物制备的滴眼液，由于加入的低分子量玻璃酸钠，能更好的渗透入角膜和结膜，进行深度保湿并发挥其抗炎和促进创伤愈合作用，低分子量玻璃酸钠与高分子量玻璃酸钠协同作用，更有效治疗干眼。高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠组合后的滴眼液对干眼的治疗效果最好。

本发明采用高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠组合物制备的滴眼液，由于加入的低分子量玻璃酸钠，能更好的渗透入角膜和结膜，进行深度保湿并发挥其抗炎和促进创伤愈合作用，低分子量玻璃酸钠与高分子量玻璃酸钠协同作用，更有效治疗干眼。

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。

Claims (10)

1.一种眼用玻璃酸钠组合物，其特征在于，所述玻璃酸钠组合物包括平均分子量在40-200万之间的高分子量玻璃酸钠、平均分子量在0.5－2万的低分子量玻璃酸钠、辅料和注射用水。

2.根据权利要求1所述的玻璃酸钠组合物，其特征在于，所述玻璃酸钠组合物包括平均分子量在80-150万之间的高分子量玻璃酸钠和平均分子量在0.5-1万的低分子量玻璃酸钠。

3.根据权利要求1所述的玻璃酸钠组合物，其特征在于，所述玻璃酸钠组合物包括0.05-0.5％(w/v)，优选为0.1-0.3％(w/v)的所述高分子量玻璃酸钠的，0.05-0.5％(w/v)，优选为0.1-0.3％(w/v)的所述低分子量玻璃酸钠，余量为辅料和注射用水。

4.根据权利要求1所述的玻璃酸钠组合物，其特征在于，所述的辅料为等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂。

5.根据权利要求1所述的玻璃酸钠组合物，其特征在于，所述玻璃酸钠组合物中不含防腐剂。

6.根据权利要求1所述的玻璃酸钠组合物，其特征在于，所述玻璃酸钠组合物的pH值为5-8，优选为6.5-7.5。

7.权利要求4-6任一项所述的眼用玻璃酸钠组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取注射用水，加入高分子量的玻璃酸钠和低分子量的玻璃酸钠，完全溶解，得玻璃酸钠混合溶液；

(2)取注射用水，加入等渗调节剂、pH调节剂和稳定剂，得辅料液；

(3)所述辅料液过滤，作基础液备用；

(4)所述玻璃酸钠混合溶液加入所述基础液，定容至额定体积，搅拌，过滤；

(5)检测，灌装，封口，即得成品。

8.如权利要求1-6任一项所述的眼用玻璃酸钠组合物在制备滴眼液中的应用，所述滴眼液与可滤过组合瓶包装一起使用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述滴眼液采用多剂量包装，体积范围为5-10mL/瓶。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述滴眼液采用单剂量包装，体积范围为0.2-1.0mL/瓶。