CN107744521A - 常春藤皂苷元及其糖苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用 - Google Patents

常春藤皂苷元及其糖苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了常春藤皂苷元及其糖苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用。本发明提供了序号1‑15的常春藤皂苷元或皂苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用，本发明证明，序号1‑15的常春藤皂苷元或皂苷对小鼠糖异生具有明显的抑制作用，对肝糖原的合成有明显的促进作用，证明序号1‑15的常春藤皂苷元或皂苷可以明显抑制肝脏糖异生。因此，本领域技术人员有充分的理由相信序号1‑15的常春藤皂苷元或皂苷对肝脏糖异生具有良好的抑制作用，可以开发成治疗肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病的药物。

Description

常春藤皂苷元及其糖苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的 应用
技术领域
本发明属于医药领域，涉及已知天然产物的新用途，具体涉及常春藤皂苷元及其糖苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用。
背景技术
常春藤皂苷元(hederagenin)为一种五环三萜类化合物，化学名称为(3β,4α)-3,23-二羟基齐墩果-12-烯-28-酸，分子式为C30H48O4。常春藤皂苷为常春藤皂苷元的糖苷化产物。
常春藤皂苷元及常春藤皂苷在自然界中资源较为丰富，广泛分布于川续断科、忍冬科、毛茛科、五加科及败酱科等多种植物中，具有较好的开发优势。申请人对常春藤皂苷元及常春藤皂苷进行了系统的研究，发现常春藤皂苷元及常春藤皂苷具有多种药理作用，对多种疾病具有防治价值，具有广阔的临床开发应用前景。
肝脏糖异生是肝脏葡萄糖代谢的重要组成部分。糖异生作用是由简单的非糖前体转变为糖的过程。有证据表明，肝脏糖异生异常与肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病密切相关。抑制糖异生可以治疗肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病。
目前尚未见常春藤皂苷元及其糖苷用于抑制肝脏糖异生的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供常春藤皂苷元及其糖苷在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
如下化学结构所示的常春藤皂苷元及其糖苷中的一种或多种形成的组合物在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用，
其中，R1和R2代表的糖单元及其连接方式如下所示：
一种用于抑制肝脏糖异生的药物制剂，含有上述常春藤皂苷元及其糖苷中的一种或多种形成的组合物，还含有药学上可以接受的载体或赋形剂，制成药学上可以接受的剂型。
优选地，所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。
优选地，所述药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
一种提取物在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用，该提取物以新鲜或干燥的植物的整体或局部为原料提取制备得到，或以中药材、中药饮片为原料提取制备得到，所述提取物中含有上述常春藤皂苷元及其糖苷中的一种或多种，所述常春藤皂苷元及其糖苷的含量占所述提取物的质量百分含量不低于50％。
一种用于抑制肝脏糖异生的药物制剂，含有上述提取物，还含有药学上可以接受的载体或赋形剂，制成药学上可以接受的剂型。
优选地，所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。
优选地，所述药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
本发明证明，序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷对小鼠糖异生具有明显的抑制作用，对肝糖原的合成有明显的促进作用，证明序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷可以明显抑制肝脏糖异生。因此，本领域技术人员有充分的理由相信序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷对肝脏糖异生具有良好的抑制作用，可以开发成治疗肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病的药物。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
本发明涉及到的常春藤皂苷元及其糖苷的化学名称、化学结构及相关参考文献如下，这些常春藤皂苷元及其糖苷通过购买或者由申请人自制，纯度不低于95％。
参考文献信息：
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实施例1：常春藤皂苷元及其糖苷的药理作用
将昆明种小鼠160只，按体重和性别随机均分为16组：对照组和序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷给药组。给药组小鼠分别灌胃给予50mg/kg/d的常春藤皂苷元或皂苷，对照组灌胃给予等体积溶媒0.5％CMC-Na，连续灌胃4周，末次灌胃后禁食12h后，尾静脉采血测空腹血糖，记作0min时血糖值；其后，按体重2g/kg剂量腹腔注射L-a-丙氨酸，1h后摘眼球取血，测60min时血糖值。根据0min和60min时血糖值计算糖异生率(％)。最后处死取肝，作肝糖元测定，用蒽酮硫酸法测肝糖原。
结果腹腔注射生糖氨基酸1h后，各组血糖都有升高，但对照组血糖升高幅度明显大于各给药组，依据各组0min和60min时血糖值计算糖异生率(％)，如下表所示：
组别 肝脏糖异生率(％) 组别 肝脏糖异生率(％)
对照组 36.5±4.4 序号8给药组 23.0±4.2
序号1给药组 22.4±3.9 序号9给药组 22.6±3.7
序号2给药组 21.3±3.6 序号10给药组 20.9±3.2
序号3给药组 18.9±3.8 序号11给药组 21.8±4.0
序号4给药组 17.3±3.9 序号12给药组 21.3±4.3
序号5给药组 21.5±3.5 序号13给药组 21.8±3.8
序号6给药组 22.7±4.1 序号14给药组 22.9±4.1
序号7给药组 21.1±3.9 序号15给药组 21.7±3.6
肝糖原测定结果显示，对照组肝糖原平均含量为0.58g/100g，序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷给药组肝糖原平均含量均在0.8g/100g以上，与对照组差异显著(P＜0.05)。
上述实验结果表明，序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷对小鼠糖异生具有明显的抑制作用，对肝糖原的合成有明显的促进作用，证明序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷可以明显抑制肝脏糖异生。因此，本领域技术人员有充分的理由相信序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷以及这些皂苷元或皂苷的任意组合形成的组合物对肝脏糖异生具有良好的抑制作用，可以开发成治疗肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病的药物。
实施例2：含有常春藤皂苷元或其糖苷的提取物的制备及药理作用
第一部分：提取物的制备
制备方法一：干燥的黄褐毛忍冬药材5kg，用70％乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物1)，加适量水混悬，过滤，上样于D101大孔树脂，从10％、30％、50％、70％、90％乙醇开始梯度洗脱，根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙，三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从树脂上洗脱完停止收集，将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物1。
制备方法二：干燥的黄褐毛忍冬药材5kg，用90％乙醇浸泡24h，过滤，收集滤液，减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物2)，加适量水混悬，过滤，上样于AB-8大孔树脂，从10％、30％、50％、70％、90％乙醇开始梯度洗脱，根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙，三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从树脂上洗脱完停止收集，将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物2。
制备方法三：干燥的黄褐毛忍冬药材5kg，水煮6h，过滤，收集滤液，减压浓缩得到浸膏(取部分干燥得总提取物3)，过滤，上样于LX-38大孔树脂，从10％、30％、50％、70％、90％乙醇开始梯度洗脱，根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙，三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从树脂上洗脱完停止收集，将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物3。
制备方法四：干燥的黄褐毛忍冬药材5kg，用70％乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物4)，加适量水混悬，依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取。正丁醇部位浸膏进行正相硅胶柱层析(200-300目)，以氯仿-甲醇梯度洗脱(20∶1、10∶1、5∶1、2∶1)，根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙，三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从硅胶上洗脱完停止收集，将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物4。
制备方法五：干燥的黄褐毛忍冬药材5kg，用70％乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物5)，加适量水混悬，依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取。正丁醇部位浸膏进行ODS反相硅胶柱层析，依次用20％、30％、40％、50％甲醇水梯度洗脱，根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙，三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从ODS上洗脱完停止收集，将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物5。
用上述HPLC-ELSD法分别测定上述5种不同制备方法制备的总提取物1-5以及富含Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的黄褐毛忍冬提取物1-5中的Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙总质量百分含量，结果如下表。
由此可见，制备方法一至五可以有效对Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙进行富集，得到富含Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙这三种常春藤皂苷的黄褐毛忍冬提取物1-5。在下述药理作用中，为了便于黄褐毛忍冬提取物1-5药效强度的比较，给药剂量均以其中所含三种皂苷总和进行换算。
第二部分：提取物的抑制肝脏糖异生作用
将昆明种小鼠60只，按体重和性别随机均分为6组：对照组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含50mg/kg/d三种总皂苷的提取物量，对照组灌胃给予等体积溶媒0.5％CMC-Na，连续灌胃4周，末次灌胃后禁食12h后，尾静脉采血测空腹血糖，记作0min时血糖值；其后，按体重2g/kg剂量腹腔注射L-a-丙氨酸，1h后摘眼球取血，测60min时血糖值。根据0min和60min时血糖值计算糖异生率(％)。最后处死取肝，作肝糖元测定，用蒽酮硫酸法测肝糖原。
结果腹腔注射生糖氨基酸1h后，各组血糖都有升高，但对照组血糖升高幅度明显大于各给药组，依据各组0min和60min时血糖值计算糖异生率(％)，如下表所示：
组别 肝脏糖异生率(％) 组别 肝脏糖异生率(％)
对照组 36.5±4.4 提取物3给药组 19.6±4.1
提取物1给药组 19.3±3.9 提取物4给药组 19.1±3.5
提取物2给药组 18.9±3.2 提取物5给药组 19.5±3.6
与对照组相比，黄褐毛忍冬提取物1-5给药组肝脏糖异生率显著降低(P＜0.05)，各给药组之间无显著性差异(P＞0.05)。肝糖原测定结果显示，对照组肝糖原平均含量为0.58g/100g，黄褐毛忍冬提取物1-5给药组肝糖原平均含量均在0.8g/100g以上，与对照组差异显著(P＜0.05)，各给药组之间无显著性差异(P＞0.05)。
上述实验结果表明，黄褐毛忍冬提取物1-5对小鼠糖异生具有明显的抑制作用，对肝糖原的合成有明显的促进作用，证明黄褐毛忍冬提取物1-5可以明显抑制肝脏糖异生，可以开发成治疗肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病的药物。
实施例3：药物制剂
1、片剂：序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷或黄褐毛忍冬提取物5g，淀粉50g，硬脂酸镁3g。制备工艺：取序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷或黄褐毛忍冬提取物加淀粉、硬脂酸镁混合均匀，制成颗粒，干燥，压片。
2、胶囊：序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷或黄褐毛忍冬提取物5g，淀粉50g，硬脂酸镁3g。制备工艺：取序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷或黄褐毛忍冬提取物加淀粉、硬脂酸镁混合均匀，制成颗粒，干燥，装胶囊。
3、注射液：序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷或黄褐毛忍冬提取物1g，注射用氯化钠适量。制备工艺：取序号1-15的常春藤皂苷元或皂苷或黄褐毛忍冬提取物加注射用水溶解，加入注射用氯化钠至等渗，调节pH值至7-7.1，滤过，冷藏24小时，加注射用水至规定量，滤过，灌封，灭菌，即得。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

Claims (8)

1.如下化学结构所示的常春藤皂苷元及其糖苷中的一种或多种形成的组合物在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用，
其中，R1和R2代表的糖单元及其连接方式如下所示：
2.一种用于抑制肝脏糖异生的药物制剂，其特征在于：含有权利要求1所述的常春藤皂苷元及其糖苷中的一种或多种形成的组合物，还含有药学上可以接受的载体或赋形剂，制成药学上可以接受的剂型。
3.根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于：所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。
4.根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于：所述药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
5.一种提取物在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用，该提取物以新鲜或干燥的植物的整体或局部为原料提取制备得到，或以中药材、中药饮片为原料提取制备得到，其特征在于：所述提取物中含有权利要求1所述常春藤皂苷元及其糖苷中的一种或多种，所述常春藤皂苷元及其糖苷的含量占所述提取物的质量百分含量不低于50％。
6.一种用于抑制肝脏糖异生的药物制剂，其特征在于：含有权利要求5所述的提取物，还含有药学上可以接受的载体或赋形剂，制成药学上可以接受的剂型。
7.根据权利要求6所述的药物制剂，其特征在于：所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。
8.根据权利要求6所述的药物制剂，其特征在于：所述药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
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