CN107723238A - 一种细胞培养装置及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种细胞培养装置及其应用，该装置包括培养箱，盖合在所述培养箱上的培养盖，以及与所述培养盖可拆卸连接的载玻片支架；所述载玻片支架为空心半圆柱体结构，所述空心半圆柱体结构内侧设有多层用于插接载玻片的凹槽，相邻层凹槽之间的间距为一个载玻片的厚度，并且每层凹槽插接两个载玻片；所述空心半圆柱体结构外侧设有若干个透气孔槽。该装置优选应用于多种细胞的共培养。本发明还提供一种细胞共培养方法，包括：将两种以上不同细胞分别接种于载玻片上，待细胞贴壁；将载玻片支架和培养盖连接后，将载玻片插接在载玻片支架的凹槽中；培养箱中加入培养基，并手持培养盖将插好载玻片的载玻片支架垂直放入培养箱中进行细胞的共培养。

Description

一种细胞培养装置及其应用

技术领域

本发明属于生物医学仪器领域，具体涉及一种细胞培养装置及其应用。

背景技术

细胞培养技术是目前体外实验中最常用的方法。由于单层细胞培养不能完全模拟多细胞相互作用的体内环境、细胞趋向单一化，因而无法探讨多细胞间的相互关系，更不能满足研究者的需求。细胞共培养技术能弥补单层细胞培养的缺陷，有利于构建更接近人体状态的体外生理或病理模型。细胞共培养又称为复合培养或混合培养，是指将2种或2种以上细胞放在同一培养系统中培养。目前，细胞共培养方法主要包括直接接触共培养、间接接触共培养和三维细胞共培养，其中间接共培养是将两种或两种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置于同一培养环境之中，使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触。其原理是在共培养体系中一种细胞对另一种细胞的影响是通过旁分泌的细胞因子相互作用。

间接共培养分为条件培养基共培养法、“爬片式”共培养法、嵌入式细胞共培养法(Transwell小室)、其他间接接触共培养方法。本发明是在“爬片式”共培养法的理论基础上设计完成。“爬片式”共培养法是将细胞先接种在处理后的玻片上，待细胞贴壁后，以一定比例放入另一种细胞的培养皿中与其共培养。但这种方法操作时需要在玻片上先滴蜡再种细胞，同时还需要六孔板、35mm共聚焦培养皿以及蜡烛，操作过程较为繁琐且成本较高。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种细胞培养装置及其应用，能简化培养的操作流程且能降低成本，还可多组共培养同时进行。本发明的技术方案为：

一种细胞培养装置，包括培养箱，盖合在所述培养箱上的培养盖，以及与所述培养盖可拆卸连接的载玻片支架；所述载玻片支架为空心半圆柱体结构，所述空心半圆柱体结构内侧设有多层用于插接载玻片的凹槽，相邻层凹槽之间的间距为一个载玻片的厚度，并且每层凹槽插接两个载玻片；所述空心半圆柱体结构外侧设有若干个透气孔槽。

进一步地，所述培养盖上设有卡槽，所述载玻片支架顶部设有卡块，所述培养盖和所述载玻片支架通过所述卡槽和所述卡块卡接。

进一步地，所述培养盖内侧设有顶块，所述顶块用于保证所述培养盖和所述培养箱盖合时之间留有缝隙。

进一步地，所述载玻片支架采用聚苯乙烯材料制成。

所述细胞培养装置优选应用于多种细胞的共培养。

一种细胞共培养方法，是采用上述细胞培养装置，包括以下步骤：

(1)将两种以上的不同细胞分别接种于载玻片上，待细胞贴壁；

(2)将载玻片支架和培养盖连接后，将步骤(1)的载玻片插接在载玻片支架的凹槽中；

(3)培养箱中加入培养基，并手持培养盖将插好载玻片的载玻片支架垂直放入培养箱中进行细胞的共培养；

(4)共培养结束后，手持培养盖从培养箱中取出载玻片支架，抽出载玻片，并分离培养盖和载玻片支架进行清洗。

与现有技术相比，本发明的特点和有益效果是：本发明的细胞培养装置设计巧妙，结构简单，可实现多种细胞的共培养，并且能在使用最少耗材的情况下，完成一次细胞间接接触共培养。共培养操作过程较为简单，大大改善了现有技术中存在的缺陷，使整个实验过程更加节省时间。此外，该装置可重复使用。

附图说明

图1为本发明的细胞培养装置的整体结构示意图，其中1-1为无载玻片的结构示意图；1-2为有载玻片的结构示意图；

图2为本发明的细胞培养装置的载玻片支架的结构示意图，其中2-1为载玻片和培养盖相连接的结构示意图；2-2为载玻片支架的结构示意图；

图3为本发明的细胞培养装置的培养盖的结构示意图；

图中：1、培养盖，2、载玻片支架，3、载玻片，4、培养箱，5、凹槽，6、顶快，7、透气孔槽，8、卡槽，9、卡块。

具体实施方式

下面结合附图和具体的实施例对本发明做进一步详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

图1示出本发明的细胞培养装置的一种结构示意图，包括培养箱4，盖合在培养箱4上的培养盖1，以及与培养盖1可拆卸连接的载玻片支架2，培养盖1和载玻片支架2的具体连接方式为：培养盖1上设有卡槽8，载玻片支架2顶部设有卡块9，培养盖1和载玻片支架2通过卡槽8和卡块9卡接，培养盖1的结构如图3所示。培养盖内侧设有4个顶块6，4个顶块6分别位于培养盖内侧4条边上，用于保证所述培养盖和所述培养箱盖合时之间留有缝隙，适合气体交换且防止其它物体污染。培养盖1的边角还可设置成角度为45°的半弧形。

载玻片支架2为空心半圆柱体结构，如图2所示，该空心半圆柱体结构内侧设有多层用于插接载玻片3的半圆弧形凹槽5，为了保证载玻片插入凹槽后的平稳性，半圆弧形凹槽5的直径要大于载玻片的直径；相邻层凹槽之间的间距为一个载玻片的厚度，即0.22mm，并且每层凹槽插接两个载玻片，每层凹槽的高度要大于两个载玻片的厚度并且小于三个载玻片的厚度，优选每层凹槽的高度为0.6mm；空心半圆柱体结构外侧设有5个透气孔槽7，同时还能保证细胞在培养过程中周围的培养基更加均匀、充分。

培养箱4和培养盖1均由透明玻璃制成，载玻片支架2由国际通用的具有较好光学性能、透明性和生物相容性的聚苯乙烯制成。

实施例1

两种细胞共培养方法，采用如图1～3所示的细胞培养装置，包括以下步骤：

步骤1、将两种不同细胞先分别接种在载玻片上，可根据需要设置两个载玻片是单面分别接种两种不同细胞，还可设置上下面接种两种不同细胞的载玻片，待细胞贴壁；

步骤2、将载玻片支架和培养盖连接后，将步骤(1)的载玻片插接在载玻片支架的凹槽中，具体插接方式为：第一个空白载玻片和种有细胞1的载玻片按照下上顺序插接于载玻片支架的最下层凹槽中，并且有细胞1一面朝上；第二个空白载玻片和种有细胞2的载玻片按照上下顺序插接于相邻一层凹槽中，并且有细胞2一面朝下；

还可在多层凹槽中插接载玻片同时培养这两种不同细胞，具体插接方式为：第一个空白载玻片和种有细胞1的载玻片按照下上顺序插接于载玻片支架的最下层凹槽中，并且有细胞1一面朝上；从第二层凹槽开始，插接的载玻片上下面均接种有不同细胞，并且同一层凹槽中两个载玻片的插放方式相同(上层和下层载玻片都是以细胞1面在上，细胞2面在下的方式插放)；以此类推，到最后一层凹槽，第二个空白载玻片和种有细胞2的载玻片按照上下顺序插接于相邻一层凹槽中，并且有细胞2一面朝下；

步骤3、培养箱中加入培养基，并手持培养盖将插好载玻片的载玻片支架垂直放入培养箱中进行细胞的共培养；

步骤4、共培养结束后，手持培养盖从培养箱中取出载玻片支架，抽出载玻片，并分离培养盖和载玻片支架进行清洗。

实施例2

三种以上细胞共培养方法，采用如图1～3所示的细胞培养装置，包括以下步骤：

步骤1、将三种以上不同细胞先分别接种在载玻片上，根据需要设置两个载玻片是单面分别接种不同细胞，以及上下面接种两种不同细胞的载玻片若干个，待细胞贴壁；

步骤2、将载玻片支架和培养盖连接后，将步骤(1)的载玻片插接在载玻片支架的凹槽中，具体插接方式为：第一个空白载玻片和种有细胞1的载玻片按照下上顺序插接于载玻片支架的最下层凹槽中，并且有细胞1一面朝上；从第二层凹槽开始，插接的载玻片上下面均接种有不同细胞(下层载玻片上下面分别接种细胞2和细胞3，上层载玻片上下面接种细胞4和细胞5)；以此类推，到最后一层凹槽，第二个空白载玻片和种有细胞n的载玻片按照上下顺序插接于相邻一层凹槽中，并且有细胞n一面朝下；

步骤3、培养箱中加入培养基，并手持培养盖将插好载玻片的载玻片支架垂直放入培养箱中进行细胞的共培养；

步骤4、共培养结束后，手持培养盖从培养箱中取出载玻片支架，抽出载玻片，并分离培养盖和载玻片支架进行清洗。

本实施例的细胞培养装置设计巧妙，结构简单，可实现多种细胞的共培养，并且能在使用最少耗材的情况下，完成一次细胞间接接触共培养，制作该装置所采用的原料也较为低廉，因此制作成本低。共培养操作过程较为简单，大大改善了现有技术中存在的缺陷，使整个实验过程更加节省时间。此外，该装置可重复使用。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (6)

1.一种细胞培养装置，其特征在于，包括培养箱，盖合在所述培养箱上的培养盖，以及与所述培养盖可拆卸连接的载玻片支架；所述载玻片支架为空心半圆柱体结构，所述空心半圆柱体结构内侧设有多层用于插接载玻片的凹槽，相邻层凹槽之间的间距为一个载玻片的厚度，并且每层凹槽插接两个载玻片；所述空心半圆柱体结构外侧设有若干个透气孔槽。

2.根据权利要求1所述的一种细胞培养装置，其特征在于，所述培养盖上设有卡槽，所述载玻片支架顶部设有卡块，所述培养盖和所述载玻片支架通过所述卡槽和所述卡块卡接。

3.根据权利要求2所述的一种细胞培养装置，其特征在于，所述培养盖内侧设有顶块，所述顶块用于保证所述培养盖和所述培养箱盖合时之间留有缝隙。

4.根据权利要求1～4所述的一种细胞培养装置，其特征在于，所述载玻片支架采用聚苯乙烯材料制成。

5.权利要求1所述的一种细胞培养装置的应用，其特征在于，优选应用于多种细胞的共培养。

6.一种细胞共培养方法，是采用权利要求1所述的一种细胞培养装置，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将两种以上的不同细胞分别接种于载玻片上，待细胞贴壁；

(2)将载玻片支架和培养盖连接后，将步骤(1)的载玻片插接在载玻片支架的凹槽中；

(3)培养箱中加入培养基，并手持培养盖将插好载玻片的载玻片支架垂直放入培养箱中进行细胞的共培养；

(4)共培养结束后，手持培养盖从培养箱中取出载玻片支架，抽出载玻片，并分离培养盖和载玻片支架进行清洗。