CN107619788A

CN107619788A - 一种农用芽孢杆菌菌液长效保护剂配方及其制备方法

Info

Publication number: CN107619788A
Application number: CN201610573857.1A
Authority: CN
Inventors: 赵林; 李昆仑; 李宝君; 李松; 孙欣
Original assignee: Hang Chen Bio Tech Ltd Jinan
Current assignee: Hang Chen Bio Tech Ltd Jinan
Priority date: 2016-07-21
Filing date: 2016-07-21
Publication date: 2018-01-23

Abstract

本发明提供一种长效保护剂配方及制备方法，涉及微生物技术领域。所述长效保护剂，由下列物质组成渗透压稳定剂20‑40%，pH稳定剂20‑40%，抗氧化剂10‑30%，防腐剂5‑10%。本发明还提供长效保护剂在芽孢杆菌活菌菌液中的应用，将菌种发酵24h得到活菌菌液，加入1%的长效保护剂，室温下保存300天活菌保存率在90‑95%之间。

Description

一种农用芽孢杆菌菌液长效保护剂配方及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及农用芽孢杆活菌菌液长效保护剂及其制备方法。

背景技术

生物肥料是一种具有活性微生物，并能够利用其代谢产物影响农作物生长发育，调节作物的生长，防治病虫害，对调高作物产量有明显提升，同时，生物肥料还在改善土壤结构与环境方面具有明显作用，可以提高土壤肥力，缓解土壤板结，提高作物对土壤的利用率，间接提高了作物产品的质量。

上个世纪中旬，化肥与农药在我国境内普遍滥用，虽然带来了巨大的农业效益，单给环境也带来了巨大的负面影响，甚至是严重破坏，就土壤来说，土壤板结，肥力下降，进而造成水土流失，土壤肥力进一步下降，最终形成恶性循环，最终导致农作物减产，甚至绝产。而化肥与农药会残留在农作物体内，使作物产品品质大打折扣，人和动物食用后，也会残留在人和动物体内，危害身体健康。

人们已经认识到化肥与农药的危害，所以，现在人们更倾向于生物肥料的应用，生物肥料也是近几十年发展起来的复合肥料，由于生物肥料具有对环境无污染，改善土壤板结，增加土壤肥力，增强农作物的抗病虫害的能力等优点，生物肥料已经逐渐取代化肥与农药。

近年来，随着国家对食品质量安全与环境质量的越来越重视，生物肥料已然被推向了新的高度，生物肥料的全面推广只是时间问题，一场绿色环保的“土地革命”即将到来，中国农业又将迈入新的局面。

在现有技术中，芽孢杆菌是微生物肥料中常用的菌属，如巨大芽孢杆菌能提高土壤肥力，对固氮具有增效作用，促进作物增产，如枯草芽孢杆菌能分泌多种对植物病原真菌具有拮抗作用的次生代谢产物，如枯草菌素，同时自身生长过程中合成多种活性酶以及有机酸、维生素、氨基酸类物质，具有促进作物生长，分解释放土壤中结合养分，降低土壤PH，提高作物抗性等优点，是一种极具应用价值的生防菌。

目前阻碍微生物菌剂工农业应用的瓶颈问题是利用传统的微生物发酵方法获得的微生物菌剂有效活菌数偏低，菌种单一，功能单一，应用于工农业生产中效果不明显，如果要提高有效活菌数量，需要冻干、浓缩等方法，设备等成本的投入偏高，最终产品价位高，不容易被使用者接受，制作成颗粒应用，造粒时烘干温度高，导致活菌大量死亡，应用效果差。

针对上述问题，本发明提供一种可以长期保存液体益生菌剂的保护剂配方，添加该配方可以保证液体菌剂在5-50℃条件下,一年时间菌活保存率90%-95%之间。

发明内容

本发明的目的在于能够提供一种配方，解决液体益生菌剂在加工、运输、贮存过程中容易失去活性，降低生物活性的问题。

一种长效保护剂，按照质量百分含量由下列物质组成：渗透压稳定剂20-40%，pH稳定剂20-40%，抗氧化剂 10-30%，防腐剂5-10%。其中：

渗透压稳定剂：多元醇或高聚多元醇选自甘油、甘露醇、木糖醇、山梨醇、聚乙二醇2000/4000/6000中的一种或两种以上的混合物。

pH稳定剂：其特征在于包含多元酸及其盐，选自柠檬酸、柠檬酸三钠、酒石酸、酒石酸钾、酒石酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁中的一种或两种以上的混合物。

抗氧化剂：其特征在于包含抗坏血酸及其盐选自丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）、尿酸中的一种或两种以上的混合物。

防腐剂：山梨酸钾、苯甲酸钠、尼泊金酯、丙酸钙、双乙酸钠、乳酸钠、那他霉素中的一种或两种以上的混合物。

本发明所涉及的长效保护剂在农用芽孢杆菌菌液中的应用方法如下：益生菌液发酵至芽孢率95%以上，调节pH在4.0-6.5之间，向其中加入1%的保护剂，充分搅拌至完全溶解。

具体实施方式

下面通过实施例进一步解释本发明，但本发明应不受这些实施例的限制。

实施例1：

长效保护剂配方：甘油20%、甘露醇20%、山梨醇12%、磷酸二氢钾20%、磷酸氢二钾5%、酒石酸钾15%、尼泊金酯3%、丙酸钙3.0%、双乙酸钠1.0%、乳酸钠1.0%。

取芽孢芽孢率≥95%、活菌含量为50亿cfu/克的巨大芽孢杆菌活菌菌液，向菌液中加入长效保护剂2%，并置于pH6.0，温度25℃，保存300天，进行活菌计数统计，菌液活菌含量为48.0亿cfu/克，存活率为96%。

实施例2：

长效保护剂配方甘油10%、木糖醇20%、山梨醇10%、硫酸铵20%、柠檬酸三钠20%、酒石酸钠6%、基羟基茴香醚4%、山梨酸钾5%、苯甲酸钠5%。

取芽孢芽孢率≥95%、活菌含量为50亿cfu/克的巨大芽孢杆菌活菌菌液，向菌液中加入长效保护剂5%，并置于pH7.5，温度30℃，保存300天，进行活菌计数统计，菌液活菌含量为46.2亿cfu/克，存活率为92.4%。

实施例3：

长效保护剂配方二乙二醇12%、木糖醇15%、甘油9%、硫酸钠15%、磷酸氢二钾6%、柠檬酸三钠18%、二丁基羟基甲苯（BHT）10%、苯甲酸钠5%、尼泊金酯5%、丙酸钙5%。

取芽孢芽孢率≥95%、活菌含量为50亿cfu/克的巨大芽孢杆菌活菌菌液，向菌液中加入长效保护剂4%，并置于pH5.5，温度35℃，保存300天，进行活菌计数统计，菌液活菌含量为47.5亿cfu/克，存活率为95.0%。

对比例1：

取芽孢芽孢率≥95%、活菌含量为50亿cfu/克的巨大芽孢杆菌活菌菌液，置于pH6.5，温度35℃，保存300天，进行活菌计数统计，菌液活菌含量为3.5亿cfu/克，存活率为7.0%。

实施例1-3、对比例1的巨大芽孢杆菌活菌菌液活菌统计如下：

处理结果	保存300天的活菌含量	保存300天的存活率
			空白	1.0亿cfu/克	2.0%
实施例1	48.0亿cfu/克	96%
			实施例2	46.2亿cfu/克	92.4%
实施例3	47.5亿cfu/克	95.0%
			对比例1	3.5亿cfu/克	7.0%

从以上的对比可以看出，实施例1的巨大芽孢杆菌活菌存活率显著高于其他条件，300天后巨大芽孢杆菌的存活率仍达96%以上。

Claims

1.一种农用芽孢杆菌菌液长效保护剂，按照质量百分含量由下列物质组成：渗透压稳定剂20-40%，pH稳定剂20-40%，抗氧化剂 10-30%，防腐剂5-10%。

2.根据权利要求1所述渗透压稳定剂，其特征在于所述多元醇或高聚多元醇选自甘油、甘露醇、木糖醇、山梨醇、聚乙二醇2000/4000/6000中的一种或两种以上的混合物。

3.根据权利要求1所述pH稳定剂，其特征在于包含多元酸及其盐，选自柠檬酸、柠檬酸三钠、酒石酸、酒石酸钾、酒石酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁中的一种或两种以上的混合物。

4.根据权利要求1所述抗氧化剂，其特征在于包含抗坏血酸及其盐选自丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）、尿酸中的一种或两种以上的混合物。

5.根据权利要求1所述防腐剂，其特征在于所述防腐剂选自山梨酸钾、苯甲酸钠、尼泊金酯、丙酸钙、双乙酸钠、乳酸钠、那他霉素中的一种或两种以上的混合物。

6.一种权利要求1-9之一所述长效保护剂在芽孢杆菌活菌菌液中的应用。

7.根据权利要求6所述应用，其特征在于将保护剂加入到芽孢杆菌活菌菌液中得到长效保护菌液，保护剂与活菌菌液的质量比为1-5:100。