CN104673696A - 防治土传病害的微生物土壤改良剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种防治土传病害的微生物土壤改良剂，采用胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC No.21699、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633、沼泽红假单胞菌(Rhodopseudom onas Palustris)ATCCNo.33872、产朊假丝酵母(Candida utilis)ATCC No.22023和黄直丝链霉菌(Streptomyces flavoretus)ACCC No.40046制备菌种；所述菌种的质量百分比如下：胶冻样芽孢杆菌5～25%，枯草芽孢杆菌15～50%，沼泽红假单胞菌5～30%，产朊假丝酵母10～40%，黄直丝链霉菌10～35%。

Description

防治土传病害的微生物土壤改良剂
技术领域
本发明涉及一种土壤改良剂及其制备方法，尤其涉及一种防治土传病害的微生物土壤改良剂。
背景技术
我国许多地区的耕地由于几十年的掠夺式耕作，养分流失，耕地质量遭到严重破坏。过于依赖化肥的使用，使耕地普遍出现土壤退化、耕层变浅、耕性变差、报税能力下降等现象。化肥的诞生在一定的时间里给农民带来了丰收的希望。然而长期使用化肥产生的弊端随之而来，土地板结、化学元素残留、环境污染等等一系列问题浮出水面。化肥已经不能满足可持续发展的需要，更不能成为绿色农业的支柱。
微生物肥料是以微生物生命活动的作用导致得到特定肥料效应的一种制品，使农业生产中使用肥料的一种，与传统化肥和有机肥在要领和内涵上有所不同。微生物肥料由微生物菌种剂和微生物肥料配方混合而制成。微生物肥料生产成本低，使用方便，应用效果好，改良土壤环境，不污染环境，施用后不仅增产，而且能提高农产品质量和减少化肥施用量。微生物肥料是生产绿色食品的肥料，是保护绿色环境的肥料，是很有发展前途的肥料。世界各国都在利用土壤中的有益生物制成的生物土壤改良剂来改善作物根际土壤的微生态区系，将农作物难以利用的物质转化为可被利用的有效营养物质，降低土壤传病发病率，缓解生态环境不利影响的局面。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治土传病害的微生物土壤改良剂及其制备方法。本发明充分利用菌种之间的相互作用，起到改良土壤生态环境，防治作物土壤传病的作用，从而达到增产、高产的目的。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
防治土传病害的微生物土壤改良剂，采用胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)CICC No.21699、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633、沼泽红假单胞菌(Rhodopseudom onas Palustris)ATCCNo.33872、产朊假丝酵母(Candida utilis)ATCCNo.22023和黄直丝链霉菌(Streptomyces flavoretus)ACCC No.40046制备菌种；所述菌种的质量百分比如下：胶冻样芽孢杆菌5～25%，枯草芽孢杆菌15～50%，沼泽红假单胞菌5～30%，产朊假丝酵母10～40%，黄直丝链霉菌10～35%。
本发明还提供了上述防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，包括以下步骤：
1）接种：配制各菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度28℃下培养3天；
2）一级培养：将长好的平板挑取单菌落转接至装有液体培养基的50mL锥形瓶中，
无菌操作，30℃、130r/min培养24～48h；
3）二级发酵：将一级培养菌种接种于盛有液体培养基的500mL锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养36～72h；
4）将各菌种按所述菌种的质量百分比混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，发酵培养基：葡萄糖50～100g/L、蔗糖20～100g/L、乳酪蛋白胨1～5g/L、蛋白胨1～5g/L、琼脂1～5g/L、KH2PO41～5g/L、尿素1～5g/L、K2HPO45～20g/L、MgSO4·7H2O5～20g/L、NaCl5～20g/L、(NH4)2SO45～20g/L，其余为蒸馏水；pH6.0～8.0，接种量为1～5%，30℃下培养4～7天，使发酵液中菌数达到10～15×108个/mL，即得到所述防治土传病害的微生物土壤改良剂。
本发明提供的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，所述胶冻样芽孢杆菌采用的液体培养基为：蔗糖10.0g，CaSO4·2H2O0.1g，K2HPO40.2g，CaCO35.0g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，蒸馏水定容至1.0L。
本发明提供的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，所述枯草芽孢杆菌采用的液体培养基为：牛肉膏5g、蛋白胨10g、Nacl3g、pH7.0，蒸馏水定容至1.0L。
本发明提供的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，所述沼泽红假单胞菌采用的液体培养基为：NH4Cl1.5g，KH2PO41.5g，MgSO4·7H2O0.8g，NaCl4.0g，NaHCO31.8g，CaCl20.01g，VB0.1g，酵母粉1.0g，CH3COONa4.0g，微量元素1.0mL/L包括（FeCl3·6H2O5.0g，ZnSO4·7H2O1.0g，CuSO4·5H2O0.05g，CoCl3·6H2O0.5g，硼酸1.0g，MnCl3·4H2O0.5g），添加CH3COOCH3调节pH，蒸馏水定容至1.0L。
本发明提供的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，所述产朊假丝酵母采用的液体培养基为：稀释去除啤酒花的麦芽汁至浓度为12Brix，琼脂15g，高压灭菌30分钟。
本发明提供的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，所述黄直丝链霉菌采用的液体培养基为：蔗糖10.0g，CaSO4·2H2O0.1g，K2HPO40.2g，CaCO35.0g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，蒸馏水定容至1.0L。
相比于现有技术，本发明提供的复合微生物土壤改良剂，配方合理，能有效改良土壤生态环境，起到预防土壤传染病害的作用，从而增加作物产量，提高肥料利用率。
具体实施方式
下面的实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
本发明提供的提高土壤肥力的微生物土壤改良剂采用胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)CICC No.21699、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633、沼泽红假单胞菌(Rhodopseudom onas Palustris)ATCCNo.33872、产朊假丝酵母(Candidautilis)ATCC No.22023和黄直丝链霉菌(Streptomyces flavoretus)ACCC No.40046制备而成。
所述菌种的质量百分比如下：胶冻样芽孢杆菌5～25%，枯草芽孢杆菌15～50%，沼泽红假单胞菌5～30%，产朊假丝酵母10～40%，黄直丝链霉菌10～35%。
菌种名称 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5
胶冻样芽孢杆菌 25％ 5％ 15％ 15％ 20％
枯草芽孢杆菌 12％ 45％ 20％ 25％ 15％
沼泽红假单胞菌 15％ 20％ 15％ 30％ 25％
产朊假丝酵母 20％ 25％ 40％ 15％ 15％
黄直丝链霉菌 28% 5% 10% 15% 25%
本发明提供的土壤改良剂对土壤理化性质的改良实验
试验组为施用1000ml/亩的本产品土壤改良剂实施例1，翻耕前均匀喷施于土壤表面；
对照组喷洒等量清水；
结果如表1所示，施用本产品制剂实施例1后相对于对照组土壤容重下降，改善了土壤板结度；施用本产品制剂实施例1后相对于对照组土壤pH值接近中性，土壤酸化状况得到逆转，适于作物生长。
表1本发明实施例1对土壤理化性质的影响
土壤容重（g/cm3） pH值
实验组 1.41 6.5
对照组 1.71 5.2
并且施用了实施例1后的小麦作物，对其常见的主要病害赤霉病、颖枯病、黄矮病、丛矮病等均有明显的防治作用。

Claims (7)

1.防治土传病害的微生物土壤改良剂，其特征在于：采用胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)CICC No.21699、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633、沼泽红假单胞菌(Rhodopseudom onas Palustris)ATCCNo.33872、产朊假丝酵母(Candida utilis)ATCCNo.22023和黄直丝链霉菌(Streptomyces flavoretus)ACCC No.40046制备菌种；所述菌种的质量百分比如下：胶冻样芽孢杆菌5～25%，枯草芽孢杆菌15～50%，沼泽红假单胞菌5～30%，产朊假丝酵母10～40%，黄直丝链霉菌10～35%。
2.根据权利要求1所述的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，其特征在于：
1）接种：配制各菌种的固体培养基，灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度28℃下培养3天；
2）一级培养：将长好的平板挑取单菌落转接至装有液体培养基的50mL锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养24～48h；
3）二级发酵：将一级培养菌种接种于盛有液体培养基的500mL锥形瓶中，无菌操作，30℃、130r/min培养36～72h；
4）将各菌种按所述菌种的质量百分比混合，将混合后的菌液接种于盛有发酵培养基的发酵罐中，发酵培养基：葡萄糖50～100g/L、蔗糖20～100g/L、乳酪蛋白胨1～5g/L、蛋白胨1～5g/L、琼脂1～5g/L、KH2PO41～5g/L、尿素1～5g/L、K2HPO45～20g/L、MgSO4·7H2O5～20g/L、NaCl5～20g/L、(NH4)2SO45～20g/L，其余为蒸馏水；pH6.0～8.0，接种量为1～5%，30℃下培养4～7天，使发酵液中菌数达到10～15×108个/mL，即得到所述防治土传病害的微生物土壤改良剂。
3.根据权利要求2所述的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述胶冻样芽孢杆菌采用的液体培养基为：蔗糖10.0g，CaSO4·2H2O0.1g，K2HPO40.2g，CaCO35.0g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，蒸馏水定容至1.0L。
4.根据权利要求2所述的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌采用的液体培养基为：牛肉膏5g、蛋白胨10g、Nacl3g、pH7.0，蒸馏水定容至1.0L。
5.根据权利要求2所述的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述沼泽红假单胞菌采用的液体培养基为：NH4Cl1.5g，KH2PO41.5g，MgSO4·7H2O0.8g，NaCl4.0g，NaHCO31.8g，CaCl20.01g，VB0.1g，酵母粉1.0g，CH3COONa4.0g，微量元素1.0mL/L包括（FeCl3·6H2O5.0g，ZnSO4·7H2O1.0g，CuSO4·5H2O0.05g，CoCl3·6H2O0.5g，硼酸1.0g，MnCl3·4H2O0.5g），添加CH3COOCH3调节pH，蒸馏水定容至1.0L。
6.根据权利要求2所述的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述产朊假丝酵母采用的液体培养基为：稀释去除啤酒花的麦芽汁至浓度为12Brix，琼脂15g，高压灭菌30分钟。
7.根据权利要求2所述的防治土传病害的微生物土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述黄直丝链霉菌采用的液体培养基为：蔗糖10.0g，CaSO4·2H2O0.1g，K2HPO40.2g，CaCO35.0g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，蒸馏水定容至1.0L。
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