CN107557282B - 一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，包括瓶盖、上瓶体、下瓶体和支撑体；瓶盖与上瓶体上部螺纹连接，上瓶体下部与下瓶体螺纹连接；上瓶体外壁可拆卸连接有一能够撕裂的套筒，瓶盖底端能够抵在套筒顶端；瓶盖顶端内壁竖直固设有一底端为尖端的圆柱体；支撑体为底端无端面且顶端端面中央开第一通孔的圆柱形壳体，第一通孔孔径大于圆柱体的直径；下瓶体的瓶口内壁固设有挡环，支撑体设置于挡环上；圆柱体的长度大于上瓶口的顶端至支撑体的顶端的距离，且当瓶盖底端抵在套筒顶端时，圆柱体底端位于支撑体的顶端上方。本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶实现了非实验室条件下的生防细菌的发酵，提高了生防菌对植物病害的防治效果。
Description
技术领域
本发明涉及农用微生物菌剂发酵技术领域，特别是涉及一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶。
背景技术
使用化学杀菌剂是控制农作物病害的有效方法，但化学杀菌剂长期使用易污染环境，诱导病菌产生抗药性。近年来，利用生防菌及其代谢产物抑制植物病原菌的生存和活动，在植物病害防治中发挥了重要作用。随着人们对无污染、无公害绿色食品呼声日益提高，以及国家有关化学肥料、化学农药减量使用政策的出台，生物防治已成为继农业、化学防治之后的又一重要防治方法。目前已有较多商品化生防菌制剂问世，并广泛应用于植物病害的生物防治，在生产上取得良好的防病效果，如具有广谱抑菌活性的枯草芽孢杆菌菌剂、木霉菌剂等。
目前生防菌制剂多为活菌制剂，其有效成份为活的菌体，辅助材料多为一些保护剂、分散剂、介质载体。生防菌在菌剂加工过程中常伴有较高比例的菌体死亡，而且无论是加工液体制剂还是固体制剂，随着运输存贮时间的延长，导致菌剂活菌数量减少、菌体活力下降、活菌定殖能力差等问题出现，极大影响菌剂商品质量稳定性及菌剂生防功效的发挥。研究发现，实验条件下的新鲜生防菌发酵液(含菌体及其抑菌活性代谢产物)生防效果通常较好，且好于菌体悬浮液及无菌滤液，因此，在田间如能及时施用新鲜的生防菌发酵液对进一步提高生防菌在植物病害防治中的效果，将具有重要的作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，以解决上述现有技术存在的问题，能够在非实验室条件下选择合适的时间点对生防细菌菌剂进行发酵，使得田间能够施用上新鲜的生防细菌菌剂发酵液，从而提高生防菌对植物病害的防治效果。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：本发明提供一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，包括瓶盖、上瓶体、下瓶体和支撑体；所述瓶盖与所述上瓶体上部螺纹连接，所述上瓶体下部与所述下瓶体螺纹连接；所述上瓶体外壁可拆卸连接有一能够撕裂的套筒，所述瓶盖底端能够抵在所述套筒顶端；所述瓶盖顶端内壁竖直固设有一底端为尖端的圆柱体；所述支撑体为底端无端面且顶端端面中央开第一通孔的圆柱形壳体，所述第一通孔孔径大于所述圆柱体的直径，所述下瓶体的瓶口内壁固设有挡环，所述支撑体设置于所述挡环上；所述圆柱体的长度大于所述上瓶口的顶端至所述支撑体的顶端的距离，且当所述瓶盖底端抵在所述套筒顶端时，所述圆柱体底端位于所述支撑体的顶端上方。
优选地，所述瓶盖、所述上瓶体、所述下瓶体、所述支撑体以及所述圆柱体的材质均为塑料。
优选地，所述上瓶体一体成型且包括由同轴设置的上瓶口和下瓶口，所述下瓶口与所述下瓶体螺纹连接，所述上瓶口与所述瓶盖螺纹连接；所述套筒与所述上瓶口的外壁可拆卸连接，所述下瓶口的口径大于所述上瓶口的口径，所述下瓶口顶端设置有第二通孔，所述第二通孔的孔径小于所述上瓶口的口径且大于所述圆柱体的直径。
优选地，所述瓶盖内壁设置有第一内螺纹，所述上瓶口外壁对应所述第一内螺纹设置有第一外螺纹；所述下瓶口的外壁设置有第二外螺纹，所下瓶体的瓶口对应所述第二外螺纹设置有第二内螺纹。
优选地，所述支撑体底端外壁固设有外凸环，所述外凸环的外径与所述下瓶口的外径相等。
优选地，所述第一外螺纹下方设置有第一橡胶密封圈，所述第二外螺纹上方设置有第二橡胶密封圈、下方设置有第三橡胶密封圈。
优选地，所述第一橡胶密封圈的厚度由上向下逐渐增大，所述第二橡胶密封圈、所述第三橡胶密封圈的厚度由下向上逐渐增大。
优选地，所述瓶盖底端外壁具有第一环状外凸，所述上瓶口底端外壁设置有第二环状外凸，所述套筒与所述第二环状外凸点状相连；所述下瓶口的顶部外壁设置有第三环状外凸，所述下瓶体的瓶口顶部设置有第四环状外凸，所述第三环状外凸与所述第四环状外凸的外径相等。
优选地，还包括橡皮套环，所述橡皮套环的口径小于所述第三环状外凸的外径，当所述下瓶口与所述下瓶体完全螺纹连接时，所述橡皮套环能够套设在所述第三换状外凸和所述第四环状外凸外部，且所述橡皮套环的宽度大于所述第三环状外凸顶端至所述第四环状外凸底端的距离。
本发明还提供一种利用上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌菌剂发酵的方法，包括以下步骤：
(1)在上瓶体的下瓶口和支撑体之间放两张直径需大于下瓶口的内径的锡箔纸，并将下瓶口和支撑体对接套好，使瓶盖与上瓶体的上瓶口螺纹连接，旋紧瓶盖，直到第一环状外凸与套筒顶部接触，并确保瓶盖内的圆柱体的尖端接近上瓶体底部圆形孔洞内的双层锡箔纸；另外，将培养液放入下瓶体中，再将下瓶体与上瓶体的下瓶口螺纹对接，用橡皮套环将上瓶体的第三环状外凸和下瓶体的第四环状外凸外包裹，密封后备用，完成培养液的存放；然后将装有培养液的贮存瓶置于121℃条件下高压灭菌30～35min；
(2)在实验室无菌条件下，打开上瓶体上瓶口瓶盖，用无菌不锈钢汤匙将接种菌粉放在锡箔纸上，用瓶盖重新密封后，用玻璃胶点状连接套筒和第二环状外凸；
(3)当需进行菌剂发酵时，撕去上瓶体上瓶口的可撕裂的套筒，旋转瓶盖，使瓶盖沿螺纹下移，并使圆柱体底端位于支撑体内，直到第一环状外凸与第二环状外凸接触，瓶盖内的塑料圆柱体的尖端刺破上瓶体内的锡箔纸后，左右振荡3～5下，使上瓶体内的接种菌粉进入下瓶体的培养液中，在于室内常温(23～28℃)条件下将贮存瓶放于阴暗处3～7天，每天摇瓶1～2次，每次5～10s，持续3天，以进行生防细菌菌剂发酵，扩繁菌体数量。
本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶与现有技术相比取得了以下技术效果：
本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶能够根据实际需要选择进行生防细菌菌剂发酵的时间，应用于田间生产时，可以根据实际需要提前发酵生防细菌，实现了非实验室条件下的生防细菌的发酵，如枯草芽孢杆菌，获得的菌体数量可达商品菌剂的要求，菌体新鲜而有活力，发酵液中含有的抗菌、促生活性物质及残余的营养物质及时施用对抑制病原菌活性、促进植物生长、提高生防菌定殖、存活能力均起到重要的作用，能够提高生防菌对植物病害的防治效果。本发明提供的利用上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌菌剂发酵的方法具有操作可行、方便适用的优点，节约了生防菌菌剂产品后期加工环节，可有效解决因运输存贮时间长、导致菌剂活菌数量减少、菌体活力下降而引起菌剂生防功效差的问题，该技术还适用于其他功能细菌的发酵，如胶冻样芽孢杆菌等。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶的结构示意图；
图2为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中瓶盖的结构示意图；
图3为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中上瓶体一种角度的结构示意图；
图4为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中上瓶体另一种角度的结构示意图；
图5为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中下瓶体的结构示意图；
图6为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中支撑体的结构示意图；
图7为本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中橡皮套环的结构示意图；
其中，1-瓶盖，101-圆柱体，102-固定环，103-加强筋，104-第一环状外凸，105-第一内螺纹，2-上瓶体，21-上瓶口，211-第一外螺纹，212-第一橡胶密封圈，213-套筒，214-第二环状外凸，22-下瓶口，221-第三环状外凸，222-第二橡胶密封圈，223-第二外螺纹，224-第三橡胶密封圈，3-下瓶体，31-瓶口，311-第四环状外凸，312-挡环，313-第二内螺纹，32-锥形瓶体，4-支撑体，41-第一通孔，42-外凸环，5-橡皮套环。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的目的是提供一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，以解决现有技术存在的问题，能够在非实验室条件下选择合适的时间点对生防细菌菌剂进行发酵，使得田间能够施用上新鲜的生防细菌菌剂发酵液，从而提高生防菌对植物病害的防治效果。
本发明提供一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，包括瓶盖、上瓶体、下瓶体和支撑体；所述瓶盖与所述上瓶体上部螺纹连接，所述上瓶体下部与所述下瓶体螺纹连接；所述上瓶体外壁可拆卸连接有一能够撕裂的套筒，所述瓶盖底端能够抵在所述套筒顶端；所述瓶盖顶端内壁竖直固设有一底端为尖端的圆柱体；所述支撑体为底端无端面且顶端端面中央开第一通孔的圆柱形壳体，所述第一通孔孔径大于所述圆柱体的直径，所述下瓶体的瓶口内壁固设有挡环，所述支撑体设置于所述挡环上；所述圆柱体的长度大于所述上瓶口的顶端至所述支撑体的顶端的距离，且当所述瓶盖底端抵在所述套筒顶端时，所述圆柱体底端位于所述支撑体的顶端上方。
本发明还提供一种利用生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌菌剂发酵的方法，包括以下步骤：
(1)在上瓶体的下瓶口和支撑体之间放两张直径需大于下瓶口的内径的锡箔纸，并将下瓶口和支撑体对接套好，使瓶盖与上瓶体的上瓶口螺纹连接，旋紧瓶盖，并确保瓶盖内的圆柱体的尖端接近上瓶体底部圆形孔洞内的双层锡箔纸；另外，将培养液放入下瓶体中，再将下瓶体与上瓶体的下瓶口螺纹对接，用橡皮套环将上瓶体的第三环状外凸和下瓶体的第四环状外凸外包裹，密封后备用，完成培养液的存放；然后将装有培养液的贮存瓶置于121℃条件下高压灭菌30～35min；
(2)在实验室无菌条件下，打开上瓶体上瓶口瓶盖，用无菌不锈钢汤匙将接种菌粉放在锡箔纸上，用瓶盖重新密封后，用玻璃胶点状连接套筒和第二环状外凸。
(3)当需进行菌剂发酵时，撕去上瓶体上瓶口的可撕裂的套筒，旋转瓶盖，使瓶盖沿螺纹下移，并使圆柱体底端位于支撑体内，直到第一环状外凸与第二环状外凸接触，瓶盖内的塑料圆柱体的尖端刺破上瓶体内的锡箔纸后，左右振荡3～5下，使上瓶体内的接种菌粉进入下瓶体的培养液中，在于室内常温(23～28℃)条件下将贮存瓶放于阴暗处3～7天，每天摇瓶1～2次，每次5～10s，持续3天，以进行生防细菌菌剂发酵，扩繁菌体数量。
本发明生防细菌菌剂发酵用贮存瓶能够根据实际需要选择进行生防细菌菌剂发酵的时间，应用于田间生产时，可以根据实际需要提前发酵生防细菌，实现了非实验室条件下的生防细菌的发酵，如枯草芽孢杆菌，获得的菌体数量可达商品菌剂的要求，菌体新鲜而有活力，发酵液中含有的抗菌、促生活性物质及残余的营养物质及时施用对抑制病原菌活性、促进植物生长、提高生防菌定殖、存活能力均起到重要的作用，能够提高生防菌对植物病害的防治效果。本发明提供的利用上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌菌剂发酵的方法具有操作可行、方便适用的优点，节约了生防菌菌剂产品后期加工环节，可有效解决因运输存贮时间长、导致菌剂活菌数量减少、菌体活力下降而引起菌剂生防功效差的问题，该技术还适用于其他功能细菌的发酵，如胶冻样芽孢杆菌等。
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
如图1所示，本实施例生防细菌菌剂发酵用贮存瓶包括瓶盖1、上瓶体2和下瓶体3；瓶盖1与上瓶体2上部连接，上瓶体2下部与下瓶体3连接。
如图2所示，瓶盖1内壁设置有第一内螺纹105，瓶盖1顶端内壁竖直固设有一圆柱体101，瓶盖1与圆柱体101的连接处的周围设置有加强筋103，圆柱体101的底端为尖端，顶盖顶部还设置有一固定环102；固定环102的外径等于上瓶体2的上瓶口21的内径，固定环102能够阻止瓶体内物品的逸出；瓶盖1底部外壁设置有第一环状外凸104。
如图3和图4所示，上瓶体2一体成型且包括由同轴设置的上瓶口21和下瓶口22，上瓶口21中部外壁对应瓶盖1内的第一内螺纹105设置有第一外螺纹211，第一外螺纹211下方设置有第一橡胶密封圈212，第一橡胶密封圈212的厚度由上向下逐渐增大，第一橡胶密封圈212下方的上瓶口21的外壁可拆卸套设有一材质为塑料的套筒213，套筒213上预设有开口，通过开口能够将套筒213撕裂，瓶盖1底端能够抵在套筒213顶端；在套筒213下方的上瓶口21的外壁即上瓶口21底端外壁设置有第二环状外凸214，套筒213与第二环状外凸214点状相连。
下瓶口22的口径大于上瓶口21的口径，下瓶口22顶端端面开设有第二通孔，第二通孔的孔径小于上瓶口21的口径且大于圆柱体101的直径；下瓶口22的外壁由上而下依次设置有第三环状外凸221、第二橡胶密封圈222、第二外螺纹223和第三橡胶密封圈224，第二橡胶密封圈222、第三橡胶密封圈224的厚度由下向上逐渐增大。
如图5所示，下瓶体3包括有空心圆柱形的瓶口31和以及底端口径大、顶端口径小的锥形瓶体32，下瓶体3的瓶口31的内壁对应下瓶口22的第二外螺纹223设置有第二内螺纹313；下瓶体3的瓶口31顶部设置有第四环状外凸311，在本实施例中，第三环状外凸221与第四环状外凸311的外径相等。
如图6所示，支撑体4为底端无端面且顶端端面中央开第一通孔41的圆柱形壳体，第一通孔41孔径大于圆柱体101的直径，下瓶体3的瓶口31内壁固设有挡环312，支撑体4设置于挡环312上；支撑体4底端外壁固设有外凸环42，外凸环42的外径与下瓶口22的外径相等。
安装时，将支撑体4套接于下瓶口22内部，并使在使上瓶体2的下瓶口22与下瓶体3通过螺纹连接，上瓶体2的上瓶口21与瓶盖1通过螺纹连接；值得注意的是，瓶盖1旋紧后，瓶盖1的底端以及第一环状外凸104会抵在套筒213的顶端，且此时圆柱体101底端位于支撑体4的顶端上方，且圆柱体101的长度大于上瓶口21的顶端至支撑体4的顶端的距离。值得注意的是，在本实施例中第二通孔的孔径需小于支撑体4的外径，以使下瓶口22顶端端面对支撑体4能起到一定的限位作用。
另外，如图7所示，本实施例生防细菌菌剂发酵用贮存瓶还包括橡皮套环5，橡皮套环5的口径小于第三环状外凸221的外径，且橡皮套环5的宽度大于第三环状外凸221顶端至第四环状外凸311底端的距离，因为橡皮套环5具有一定弹性，所以当下瓶口22与下瓶体3完全螺纹连接时，橡皮套环5能够套在第三换状外凸和第四环状外凸311外部，使上瓶体2和下瓶体3的连接更加稳固。
本发明还提供一种利用上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌菌剂发酵的方法，以生防细菌枯草芽孢杆菌T122F的发酵为例，首先进行原料的制备，如下：
所需原料：生防细菌枯草芽孢杆菌T122F，枯草芽孢杆菌配方培养液，上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶。
配制枯草芽孢杆菌培养液：豆粕40g，玉米粉20g，氯化钠5g，乳糖2g，碳酸钙2g，蛋白胨3g，酵母粉5g，硫酸亚铁(七水)0.3g，硫酸镁0.5g，磷酸二氢钾0.5g，加水定容至1000mL，pH6.5，在121℃下高压湿热灭菌35min后备用。
制备枯草芽孢杆菌菌粉：实验室无菌条件下操作，枯草芽孢杆菌在含有配方培养液的三角瓶中(50mL/250mL)发酵培养48h后(30℃，200rpm)，发酵液用无菌包埋剂(内含蔗糖与可溶性淀粉，重量比为1：4)吸附，可先将发酵液与包埋剂按1：1重量比拌匀成浆状，然后再添加适量包埋剂混匀，使发酵液与包埋剂最终重量比为1：3，此混匀物即为枯草芽孢杆菌菌粉，其活菌数达20-25亿/g，此菌粉常温下密封存放1年，活菌数仍可达2亿/g。
利用上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌枯草芽孢杆菌T122F的发酵的方法：
(1)在上瓶体2的下瓶口22及支撑体4顶面之间水平铺放两张直径7.0cm的锡箔纸，将下瓶口22和支撑体4对接套好之后，上瓶体2上瓶口21用瓶盖1密封，确保瓶盖1内固定的塑料的圆柱体101的尖端接近上瓶体2底部第二通孔下方的双层锡箔纸。另取50～100mL培养液放入容积为300mL的下瓶体3中，再将下瓶体3第二内螺纹313与上瓶体2第二外螺纹223对接，将上瓶体2的第三环状外凸221和下瓶体3的第四环状外凸311用橡皮套环5外包裹，密封后备用，完成培养液的存放，然后将装有培养液的贮存瓶置于121℃条件下高压灭菌30～35min。
(2)在实验室无菌条件下，打开瓶盖1，用无菌不锈钢汤匙将0.5～1g接种菌粉放在上瓶体2内的锡箔纸上，用瓶盖1重新密封后，用玻璃胶点状连接上瓶体2上瓶口21的套筒213与第二环状外凸214。
(3)当需进行菌剂发酵时，可在非无菌条件下操作，撕去上瓶体2上瓶口21的套筒213，将瓶盖1沿螺纹下移，使瓶盖1及环状外凸的底端边缘与上瓶体2上瓶口21的第二环状外凸214顶端接触，在此过程中瓶盖1内塑料的圆柱体101的尖端将上瓶体2内部的锡箔纸刺破，然后左右振荡3～5下，使上瓶体2菌粉进入下瓶体3的培养液中，在室内常温(23～28℃)条件下将贮存瓶放于阴暗处3～7天，每日摇瓶1～2次，每次5～10s，持续3天，进行生防细菌菌剂发酵，扩繁菌体数量。
另外，发明人还以实验室振荡条件下(30℃-200rpm)培养获得的发酵液为对比，同时采用10倍梯度法稀释测定发酵液菌体浓度，结果与分析如下：
枯草芽孢杆菌在上述生防细菌菌剂发酵用贮存瓶中发酵1、2、3、5、7d，测得的菌体浓度分别为4.2、8.6、14.2、16.4和38.4(×108cfu/mL)，枯草芽孢杆菌在塑料贮存瓶中发酵3～7天，获得的菌体数量可以达到枯草芽孢杆菌商品制剂的要求，表明采用本发明提供的方法进行菌株发酵是可行的。
表1：塑料贮存瓶中不同发酵时间对枯草芽孢杆菌菌体数量的影响
发明人对培养液的装瓶量对枯草芽孢杆菌发酵的影响进行了研究：
采用上述利用生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌枯草芽孢杆菌T122F的发酵的方法，研究分析培养液不同装瓶量对枯草芽孢杆菌发酵活菌数量的影响，结果表明，菌剂发酵3天后，采用培养液装瓶量50mL/300mL、75mL/300mL、100mL/300mL、125mL/300mL获得的菌体数量分别为14.2、13.8、11.8和7.6(×108cfu/mL)，结合成本和实际应用效果，选用培养液装瓶量50～100mL/300mL较为适宜。
表2培养液不同装瓶量对枯草芽孢杆菌菌体数量的影响
发明人还对存贮时间对枯草芽孢杆菌菌剂活菌数量的影响进行了研究：
采用上述利用生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌枯草芽孢杆菌T122F的发酵的方法，培养3天获得的发酵液在瓶内继续存放5、30、60天后，测得的枯草芽孢杆菌菌剂活菌数量分别为22.4、30.2和35.2(×108cfu/mL)，与初始菌量(14.2×108cfu/mL)相比，菌体数量均有显著提高，而实验室摇瓶条件下(30℃-200rpm)培养3天获得的发酵液在瓶内继续存放5、30、60天后，测得的枯草芽孢杆菌活菌数量分别为49.0、35.8和14.4(×108cfu/mL)，与初始菌量(119.0×108cfu/mL)相比，菌体数量均有明显下降。
其原因与后者培养液中的营养物质已被充分利用有一定的关系，同时也是实验室条件下新鲜生防细菌发酵液生防效果远远好于田间生产实际的一个重要原因。从本试验的结果表明，采用本发明上述利用生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌枯草芽孢杆菌T122F的发酵的方法获得的发酵液在60天内存放是可行的，而在实验室摇瓶培养条件下获得的发酵液应在短期内使用。采用本发明上述利用生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌枯草芽孢杆菌T122F的发酵的方法获得的发酵液，其残余的营养物质仍可继续维持菌体生长，有助于菌体的定殖及其生防功能的发挥。
表3存贮时间对发酵液中枯草芽孢杆菌菌体数量的影响
在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中央”、“上”、“下”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具存特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“笫二”、“第三”、“第四”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处。综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (6)
1.一种生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，其特征在于：包括瓶盖、上瓶体、下瓶体和支撑体；所述瓶盖与所述上瓶体上部螺纹连接，所述上瓶体下部与所述下瓶体螺纹连接；所述上瓶体外壁可拆卸连接有一能够撕裂的套筒，所述瓶盖底端能够抵在所述套筒顶端；所述瓶盖顶端内壁竖直固设有一底端为尖端的圆柱体；所述支撑体为底端无端面且顶端端面中央开第一通孔的圆柱形壳体，所述第一通孔孔径大于所述圆柱体的直径，所述下瓶体的瓶口内壁固设有挡环，所述支撑体设置于所述挡环上；所述圆柱体的长度大于所述上瓶口的顶端至所述支撑体的顶端的距离，且当所述瓶盖底端抵在所述套筒顶端时，所述圆柱体底端位于所述支撑体的顶端上方；所述瓶 盖顶部还设置有一固定环，所述固定环的外径等于所述上瓶口的内径，所述固定环能够阻止瓶体内物品的逸出；
所述上瓶体一体成型且包括由同轴设置的上瓶口和下瓶口，所述下瓶口与所述下瓶体螺纹连接，所述上瓶口与所述瓶盖螺纹连接；所述套筒与所述上瓶口的外壁可拆卸连接，所述下瓶口的口径大于所述上瓶口的口径，所述下瓶口顶端设置有第二通孔，所述第二通孔的孔径小于所述上瓶口的口径且大于所述圆柱体的直径；所述瓶盖内壁设置有第一内螺纹，所述上瓶口外壁对应所述第一内螺纹设置有第一外螺纹；所述下瓶口的外壁设置有第二外螺纹，所下瓶体的瓶口对应所述第二外螺纹设置有第二内螺纹；所述瓶盖底端外壁具有第一环状外凸，所述上瓶口底端外壁设置有第二环状外凸，所述套筒与所述第二环状外凸点状相连；所述下瓶口的顶部外壁设置有第三环状外凸，所述下瓶体的瓶口顶部设置有第四环状外凸，所述第三环状外凸与所述第四环状外凸的外径相等；还包括橡皮套环，所述橡皮套环的口径小于所述第三环状外凸的外径，当所述下瓶口与所述下瓶体完全螺纹连接时，所述橡皮套环能够套设在所述第三环 状外凸和所述第四环状外凸外部，且所述橡皮套环的宽度大于所述第三环状外凸顶端至所述第四环状外凸底端的距离。
2.根据权利要求1所述的生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，其特征在于：所述瓶盖、所述上瓶体、所述下瓶体、所述支撑体以及所述圆柱体的材质均为塑料。
3.根据权利要求2所述的生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，其特征在于：所述支撑体底端外壁固设有外凸环，所述外凸环的外径与所述下瓶口的外径相等。
4.根据权利要求2所述的生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，其特征在于：所述第一外螺纹下方设置有第一橡胶密封圈，所述第二外螺纹上方设置有第二橡胶密封圈、下方设置有第三橡胶密封圈。
5.根据权利要求4所述的生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，其特征在于：所述第一橡胶密封圈的厚度由上向下逐渐增大，所述第二橡胶密封圈、所述第三橡胶密封圈的厚度由下向上逐渐增大。
6.一种利用生防细菌菌剂发酵用贮存瓶进行生防细菌菌剂发酵的方法，基于权利要求1-5任意一项所述的生防细菌菌剂发酵用贮存瓶，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在上瓶体的下瓶口和支撑体之间放两张直径需大于下瓶口的内径的锡箔纸，并将下瓶口和支撑体对接套好，使瓶盖与上瓶体的上瓶口螺纹连接，旋紧瓶盖，直到第一环状外凸与套筒顶部接触，并确保瓶盖内的圆柱体的尖端接近上瓶体底部圆形孔洞内的双层锡箔纸；另外，将培养液放入下瓶体中，再将下瓶体与上瓶体的下瓶口螺纹对接，用橡皮套环将上瓶体的第三环状外凸和下瓶体的第四环状外凸外包裹，密封后备用，完成培养液的存放；然后将装有培养液的贮存瓶置于121℃条件下高压灭菌30～35min；
(2)在实验室无菌条件下，打开上瓶体上瓶口瓶盖，用无菌不锈钢汤匙将接种菌粉放在锡箔纸上，用瓶盖重新密封后，用玻璃胶点状连接套筒和第二环状外凸；
(3)当需进行菌剂发酵时，撕去上瓶体上瓶口的可撕裂的套筒，旋转瓶盖，使瓶盖沿螺纹下移，并使圆柱体底端位于支撑体内，直到第一环状外凸与第二环状外凸接触，瓶盖内的塑料圆柱体的尖端刺破上瓶体内的锡箔纸后，左右振荡3～5下，使上瓶体内的接种菌粉进入下瓶体的培养液中，在23℃～28℃的温度条件下将贮存瓶放于阴暗处3～7天，每天摇瓶1～2次，每次5～10s，持续3天，以进行生防细菌菌剂发酵，扩繁菌体数量。
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