CN107519211B - 一种金蝉花提取物及其在制备降血脂药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中医药技术领域，涉及一种金蝉花提取物的制备方法及该提取物在制备降血脂药物中的应用。通过小鼠实验发现，本发明制备的金蝉花提取物能够有效降低高血脂小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL‑C)水平，可见金蝉花提取物具有较好的降脂作用。

Description

一种金蝉花提取物及其在制备降血脂药物中的应用
技术领域
本发明公开了一种金蝉花提取物及其在制备降血脂药物中的应用，属于中医药技术领域。
背景技术
血脂是血浆中的中性脂肪（甘油三酯和胆固醇）和类脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称。高血脂是指血浆中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白中的一种或多种水平升高。医学研究表明，高血脂与心血管疾病密切相关，是引发动脉粥样硬化的主要原因之一。
目前，随着经济的快速发展，人们的饮食结构已发生很大变化，动物脂肪等高热量食物摄取率增高，再加上生活节奏加快所致的心理因素的变化，高血脂人群日益增多，与此相应，心脑血管疾病的发病率升高，严重危害人类健康。
金蝉花为麦角菌科真菌大蝉草及其寄主山蝉若虫形成的复合体，是与冬虫夏草相类似的虫草。研究表明，金蝉花含有多糖、腺苷、虫草酸、氨基酸、多球壳菌素、麦角甾醇等多种化学成分，具有提高免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老等多重作用。但尚未见金蝉花具有降血脂作用的相关报道。本发明以金蝉花提取物作为药效物质，通过小鼠实验，研究其在制备降血脂药物中的应用前景。
发明内容
本发明的目的是：提供一种金蝉花提取物的制备方法及其在制备降血脂药物中的应用。
本发明是通过下述的技术方案来实现的：
一种金蝉花提取物的制备方法，包括如下步骤：
第1步，取晒干的金蝉花，用60%乙醇作为溶剂，在50℃下温浸提取，提取4次，每次提取时间为4小时，每次溶剂用量为金蝉花重量的12倍；过滤，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得金蝉花提取物A；
第2步，将第1步得到的金蝉花提取物A加12倍量水溶解，过滤，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法(HSCCC)，以体积比3:2:3:1的环己烷-乙酸乙酯-正丁醇-水为溶剂，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩，干燥，即得金蝉花提取物B；
第3步，将第2步得到的药液A，通过X-5大孔吸附树脂柱，用水洗脱，再用浓度70%的乙醇溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即得金蝉花提取物C；
第4步，将上述金蝉花提取物B与金蝉花提取物C混匀，即得金蝉花提取物。
由上述方法制备得到的金蝉花提取物。
上述金蝉花提取物在制备降血脂药物中的应用。
上述金蝉花提取物在制备降低高血脂哺乳动物血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平药物中的应用。
本发明的有益效果在于：本发明首次公开了金蝉花提取物可用于制备降血脂药物。实验证明，采用本发明制备的金蝉花提取物能够有效降低高血脂哺乳动物血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平，具有较好降血脂作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
一、 金蝉花提取物的制备
第1步，取晒干的金蝉花，用60%乙醇作为溶剂，在50℃下温浸提取，提取4次，每次提取时间为4小时，每次溶剂用量为金蝉花重量的12倍；过滤，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得金蝉花提取物A；
第2步，将第1步得到的金蝉花提取物A加12倍量水溶解，过滤，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法(HSCCC)，以体积比3:2:3:1的环己烷-乙酸乙酯-正丁醇-水为溶剂，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩，干燥，即得金蝉花提取物B；
第3步，将第2步得到的药液A，通过X-5大孔吸附树脂柱，用水洗脱，再用浓度70%的乙醇溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即得金蝉花提取物C；
第4步，将上述金蝉花提取物B与金蝉花提取物C混匀，即得金蝉花提取物。
二、金蝉花提取物应用于制备降血脂药物的实验方法和结果
用高胆固醇和脂类饲料喂养动物并辅以脂肪乳灌胃可快速稳定的形成脂代谢紊乱动物模型，给予动物本发明制备的金蝉花提取物，以检测提取物对高血脂的影响。
实验材料
药品：本发明制备的金蝉花提取物。
实验动物
种系：SD大鼠。
级别：SPF级。
性别和数量：70只，雌雄各半。
动物体重：50～80g。
饲养条件：为便于观察动物每日饮水量和进食量，实验动物单笼饲养，室温20～25℃，相对湿度为40～70%，照明时间12小时。定时定量添加饲料，食用鼠专用颗粒饲料，饮自来水，每日更换垫料。
其他试剂和药品
阳性药：辛伐他汀片。
高脂饲料：10%蛋黄粉、10%猪油、1%胆固醇、0.2%胆盐和78.8%基础饲料。
脂肪乳剂：10%胆固醇、20%猪油、2%胆酸钠、1%甲基硫氧嘧啶。
实验仪器：全自动生化分析仪
实验方法
脂肪乳剂的配制
参照文献，取猪油20g置于500ml烧杯中，在电炉上加热融化，加入10g胆固醇溶化，再加入2g胆酸钠和1g甲基硫氧嘧啶，充分搅匀；然后放入20ml吐温80、20ml丙二醇及30ml蒸馏水，不断搅拌。待甲基硫氧嘧啶溶解后，冷却至室温，再加蒸馏水至100ml，并充分混匀，即成10％胆固醇、20％猪油、2％胆酸钠、1％甲基硫氧嘧啶的脂肪乳剂。冰箱保存，使用时先于37℃水浴中融化。
实验分组及造模方法
SD大鼠70只，适应饲养一周后称重，随机选择10只大鼠为正常组，实验环境下，给予正常大鼠饲料饲喂。其余大鼠均饲喂高脂饲料，同时每天按1ml/100g剂量灌胃脂肪乳剂，连续15天后禁食16小时，取血，测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平，根据血清总胆固醇(TC)水平选择造模成功的实验动物50只，随机分成5组：模型组、阳性对照组、高剂量给药组、中剂量给药组、低剂量给药组，每组各10只。在继续给予高脂饲料和脂肪乳剂的同时，分别给予不同受试物（灌胃给药）。于给药开始后第15天和第30天禁食16小时后，采血，测血清TC、TG、HDL-C水平。
观察指标及检测方法
一般情况观察：
每天上午观察记录一次动物的一般表现、行为、中毒表现和死亡情况。根据每周测定的体重及食物摄入量，调整各组动物给药量，以保证各组动物受试物需要量。出现异常时，每天至少观察两次。对严重中毒的动物密切观察记录。
生化指标检测：
血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平，通过全自动生化分析仪检测。
数据统计：
各组数据均采用SPSS方差分析进行统计分析，方差不齐者采用数据转换，如转换后仍不齐则采用非参数统计。
血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测结果见下表。
对高血脂动物血清总胆固醇(TC)的影响（单位 mmol/L）
Figure DEST_PATH_IMAGE002
*与模型组比较，P<0.05，**与模型组比较，P<0.01；
对高血脂动物血清甘油三酯(TG)的影响（单位 mmol/L）
Figure DEST_PATH_IMAGE004
*与模型组比较，P<0.05，**与模型组比较，P<0.01；
对高血脂动物血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的影响（单位 mmol/L）
Figure DEST_PATH_IMAGE006
*与模型组比较，P<0.05，**与模型组比较，P<0.01；
从上表中可以看出，本发明制备的金蝉花提取物能够有效降低高血脂哺乳动物的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，具有较好降血脂效果。

Claims (1)

1.金蝉花提取物在制备降低高血脂哺乳动物血清总胆固醇(TC)水平药物中的应用，所述的金蝉花提取物通过如下方法制备得到：第1步，取晒干的金蝉花，用60%乙醇作为溶剂，在50℃下温浸提取，提取4次，每次提取时间为4小时，每次溶剂用量为金蝉花重量的12倍；过滤，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得金蝉花提取物A；第2步，将第1步得到的金蝉花提取物A加12倍量水溶解，过滤，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以体积比3:2:3:1的环己烷-乙酸乙酯-正丁醇-水为溶剂，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩，干燥，即得金蝉花提取物B；第3步，将第2步得到的药液A，通过X-5大孔吸附树脂柱，用水洗脱，再用浓度70%的乙醇溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即得金蝉花提取物C；第4步，将上述金蝉花提取物B与金蝉花提取物C混匀，即得金蝉花提取物。
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