CN107427030A - 包含火山灰的家畜饲料用添加剂组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包含火山灰的家畜饲料添加用组合物，更详细地提供包含火山灰作为有效成分的家畜饲料添加用组合物的新用途，能够增强现有的抗生素的抗菌效果，能够强化免疫功能，去除恶臭等非常适合作为家畜的饲料使用。

Description

包含火山灰的家畜饲料用添加剂组合物及其用途

技术领域

本发明涉及包含火山灰(Pozzolan)作为有效成分的家畜饲料用添加剂组合物及其用途。

背景技术

有机畜牧产是指在畜牧产品的生产过程中对未经过受精卵移植或基因操作的家畜不使用化肥和农药，并且将不经过基因操作的饲料为基准，除此之外，还指不是集约化的工厂型饲养，而是供给未使用抗生物质、生长激素、动物副产品饲料、动物药品等人为合成添加物的、在兼有运动、休息空间及放牧草地的环境下，以自然方法控制粪尿处理和环境的条件下，表示有饲养、加工、流通及评价的家畜的饲养体系和其畜牧产品。

关于有机畜牧产的认证，既包括有机畜牧产品的生产，又包括作为最终生产材料的畜牧产食品的生产及流通过程。在有机畜牧产执行中最难的环节在于，未使用抗生物质的情况下饲养时，应对疾病的方案及预防。为此，投入具有免疫力和抗菌/抗病毒能力的饲料添加剂是有必要的。

2010年，世界有机食品市场规模为约59341百万美元，与前年相比，成长12.4％，预计2015年形成与2010相比，增加约48.4％的88069.3百万美元规模的市场。在欧洲(德国、英国)、北美、澳大利亚等中主导全世界有机食品市场，尤其，美国超越欧洲形成世界规模最大的市场，以2009年为基准占有世界有机食品总收益的49％。有机食品的需要集中在于欧洲、美洲等西方发达国家。尤其，因环保有机畜牧产的兴起，欧盟(EU)从2005年起规定利用于有机畜牧产品生产的饲料需要使用100％的有机饲料，再也不许可抗生素(CommissionRegulation EC 2277,2003)，并且从2006年1月起施行(European Union Commission,2005)。在德国仅对得到有机认证的产品可使用意味着有机的生物(Bio)词语，并且只有水、盐、酵母等几种公认的添加物不被认定为农产品，因此不能使用有机的词语。在德国为了得到有机认证，需要原料的95％以上为通过有机农业制备，并且需要禁止使用基因重组原料。

为此，各个发达国家制定有效的有机畜牧产实施对策，并且为了实现而作出更大的努力。但是，以美国或欧盟为中心，对有机畜牧产的消费者团体和非政府组织(NGO)的需求非常大，相反地，有机畜牧产的实施规模还小，并落后于食品的国际标准化。

在韩国，以国际食品法典委员会(CODEX)的有机畜牧产规范为基准，适用适合于韩国实情的韩国有机畜牧产标准制定，通过开发对韩国的实情最经济的有机畜牧产的规模和饲养体系，来对其积极推进、实施。

在韩国的情况下，有机畜牧产的实施规模非常甚微，从而存在对食品的国际规格化不足的部分。因此，韩国也以国际食品法典委员会的有机畜牧产规则为基本，2001年将适合于韩国实情的韩国有机畜牧产规定指定为环保农业育成法的实施规则，并且到了通过开发适合于韩国实情的有机畜牧产的饲养体系，来积极推进实施的时间点。

在韩国国内有机畜牧产的认证标准中，作为反刍家畜供给85％以上的转换期(韩牛喂养后12个月、猪出生后6个月以上)有机饲料，作为反刍家畜供给80％以上的转换期(韩牛喂养后12个月、猪出生后6个月以上)有机饲料，作为饲料添加剂仅使用农林部告示及国际食品法典委员会中规定的许可物质，需要不使用抗生素或生长促进剂。根据农林部告示第2004-72号，从2007年12月起限制为18种抗球虫药9种、生长促进剂9种，2012年作为与家畜相关的生长促进剂全面禁止抗生素的使用。

尤其，对人及家畜误用滥用抗生素，在生物体内出现了选择性地对抗生素呈现耐性的超级细菌(super bacteria)。在环境下抗生素耐性基因(antibiotic resistancegenes)的水平移动(Shakibaie et al.,2009)、在鱼(Matyar et al.,2004))和畜牧产食品(Toroglu et al.,2009；Jones et al.,2002)中，在耐性菌及在医院住院的患者(Cosgroveet al.,2005)中出现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA，Methicillin-resistantStaphylococcus aureus)、抗万古霉素肠球菌(VRE，Vancomycin-resistantenterococcus)成为严峻的社会问题(Toroglu et al.,2005；Perl,1999)。当前，为了在工厂集约型畜牧产业中减少或者不使用饲料用抗生素的情况下可发生的受害和损失，并且持续地提高家畜的生产率，亟待需要开发能够替代抗生素的抗生素替代物质(Dibner andRichards、2005)。正广泛地进行利用天然物开发抗菌生长促进物质，上述天然物没有出现与人类和动物相关的抗生素耐性菌株的担忧，并可代替与家畜相关的抗生素。

目前，在全世界的范围内，从畜牧产品的安全性考虑，给家畜使用抗生素及抗菌剂将越来越受限制，尤其，今后配合饲料中添加的抗生素，其使用上将面临更多限制，因残留检测的强化畜牧产农也回避使用休药期长的抗生素。并且，因抗生素的滥用呈现抗生素耐性病原菌，也面临着急需开发替代抗菌物质的问题。

因此，需要开发可排除抗生素，并预防或治疗家畜疾病、具有免疫增强、抗炎、生长促进及抗菌/抗病毒效果的新的原材料。

发明内容

技术问题

本发明人将可替代抗生素，并且提供饲料用抗菌组合物作为发明目的，更详细地，本发明目的在于提供一种用于家畜饲料的新原材料抗菌组合物，用于家畜饲料，并可抑制有害菌，且提供免疫功能，改善饲料转化率，具有增重效果。并且，本发明的目的还在于提供一种饲料添加剂、包含其的家畜饲料及新的免疫增强方法。

解决问题的方案

根据本发明的一实施方式，提供包含火山灰作为有效成分的家畜饲料用抗菌组合物。上述火山灰可以为硅石(silica)、铝、氧化铝(Al₂O₃)、铁,(Fe)、三氧化二铁(Fe₂O₃)、锗(Ge)中的一种以上的组合，优选地，火山灰为硅石的含量为70重量％以上的组合物。上述火山灰为，硅石中硅和二氧化硅(SiO₂)的含量比为1:2至1:3的范围的组合物。并且，在上述火山灰中硅石和铝氧化物的含量为80重量％以上。优选地，在上述火山灰中是粉末相(powderphase)。优选地，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合上述火山灰。上述家畜可以为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫及兔子中的任意一种。

根据本发明的另一实施方式，提供含有上述抗菌组合物作为有效成分的家畜饲料添加剂。优选地，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合火山灰，上述家畜可以为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫及兔子中的一种。

根据本发明的另一实施方式，提供包含上述家畜饲料添加剂的家畜饲料。

根据本发明的另一实施方式，提供将上述抗菌组合物或上述家畜饲料添加剂给药到家畜的免疫力增强方法。

发明的效果

根据本发明，作为家畜饲料用的火山灰具有增强免疫功能、抗菌/抗病毒效果，并且同时是作为去除恶臭等非常适合用于有机家畜的饲料原材料。提高营养素的吸收及利用率，并且具有增重效果，最终可改善肉的品质，促进生长。可适用于多种家畜种类的饲料，并且可替代具有多种副作用的抗生素，因此，期待满足韩国以及世界各国的严格要求。

附图说明

图1至图4为示出作为菌株的鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、大肠杆菌(Escherichia coli)、丁酸梭菌(Clostridium butyricum)及干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)的各个生长抑制或促进效果。

图5为比较基于培养基的上述菌株的生长程度的图表。表示对照组(培养基1)、SP提取液(培养基4)、SP3％(培养基2)、SP5％(培养基3)。

图6及图7为分别示出针对于作为菌株的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)(金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus))及抗万古霉素肠球菌(VRE)(肠球菌(Enterococcus))的生长抑制的照片。

图8为对上述菌株(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及抗万古霉素肠球菌)的生长程度进行比较的图表。表示对照组(培养基1)、SP提取液(培养基4)、SP3％(培养基2)及SP5％(培养基3)。

图9为对实施例3的肉鸡的35天上市体重进行比较的图表。

图10为对实施例3的肉鸡的按生长期间的体重增加率进行比较的图表。

图11为对实施例3的肉鸡的饲料效率进行比较的图表。表示对照组(T1)、SP0.3％(T2)、SP0.5％(T3)及SP0.7％(T4)。

图12为对实施例3的肉鸡的屠宰率进行比较的图表。

图13为对实施例3的肉鸡的第三周器官重量进行比较的图表。

图14为对实施例3的肉鸡的第五周器官重量进行比较的图表。

图15为对实施例3的肉鸡的第三周免疫器官重量进行比较的图表。

图16为对实施例3的肉鸡的第五周免疫器官重量进行比较的图表。

图17为对实施例3的肉鸡的血液免疫球蛋白G(IgG)含量进行比较的图表。

图18为对实施例3的肉鸡的粪微生物的浓度进行比较的图表。

图19及图20为对实施例3的肉鸡的盲肠有机酸的含量进行比较的图表。表示对照组(T1)、SP0.3％(T2)、SP0.5％(T3)及SP0.7％(T4)。

图21为对实施例3的肉鸡的脂肪酸的含量进行比较的图表。

图22为对实施例3的肉鸡的粪的氨含量进行比较的图表。

图23为对实施例3的肉鸡的粪的硫化氢含量进行比较的图表。

图24为对实施例4的仔猪的最终体重进行比较的图表。表示对照组(T1)、抗生素0.2％(T2)、0.3％的火山灰(T3)、0.5％的火山灰(T4)及0.7％的火山灰(T5)。

图25为对实施例4的仔猪的每日增重量进行比较的图表。

图26为对实施例4的仔猪的饲料摄取量进行比较的图表。

图27为对实施例4的仔猪的饲料转化率进行比较的图表。

图28为对实施例4的仔猪的血液分析结果进行比较的图表。

图29为对实施例4的仔猪的微生物浓度进行比较的图表。

图30及图31为对实施例4的仔猪的盲肠有机酸的含量进行比较的图表。表示对照组(T1)、抗生素0.2％(T2)、SP0.3％(T3)、SP0.5％(T4)及SP0.7％(T5)。

具体实施方式

本发明提供包含火山灰作为有效成分的家畜饲料用抗菌组合物。

众所周知，火山灰(pozzolan)矿物由火山灰形成，属于蜡石的一种，是白垩纪时代生成，在主要产地的意大利附近的泊舟里的村庄被发现而由来，经研究学者阐明公元前2世纪时，包括在罗马时代已经有名的体育馆竞技场，在pandeion等建筑物上替代水泥而使用火山灰至今，能够无裂痕且无腐蚀地长时间保存原有圆形。作为除此之外的分布地区如美国的Pamaunti地区、马来西亚及印度等，仅在极其有限的地区和国家生产，除了意大利和韩国产之外，均没有发现锗成分或放射远红外线的效果，在亚洲国家中，即使是在广阔的中国平原地区也根本不存在相同矿脉。

现有的火山灰被添加到制备混凝土的基本材料中，对混凝土赋予特殊性能或用于改性的混合材料，作为用于废弃物的固体化的无机污泥大致具有水泥反应性，从而适合于适当的含水率的无机污泥(含有重金属类)的固体化。并且和水泥亲和性好的火山灰(pozzolan)可用作污泥含水率调节和代替水泥的固化辅助剂，因具有价格低廉的优点等，从而最广泛使用。

火山灰选自由火山岩、凝灰岩、硅酸白土、硅藻土以及千枚岩组成的组中的一种以上，优选是粉末相。并且，主成分可以为硅石-氧化铝或二氧化硅，优选地，火山灰为选自二氧化硅、铝、氧化铝(Al₂O₃)、铁(Fe)、三氧化二铁(Fe₂O₃)、锗(Ge)中一种以上组分的组合物。并且，优选地，火山灰中硅石的含量为70重量％以上。上述火山灰为硅石中的硅和二氧化硅(SiO₂)的含量比为1:2至1:3的范围的组合物。优选地，在上述火山灰中，硅石和铝氧化物的含量为80重量％以上。优选地，在上述火山灰是粉末相(powder phase)。

本发明的“含有(comprising)”的术语并不限定于包含，作为一例并不排除其他添加剂、成分、指数或步骤。

“抗菌(antimicrobial)”是指，在哪些浓度下，对于微生物的生长或生存起到减少、防止、抑制或去除的能力。抗菌组合物的含义在于，可以是称作抗微生物剂的抗生素相同，也可以与抗菌剂、杀菌剂、防腐剂、保鲜剂或除菌剂相同，优选地，是指可阻止或抑制选自革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌(酵母及酶)的一种以上的微生物的发育和生活功能的物质，及具有抗细菌及抗真菌效果的物质。

上述火山灰能够添加于饲料中，且对其含量没有特殊限制，优选地，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合。更优选的是0.3～0.7重量％，尤其优选的是0.5重量％。

上述家畜可以为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫或兔子中的一种，优选地，可以为鸡或猪，但并不限定于此。

根据本发明的另一实施方式，提供含有上述抗菌组合物作为有效成分的家畜饲料添加剂。上述家畜饲料添加剂可直接使用，或者，还可添加到作为家畜饲料已被认可的如谷类及其副产品等的公知载体、稳定剂等中使用，可根据需要添加有机酸，如柠檬酸、富马酸、己二酸、乳酸、苹果酸等或磷酸盐如磷酸钠、磷酸钾、酸性焦磷酸盐、聚磷酸盐(聚合磷酸盐)等；天然抗氧化剂，如多酚、儿茶素、α-生育酚、迷迭香提取物、维生素C、绿茶提取物、甘草提取物、壳聚糖、丹宁酸、植酸等；抗生物质、抗菌剂及其他添加剂等，并且作为其形状可以为粉体、颗粒、丸、悬浮液等适当的状态，在供给上述饲料添加剂的情况下，可针对于家畜单独供给或混合于饲料而供给。

优选地，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合上述火山灰。上述家畜可以为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫及兔子中的一种。

根据本发明的另一实施方式，提供包含上述家畜饲料添加剂的家畜饲料。在本发明中，在制备家畜饲料时，作为添加剂可以混合以下成分：谷类如研磨或粉碎的小麦、燕麦、大麦、玉米及大米；由油菜籽、大豆及葵花籽的植物性蛋白质供给源；动物性蛋白质供给源；糖蜜；以及奶制品，例如由多种牛奶粉末及乳浆粉末构成的干燥成分。将所有干燥成分进行混合之后，可添加液体成分及加热后成为液体的成分。液体成分可选自通过加热液化的脂质例如脂肪、如植物性脂肪和/或羧酸如脂肪酸等构成。充分混合后，根据研磨度获取粉或粒子状浓度。为了防止在储存期间被分离，优选地，只能在动物饲料中添加水，后续利用现有的颗粒化、增量或挤压工序处理上述饲料。可通过干燥去除任意追加的水。根据需要，将所生成的粒子状动物饲料能够粉碎成更小的粒子大小。

根据本发明的另一实施方式，提供家畜的免疫力增强方法，使用上述抗菌组合物或上述家畜饲料添加剂。优选地，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合火山灰，更优选的是0.3～0.7重量％，尤其优选的是0.5重量％。上述家畜可以为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫或兔子，优选的是猪，但并不限定于此。

以下，通过发明的具体实施例，对发明的作用及效果进行更详细的说明。这种实施例只不过是作为发明的示例而提出，并不由此确定本发明的发明要求保护范围。

实施例1.火山灰的制备及成分确认

使用晨星株式会社提供的火山灰，并委托韩国科学技术研究院(KIST)的分析机构进行成分分析，最终如以下表1及表2确认Si及Ge等的成分。

表1

表2

为了针对于上述火山灰进行多种家畜的抗菌及生长效果试验，如以下实施例混合原料培养基或在饲料中混合多种含量的火山灰或火山灰提取液来制备了试样。

实施例2

为了进行与多种有益菌或有害菌相关的生长促进或抑制效果实验，通过如下的实验设计来测定的多种菌株的生长程度。

2-1.实验菌株

作为肠内菌株，从韩国食品研究院(KFRI)购得4个普通菌株，作为抗生素耐性菌株从首尔女子大学耐性菌株银行(KNRRC)购得2个耐性菌株。以下表3为自在菌株的学名及菌株保藏号码。

表3

2-2.培养方法及培养基

在作为对照组的蒸馏水培养基1中不添加火山灰，在培养基原料加入蒸馏水之后进行灭菌，并稀释为10^-7的菌株之后接种100uL。在作为实验组的蒸馏水培养基2及蒸馏水培养基3中，在培养基原料分别混合3.0％及5.0％的蒸馏水及火山灰，并进行灭菌后分别稀释为10^-7的菌株之后接种100uL。在作为另一实验组使用火山灰提取液的培养基4中，通过混合100g的火山灰和500mL的蒸馏水，来在115℃的温度下，进行9小时的过夜静置之后，过滤于2张过滤纸(No.1)之后，对过滤的培养基进行灭菌，并稀释为10^-6的菌株之后接种100uL。对照组和实验组的培养基如以下表4。

表4

区分	培养基的组成	分类
			培养基1	培养基原料+蒸馏水	对照组
培养基2	培养基原料+蒸馏水+3.0％的火山灰	实验组
			培养基3	培养基原料+蒸馏水+5.0％的火山灰	实验组
培养基4	培养基原料+蒸馏水+火山灰提取液	实验组

之后，在37℃的温度下培养24小时后测定了菌数。但是，作为干酪乳杆菌在37℃的温度下培养了48小时。以下，根据菌株的特性及菌株所使用的培养基进行整理后得表5。

表5

2-3.菌株的培养结果

利用上述培养方法按菌株进行培养，最终生长结果如以下表6。1号至4号的菌株单位为Log10^-7cfu，5号至6号的菌株单位为Log10^-6cfu。CFU(Colony Forming Unit)作为微生物集落形成单位，是以适当的条件使用肉眼难以观察的微生物生长，从而将每一个微生物个体培养到可用肉眼进行观察的程度的大小的集落(colony＝块、菌落)的单位。

表6

应当留意，各列菌株处理组结果的a、b、c、d在95％的信赖水准(p＜0.05)

在图1至图4，及图6至图7中分别示出基于各个菌株的培养基的生长抑制或促进的照片。在图5及图8中显示进行菌株之间的比较的图表。如在其结果可知，确认如下效果：在添加火山灰或添加火山灰提取液的培养基中促进有益菌(干酪乳杆菌)的生长，相反地，显著地抑制有害菌(鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、抗万古霉素肠球菌)的生长。

实施例3

为了进行与肉鸡相关的抗菌生长促进效果实验，选定肉鸡(broiler)，并通过如下实验设计来测定了多种效果。

3-1.实验动物及实验设计

对进行罗斯系统(Ross 308)的性鉴别的孵化1天龄的400只雄性肉鸡以4处理组×4重复(每重复25只)进行了完全随机配置。以T1(对照组)、T2(0.3％的火山灰)、T3(0.5％的火山灰)及T4(0.7％的火山灰)区分实验处理组。

3-2.实验饲料及饲养管理

作为实验饲料，以玉米、大豆粕为主进行配合，从而可充足或超过在美国的美国科学院全国研究理事会(NRC)饲养标准(1994)中提出的肉鸡的营养素需要量，并且作为基于火山灰的添加水平的配合饲料制备量通过减少玉米的量来将粗蛋白质和代谢能量含量调解为相同的水平。

3-3.饲养成绩及屠宰特性及屠宰

基于肉鸡的生长的按各步骤的生长能力，即，分别测定饲料摄取量、增重量及饲料效率，其结果如以下表7。以规定时间内饲料摄取量除以增重量的值表示饲料效率。以第三十五天上市时，相对于生体重的屠宰重(去除羽毛、血液、头、腿及内脏的重量)的比率计算屠宰率(Dressing percent)。其结果如以下表8。在第三周、第五周分别测定肝、胃脏及免疫器官(胸腺、脾脏、F囊)的重量，示出相对于体重的比率，其结果如表9。表10是对通过血液分析的脂质、血糖、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)等进行分析的。

表7肉鸡的饲养成绩

*饲料效率：期间中增重量/饲料摄取量。平均±标准偏差。a、b、c、d(p＜0.05)

表8肉鸡的屠宰特性

平均±标准偏差a、b、c(p＜0.05)

表9肉鸡的器官重量(单位：g/体重100g)

平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

表10肉鸡的血液脂质、血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶(单位：mg/100ml)

平均±标准偏差。a、b、c、d(p＜0.05)

图9作为根据火山灰含量对35天上市体重进行比较的图表，在作为T3的0.5％含量的火山灰的情况下显示最大的增加率。图10为对按生长期间的体重增加率进行比较的图表，在按各个时期0.5％含量的火山灰的情况下增加率最高。图11为对饲料效率进行比较的图表，在0.3％及0.7％的火山灰的情况下，显示类似，在作为T3的0.5％含量的火山灰的情况下呈现若干增加的数值。图12为对饲料效率进行比较的图表，还是在T3中呈现若干的增加。图13为对第三周的器官重量的增加率进行比较的图表，在T3中增加最大，其次以T2及T4的顺序呈现高的增加率。图14为对第五周的器官重量的增加率进行比较的图表，还是在T3中呈现若干增加，其他T2及T3与作为对照组的T1类似。图15示出第三周免疫器官的重量，在T3中呈现显著高的增加，来间接地示出免疫期间被强化。图16示出第五周免疫器官的重量，在T3中示出显著高的增加。

3-4.血液免疫物质

作为血液免疫物质分析，通过酶联免疫吸附测定(ELISA，enzyme-linkedimmunosorbent assay)(Bethyl laboratories.,Inc.,USA)进行测定(Constantinoiu等，2007)。以表11示出其结果。

表11肉鸡的血液免疫物质(单位：μg/ml)

平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

图17作为对作为血液免疫物质的免疫球蛋白G(IgG)的含量进行比较的图表，在T3中示出最大的增加，以T4及T2的顺序示出增加形态，从而确认了火山灰可使免疫物质分泌量增加。

3-5.粪微生物

通过采集实验结束3天之前的粪来与磷酸缓冲食盐水(popozzolan horusbuffered saline)进行混合来稀释10倍(w/v)。将以10²-10⁸浓度稀释的试样接种于灭菌的平板培养基。在37℃的温度下，进行48小时的静置培养后，利用微生物计数器调查菌落个数(colony)，以每g的菌数(log₁₀CFU，粪的集落形成单位/g(colony forming unit/g offeces))取常用对数而提出，其结果如表12。

表12肉鸡的粪微生物(单位：cfu log₁₀/粪g)

*平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

图18作为对微生物的变化形态进行比较的图表，作为有益菌，在乳酸菌(Lactobacillus)的情况下，在T3中示出出最高的浓度，在作为有害菌的大肠杆菌(E.Coli)、沙门氏菌(Salmonella)等的情况下示出高的抑制效果。

3-6.盲肠有机酸

从宰杀的鸡中提取盲肠，来通过气相色谱系统(Gas chromatographic system)(型号(model)GC-15A，日本京都岛津公司(Shimadzu Corp.,Kyoto,Japan))系统测定乙酸盐(acetate)、丙酸盐(propionate)、丁酸盐(butyrate)、异丁酸盐(isobutyrate)、戊酸盐(valerate)及异戊酸盐(isovalerate)的浓度，并在表13中显示其结果。

表13肉鸡的盲肠有机酸(单位：μmol/盲肠内容物)

*平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

图19及图20为对盲肠有机酸的含量进行比较的图表，在一部分有机酸的情况下，虽然含量降低了，但是对整体的短链脂肪酸(SCFA，Sohrt chain Fatty acid)进行观察在T3中呈现最大的增加率，在含有火山灰的处理组中呈现增加的趋势。

3-7.鸡肉脂肪酸

从肉鸡的腿部提取脂质，来注入于气相色谱系统(型号GC-15A，日本京都岛津公司)而分析脂肪酸，并在表14表示其结果。

表14鸡肉的脂肪酸组成(单位：总脂肪酸的％)

图21为对鸡肉脂肪酸进行比较的图表，在火山灰的处理组中饱和脂肪酸(saturated fatty acid：SFA)减少，在火山灰处理组中不饱和脂肪酸(unsaturated fattyacid：UFA)示出增加的趋势。并且，在T3中不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸(UFA/SFA)的数值显示最大，整体上在处理火山灰的组中示出大的增加数值。最终，确认如下：因火山灰导致不饱和脂肪酸的含量增加，从而可增加肉鸡的营养学功效，并可改善品质。

3-8.鸡粪恶臭

利用气体测定仪(气体指示器(Gas Indicator)AP-20，日本Axis Sensitive公司)测定氨和硫化氢浓度。按照制造公司的操作指南使气体吸入后，记录表示的数值来如以下表15提出。

表15鸡粪恶臭(单位：ppm)

*平均±标准偏差。a、b、c、d(p＜0.05)

图22及图23作为对氨及硫化氢的含量进行比较的图表，在含有火山灰的处理组中示出整体上减少的倾向，尤其，在T4示出最大的减少率。

实施例4

为了进项与断奶仔猪相关的抗菌生长促进效果实验，选定杂交种断奶仔猪，并如下通过实验设计来测定了多种效果。

4-1.实验动物及实验设计

在标准环境条件下，利用300只三元杂交种(兰德瑞斯猪(Landrace)*Yorkshire)×杜洛克猪(Duroc))断奶仔猪(平均体重121.20kg)进行5处理3重复、以每次重复每个猪圈20只进行完全随机配置。作为实验处理组区分为T1(无添加组)、T2(抗生素洁霉素0.2％))、T3(0.3％的火山灰)、T4(0.5％的火山灰)及T5(0.7％的火山灰)。

4-2.实验饲料及饲养管理

作为实验饲料，以玉米、大豆粕为主进行配合，从而可充足或超过在美国的美国科学院全国研究理事会饲养标准(1994)中提出的肉猪的营养素需要量，并且作为基于火山灰的添加的配合饲料制备量通过减少玉米的量来进行调节。将粗蛋白质和代谢能量含量调解为相同的水平。

4-3.生长能力及腹泻频度

为了调查断奶仔猪的生长能力，即，日平均饲料摄取量(ADFI：average dailyfeed intake)、日平均增重量(ADWG：average daily weight gain)及饲料转化率(FCR：feed conversion ratio)，分别对每个猪圈测定初始及第三十天的体重和饲料摄取量，并调查了断奶仔猪的腹泻频度。以实验期间中的增重量除以饲料摄取量的值表示饲料转化率。将各个猪圈的全部仔猪为对象以每天2次的方式掌握对具有肛门周围的水泻痕迹的个体数。以9分法测定腹泻频度，并在全部个体的肛门周围示出水泻痕迹时的腹泻频度标记为9分至0分。结果示于表16中。表17为对通过血液分析的脂质、血糖等进行分析。

表16断奶仔猪的饲养成绩(单位：g)

*饲料转化率：期间中的增重量/饲料摄取量。平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

图24至图27作为分别对最终体重、日增重量、日摄取量及饲料转化率进行比较的图表，在含有火山灰的处理组中大致示出高的增加率，尤其，在含有0.5％的火山灰的组中示出最高的数值。

表17断奶仔猪的血液脂质、血糖及免疫物质(单位：mg/dL)

*平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

图28作为对血液分析结果脂质及血糖等的数值进行比较的图表，在含有火山灰的处理组中示出大致增加的形态。这是与处理抗生素的组相比，示出高的数值，来例证代替效果。

4-4.血液免疫物质

作为血液免疫物质分析，通过酶联免疫吸附测定((Bethyl laboratories.、Inc.,USA)进行测定(Constantinoiu等，2007)。其结果如表18。

表18肉鸡的血液免疫物质(单位：ng/ml)

在图28中对免疫物质进行比较的图表中，与在T4的处理组中处理抗生素的T3相比，示出免疫物质的高含量，从而确认即使未使用抗生素，也可增强免疫功能。

4-5.粪微生物

采集实验结束3天前的粪，与磷酸缓冲食盐水(po pozzolan horus bufferedsaline)进行混合来稀释10倍(w/v)。将以10²-10⁸浓度稀释的试样接种于灭菌的平板培养基。在37℃的温度下，进行48小时的静置培养后，利用微生物计数器调查菌落个数，以每g的菌数(log₁₀CFU,粪的集落形成单位/g)取常用对数而提出，其结果如表19。

表19断奶仔猪的粪微生物(单位：cfu log₁₀/猪粪g)

*平均±标准偏差。a、b、c、d(p＜0.05)

图29作为对粪微生物进行比较的图表，作为有益菌，在乳酸菌的情况下，在T3中示出最高的浓度，在作为有害菌的大肠杆菌、沙门氏菌等的情况下，反而示出高于抗生素的抑制效果。

4-6.盲肠有机酸

从宰杀的断奶仔猪提取盲肠，通过气相色谱系统(型号GC-15A，日本京都岛津公司)系统测定乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、异丁酸盐、戊酸盐及异戊酸盐的浓度，其结果如表20。

表20断奶仔猪的盲肠有机酸(单位：μmol/盲肠内容物)

*平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

*平均±标准偏差。a、b、c(p＜0.05)

图30及图31为对有机酸的含量进行比较的图表，在含有0.5％的火山灰的T4组中，与给药抗生素的T2组相比示短链脂肪酸示出高的增加率，在整体上在含有火山灰的处理组中示出增加的倾向。因此，确认了火山灰诱导盲肠的有机酸的增加。

Claims (15)

1.一种家畜用饲料添加剂组合物，其特征在于，包含火山灰作为有效成分。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述火山灰为选自硅石、铝、氧化铝、铁、三氧化二铁、锗中任意一种以上的组合。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述火山灰中硅石的含量为70重量％以上。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述火山灰为，硅石中硅和二氧化硅的含量比为1:2至1:3的范围。

5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，在上述火山灰中硅石和铝氧化物的含量为80重量％以上。

6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述火山灰为粉末相。

7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合上述火山灰。

8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述家畜为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫及兔子中的任意一种。

9.一种家畜饲料添加剂，其特征在于，含有权利要求1所述的组合物作为有效成分。

10.根据权利要求9所述的家畜饲料添加剂，其特征在于，以饲料总重量为基准，混合0.01～0.70重量％的火山灰。

11.根据权利要求9所述的家畜饲料添加剂，其特征在于，上述家畜为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫及兔子中的任意一种。

12.一种家畜饲料，其特征在于，包含权利要求9所述的家畜饲料添加剂。

13.一种家畜的免疫力增强方法，其特征在于，包括将权利要求1所述的组合物或权利要求9所述的家畜饲料添加剂投入到家畜饲料的步骤。

14.根据权利要求13所述的家畜的免疫力增强方法，其特征在于，以饲料总重量为基准，以0.01～0.70重量％的比率混合上述火山灰。

15.根据权利要求13所述的家畜的免疫力增强方法，其特征在于，上述家畜为牛、鸡、猪、马、山羊、鸭、鹅、狗、猫及兔子中的任意一种。