CN107410674B - 一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种功能饲料，尤其涉及一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料及其制备方法，以重量百分比计，所述饲料包含：鱼粉15‑25％、鸡肉粉20‑35％、豆粕16‑22％、面粉8‑15％、鱿鱼浸膏4‑8％、磷酸二氢钙1‑2％、多维预混料1‑2％、多矿预混料1‑2％、鱼油2‑4％、豆油1‑2％、磷脂油1‑2％、玉米蛋白粉2‑7％、皇竹草提取液0.2‑0.5％、桑叶发酵液0.1‑0.5％、丹参发酵液0.1‑0.3％。与普通加州鲈膨化饲料相比，本发明饲料配方能满足加州鲈幼鱼、中鱼、成鱼的基本营养需求，还可有效的增强肝组织血液循环中动静脉血液之间的交换性回流，对因肝脏发白病变及由此引起的肝组织机能衰退具有良好的预防和修复治疗效果。

Description

一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种功能饲料，尤其涉及一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料及其制备方法。
背景技术
加州鲈，也称大口黑鲈(Micropterus salmoides)，分类学上隶属于鲈形目、太阳鱼科、黑鲈属，为典型肉食性淡水鱼类。在养殖周期内，加州鲈的肝脏健康程度与鱼体的健康程度具有密切的内在联系。实践证明，加州鲈肝脏出现病变或持续性生理应激刺激时，症状上常常表现为肝脏表观色泽发白，不良影响方面主要体现在包括饵料系数过高、肥满度过低、体质下降、发病率和死亡率高等指标明显化。
一般情况下，加州鲈肝脏发白主要与病理性因素或持续性生理应激刺激密切相关，初始阶段在组织特征上往往具有共性表现，即肝组织出现渐进性储血机能减弱，当储血机能减弱影响到肝组织血液循环中血流形态时，肝组织肝细胞氧呼吸障碍和合成代谢障碍进一步加剧，从而影响鱼体的生长性能和消化性能。
针对加州鲈养殖周期内频繁出现肝脏发白病变引起肝脏机能衰退的现象，采取常规的抗生素内服只能从预防因肝脏机能衰退可能出现的继发感染问题，并不能从根本上解决问题；而内服维生素、市售质量良莠不齐的保肝产品在修复肝脏机能方面的效果也并不理想，探索安全有效的技术解决方案具有十分重要的推广应用价值。
发明内容
针对上述问题，本发明创新性提出一种以内服干预方式对症修复肝组织的储血机能，通过持续改善肝脏微组织环境达到修复肝脏发白的效果，机理性的修复加州鲈肝脏机能衰退现象的方案。
在第一方面，本发明提供一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，以重量百分比计，所述饲料包含：鱼粉15-25％、鸡肉粉20-35％、豆粕16-22％、面粉8-15％、鱿鱼浸膏4-8％、磷酸二氢钙1-2％、多维预混料1-2％、多矿预混料1-2％、鱼油2-4％、豆油1-2％、磷脂油1-2％、玉米蛋白粉2-7％、皇竹草提取液0.2-0.5％、桑叶发酵液0.1-0.5％、丹参发酵液0.1-0.3％。
本发明功能饲料针对上述发病机理的养殖鱼类特别是加州鲈的肝脏发白具有良好的修复效果。
优选的，一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，以重量百分比计，所述饲料包含：鱼粉20-21％、鸡肉粉23-25％、豆粕20-22％、面粉15％、鱿鱼浸膏5-7％、磷酸二氢钙1-2％、多维预混料1-2％、多矿预混料1-2％、鱼油2-4％、豆油1-2％、磷脂油1-2％、玉米蛋白粉3-6％、皇竹草提取液0.3-0.5％、桑叶发酵液0.3-0.4％、丹参发酵液0.2-0.3％。
在一个优选的实施例中，一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，以重量百分比计，所述饲料包含：鱼粉21％、鸡肉粉25％、豆粕22％、面粉15％、鱿鱼浸膏5％、磷酸二氢钙1％、多维预混料1％、多矿预混料1％、鱼油2％、豆油2％、磷脂油1％、玉米蛋白粉3％、皇竹草提取液0.5％、桑叶发酵液0.3％、丹参发酵液0.2％。
在一个优选的实施例中，一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，以重量百分比计，所述饲料包含：鱼粉20％、鸡肉粉23％、豆粕20％、面粉15％、鱿鱼浸膏7％、磷酸二氢钙1.0％、多维预混料1.0％、多矿预混料1.0％、鱼油2.0％、豆油2.0％、磷脂油1.0％、玉米蛋白粉6％、皇竹草提取液0.3％、桑叶发酵液0.4％、丹参发酵液0.3％。
其中，上述皇竹草提取液为皇竹草的水提取液。
优选的，所述皇竹草提取液通过包含以下步骤的方法制备得到：将皇竹草：水以1：10-20的重量体积比混合，90-95℃加热至沸腾后，在30-45℃温度下加热至原体积的10-15％，过滤，得到的滤液为皇竹草提取液。
在一个优选的实施例中，一种皇竹草提取液，由包含以下步骤的方法制备得到：将皇竹草：水以1：10-15的重量体积比混合，95℃加热至沸腾后，在40℃温度下加热至原体积的10-12％，过滤，得到的滤液为皇竹草提取液。
在一个优选的实施例中，一种皇竹草提取液，由包含以下步骤的方法制备得到：将皇竹草：水以1：10的重量体积比混合，95℃加热至沸腾后，在40℃温度加热至原体积的12％，过滤，得到的滤液为皇竹草提取液。
其中，上述皇竹草提取液中的皇竹草为含水量8％以内的皇竹草。
其中，上述皇竹草提取液的制备中将皇竹草粉碎后再与水混合、提取，例如约80目粉碎。
其中，上述桑叶发酵液为桑叶的乳酸菌发酵液。
优选的，所述桑叶发酵液由包含以下步骤的方法制备得到：将桑叶：水：芽孢液态培养基和乳酸菌混合，37℃密闭培养至OD值为3.5-4.3得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为桑叶发酵液；其中，桑叶：水：芽孢液态培养基的重量体积比为1(重量)：5-10(体积)：1-3(体积)，乳酸菌的加入量为每重量份桑叶加入1.5╳104cfu-5╳104cfu。
其中，上述桑叶、水、芽孢液态培养基和乳酸菌的混合没有加入顺序的限制，例如采用先将桑叶和水混合，再加入芽孢液态培养基混合，最后加入乳酸菌混合。
优选的，所述桑叶发酵液由包含以下步骤的方法制备得到：将桑叶：无水：芽孢液态培养基按重量体积比1：5-10：1-3混合形成混合液，再按每重量份桑叶加入1.5╳104cfu-5.0╳104cfu乳酸菌，37℃密闭培养至OD值为3.5-4.3得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为桑叶发酵液。
在一个优选的实施例中，一种桑叶发酵液，由包含以下步骤的方法制备得到：将桑叶：水：芽孢液态培养基按重量体积比1：5-7：1-2混合形成混合液，再按每重量份桑叶加入2╳104cfu-3╳104cfu乳酸菌，37℃密闭培养至OD值为3.5-4得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为桑叶发酵液。
在一个优选的实施例中，一种桑叶发酵液，由包含以下步骤的方法制备得到：将100重量份的桑叶、600体积份的水和100体积份的乳酸菌液态培养基混合，再按每重量份桑叶加入2.0╳104cfu乳酸菌，37℃恒温密闭培养至OD值为3.5-4.0，将培养物3000rpm离心10分钟去渣，收集到上清即为桑叶发酵液。
其中，所述乳酸菌液态培养基可以为市售的乳酸菌液态培养基，例如进口的Bacillus mediumbase。
其中，所述枯乳酸菌为植物源乳酸菌。
其中，所述桑叶为鲜桑叶，例如含水量≥80％的鲜桑叶，确保桑叶的新鲜度。
进一步的，上述桑叶发酵液中的水优选无菌蒸馏水。
进一步的，上述培养物离心优选在3000rpm离心，例如3000rpm离心10分钟。
其中，上述丹参发酵液为丹参的芽孢杆菌发酵液。
优选的，所述丹参发酵液通过包含以下步骤的方法制备得到：所述丹参发酵产物通过包含以下步骤的方法制备得到：将丹参、水、芽孢杆菌液态培养基和芽孢杆菌混合，37℃密闭培养至OD值3.5-4.8得到培养物物，将培养物离心去渣，收集的上清为丹参发酵液；其中，丹参、水和芽孢杆菌液态培养基的重量体积比为1(重量):4-8(体积):1-3(体积)，芽孢杆菌的加入量为每重量份丹参加入1.5╳105cfu-4.5╳105cfu的芽孢杆菌。
其中，上述丹参、水、芽孢液态培养基和芽孢杆菌的混合没有加入顺序的限制，例如采用先将丹参和水混合，再加入芽孢液态培养基混合，最后加入芽孢杆菌混合。
优选的，所述丹参发酵液通过包含以下步骤的方法制备得到：按照1:4-8:1-3的重量体积比混合丹参、水和芽孢杆菌液态培养基，再每重量份丹参加入1.5╳105cfu-4.5╳105cfu的芽孢杆菌，37℃密闭培养至OD值3.5-4.8得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为丹参发酵液。
在一个优选的实施例中，一种丹参发酵液，由包含以下步骤的方法制备得到：按照1:4-6:1-1.5的重量体积比混合丹参、水和芽孢杆菌液态培养基，再每重量份丹参加入1.5╳105cfu-2.5╳105cfu以上的芽孢杆菌，37℃密闭培养至OD值3.5-4.8得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为丹参发酵液。
在一个优选的实施例中，一种丹参发酵液，由包含以下步骤的方法制备得到：将100重量份的丹参、500体积份的水和100体积份的芽孢杆菌液态培养基混合，再每重量份丹参加入1.5╳105cfu-2.5╳105cfu以上的芽孢杆菌100体积份，37℃恒温密闭培养至OD值3.8得到培养物，将培养物8000rpm离心3分钟去渣，收集到上清即为丹参发酵液。
其中，所述芽孢杆菌液态培养基可以为市售的芽孢杆菌液态培养基，例如进口的Bacillus mediumbase。
其中，所述芽孢杆菌为植物源芽孢杆菌。
进一步的，上述丹参发酵液中的水优选无菌蒸馏水。
进一步的，上述培养物离心优选在8000rpm离心，例如8000rpm离心3分钟。
优选的，所述多维预混料为市售肉食性鱼类多维预混料。
优选的，所述多矿预混料为市售肉食性鱼类多矿预混料。
优选的，所述鱼粉可以选用国产鱼粉。
优选的，所述鸡肉粉可以为进口鸡肉粉。
本发明采用的饲料经过合理性配比，能满足加州鲈幼鱼、中鱼、成鱼的基本营养需求，添加的皇竹草提取液富含多种活性氨基酸，对肝组织肝血窦组织机能具有良好的激活作用，对肝血窦分布丰度提升具有滋养效果；而桑叶发酵液和丹参发酵液，富含多种活性多肽和肝细活性因子，可有效的增强肝组织血液循环中动静脉血液之间的交换性回流，对因肝脏发白引起的肝组织机能衰退具有良好的预防或修复效果，并且桑叶发酵液、丹参发酵液对肝组织病理性或持续性生理性应激的修复具有协同增效作用。
在本发明的第二方面，本发明提供一种制备上述防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料的方法，将所述固态原料组分粉碎后与液体原料组分混合。
优选的，一种制备上述防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料的方法，将所述固态原料组分粉碎后与液体原料组分混合，挤压切割，得到膨化颗粒饲料。
与普通加州鲈膨化饲料相比，本发明饲料配方能满足加州鲈幼鱼、中鱼、成鱼的基本营养需求，还可有效的增强肝组织血液循环中动静脉血液之间的交换性回流，对因肝肝脏发白病变及由此引起的肝组织机能衰退具有良好的预防和修复治疗效果。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
实施例1
一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，由以下重量百分比的组分组成：鱼粉21％、鸡肉粉25％、豆粕22％、面粉15％、鱿鱼浸膏5％、磷酸二氢钙1.0％、多维预混料1.0％、多矿预混料1.0％、鱼油2.0％、豆油2.0％、磷脂油1.0％、玉米蛋白粉3％、皇竹草提取液0.5％、桑叶发酵产物0.3％、丹参发酵产物0.2％。
其中，皇竹草提取液由以下步骤的方法制备得到：将皇竹草：水以1：10的重量体积比混合，95℃加热至沸腾后，在40℃温度加热至原体积的12％，过滤，得到的滤液为皇竹草提取液。
其中，桑叶发酵液由以下步骤的方法制备得到：将100重量份的桑叶、600体积份的水和100体积份的乳酸菌液态培养基混合，再按每重量份桑叶加入2.0╳104cfu乳酸菌，37℃恒温密闭培养至OD值为3.5-4.0，将培养物3000rpm离心10分钟去渣，收集到上清即为桑叶发酵液。
其中，丹参发酵液由以下步骤的方法制备得到：将100重量份的丹参、500体积份的水和100体积份的芽孢杆菌液态培养基混合，再每重量份丹参加入1.5╳105cfu-2.5╳105cfu以上的芽孢杆菌100体积份，37℃恒温密闭培养至OD值3.8得到培养物，将培养物8000rpm离心3分钟去渣，收集到上清即为丹参发酵液。
制备该功能饲料的方法：将固态原料组分粉碎后与液态原料组分混合，制成不同粒径的膨化颗粒饲料。
实施例2
一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，由以下重量百分比的组分组成：鱼粉20％、鸡肉粉23％、豆粕20％、面粉15％、鱿鱼浸膏7％、磷酸二氢钙1.0％、多维预混料1.0％、多矿预混料1.0％、鱼油2.0％、豆油2.0％、磷脂油1.0％、玉米蛋白粉6％、皇竹草提取液0.3％、桑叶发酵产物0.4％、丹参发酵产物0.3％。
其中，皇竹草提取液由以下步骤的方法制备得到：将皇竹草：水以1：10-15的重量体积比混合，95℃加热至沸腾后，在40℃温度下加热至原体积的10-12％，过滤，得到的滤液为皇竹草提取液。
其中，桑叶发酵液由以下步骤的方法制备得到：将桑叶：水：芽孢液态培养基按重量体积比1：5-7：1-2混合形成混合液，再按每重量份桑叶加入2╳104cfu-3╳104cfu乳酸菌，37℃密闭培养至OD值为3.5-4得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为桑叶发酵液。
其中，丹参发酵液由以下步骤的方法制备得到：按照1:4-6:1-1.5的重量体积比混合丹参、水和芽孢杆菌液态培养基，再每重量份丹参加入1.5╳105cfu-2.5╳105cfu以上的芽孢杆菌，37℃密闭培养至OD值3.5-4.8得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为丹参发酵液。
制备该功能饲料的方法：将固态原料组分粉碎后与液态原料组分混合，制成不同粒径的膨化颗粒饲料。
实验例1对肝脏发白的修复效果
广东佛山南海区某养殖基地选取12口加州鲈养殖池塘作为试点，随机分成A、B、C和D四组，每组下设三个平行池塘，每平行组投喂8000尾加州鲈，按饱食投喂的方式，日投喂分早晚两餐进行，其中A组的三个池塘投喂实施例1制备的功能饲料，B组的三个池塘投喂实施例2制备的功能饲料，C组的三个池塘投喂纯冰鲜饵料，D组的三个池塘投喂市售某品牌的普通加州鲈膨化饲料，试验周期20周。
试验周期内，从各个试点组不同时间节点随机抽样制作肝组织切片观察肝组织并记录正常数，每组中各平行分别抽取100尾(300尾/组)，若肝脏出现发白症状，且肝细胞平均直径>4.0um，则可认定为加州鲈肝脏发白；若肝脏出现局部发白或是肝脏红润，且肝细胞平均直径<4.0um，则可认定为加州鲈肝脏属于正常组织学范畴。根据检测结果及计算得到试验阶段不同节点抽检发现加州鲈肝脏发白的累计发病率，公式如下，结果如表1。
累计发病率(％)＝(认定肝脏发白加州鲈累计尾数/池塘初始放养总尾数)╳100
表1：
Figure GDA0002385514740000061
Figure GDA0002385514740000071
从上表肝组织形态分析结果可知，与投喂冰鲜饵料和市售普通加州鲈膨化饲料的池塘相比，使用本实施例1和2饲料的加州鲈脏发白病变的累计发病率更低。
试验例2
在佛山南海加州鲈养殖区，选择12口养殖面积相近的加州鲈土塘作为试点，初始放养尾数均为40000尾，试验起始时，加州鲈体重规格45±10g。
(1)试验分组与试验料制备
以实施例1制备的功能饲料为基础饲料，其投喂试验组作为试验对照组，设为A组；以实施例1制备的功能饲料配方为基础配方，分别制备皇竹草提取液、桑叶发酵产物和丹参发酵产物单独缺失的试验料，缺失组分以等重量面粉替换，其投投喂试验组依次设为B组、C组和D组。每个试验组均下设三个平行。试验周期20周。
(2)饲料中活性成分缺失对肝脏发白发病率的影响
试验周期内，从各个试点组不同节点随机抽样制作肝组织切片观察肝组织并记录正常数，每组中各平行分别抽取100尾(300尾/组)，若肝脏出现发白症状，且肝细胞平均直径>4.0um，则可认定为加州鲈肝脏发白；若肝脏出现局部发白或是肝脏红润，且肝细胞平均直径<4.0um，则可认定为加州鲈肝脏属于正常组织学范畴。根据检测结果及计算得到试验阶段不同节点抽检发现加州鲈肝脏发白的累计发病率，公式如下，结果如表2。
累计发病率(％)＝(认定肝脏发白加州鲈累计尾数/池塘初始放养总尾数)╳100
表2：
Figure GDA0002385514740000072
Figure GDA0002385514740000081
从表2可以看出，在土塘养殖过程中，投喂本试验所选的普通加州鲈商品饲料20周，该组加州鲈肝脏发白累计发病率平均值为0.4％，明显高于投喂本发明功能饲料组的0.15％，同时也高于本发明功能饲料组中单一组分缺失的三个试验组，如缺失皇竹草提取液组肝脏发白发病率0.27％，桑叶发酵产物肝脏发白发病率0.36％和丹参发酵产物肝脏发白发病率0.31％。由此可见，本试验中，以加州鲈肝脏发白发病率评估各组饲料对肝脏发白的修复效果方面，本发明功能饲料组>缺失皇竹草提取液组>缺失丹参发酵产物组>缺失桑叶发酵产物组>市售加州鲈饲料组。综合上所述，本发明中添加的皇竹草提取液、桑叶发酵产物和丹参发酵产物对修复加州鲈肝脏发白具有重要贡献，是修复加州鲈肝脏发白的活性成分。
另一方面，当皇竹草提取液、桑叶发酵产物和丹参发酵产物单独缺失时，剩余两种活性成分均同时存在时，本发明的功能饲料对加州鲈肝脏发白的修复效果明显下降。由此可见，皇竹草提取液、桑叶发酵产物和丹参发酵产物三种活性成分对修复加州鲈肝脏发白具有协同增效作用。
以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (4)

1.一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，其特征在于，以重量百分比计，所述饲料由以下组分组成：鱼粉15-25%、鸡肉粉20-35%、豆粕16-22%、面粉8-15%、鱿鱼浸膏4-8%、磷酸二氢钙1-2%、多维预混料1-2%、多矿预混料1-2%、鱼油2-4%、豆油1-2%、磷脂油1-2%、玉米蛋白粉2-7%、皇竹草提取液0.2-0.5%、桑叶发酵液0.1-0.5%、丹参发酵液0.1-0.3%；
所述皇竹草提取液通过包含以下步骤的方法制备得到：将皇竹草：水以1：10-20的重量体积比混合，90-95℃加热至沸腾后，在30-45℃温度下加热至原体积的10-15%，过滤，得到的滤液为皇竹草提取液；
所述桑叶发酵产物通过包含以下步骤的方法制备得到：将桑叶、水、芽孢液态培养基和乳酸菌混合，37℃密闭培养至OD值为3.5-4.3得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为桑叶发酵液；其中，桑叶：水：芽孢液态培养基的重量体积比为1：5-10：1-3，乳酸菌的加入量为每重量份桑叶加入1.5╳104cfu -5╳104cfu；
所述丹参发酵产物通过包含以下步骤的方法制备得到：将丹参、水、芽孢杆菌液态培养基和芽孢杆菌混合，37℃密闭培养至OD值3.5-4.8得到培养物，将培养物离心去渣，收集的上清为丹参发酵液；其中，丹参、水和芽孢杆菌液态培养基的重量体积比为1:4-8:1-3，芽孢杆菌的加入量为每重量份丹参加入1.5╳105cfu -4.5╳105cfu的芽孢杆菌。
2.根据权利要求1所述的一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，其特征在于，以重量百分比计，所述饲料由以下组分组成：鱼粉20-21%、鸡肉粉23-25%、豆粕20-22%、面粉15%、鱿鱼浸膏5-7%、磷酸二氢钙1%、多维预混料1%、多矿预混料1%、鱼油2%、豆油2%、磷脂油1%、玉米蛋白粉3-6%、皇竹草提取液0.3-0.5%、桑叶发酵液0.3-0.4%、丹参发酵液0.2-0.3%。
3.根据权利要求2所述的一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，其特征在于，以重量百分比计，所述饲料由以下组分组成：鱼粉21%、鸡肉粉25%、豆粕22%、面粉15%、鱿鱼浸膏5%、磷酸二氢钙1%、多维预混料1%、多矿预混料1%、鱼油2%、豆油2%、磷脂油1%、玉米蛋白粉3%、皇竹草提取液0.5%、桑叶发酵液0.3%、丹参发酵液0.2%。
4.根据权利要求2所述的一种防治加州鲈肝脏发白病变的功能饲料，其特征在于，以重量百分比计，所述饲料由以下组分组成：鱼粉20%、鸡肉粉23%、豆粕20%、面粉15%、鱿鱼浸膏7%、磷酸二氢钙1%、多维预混料1%、多矿预混料1%、鱼油2%、豆油2%、磷脂油1%、玉米蛋白粉6%、皇竹草提取液0.3%、桑叶发酵液0.4%、丹参发酵液0.3%。
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