CN107389849A - 一种中药生品及其蜜炙品的鉴别方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，包括供试品溶液制备、蜂蜜对照药材的制备、薄层点样、展开和显色。蜂蜜水溶液经乙酸乙酯脱脂，去蛋白液脱蛋白，水液蒸干，残渣加乙醇或甲醇溶液使溶解，即得蜂蜜对照药材；一种中药及其蜜炙品的饮片与配方颗粒加水提取，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或甲醇溶液使溶解，即得供试品溶液。本发明提供了一种简便、高效，适用于一种中药及其蜜炙品的饮片与配方颗粒的通用鉴别方法，以果糖、蔗糖为对照品，蜂蜜脱脂、去蛋白处理后作为蜂蜜对照药材，即以蜂蜜对照药材的主要成分为对照，薄层展开后，可直观查看中药蜜炙前后饮片或配方颗粒的差异。

Description

一种中药生品及其蜜炙品的鉴别方法
技术领域
本发明属于中药鉴别技术领域，尤其涉及一种中药生品及其蜜炙品的鉴别方法。
背景技术
蜜炙是一种特殊的炮制方法，在中药炮制中占据重要的作用。经过蜜炙的炮制品，通常能够起到增强润肺止咳、补中益气、缓和药性的作用，近代研究表明，经蜂蜜炼制后，可以增加某些药材中苷元的溶解度，帮助溶解、促进吸收。此外，炼蜜中的大多数转化糖具有还原性，能防止药材中的有效成分氧化变质，从而保证药材的质量。中药的生品和炮制品均有其特殊的功效，生品和炮制品又属于两种不同的饮片，经过炮制的药材颜色会加深，肉眼较易分辨，而制成的配方颗粒，外观几乎一致，外观特征上很难分辨，这就给生品和炮制品的鉴别带来了很大的困难。
《中华人民共和国药典(2015版)》仅仅提供了相关的生品的鉴别，并没有给出生品和炮制品的差异性鉴别，生品与炮制品的差异性鉴别就变得十分有意义。
本发明采用薄层色谱法对蜜炙品和生品进行薄层鉴别，具有高效，迅速，直观等特点，解决了配方颗粒的生品和蜜炙品两者无法区分的难题，弥补了这一空缺，可作为一种中药及其蜜炙品的饮片与配方颗粒的通用鉴别方法。
发明内容
本发明为了解决现阶段薄层鉴别无法区分一种中药生品与其蜜炙品的现状，提供了一种中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，包括供试品溶液制备、蜂蜜对照药材的制备、点样、展开和显色，蜂蜜水溶液经乙酸乙酯脱脂，去蛋白液脱蛋白，水液蒸干，残渣加乙醇或甲醇溶液使溶解，即得蜂蜜对照药材溶液；一种中药及其蜜炙品的饮片或配方颗粒加水提取，滤过，蒸干，残渣加乙醇或甲醇溶液使溶解，即得供试品溶液。
所述鉴别方法采用二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水[(30～70)：(15～30)：(10～20)：(5～15)]或二氯甲烷-甲酸-甲醇-水[(30～70)：(15～30)：(10～20)：(5～15)]为展开剂，以茴香醛硫酸溶液为显色剂。
进一步，所述中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，包括如下步骤：
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的60～85％乙醇或甲醇溶液溶解，制成0.5～2mg/ml的对照品溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取炼蜜0.1～5g，溶于1～50ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用10～40ml乙酸乙酯脱脂1～3次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白,充分振摇至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水液于30～60℃除去溶剂，残渣加40～90％乙醇或甲醇溶液使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品0.1～5g，加水10～80ml，于30～70℃提取10～60分钟，过滤，滤液于30～60℃除去溶剂，残渣加40～90％乙醇或甲醇溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材适量，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水[(30～70)：(15～30)：(10～20)：(5～15)]为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下观察。
当展开剂比例优选为二氯甲烷-冰乙酸-甲醇-水(10：5：3：2)时，蜜炙品色谱相比于生品色谱，在Rf值为0.5～0.7处多出一个橙黄色斑点。
所述氯仿/正丁醇去蛋白液各组分比例为氯仿-正丁醇(5：1)。
本发明有益效果：
(1)本发明提供了一种简便、高效，适用于中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，以果糖、蔗糖为对照品，对蜂蜜进行脱脂、去蛋白处理后作为蜂蜜对照药材溶液，即以蜂蜜对照药材的主要成分为对照，薄层展开后，可直观查看中药蜜炙前后饮片或配方颗粒的差异。
(2)由于中药蜜炙前后，蜜炙品相比于生品，只是增加了果糖这一组分，中药原有成分在本方法色谱图中没有发生明显的变化，因此，本方法可作为中药生品及其蜜炙品的通用方法。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明：
图1：实施例6所得薄层色谱图(1-蔗糖薄层色谱；2-果糖薄层色谱；3-炼蜜薄层色谱；4a-黄芪饮片薄层色谱；5a-炙黄芪饮片薄层色谱；4b-黄芪配方颗粒薄层色谱；5b-炙黄芪配方颗粒薄层色谱；A、B分别代表起始线和展开剂前沿)。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明：
实施例1
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的70％乙醇溶解，制成2mg/ml的溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜对照药材0.1g，溶于25ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用10ml乙酸乙酯脱脂两次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白,充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水液于30℃除去溶剂，残渣加40％乙醇使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品0.1g，加水40ml，于30℃超声提取10分钟，过滤，滤液于30℃除去溶剂，残渣加40％乙醇使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材1～10μl，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水(30：15：10：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下检视。
实施例2
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的75％乙醇溶解，制成1mg/ml的溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜对照药材5g，溶于40ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用40ml乙酸乙酯脱脂两次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白，充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水液于60℃除去溶剂，残渣加90％乙醇使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品5g，加蒸馏水80ml，于70℃超声提取60分钟，过滤，滤液于60℃旋蒸除去溶剂，残渣加90％乙醇使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材1～15μl，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水(70：30：20：15)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下检视。
实施例3
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的70％甲醇溶解，制成2mg/ml的溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜对照药材0.5g，溶于25ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用20ml乙酸乙酯脱脂3次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白，充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水相于40℃旋蒸除去溶剂，残渣加50％甲醇使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品0.5g，加蒸馏水50ml，于40℃提取20分钟，过滤，滤液于40℃除去溶剂，残渣加50％甲醇使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材5～10μl，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水(40：20：15：8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下检视。
实施例4
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的65％乙醇溶解，制成2mg/ml的溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜对照药材1g，溶于25ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，用30ml乙酸乙酯脱脂1次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白，充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水相于50℃除去溶剂，残渣加60％乙醇使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品1g，加蒸馏水25ml，于50℃超声提取30分钟，过滤，滤液于40℃除去溶剂，残渣加60％乙醇使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材各10μl，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水(50：25：15：10)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下观察。
实施例5
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的60％甲醇使溶解，制成2mg/ml的溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜对照药材2g，溶于25ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用25ml乙酸乙酯脱脂两次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白，充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水相于60℃旋蒸除去溶剂，残渣加70％甲醇使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品2g，加蒸馏水40ml，于60℃超声提取40分钟，过滤，滤液于60℃除去溶剂，残渣加70％甲醇使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材1～15μl，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-甲酸-甲醇-水(60：25：12：12)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下检视。
实施例6
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量的80％乙醇使溶解，制成0.5mg/ml的溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜对照药材5g，溶于25ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用40ml乙酸乙酯脱脂两次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白，充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水液于60℃除去溶剂，残渣加80％乙醇使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药供试品3g，加蒸馏水40ml，于60℃超声提取30分钟，过滤，滤液于60℃除去溶剂，残渣加80％乙醇使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材1～15μl，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水(10：5：3：2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下检视。
图1为实施例6的薄层谱图(1-蔗糖薄层色谱；2-果糖薄层色谱；3-炼蜜薄层色谱；4a-黄芪饮片薄层色谱；5a-炙黄芪饮片薄层色谱；4b-黄芪配方颗粒薄层色谱；5b-炙黄芪配方颗粒薄层色谱)。如图1所示，(1)相比于黄芪饮片薄层色谱4a，黄芪饮片经蜜炙后的炙黄芪，其炙黄芪饮片薄层色谱5a在Rf为0.6处多出一个斑点，为炼蜜中的果糖成分；(2)相比于黄芪配方颗粒薄层色谱4b，炙黄芪配方颗粒薄层色谱5b在Rf为0.6处也多出一个果糖斑点。故通过本发明中薄层色谱法可以快速鉴别炙黄芪配方颗粒与黄芪配方颗粒，炙黄芪饮片与黄芪饮片。由于中药蜜炙前后，蜜炙品相比于生品，只是增加了果糖这一组分，中药原有成分在本方法色谱图中没有发生明显的变化。因此，本方法可作为中药生品及其蜜炙品的通用方法。
以上实施例并非仅限于本发明的保护范围，所有基于本发明的基本思想而进行的修改或变动都属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，包括供试品溶液制备、蜂蜜对照药材的制备、薄层点样、展开和显色，其特征在于：蜂蜜水溶液经乙酸乙酯脱脂，去蛋白液脱蛋白，水液蒸干，残渣加乙醇或甲醇溶液使溶解，即得蜂蜜对照药材溶液；一种中药生品及其蜜制品加水提取，滤过，蒸干，残渣加乙醇或甲醇溶液使溶解，即得供试品溶液。
2.根据权利要求1所述中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，其特征在于：所述鉴别方法采用二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水[(30～70)：(15～30)：(10～20)：(5～15)]为展开剂，以茴香醛硫酸溶液为显色剂。
3.根据权利要求2所述中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)对照品溶液的制备：取果糖和蔗糖适量，加适量60％～85％乙醇或甲醇溶液溶解，制成0.5～2mg/ml的对照品溶液；
(2)蜂蜜对照药材的制备：取蜂蜜0.1～5g，溶于1～50ml水中，充分溶解，滤掉不溶物，依次用10～40ml乙酸乙酯脱脂1～3次，用氯仿/正丁醇去蛋白液脱去蛋白，充分振摇，至离心后的下层溶液不再出现凝胶样物质，水液于30～60℃除去溶剂，残渣加40～90％乙醇或甲醇溶液使溶解；
(3)供试品溶液的制备：分别取中药生品和蜜炙品0.1～5g，加蒸馏水10～80ml，于30～70℃提取10～60分钟，过滤，滤液于30～60℃除去溶剂，残渣加40～90％乙醇或甲醇溶液使溶解。
(4)点样、展开、显色：吸取对照品溶液、供试品溶液、蜂蜜对照药材适量，分别点于同一薄层板上，以二氯甲烷-冰醋酸-甲醇-水[(30～70)：(15～30)：(10～20)：(5～15)]为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置于紫外灯(365nm)下观察。
4.根据权利要求3所述中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，其特征在于：当展开剂比例为二氯甲烷-冰乙酸-甲醇-水(10：5：3：2)时，蜜炙品色谱相比于生品色谱，在Rf值为0.5～0.7处多出一个橙黄色斑点。
5.根据权利要求3所述中药生品及其蜜炙品的鉴别方法，其特征在于：所述氯仿/正丁醇去蛋白液各组分比例为氯仿-正丁醇(5：1)。
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