CN107384582A - 一种红花油体的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种红花油体的提取方法，属于红花油体提取方法领域。该方法包括：先将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；将浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；将处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2‑8h，得到分层后的油体液；提取得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2‑4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。本发明的提取方法快速简单、提取量大、提取效率高、用料简单、适合工业生产。

Description

一种红花油体的提取方法
技术领域
本发明属于红花油体提取方法领域，具体涉及一种红花油体的提取方法。
背景技术
红花(Carthamustinctorius L.)又名草红花、黄兰花、菊红花,为菊科(Compositae)红花属(Car-thamus L.)1-2年生草本植物。红花是红花属中唯一的栽培种,它原产大西洋东部、非洲西北的加那利群岛及地中海沿岸。根据著名植物学家虎克(Hooker)与杰克逊(Jackson)的论著,红花属全世界共60种,后经分类学家进一步研究和归类,现在一般认为约有20-25种。种子油脂是以油体的形式贮藏于胚乳、子叶或盾片等组织中。油体是由单层的磷脂膜,内包含TAG,表面镶嵌油体蛋白、钙结合蛋白、固醇结合蛋白。储存在油体中的TAG为种子萌发提供能量。
现有的提取红花油体的方法为采用两相或三相倾析式离心机，采用重力除杂倾倒获得液体相和部分油体相，然后采用离心机的方法将油体相和液体相分离，由于现有的提取方法为倾析式离心除杂,多次离心，不适合大规模连续分离，离心除杂过程中造成部分油体损失，制备过程中大量使用化学试剂造成环境压力。
发明内容
本发明的目的是提供一种红花油体的提取方法，该方法提取量大、提取效率高。
本发明提供一种红花油体的提取方法，该方法包括：
步骤一：将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；
步骤二：将步骤一浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；
步骤三：将步骤二得到的处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；
步骤四：提取步骤三得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。
优选的是，所述步骤一的浸泡时间为10-20min。
优选的是，所述步骤二的处理时间为2-3min。
优选的是，所述步骤二的种子重量(g)：PBS缓冲溶液的体积(L)为100：1。
优选的是，所述的NaCl溶液的浓度为15-30mM。
优选的是，所述的步骤四的搅拌速度为28000rpm，搅拌时间为20-30s。
优选的是，所述的步骤四的离心时间为10-15min，转速为4000-6000×g。
本发明的有益效果
本发明提供一种红花油体的提取方法，该方法包括：先将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；将浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；将处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；提取得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。与现有技术相对比，本发明的提取方法一步离心并利用浮力作用制得油体快速简单、连续流离心机可以连续工作制备提取量大、提取效率高、用料简单、适合工业生产。
附图说明
图1为本发明实施例1制备得到的红花油体的显微镜照片；
图2为对比例1制备得到的红花油体的显微镜照片。
具体实施方式
本发明提供一种红花油体的提取方法，该方法包括：
步骤一：将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；所述的水洗优选是将红花种子采用分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗，所述的分选机优选为型号为TFKH1200型葵花籽脱壳分选机，所述的水洗次数不限，直至将污染物洗掉为准，优选为3-5遍，所述的红花种子的质量(g)：水的体积(L)为100：1；水洗后进行晾干，然后将其浸泡在PBS缓冲液中，浸泡时间优选为10-20min，所述的PBS缓冲液的浓度优选为10mM，pH为7.2；
步骤二：将步骤一浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；所述处理时间优选为2-3min；种子重量(g)：PBS缓冲溶液的体积(L)为100：1；胶体磨的型号优选为GB/T14466-93；
步骤三：将步骤二得到的处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；所述的离心优选采用型号为GQ75管式分离机进行离心除杂，离心功率优选为0.5-0.7KW，更优选为0.6KW，频率优选为15-25Hz，更优选为20Hz，离心除杂后的油体损失在2％左右，离心除杂后加入NaCl溶液的目的是一方面钠离子在油体表面富集，在一定离子浓度条件下有助于稳定油体表面电荷，使得油体处在一定的电场作用下，有利于油体离散；另一方面，在一定盐浓度条件下有助于油体悬浮，所述的NaCl溶液的浓度优选为15-30mM，更优选为20mM；将油体液在室温下静置2-8小时，油体液分层；
步骤四：提取步骤三得到的上层油体液，除去下层废液，然后将上层油体液加入PBS乳化机中搅拌混匀，所述的PBS乳化机的型号优选为FA25，搅拌速度优选为28000rpm，搅拌时间优选为20-30s，将搅拌后的油体液放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体；所述的离心时间优选为10-15min，，转速为4000-6000×g，离心机的型号为J-26XP。
本发明通过控制油体液在室温中的静置时间，对油体液进行分层，所述的静置时间为2-4h，当静置时间少于2h时，油体分层不明显；当静置时间大于4h时，得到的油体液容易变质。
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的说明，实施例中涉及到的原料均为商购获得。
对比例1
步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子15分钟，没过种子即可；
步骤二：将1000g种子和10L PBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；
步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.6KW，频率为20Hz，然后在室温下静置4h，得到分层后的油体液；油体收率为：20％。
步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置3h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心5000×g，12min，得到红花油体。
实验结果表明：对比例1制备得到的红花油体的提取率为11％，图2为对比例1制备得到的红花油体的显微镜照片，从图2可以看出，油体出现了大量的聚集现象。
实施例1
步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子15分钟，没过种子即可；
步骤二：将1000g种子和10LPBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；
步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.6KW，频率为20Hz，加入浓度为20mM的NaCl溶液，然后在室温下静置4h，得到分层后的油体液；油体收率为：60％。
步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置3h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心5000g，12min，得到红花油体。
实验结果表明：实施例1制备得到的红花油体的提取率为15％，图1为本发明实施例1制备得到的红花油体的显微镜照片，从图1可以看出，本发明的油体粒径均匀，没有出现聚集。
实施例2
步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子20分钟，没过种子即可；
步骤二：：将1000g种子和10L PBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；
步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.5KW，频率为15Hz，加入浓度为20mM的NaCl溶液，然后在室温下静置2h，得到分层后的油体液；油体收率为50％；
步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置2h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心4000×g，10min，得到红花油体。
实验结果表明：实施例2制备得到的红花油体的提取率为14％，油体粒径均一，无聚集。
实施例3
步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，直至将灰尘洗掉，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子20分钟，没过种子即可；
步骤二：：将1000g种子和10L PBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；
步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.7KW，频率为25Hz，加入浓度为20mM的NaCl溶液，然后在室温下静置6h，得到分层后的油体液；油体收率为45％；
步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置4h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心6000×g，15min，得到红花油体。
实验结果表明：实施例3制备得到的红花油体的提取率为14％，油体粒径均一，无聚集。

Claims (7)

1.一种红花油体的提取方法，其特征在于，该方法包括：
步骤一：将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；
步骤二：将步骤一浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；
步骤三：将步骤二得到的处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；
步骤四：提取步骤三得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。
2.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述步骤一的浸泡时间为10-20min。
3.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述步骤二的处理时间为2-3min。
4.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述步骤二的种子重量(g)：PBS缓冲溶液的体积(L)为100：1。
5.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述的NaCl溶液的浓度为15-30mM。
6.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述的步骤四的搅拌速度为28000rpm，搅拌时间为20-30s。
7.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述的步骤四的离心时间为10-15min，转速为4000-6000×g。
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