CN107365736A - 植物根尖干细胞不对称分裂调控通路的一种抑制剂及其应用 - Google Patents

Abstract

提供一种抑制植物根尖干细胞不对称分裂(ACD)调控通路的黄酮类化合物柚皮素(naringenin)。它具有促进ACD非活性调控复合体RBR‑SCR结合、进而抑制ACD活性调控复合体SCR‑SHR形成并抑制ACD下游关键基因NUC表达的作用。同时提供柚皮素在制备SCR‑SHR蛋白复合体抑制剂的应用。本发明首次发现抑制根尖干细胞ACD的次生代谢产物，也是柚皮素生物学效应的一个新发现，为深入研究根尖干细胞ACD调控机制提供了重要工具，同时为柚皮素在植物学领域的应用拓展了新空间。

Description

植物根尖干细胞不对称分裂调控通路的一种抑制剂及其应用

技术领域：

本发明属于植物干细胞调控领域，具体地，涉及一种抑制植物根尖干细胞不对称分裂调控通路的黄酮类化合物柚皮素，及其在制备植物根尖干细胞不对称分裂调控通路抑制剂中的应用。

背景技术：

自然界每个多细胞生物都起源于单细胞，发育过程中单细胞分裂产生的子代分化成生命功能所需的多种细胞类型，进而得以形成不同的组织、器官、系统，最终发育成形态完整功能完善的生命体。干细胞是生物发育过程的细胞来源和信号调控中心，是一类具有多向分化潜能和自我更新复制能力的原始的未分化细胞。而在干细胞分化过程中决定细胞命运差异最重要最普遍的机制就是细胞不对称分裂(Asymmetric cell division,ACD)。ACD是指干细胞有丝分裂期间细胞命运决定因子只进入一个子细胞中，导致两个子细胞走上不同的发育途径，其中一个子细胞仍然具有自我更新的能力维持其干细胞特性，而另一个子细胞则不再具备这种能力，分化成其他类型细胞。

植物中主要有两团干细胞，分别位于茎尖分生组织和根尖分生组织。根是植物重要的营养器官，担负着吸收水分和营养物质以及植物固着在基质上等重要作用。根尖干细胞ACD是植物根发育过程中的核心事件，SCR(SCARECROW)、SHR(SHORT ROOT)、RBR(RETINOBLASTOMA-RELATED)三个蛋白是目前已知的调控植物根发育过程中ACD的关键因子。SCR和SHR是GRAS家族两个转录因子，RBR是人类成视网膜细胞瘤基因的同源基因。主根发育过程中：如果RBR结合了SCR，则抑制ACD活性调控复合体SCR-SHR形成，进而阻碍下游基因如SCR、CYCD6；1(CYCLIND6；1)、NUC(NUTCRAKER)、MGP(MAGPIE)等激活，限制ACD发生；相反，如果SHR和SCR结合，则形成ACD活性调控复合体SCR-SHR，进而激活下游基因表达，促进ACD发生。

植物干细胞调控一直是植物学研究领域的重点和难点之一，近十多年来已经取得了大量研究成果，解析了一些调控植物干细胞的分子机制，并在现代农业、生物医药、美容健康等生产领域逐步开发出基于植物干细胞分离、纯化、培养的多种创新型产业。因而本发明中植物次生代谢产物柚皮素抑制根尖干细胞ACD调控通路的新功效，将为植物干细胞调控的深入研究提供重要工具，并为基于植物干细胞技术的产业发展提供新的思路。

目前，现有技术中未见有以柚皮素作为干细胞ACD调控通路抑制剂的报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种具有植物根尖干细胞ACD调控通路抑制作用的黄酮类化合物柚皮素，以及提供柚皮素在制备ACD抑制剂中的应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

植物根尖干细胞ACD调控通路的抑制剂，其含有柚皮素。

根据所述的抑制剂，其以柚皮素为唯一活性成分。

根据所述的抑制剂，其中所述的柚皮素浓度为50μM。

根据所述的抑制剂，其中所述的柚皮素通过促进RBR和SCR蛋白结合形成ACD非活性调控复合体RBR-SCR，并抑制活性调控复合体SCR-SHR形成，进而抑制ACD下游关键基因NUC表达。

柚皮素在制备根尖干细胞ACD调控通路抑制剂中的应用，所述的抑制剂以柚皮素为活性成分。

柚皮素在制备根尖干细胞ACD调控通路抑制剂中的应用，所述的抑制剂以柚皮素为活性成分，浓度为50μM。

与现有技术相比，本发明具备如下的优益性：

柚皮素是一种天然黄酮类化合物，广泛存在于芸香科及其他植物中，如枳实、化橘红、葡萄柚、桃叶、西红柿、菝葜等。我国柚皮素资源丰富，目前其生物活性只在医药领域得到开发，而在植物学领域的应用尚未见报导。本发明首次发现柚皮素对根尖干细胞ACD调控通路具有显著抑制效应。

关于植物根发育ACD过程已有的研究证实：RBR、SCR、SHR通过相互结合形成活性或非活性的蛋白复合体，只有活性复合体SHR-SCR可以激活下游基因如NUC、MGP等表达，进而促进ACD过程发生，而非活性复合体RBR-SCR的形成则会阻碍活性复合体SHR-SCR形成；ACD调控是根发育过程中的核心事件，不仅贯穿主根发育的始终，而且影响侧根的形成，因而根尖干细胞调控过程中活性复合体SHR-SCR和非活性复合体RBR-SCR的水平决定了根的发育状况。由此可见筛选ACD过程调控剂无论对植物生长发育的基础研究还是对植物干细胞技术的应用产业都具有重要意义，所以探索柚皮素对根尖干细胞ACD调控通路的抑制作用是一项极具创新性和发展前景的工作。

本发明中植物次生代谢产物柚皮素的新功效，即抑制根尖干细胞ACD调控通路，是首次发现的对根尖干细胞ACD具有抑制作用的次生代谢产物，因而是次生代谢产物调控根尖干细胞研究和应用领域的一次重大突破。同时申请人正在申请的另一项发明“植物根尖干细胞不对称分裂调控通路的促进剂及其应用”中发现了两种与柚皮素作用完全相反的ACD促进剂，并且与柚皮素同为植物来源的黄酮类化合物。生物学过程的促进剂和抑制剂通常是深入研究某一过程的关键手段，而且在植物生理研究领域，如果某一生物学过程的抑制剂和促进剂正好是植物来源而非人工合成，则有利于更真实更完整的解析这一过程的复杂调控机制，因而本发明提供的根尖干细胞ACD抑制剂柚皮素，为研究植物根尖干细胞调控这一重要生理过程提供了极有利的研究工具。另外，对植物干细胞的操纵是现代农业、生物医药、美容健康等多项产业的创新技术之一，所以本发明提供的根尖干细胞ACD抑制剂柚皮素还为人工调控植物干细胞的生物技术提供一种全新的选择。

附图说明：

图1.pSPYNE-35S和pSPYCE-35S载体结构。

图2a.荧光双分子互补实验(bimolecular fluorescence complementation,BIFC)阴性对照，YFP荧光场几乎无荧光，证明：SCR-YC与pSPYNE-35S空白载体不能结合，RBR-YN和SHR-YN与pSPYCE-35S空白载体不能结合(标尺＝30μm)。

图2b.50μM柚皮素促进ACD过程负调控蛋白RBR和SCR结合(RBR和SCR分别偶联报告基因YFP的两个互补片段，当RBR和SCR结合则使YFP两个互补片段靠近恢复荧光活性，所以荧光增多指示RBR和SCR结合增多，标尺＝30μm)；

图2c.50μM柚皮素抑制ACD过程正调控蛋白SHR和SCR结合(SHR和SCR分别偶联报告基因YFP的N端和C端，只有SHR和SCR结合才使YFP两个互补片段靠近恢复荧光活性，所以荧光减少指示SHR和SCR结合减少，标尺＝30μm)；

图3.50μM柚皮素抑制NUC基因表达(实时荧光定量PCR检测NUC基因相对表达水平，“*”表示显著差异，p<0.05)；

具体实施方式：

下面结合附图，用本发明的实施例子来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限制本发明。

下述实施例中的方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化分子试剂公司购买得到的。

实施例1

柚皮素的制备：

名称：柚皮素/柑桔黄素/4',5,7-三羟基二氢黄酮

(naringenin/4',5,7-Trihydroxyflavanone)

分子式：C₁₅H₁₂O₅

结构式：

制备：

1.桃叶干燥粉碎过60目筛；

2.65％乙醇按料液比1:35在40℃提取4小时除去叶绿素；

3.过滤得沉淀干燥，乙醇甲醇混合液(体积比7:3)按料液比1:45(g:ml)在50℃提取5小时得柚皮素粗品；

4.石油醚萃取柚皮素粗品脱脂；

5.脱脂后的水相用乙酸乙酯萃取；

6.乙酸乙酯相上硅胶柱层析，用乙酸乙酯-甲醇系统(9:1)进行洗脱，洗脱液分部收集，最前沿段合并浓缩；

7.上硅胶柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱，分部收集，浓缩后析出沉淀物；

8.反复过柱，甲醇重结晶后，得到白色针状晶体，即柚皮素纯品。

实施例2

SHR-YN、RBR-YN、SCR-YC三个质粒构建：

(1)BIFC实验是鉴定目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的经典方法。其原理是将荧光蛋白两个互补片段分别与目标蛋白融合表达，如果目标蛋白发生互作，则能拉近荧光蛋白两个互补片段使荧光蛋白恢复功能从而在激发光下产生荧光，因而首先需要构建目标蛋白与荧光蛋白两个互补片段融合的质粒。提取哥伦比亚生态型拟南芥(Col)根部RNA，逆转录得到cDNA，分别用SHR上游引物(5'-CGCGGATCCATGGATACTCTCTTTAGACTAGTC-3')和下游引物(5'-CCGCTCGAGCGTTGGCCGCCACGC-3')，RBR上游引物(5'-CGCGGATCCATGGAAGAAGTTCAGCCTCC-3')和下游引物(5'-CCGCTCGAGTGAATCTGTTGGCTCGG-3')，SCR上游引物(5'-CGCGGATCCATGGCGGAATCCGGCGATT-3')和下游引物(5'-CCGCTCGAGAGAACGAGGCGTCCAAG-3')，进行PCR扩增获得SHR、RBR、SCR全长CDs。在BamH I和Xho I两个位点分别将SHR和RBR克隆到载体pSPYCE-35S(图1)得到SHR-YN和RBR-YN质粒，将SCR克隆到载体pSPYCE-35S(图1)得到SCR-YC质粒。冻融法转化大肠杆菌DH 5α，挑选阳性克隆提取质粒，经序列测定和比对，证明三个目的基因成功构建到载体上并且序列正确。

实施例3

SHR-YN、RBR-YN、SCR-YC三个质粒转染烟草：

将成功构建的三个质粒SHR-YN、RBR-YN、SCR-YC应用电击法分别转化到农杆菌GV3101中，挑选阳性克隆提取质粒，经序列测定和比对，证明三个目的基因成功转化农杆菌。挑取三个目的基因农杆菌阳性克隆单菌落，分别接种到含50μg/mL卡那霉素、庆大霉素和利福平三种抗性的100mL LB培养基，28℃、200rpm摇床培养过夜，第二天早上加入200μM乙酰丁香酮继续培养，每两小时测一次菌液OD值至OD值达到0.8-1.0。菌液5000g离心10分钟，收集菌体，弃上清，加入一定体积浸染液(0.5％D-葡萄糖、10mM MES、10mM MgCl₂、200μM乙酰丁香酮)重悬菌体，将三种菌OD值调整至0.5。分别将SHR-YN和SCR-YC菌液等体积混合、RBR-YN和SCR-YC菌液等体积混合。取培养6-8周的本氏烟草，用1mL一次性注射器去针头后吸取混合菌液，从叶片下表皮将菌液缓慢注射渗透到叶片中，分别实现两组质粒对烟草的共转染。

实施例4

柚皮素促进转染烟草叶片中RBR和SCR蛋白结合：

被转染的烟草暗培养24小时后在原培养条件下继续培养3天，取共转染RBR和SCR蛋白的烟草叶片，叶柄浸没在50μM柚皮素以及等量溶剂二甲基亚砜(DMSO)中2小时。在叶片转染部位撕取叶表皮，在激光共聚焦显微镜下检测黄色荧光蛋白，结果显示柚皮素处理的叶片，其表皮细胞中黄色荧光显著强于DMSO处理的叶片(图2a,b)，说明50μM柚皮素显著促进根尖干细胞ACD过程负调控蛋白RBR和SCR结合。

实施例5

柚皮素抑制转染烟草叶片中SHR和SCR蛋白结合：

被转染的烟草暗培养24小时后在原培养条件下继续培养3天，取共转染SHR和SCR蛋白的烟草叶片，叶柄分别浸没在50μM柚皮素以及等量溶剂二甲基亚砜(DMSO)中2小时。在叶片转染部位撕取叶表皮，在激光共聚焦显微镜下检测黄色荧光蛋白，结果显示柚皮素处理的叶片，其表皮细胞中黄色荧光弱于DMSO处理的叶片(图2a,c)，说明50μM柚皮素抑制根尖干细胞ACD过程正调控蛋白SHR和SCR结合。

实施例6

柚皮素抑制根尖干细胞ACD调控中下游关键基因NUC表达：

将Col拟南芥种子灭菌后在无菌条件下分别播种到含有50μM柚皮素或等量溶剂二甲基亚砜(DMSO)的MS培养基上，竖直培养7天，分别取小苗根部提取RNA，逆转录得到cDNA。以不同处理的cDNA为模板，以Actin2为看家基因，应用实时荧光定量PCR方法检测NUC基因相对表达水平。Actin2引物为Actin2-F(5’-TGTGCCAATCTACGAGGGTTT-3’)和Actin2-R(5’-TTTCCCGCTCTGCTGTTGT-3’)，NUC引物为NUC-F(5’-CCCAGGATCAGTTAATCTCAAC-3’)和NUC-R(5’-TCTTGTCCCATCCATAGAGAGA-3’)。结果显示，50μM柚皮素下调NUC表达水平(图3)，说明柚皮素抑制根尖干细胞ACD调控中下游关键基因NUC表达。

序列表

<110> 中国科学院昆明植物研究所

<120> 植物根尖干细胞不对称分裂调控通路的一种抑制剂及其应用

<160> 18

<210> 1

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥SHR基因上游引物

<400> 1

cgcggatcca tggatactct ctttagacta gtc

<210> 2

<211> 24

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥SHR基因下游引物

<400> 2

ccgctcgagc gttggccgcc acgc

<210> 3

<211> 29

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥RBR基因上游引物

<400> 3

cgcggatcca tggaagaagt tcagcctcc

<210> 4

<211> 26

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥RBR基因下游引物

<400> 4

ccgctcgagt gaatctgttg gctcgg

<210> 5

<211> 28

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥SCR基因上游引物

<400> 5

cgcggatcca tggcggaatc cggcgatt

<210> 6

<211> 26

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥SCR基因下游引物

<400> 6

ccgctcgaga gaacgaggcg tccaag

<210> 7

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥NUC基因上游引物

<400> 7

cccaggatca gttaatctca ac

<210> 8

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥NUC基因下游引物

<400> 8

tcttgtccca tccatagaga ga

<210> 9

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥Actin2基因上游引物

<400> 9

tgtgccaatc tacgagggtt t

<210> 10

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列

<223> 拟南芥Actin2基因下游引物

<400> 10

tttcccgctc tgctgttgt

<210>11

<211> 1596

<212> DNA

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥SHR基因

<400> 11

atggatactc tctttagact agtcagtctc caacaacaac aacaatccga tagtatcatt 60

acaaatcaat cttcgttaag cagaacttcc accaccacta ctggctctcc acaaactgct 120

tatcactaca actttccaca aaacgacgtc gtcgaagaat gcttcaactt tttcatggat 180

gaagaagacc tttcctcttc ttcttctcac cacaaccatc acaaccacaa caatcctaat 240

acttactact ctcctttcac tactcccacc caataccatc ccgccacatc atcaacccct 300

tcctccaccg ccgcagccgc agctttagcc tcgccttact cctcctccgg ccaccataat 360

gacccttccg cgttctccat acctcaaact cctccgtcct tcgacttctc agccaatgcc 420

aagtgggcag actcggtcct tcttgaagcg gcacgtgcct tctccgacaa agacactgca 480

cgtgcgcaac aaatcctatg gacgctcaac gagctctctt ctccgtacgg agacaccgag 540

caaaaactgg cttcttactt cctccaagct ctcttcaacc gcatgaccgg ttcaggcgaa 600

cgatgctacc gaaccatggt aacagctgca gccacagaga agacttgctc cttcgagtca 660

acgcgaaaaa ctgtactaaa gttccaagaa gttagcccct gggccacgtt tggacacgtg 720

gcggcaaacg gagcaatctt ggaagcagta gacggagagg caaagatcca catcgttgac 780

ataagctcca cgttttgcac tcaatggccg actcttctag aagctttagc cacaagatca 840

gacgacacgc ctcacctaag gctaaccaca gttgtcgtgg ccaacaagtt tgtcaacgat 900

caaacggcgt cgcatcggat gatgaaagag atcggaaacc gaatggagaa attcgctagg 960

cttatgggag ttcctttcaa atttaacatt attcatcacg ttggagattt atctgagttt 1020

gatctcaacg aactcgacgt taaaccagac gaagtcttgg ccattaactg cgtaggcgcg 1080

atgcatggga tcgcttcacg tggaagccct agagacgctg tgatatcgag tttccgacgg 1141

ttaagaccga ggattgtgac ggtcgtagaa gaagaagctg atcttgtcgg agaagaagaa 1201

ggtggctttg atgatgagtt cttgagaggg tttggagaat gtttacgatg gtttagggtt 1261

tgcttcgagt catgggaaga gagttttcca aggacgagca acgagaggtt gatgctagag 1321

cgtgcagcgg gacgtgcgat cgttgatctt gtggcttgtg agccgtcgga ttccacggag 1380

aggcgagaga cagcgaggaa gtggtcgagg aggatgagga atagtgggtt tggagcggtg 1440

gggtatagtg atgaggtggc ggatgatgtc agagctttgt tgaggagata taaagaaggt 1500

gtttggtcga tggtacagtg tcctgatgcc gccggaatat tcctttgttg gagagatcag 1560

ccggtggttt gggctagtgc gtggcggcca acgtaa 1596

<210> 12

<211> 531

<212> PRT

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥SHR蛋白

<400> 12

Met Asp Thr Leu Phe Arg Leu Val Ser Leu Gln Gln Gln Gln Gln Ser Asp

1 5 10 15

Ser Ile Ile Thr Asn Gln Ser Ser Leu Ser Arg Thr Ser Thr Thr Thr Thr

20 25 30

Gly Ser Pro Gln Thr Ala Tyr His Tyr Asn Phe Pro Gln Asn Asp Val Val

35 40 45 50

Glu Glu Cys Phe Asn Phe Phe Met Asp Glu Glu Asp Leu Ser Ser Ser Ser

55 60 65

Ser His His Asn His His Asn His Asn Asn Pro Asn Thr Tyr Tyr Ser Pro

70 75 80 85

Phe Thr Thr Pro Thr Gln Tyr His Pro Ala Thr Ser Ser Thr Pro Ser Ser

90 95 100

Thr Ala Ala Ala Ala Ala Leu Ala Ser Pro Tyr Ser Ser Ser Gly His His

105 110 115

Asn Asp Pro Ser Ala Phe Ser Ile Pro Gln Thr Pro Pro Ser Phe Asp Phe

120 125 130 135

Ser Ala Asn Ala Lys Trp Ala Asp Ser Val Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala

140 145 150

Phe Ser Asp Lys Asp Thr Ala Arg Ala Gln Gln Ile Leu Trp Thr Leu Asn

155 160 165 170

Glu Leu Ser Ser Pro Tyr Gly Asp Thr Glu Gln Lys Leu Ala Ser Tyr Phe

175 180 185

Leu Gln Ala Leu Phe Asn Arg Met Thr Gly Ser Gly Glu Arg Cys Tyr Arg

190 195 200

Thr Met Val Thr Ala Ala Ala Thr Glu Lys Thr Cys Ser Phe Glu Ser Thr

205 210 215 220

Arg Lys Thr Val Leu Lys Phe Gln Glu Val Ser Pro Trp Ala Thr Phe Gly

225 230 235

His Val Ala Ala Asn Gly Ala Ile Leu Glu Ala Val Asp Gly Glu Ala Lys

240 245 250 255

Ile His Ile Val Asp Ile Ser Ser Thr Phe Cys Thr Gln Trp Pro Thr Leu

260 265 270

Leu Glu Ala Leu Ala Thr Arg Ser Asp Asp Thr Pro His Leu Arg Leu Thr

275 280 285

Thr Val Val Val Ala Asn Lys Phe Val Asn Asp Gln Thr Ala Ser His Arg

290 295 300 305

Met Met Lys Glu Ile Gly Asn Arg Met Glu Lys Phe Ala Arg Leu Met Gly

310 315 320

Val Pro Phe Lys Phe Asn Ile Ile His His Val Gly Asp Leu Ser Glu Phe

325 330 335 340

Asp Leu Asn Glu Leu Asp Val Lys Pro Asp Glu Val Leu Ala Ile Asn Cys

345 350 355

Val Gly Ala Met His Gly Ile Ala Ser Arg Gly Ser Pro Arg Asp Ala Val

360 365 370

Ile Ser Ser Phe Arg Arg Leu Arg Pro Arg Ile Val Thr Val Val Glu Glu

375 380 385 390

Glu Ala Asp Leu Val Gly Glu Glu Glu Gly Gly Phe Asp Asp Glu Phe Leu

395 400 405

Arg Gly Phe Gly Glu Cys Leu Arg Trp Phe Arg Val Cys Phe Glu Ser Trp

410 415 420 425

Glu Glu Ser Phe Pro Arg Thr Ser Asn Glu Arg Leu Met Leu Glu Arg Ala

430 435 440

Ala Gly Arg Ala Ile Val Asp Leu Val Ala Cys Glu Pro Ser Asp Ser Thr

445 450 455

Glu Arg Arg Glu Thr Ala Arg Lys Trp Ser Arg Arg Met Arg Asn Ser Gly

460 465 470 475

Phe Gly Ala Val Gly Tyr Ser Asp Glu Val Ala Asp Asp Val Arg Ala Leu

480 485 490

Leu Arg Arg Tyr Lys Glu Gly Val Trp Ser Met Val Gln Cys Pro Asp Ala

495 500 505 510

Ala Gly Ile Phe Leu Cys Trp Arg Asp Gln Pro Val Val Trp Ala Ser Ala

515 520 525

Trp Arg Pro Thr

530

<210> 13

<211> 3042

<212> DNA

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥RBR基因

<400> 13

atggaagaag ttcagcctcc agtgaccccg cccattgaac caaatgggaa aagaagcgaa 60

gcctctctct tggacatatg cgagaaagtt ctgtctcttg atgggagcac ttgcgatgaa 120

gctttgaagt tgtttacaga aaccaaacga attttgtcag caagcatgtc taacattgga 180

agtggaacgc gggaagaagt agagaggttc tggtttgcgt ttattctcta ttcagtgaag 240

aggcttagtg tgagaaaaga agcggatggt ctgtcagtgt ctggtgataa tgagtttaat 300

ctatgtcaga tactgagggc tctgaagcta aatattgtgg atttttttaa agagttacct 360

cagtttgtgg tcaaggctgg atctgtgctg ggtgaacttt acggcgcaga ctgggagaac 420

agacttcagg caaaggaggt gcaggctaac tttgtgcatc ttagccttct aagtaaatac 480

tacaaacgtg ggttccggga attctttttg acatatgatg caaacgcaga aaagaactca 540

gcaaactctt ctacctattt gctggatagt tatcgttttg gatggctact ctttttggca 600

ctccgaaacc atgcgtttag tcgatttaag gacctcgtga catgctcaaa tggcgtagtt 660

tctatattgg ctattttgat catacatgtt ccttgtcggt ttagaaattt cagcatccaa 720

gattcttctc gctttgttaa gaaaggtgac aaaggtgtag acttggttgc atcactttgc 780

aagatatatg acgcctcaga agatgagttg aggatagtaa ttgacaaggc aaataatttg 840

gtagaaacca tactgaagaa aaagccatct ccagcatctg agtgccaaac tgacaagcta 900

gataatattg acccagatgg cttgacctac tttgaggatt tactggaaga gacgtccatc 960

tcaactagct taattacact tgaaaaggat tactatgatg gtaaaggcga acttgatgag 1020

agggtattca tcaatgaaga ggatagctta cttggatctg gaagcttatc tgcaggagct 1080

gttaatatta ctggtgttaa gaggaaaatt gatgctttga gctcacctgc aaggacattt 1140

ataagcccac tttctcctca taagtcgcct gctgctaaga caaatggtat tagcggtgct 1200

accaagttgg cagcaacacc agtgagcaca gcaatgacaa ctgccaagtg gctcaggact 1260

gtcatatccc cgcttctgcc aaaaccttct cctgggttgg aacatttcct taaatcatgt 1320

gatagggata taacaaatga cgtcacacga agagcacaca taatattgga agctattttc 1380

ccaaatagtt cccttggtgc ccaatgtgga ggtggaagtt tgcaagctgt tgacctgatg 1440

gatgacatat gggcagagca gcgcagatta gaagcttgta agttatacta cagagttctt 1500

gaggcaatgt gtaaagcaga agctcagatt ttgcatgcaa ataatctgaa ctctttattg 1560

acaaatgaga ggttccatag atgcatgctt gcttgctcag ctgaattggt actggctacc 1620

cacaaaacaa ttacaatgtt gttcccagct gttctggaga ggactgggat cacagccttt 1680

gatctcagca aggtaattga gagtttcata cgacatgaag attctctgcc tagagagttg 1740

agacgacatc tgaattcact ggaggaacgg cttctagaga gtatggtatg ggagaaaggc 1800

tcttcaatgt acaattctct gattgttgcc aggccatcgc ttgcattgga gataaatcag 1860

ctcggtttac tagctgaacc aatgccatct ctggatgcaa tcgcagcact tattaatttc 1920

tctgacggag caaatcatgc atcatctgta caaaagcatg aaacttgtcc aggacaaaat 1980

ggggggatta gatcgcccaa aagattatgt actgattacc gcagcattct agttgaacgc 2040

aattccttta catcaccagt aaaggatcgt ctgttggcct taggcaacgt taaatccaag 2100

atgctgccac ctccgttgca gtctgcattt gccagcccaa cacggcccaa cccaggaggt 2160

ggaggagaaa cttgtgcaga aactggaatc aatattttct tcacaaagat taataaattg 2220

gctgctgtaa gaatcaatgg aatggtggaa agactacaac tttcacagca aataagggag 2280

agtgtgtatt gtttcttcca acatgtactt gctcagcgga cttctctttt attcagtcga 2340

cacattgacc agatcattct ctgttgcttc tacggagtgg ccaagatatc ccaaatgagc 2400

ctgactttca gggaaatcat atacaactac cggaagcaac cacagtgtaa accattagtt 2460

ttccgcagcg tttatgtgga tgcgttacaa tgtcgccgtc aagggagaat agggccagat 2520

catgttgaca tcatcacatt ctacaatgaa atatttattc ctgccgtaaa gccgctgctg 2580

gtggagctag gtcctgtaag aaacgaccgg gctgtggaag ccaataataa gcctgaaggt 2640

caatgtcccg gatcgccaaa ggtgtctgtg tttccaagtg ttccagacat gtcccctaaa 2700

aaagtatctg cagtgcacaa tgtttatgtt tctcctcttc ggggatcaaa gatggatgct 2760

cttatttcac acagtacaaa gagttactat gcttgtgttg gagagagtac acatgcttac 2820

cagagccctt caaaggacct atctgccatc aacaaccgct tgaacaacag cagcagcaac 2880

cgcaagagga cgctaaactt tgacgcagaa gcagggatgg tcagcgattc catggtagca 2940

aatagcctta acctccaaaa ccaaaatcaa aaccaaaatg gaagcgatgc atcgtcctca 3000

ggtggtgccg caccccttaa aaccgagcca acagattcat ag 3042

<210> 14

<211> 1013

<212> PRT

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥RBR蛋白

<400> 14

Met Glu Glu Val Gln Pro Pro Val Thr Pro Pro Ile Glu Pro Asn Gly Lys

1 5 10 15

Arg Ser Glu Ala Ser Leu Leu Asp Ile Cys Glu Lys Val Leu Ser Leu Asp

20 25 30

Gly Ser Thr Cys Asp Glu Ala Leu Lys Leu Phe Thr Glu Thr Lys Arg Ile

35 40 45 50

Leu Ser Ala Ser Met Ser Asn Ile Gly Ser Gly Thr Arg Glu Glu Val Glu

55 60 65

Arg Phe Trp Phe Ala Phe Ile Leu Tyr Ser Val Lys Arg Leu Ser Val Arg

70 75 80 85

Lys Glu Ala Asp Gly Leu Ser Val Ser Gly Asp Asn Glu Phe Asn Leu Cys

90 95 100

Gln Ile Leu Arg Ala Leu Lys Leu Asn Ile Val Asp Phe Phe Lys Glu Leu

105 110 115

Pro Gln Phe Val Val Lys Ala Gly Ser Val Leu Gly Glu Leu Tyr Gly Ala

120 125 130 135

Asp Trp Glu Asn Arg Leu Gln Ala Lys Glu Val Gln Ala Asn Phe Val His

140 145 150

Leu Ser Leu Leu Ser Lys Tyr Tyr Lys Arg Gly Phe Arg Glu Phe Phe Leu

155 160 165 170

Thr Tyr Asp Ala Asn Ala Glu Lys Asn Ser Ala Asn Ser Ser Thr Tyr Leu

175 180 185

Leu Asp Ser Tyr Arg Phe Gly Trp Leu Leu Phe Leu Ala Leu Arg Asn His

190 195 200

Ala Phe Ser Arg Phe Lys Asp Leu Val Thr Cys Ser Asn Gly Val Val Ser

205 210 215 220

Ile Leu Ala Ile Leu Ile Ile His Val Pro Cys Arg Phe Arg Asn Phe Ser

225 230 235

Ile Gln Asp Ser Ser Arg Phe Val Lys Lys Gly Asp Lys Gly Val Asp Leu

240 245 250 255

Val Ala Ser Leu Cys Lys Ile Tyr Asp Ala Ser Glu Asp Glu Leu Arg Ile

260 265 270

Val Ile Asp Lys Ala Asn Asn Leu Val Glu Thr Ile Leu Lys Lys Lys Pro

275 280 285

Ser Pro Ala Ser Glu Cys Gln Thr Asp Lys Leu Asp Asn Ile Asp Pro Asp

290 295 300 305

Gly Leu Thr Tyr Phe Glu Asp Leu Leu Glu Glu Thr Ser Ile Ser Thr Ser

310 315 320

Leu Ile Thr Leu Glu Lys Asp Tyr Tyr Asp Gly Lys Gly Glu Leu Asp Glu

325 330 335 340

Arg Val Phe Ile Asn Glu Glu Asp Ser Leu Leu Gly Ser Gly Ser Leu Ser

345 350 355

Ala Gly Ala Val Asn Ile Thr Gly Val Lys Arg Lys Ile Asp Ala Leu Ser

360 365 370

Ser Pro Ala Arg Thr Phe Ile Ser Pro Leu Ser Pro His Lys Ser Pro Ala

375 380 385 390

Ala Lys Thr Asn Gly Ile Ser Gly Ala Thr Lys Leu Ala Ala Thr Pro Val

395 400 405

Ser Thr Ala Met Thr Thr Ala Lys Trp Leu Arg Thr Val Ile Ser Pro Leu

410 415 420 425

Leu Pro Lys Pro Ser Pro Gly Leu Glu His Phe Leu Lys Ser Cys Asp Arg

430 435 440

Asp Ile Thr Asn Asp Val Thr Arg Arg Ala His Ile Ile Leu Glu Ala Ile

445 450 455

Phe Pro Asn Ser Ser Leu Gly Ala Gln Cys Gly Gly Gly Ser Leu Gln Ala

460 465 470 475

Val Asp Leu Met Asp Asp Ile Trp Ala Glu Gln Arg Arg Leu Glu Ala Cys

480 485 490

Lys Leu Tyr Tyr Arg Val Leu Glu Ala Met Cys Lys Ala Glu Ala Gln Ile

495 500 505 510

Leu His Ala Asn Asn Leu Asn Ser Leu Leu Thr Asn Glu Arg Phe His Arg

515 520 525

Cys Met Leu Ala Cys Ser Ala Glu Leu Val Leu Ala Thr His Lys Thr Ile

530 535 540

Thr Met Leu Phe Pro Ala Val Leu Glu Arg Thr Gly Ile Thr Ala Phe Asp

545 550 555 560

Leu Ser Lys Val Ile Glu Ser Phe Ile Arg His Glu Asp Ser Leu Pro Arg

565 570 575

Glu Leu Arg Arg His Leu Asn Ser Leu Glu Glu Arg Leu Leu Glu Ser Met

580 585 590 595

Val Trp Glu Lys Gly Ser Ser Met Tyr Asn Ser Leu Ile Val Ala Arg Pro

600 605 610

Ser Leu Ala Leu Glu Ile Asn Gln Leu Gly Leu Leu Ala Glu Pro Met Pro

615 620 625

Ser Leu Asp Ala Ile Ala Ala Leu Ile Asn Phe Ser Asp Gly Ala Asn His

630 635 640 645

Ala Ser Ser Val Gln Lys His Glu Thr Cys Pro Gly Gln Asn Gly Gly Ile

650 655 660

Arg Ser Pro Lys Arg Leu Cys Thr Asp Tyr Arg Ser Ile Leu Val Glu Arg

665 670 675 680

Asn Ser Phe Thr Ser Pro Val Lys Asp Arg Leu Leu Ala Leu Gly Asn Val

685 690 695

Lys Ser Lys Met Leu Pro Pro Pro Leu Gln Ser Ala Phe Ala Ser Pro Thr

700 705 710

Arg Pro Asn Pro Gly Gly Gly Gly Glu Thr Cys Ala Glu Thr Gly Ile Asn

715 720 725 730

Ile Phe Phe Thr Lys Ile Asn Lys Leu Ala Ala Val Arg Ile Asn Gly Met

735 740 745

Val Glu Arg Leu Gln Leu Ser Gln Gln Ile Arg Glu Ser Val Tyr Cys Phe

750 755 760 765

Phe Gln His Val Leu Ala Gln Arg Thr Ser Leu Leu Phe Ser Arg His Ile

770 775 780

Asp Gln Ile Ile Leu Cys Cys Phe Tyr Gly Val Ala Lys Ile Ser Gln Met

785 790 795

Ser Leu Thr Phe Arg Glu Ile Ile Tyr Asn Tyr Arg Lys Gln Pro Gln Cys

800 805 810 815

Lys Pro Leu Val Phe Arg Ser Val Tyr Val Asp Ala Leu Gln Cys Arg Arg

820 825 830

Gln Gly Arg Ile Gly Pro Asp His Val Asp Ile Ile Thr Phe Tyr Asn Glu

835 840 845 850

Ile Phe Ile Pro Ala Val Lys Pro Leu Leu Val Glu Leu Gly Pro Val Arg

855 860 865

Asn Asp Arg Ala Val Glu Ala Asn Asn Lys Pro Glu Gly Gln Cys Pro Gly

870 875 880

Ser Pro Lys Val Ser Val Phe Pro Ser Val Pro Asp Met Ser Pro Lys Lys

885 890 895 900

Val Ser Ala Val His Asn Val Tyr Val Ser Pro Leu Arg Gly Ser Lys Met

905 910 915

Asp Ala Leu Ile Ser His Ser Thr Lys Ser Tyr Tyr Ala Cys Val Gly Glu

920 925 930 935

Ser Thr His Ala Tyr Gln Ser Pro Ser Lys Asp Leu Ser Ala Ile Asn Asn

940 945 950

Arg Leu Asn Asn Ser Ser Ser Asn Arg Lys Arg Thr Leu Asn Phe Asp Ala

955 960 965

Glu Ala Gly Met Val Ser Asp Ser Met Val Ala Asn Ser Leu Asn Leu Gln

970 975 980 985

Asn Gln Asn Gln Asn Gln Asn Gly Ser Asp Ala Ser Ser Ser Gly Gly Ala

990 995 1000

Ala Pro Leu Lys Thr Glu Pro Thr Asp Ser

1005 1010

<210> 15

<211> 1962

<212> DNA

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥SCR基因

<400> 15

atggcggaat ccggcgattt caacggtggt caacctcctc ctcatagtcc tctgagaaca 60

acttcttccg gtagtagcag cagcaacaac cgtggtcctc ctcctcctcc tcctcctcct 120

ttagtgatgg tgagaaaaag attagcttcc gagatgtctt ctaaccctga ctacaacaac 180

tcctctcgtc ctcctcgccg tgtctctcac cttcttgact ccaactacaa tactgtcaca 240

ccacaacaac caccgtctct tacggcggcg gctactgtat cttctcaacc aaacccacca 300

ctctctgttt gtggcttctc tggtcttccc gtttttcctt cagaccgtgg tggtcggaat 360

gttatgatgt ccgtacaacc aatggatcaa gactcttcat cttcttctgc ttcacctact 420

gtatgggttg acgccattat cagagacctt atccattcct caacttcagt ctctattcct 480

caacttatcc aaaacgttag agacattatc ttcccttgta acccaaatct cggtgctctt 540

cttgaataca ggctccgatc tctcatgctc cttgatcctt cctcttcctc tgacccttct 600

cctcaaactt tcgaacctct ctatcagatc tccaacaatc cttctcctcc acaacagcaa 660

cagcagcacc aacaacaaca acaacagcat aagcctcctc ctcctccgat tcagcagcaa 720

gaaagagaaa attcttctac cgatgcacca ccgcaaccag agacagtgac ggccactgtt 780

cccgccgtcc aaacaaatac ggcggaggct ttaagagaga ggaaggaaga gattaagagg 840

cagaagcaag acgaagaagg attacacctt ctcacattgc tgctacagtg tgctgaagct 900

gtctctgctg ataatctcga agaagcaaac aagcttcttc ttgagatctc tcagttatca 960

actccttacg ggacctcagc gcagagagta gctgcttact tctcggaagc tatgtcagcg 1020

agattactca actcgtgtct cggaatttac gcggctttgc cttcacggtg gatgcctcaa 1080

acgcatagct tgaaaatggt ctctgcgttt caggtcttta atgggataag ccctttagtg 1140

aaattctcac actttacagc gaatcaggcg attcaagaag catttgagaa agaagacagt 1200

gtacacatca ttgacttgga catcatgcag ggacttcaat ggcctggttt attccacatt 1260

cttgcttcta gacctggagg acctccacac gtgcgactca cgggacttgg tacttccatg 1320

gaagctcttc aggctacagg gaaacgtctt tcggatttcg cagataagct tggcctgcct 1380

tttgagttct gccctttagc tgagaaagtt ggaaacttgg acactgagag actcaatgtg 1440

aggaaaaggg aagctgtggc tgttcactgg cttcaacatt ctctttatga tgtcactggc 1500

tctgatgcac acactctctg gttactccaa agattagctc ctaaagttgt gacagtagtg 1560

gaacaagatt tgagccacgc tggttctttc ttaggaagat ttgtagaagc aatacattac 1620

tactctgcac tctttgactc actgggagca agctacggcg aagagagtga agagagacat 1680

gtcgtggaac agcagctatt atcgaaagag atacggaatg tattagcggt tggaggacca 1740

tcgagaagcg gtgaagtgaa gtttgagagc tggagggaga aaatgcaaca atgtgggttt 1800

aaaggtatat ctttagctgg aaatgcagct acacaagcga ctctactgtt gggaatgttt 1860

ccttcggatg gttacacttt ggttgatgat aatggtacac ttaagcttgg atggaaagat 1920

ctttcgttac tcactgcttc agcttggacg cctcgttctt ag 1962

<210> 16

<211> 653

<212> PRT

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥SCR蛋白

<400> 16

Met Ala Glu Ser Gly Asp Phe Asn Gly Gly Gln Pro Pro Pro His Ser Pro

1 5 10 15

Leu Arg Thr Thr Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Asn Asn Arg Gly Pro Pro

20 25 30

Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Val Met Val Arg Lys Arg Leu Ala Ser Glu

35 40 45 50

Met Ser Ser Asn Pro Asp Tyr Asn Asn Ser Ser Arg Pro Pro Arg Arg Val

55 60 65

Ser His Leu Leu Asp Ser Asn Tyr Asn Thr Val Thr Pro Gln Gln Pro Pro

70 75 80 85

Ser Leu Thr Ala Ala Ala Thr Val Ser Ser Gln Pro Asn Pro Pro Leu Ser

90 95 100

Val Cys Gly Phe Ser Gly Leu Pro Val Phe Pro Ser Asp Arg Gly Gly Arg

105 110 115

Asn Val Met Met Ser Val Gln Pro Met Asp Gln Asp Ser Ser Ser Ser Ser

120 125 130 135

Ala Ser Pro Thr Val Trp Val Asp Ala Ile Ile Arg Asp Leu Ile His Ser

140 145 150

Ser Thr Ser Val Ser Ile Pro Gln Leu Ile Gln Asn Val Arg Asp Ile Ile

155 160 165 170

Phe Pro Cys Asn Pro Asn Leu Gly Ala Leu Leu Glu Tyr Arg Leu Arg Ser

175 180 185

Leu Met Leu Leu Asp Pro Ser Ser Ser Ser Asp Pro Ser Pro Gln Thr Phe

190 195 200

Glu Pro Leu Tyr Gln Ile Ser Asn Asn Pro Ser Pro Pro Gln Gln Gln Gln

205 210 215 220

Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln His Lys Pro Pro Pro Pro Pro Ile Gln

225 230 235

Gln Gln Glu Arg Glu Asn Ser Ser Thr Asp Ala Pro Pro Gln Pro Glu Thr

240 245 250 255

Val Thr Ala Thr Val Pro Ala Val Gln Thr Asn Thr Ala Glu Ala Leu Arg

260 265 270

Glu Arg Lys Glu Glu Ile Lys Arg Gln Lys Gln Asp Glu Glu Gly Leu His

275 280 285

Leu Leu Thr Leu Leu Leu Gln Cys Ala Glu Ala Val Ser Ala Asp Asn Leu

290 295 300 305

Glu Glu Ala Asn Lys Leu Leu Leu Glu Ile Ser Gln Leu Ser Thr Pro Tyr

310 315 320

Gly Thr Ser Ala Gln Arg Val Ala Ala Tyr Phe Ser Glu Ala Met Ser Ala

325 330 335 340

Arg Leu Leu Asn Ser Cys Leu Gly Ile Tyr Ala Ala Leu Pro Ser Arg Trp

345 350 355

Met Pro Gln Thr His Ser Leu Lys Met Val Ser Ala Phe Gln Val Phe Asn

360 365 370

Gly Ile Ser Pro Leu Val Lys Phe Ser His Phe Thr Ala Asn Gln Ala Ile

375 380 385 390

Gln Glu Ala Phe Glu Lys Glu Asp Ser Val His Ile Ile Asp Leu Asp Ile

395 400 405

Met Gln Gly Leu Gln Trp Pro Gly Leu Phe His Ile Leu Ala Ser Arg Pro

410 415 420 425

Gly Gly Pro Pro His Val Arg Leu Thr Gly Leu Gly Thr Ser Met Glu Ala

430 435 440

Leu Gln Ala Thr Gly Lys Arg Leu Ser Asp Phe Ala Asp Lys Leu Gly Leu

445 450 455

Pro Phe Glu Phe Cys Pro Leu Ala Glu Lys Val Gly Asn Leu Asp Thr Glu

460 465 470 475

Arg Leu Asn Val Arg Lys Arg Glu Ala Val Ala Val His Trp Leu Gln His

480 485 490

Ser Leu Tyr Asp Val Thr Gly Ser Asp Ala His Thr Leu Trp Leu Leu Gln

495 500 505 510

Arg Leu Ala Pro Lys Val Val Thr Val Val Glu Gln Asp Leu Ser His Ala

515 520 525

Gly Ser Phe Leu Gly Arg Phe Val Glu Ala Ile His Tyr Tyr Ser Ala Leu

530 535 540

Phe Asp Ser Leu Gly Ala Ser Tyr Gly Glu Glu Ser Glu Glu Arg His Val

545 550 555 560

Val Glu Gln Gln Leu Leu Ser Lys Glu Ile Arg Asn Val Leu Ala Val Gly

565 570 575

Gly Pro Ser Arg Ser Gly Glu Val Lys Phe Glu Ser Trp Arg Glu Lys Met

580 585 590 595

Gln Gln Cys Gly Phe Lys Gly Ile Ser Leu Ala Gly Asn Ala Ala Thr Gln

600 605 610

Ala Thr Leu Leu Leu Gly Met Phe Pro Ser Asp Gly Tyr Thr Leu Val Asp

615 620 625

Asp Asn Gly Thr Leu Lys Leu Gly Trp Lys Asp Leu Ser Leu Leu Thr Ala

630 635 640 645

Ser Ala Trp Thr Pro Arg Ser

650

<210> 17

<211> 1401

<212> DNA

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥NUC基因

<400> 17

atgacaagtg aagttcttca aacaatctca agtggatcag gttttgctca gccacagagc 60

tcatcaaccc tggatcatga tgaatctctc atcaatcctc ctcttgttaa gaaaaagaga 120

aatctccctg gaaatcctga tccggaagct gaagtgatag ctttatcccc cacgaccttg 180

atggctacga accggttcct atgtgaggta tgtggcaaag gtttccaaag agaccaaaac 240

ttacagcttc atcggcgagg acataatctt ccatggaagt tgaagcagag gacaagcaaa 300

gaagtgagaa aacgtgtcta cgtttgcccc gagaagacat gtgtccacca tcactcctct 360

agagctctag gcgatctcac tggaatcaaa aagcattttt gccggaaaca cggggagaag 420

aagtggacgt gcgagaaatg tgctaagaga tacgcagtcc aatctgattg gaaagctcat 480

tccaagactt gtggtactag agagtaccgt tgcgattgtg gcaccatttt ctcaaggcga 540

gacagcttta tcactcatag agctttctgc gatgccttag cggaagaaac cgctaagata 600

aacgcagtgt ctcatctcaa cggtttagcc gcggctggag ccccaggatc agttaatctc 660

aactatcaat atctcatggg aacattcatc ccaccgcttc aaccatttgt accacaaccg 720

caaacaaatc caaaccatca tcatcaacat tttcagccac caacttcttc gtcgctctct 780

ctatggatgg gacaagatat cgcgccgcct caaccgcaac cggactacga ttgggttttt 840

ggaaacgcta aggcagcgtc tgcttgcatt gataataata atactcacga tgagcagatt 900

acgcaaaacg caaacgcaag tttgaccact accactactc tctctgcccc ttctttattc 960

agcagcgacc aaccacaaaa cgcaaacgca aattcaaacg tgaatatgtc cgcgacagct 1020

ttactacaga aagctgctga aattggcgct acttctacaa caaccgcagc gaccaatgac 1080

ccatcaacgt ttcttcaaag tttcccgctt aaatccaccg atcaaaccac cagttatgac 1141

agtggcgaaa agttttttgc tttgttcggg tctaacaaca acattgggtt aatgagtcgt 1200

agtcatgatc atcaagagat cgagaacgct agaaatgacg ttacggttgc gtctgccttg 1260

gatgaattac agaattaccc ttggaaacgt agaagagttg atggtggagg tgaagtgggt 1320

ggaggagggc aaactcggga tttcctcggg gttggtgtac aaacgttgtg ccatccatcg 1380

tctatcaatg gatggatttg a 1401

<210> 18

<211> 1134

<212> DNA

<213> 拟南芥（Arabidopsis thalianna）

<223> 拟南芥Actin2基因

<400> 18

atggctgagg ctgatgatat tcaaccaatc gtgtgtgaca atggtaccgg tatggtgaag 60

gctggatttg caggagatga tgctcccagg gctgtttttc ccagtgttgt tggtaggcca 120

agacatcatg gtgtcatggt tgggatgaac cagaaggatg catatgttgg tgatgaagca 180

caatccaaga gaggtattct taccttgaag tatcctattg agcatggtgt tgttagcaac 240

tgggatgata tggaaaagat ctggcatcac actttctaca atgagcttcg tattgctcct 300

gaagagcacc ctgttcttct taccgaggct cctcttaacc caaaggccaa cagagagaag 360

atgactcaaa tcatgtttga gacctttaac tctcccgcta tgtatgtcgc catccaagct 420

gttctctcct tgtacgccag tggtcgtaca accggtattg tgctggattc tggtgatggt 480

gtgtctcaca ctgtgccaat ctacgagggt ttctctcttc ctcatgccat cctccgtctt 540

gaccttgctg gacgtgacct tactgattac ctcatgaaga tccttacaga gagaggttac 600

atgttcacca caacagcaga gcgggaaatt gtaagagaca tcaaggagaa gctctccttt 660

gttgctgttg actacgagca ggagatggaa acctcaaaga ccagctcttc catcgagaag 720

aactatgaat tacccgatgg gcaagtcatc acgattggtg ctgagagatt cagatgccca 780

gaagtcttgt tccagccctc gtttgtggga atggaagctg ctggaatcca cgagacaacc 840

tataactcaa tcatgaagtg tgatgtggat atcaggaagg atctgtacgg taacattgtg 900

ctcagtggtg gaaccactat gttctcaggt atcgctgacc gtatgagcaa agaaatcaca 960

gcacttgcac caagcagcat gaagattaag gtcgttgcac cacctgaaag gaagtacagt 1020

gtctggatcg gtggttccat tcttgcttcc ctcagcacat tccagcagat gtggatctcc 1080

aaggccgagt atgatgaggc aggtccagga atcgttcaca gaaaatgttt ctaa 1134

Claims (10)

1.植物根尖干细胞不对称分裂调控通路的抑制剂，其特征在于所述的抑制剂含有柚皮素。

2.根据权利要求1所述的抑制剂，其特征在于其以柚皮素为唯一活性成分。

3.根据权利要求1或2所述的抑制剂，其特征在于所述的抑制剂中柚皮素的浓度为50μM。

4.根据权利要求1或2或3所述的抑制剂，其特征在于所述的柚皮素促进植物根尖干细胞ACD过程负调控蛋白RBR和SCR结合。

5.根据权利要求1或2或3所述的抑制剂，其特征在于所述的柚皮素抑制植物根尖干细胞ACD过程正调控蛋白SHR和SCR结合。

6.根据权利要求1或2或3所述的抑制剂，其特征在于所述的柚皮素通过促进RBR和SCR蛋白结合形成ACD非活性调控复合体RBR-SCR，并抑制活性调控复合体SCR-SHR形成，进而抑制ACD下游关键基因NUC表达。

7.柚皮素在制备抑制ACD活性调控复合体SCR-SHR形成的抑制剂中的应用。

8.柚皮素在制备抑制ACD活性调控复合体SCR-SHR形成的抑制剂中的应用，其特征在于所述的抑制剂以柚皮素为唯一活性成分，浓度为50μM。

9.柚皮素在制备抑制NUC基因表达的抑制剂中的应用。

10.柚皮素在制备抑制NUC基因表达的促进剂中的应用，所述的促进剂以柚皮素为唯一活性成分，浓度为50μM。