CN107356589A - 一种利用磺化反应检测单羟酚类衍生物的试剂制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种利用磺化反应检测单羟酚类衍生物的试剂制备方法,本发明所述的单羟酚类衍生物包括酪氨酸、对羟基苯丙氨酸、色氨酸和5‑羟吲哚乙酸。所述单羟酚类衍生物尿液检测试剂,是包括硫酸、硫酸汞、氯磺酸、环丁砜组成的水溶液。所述的配置方法包括:A溶液的制备,B溶液的制备,C溶液的制备。最后将三个溶液按照一定比例混合。本发明提供的技术方案,原材料价格低廉而且易获取,制备过程简单,试剂稳定性好,具有测试准确、灵敏度高和特异性好等特点,检测时反应时间短,结果易于判断,特别适合于大规模的人群普查及癌症临床辅助诊断和疗效动态检查。
Description
技术领域
本发明涉及一种检测单羟酚衍生物的试剂制备方法,尤指利用硫酸的磺化反应来检测尿液中单羟酚衍生物的试剂及其制备方法。所述的单羟酚类衍生物包括酪氨酸、对羟基苯丙氨酸、色氨酸和5-羟吲哚乙酸。所述单羟酚类衍生物尿液检测试剂,是包括硫酸、硫酸汞、氯磺酸、环丁砜组成的水溶液。所述的配置方法包括:A溶液的制备,B溶液的制备,C溶液的制备,最后将三个溶液按照一定比例混合。本发明提供的技术方案,原材料价格低廉而且易获取,制备过程简单,试剂稳定性号,具有测试准确、灵敏度高和特异性好等特点,检测时反应时间短,结果易于判断,特别适合于大规模的人群普查及癌症临床辅助诊断和疗效动态检查。
背景技术
根据全国肿瘤登记中心发布的《2015中国肿瘤登记年报》显示,我国每年新发肿瘤病例约为429万例,平均每天11753人,每分钟有8人被诊断为癌症。人体所患的恶性肿瘤中,约有75%以上发生在身体易于查出或发现的部位。有效的早诊意识和措施、肿瘤高危人群的筛查、精确诊断设备的应用等,都有助于肿瘤的早发现。世界卫生组织的研究认为:目前1/3的癌症是可以预防的;1/3的癌症可以通过积极治疗而延长患者生命;1/3的癌症是可以通过早期发现、早期诊断、早期治疗而痊愈的。其实,如果能做到“三早”,即早发现、早诊断、早规范化治疗,部分癌症治愈率可以达到90%以上。
尿单羟酚衍生物是一组氨基酸(酪氨酸、色氨酸)及其代谢产物(对羟基苯丙酮酸,5-羟吲哚乙酸)的总称。研究证实,当人体有癌细胞活动时,细胞的异常增殖引发应激反应引起人体肾上腺皮质激素(单羟酚类物质)分泌增加,肾上腺皮质激素(单羟酚类物质)的增加会抑制人体的免疫功能,从而导致抗癌免疫力下降,同时体内特异氨基酸代谢异常升高,尿液中单羟酚衍生物的含量远远超过正常人。传统的氧化法测定用高浓度的硫酸和硝酸作为溶剂,再加入高浓度的汞离子和亚汞离子,配置过程会产生大量的有毒气体,用户在使用过程中一旦试剂溢出,很容易灼伤皮肤,另外反应产物也不易处理,会给环境带来较大危害,同时由于试剂容易受到尿液中复杂成分的干扰导致假阳性,大大限制了其应用价值。
发明内容
针对上述方法的不足,本发明提供了一种利用磺化反应检测单羟酚类衍生物的试剂制备方法,用以解决试剂配置和用后处理问题和准确性低的问题。
本发明的技术方案是:利用硫酸的磺化反应,将单羟酚类衍生物的酚羟基进行临位磺化,磺化产物再与二价汞离子发生络合反应,形成红色的络合物。通过引入氯磺酸,可以提高磺化反应的效率。如果磺化反应发生在非临位,则会生产黄色络合物,而临位发生磺化,才能生成红色络合物。因此通过引入环丁砜,可以提高酚羟基临位磺化的产出比例,进而提高测值的准确性。
反应原理:第一步:单羟酚类衍生物+硫酸→单羟酚临位磺化产物
第二步:单羟酚临位磺化产物+二价汞离子→红色络合物
单羟酚类代谢物尿液检测试剂的制备方法,包括如下步骤:
I.称取硫酸汞溶于5~20%质量浓度的硫酸水溶液中获得A溶液,溶液中硫酸汞含量为50-500g/l;
2.量取一定体积的氯磺酸溶于去离子水中获得B溶液,溶液中氯磺酸含量为5-100ml/l;
3.量取一定体积的环丁砜溶于去离子水中获得C溶液,溶液中环丁砜含量为5-100ml/l;
4.混合:将制备的A、B、C溶液按1:(0.5~1.6):(0.01~0.2)体积比混合,即得所述单羟酚类衍生物尿液检测试剂。
试剂稳定性:室温环境(4℃-40℃)可以保存2年,稳定性好。
制定相应的比色卡,在试剂中加入五倍体积的尿液,观察络合物的颜色,跟标准比色卡对比即可判断是否健康或者患有癌症。
产业上的可利用性
本发明提供操作简单,易于实现的一种利用磺化反应检测单羟酚类衍生物的试剂制备。
具体实时方式
实施例1
I.称取硫酸汞溶于10%质量浓度的硫酸水溶液中获得A溶液,溶液中硫酸汞含量为400g/l;
2.量取一定体积的氯磺酸溶于去离子水中获得B溶液,溶液中氯磺酸含量为 100ml/l;
3.量取一定体积的环丁砜溶于去离子水中获得C溶液,溶液中环丁砜含量为100ml/l;
4.混合:将制备的A、B、C溶液按1:1.6:0.2体积比混合,即得所述单羟酚类衍生物尿液检测试剂。
试剂稳定性:室温环境(4℃-40℃)可以保存2年,稳定性好。
制定相应的比色卡,在试剂中加入五倍体积的尿液,观察络合物的颜色,跟标准比色卡对比即可判断是否健康或者患有癌症。
实施例2
I.称取硫酸汞溶于20%质量浓度的硫酸水溶液中获得A溶液,溶液中硫酸汞含量为500g/l;
2.量取一定体积的氯磺酸溶于去离子水中获得B溶液,溶液中氯磺酸含量为50ml/l;
3.量取一定体积的环丁砜溶于去离子水中获得C溶液,溶液中环丁砜含量为60l/l;
4.混合:将制备的A、B、C溶液按1:1.2:0.15体积比混合,即得所述单羟酚类衍生物尿液检测试剂。
试剂稳定性:室温环境(4℃-40℃)可以保存2年,稳定性好。
制定相应的比色卡,在试剂中加入五倍体积的尿液,观察络合物的颜色,跟标准比色卡对比即可判断是否健康或者患有癌症。
Claims (7)
1.采用的是硫酸的磺化反应检测尿液中单羟酚类衍生物。
2.检测试剂是硫酸、硫酸汞、氯磺酸、环丁砜组成的水溶液。
3.根据权利要求l和2所述一种尿液单羟酚类衍生物检测试剂,其特征在于,所述水溶液中硫酸汞的浓度为50-500g/L,氯磺酸浓度为5-100ml/L,环丁砜浓度为5-100ml/L。
4.权利要求3所述单羟酚类代谢物尿液检测试剂的制备方法,包括如下步骤:
(I)A溶液的制备:称取硫酸汞溶于一定浓度的硫酸水溶液中获得A溶液;
(2)B溶液的制备:量取一定体积的氯磺酸溶于双蒸水中获得B溶液;
(3)C溶液的制备:量取一定体积的环丁砜溶于双蒸水中获得C溶液;
(4)混合:将制备的A、B、C溶液按1:(0.5~1.6):(0.01~0.2)体积比混合,即得所述单羟酚类衍生物尿液检测试剂。
5.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,所述A溶液中硫酸汞含量为50-500g/l。
6.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,所述B溶液中氯磺酸含量为5-100ml/l。
7.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,所述C溶液中环丁砜含量为5-100ml/l。
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