CN107347640A - 一种植物组织培养过程的消毒装置及方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种植物组织培养过程的消毒装置及方法，依据传统的消毒工具，设计了便捷的消毒工具，以期达到简单省时的效果，并能在植物组织培养过程中大规模推广使用。利用多孔筛对不同材料进行一次同步消毒，保证消毒时间一致，并且可以对材料进行充分晾干，以及保护材料不受损伤；多孔筛上可标注编号（例1‑9），可以防止不同材料的混乱而造成试验差错。因而应用本发明可以对大量外植体进行同步消毒，操作简单省时，保护材料，可以应用于大规模的植物组织培养，对其试验研究具有重大意义。

Description

一种植物组织培养过程的消毒装置及方法

技术领域

本发明属于植物组织培养的技术领域，涉及到外植体消毒的方法，具体是一种植物组织培养过程中，对大量不同材料进行简单省时的消毒方法。

背景技术

植物组织培养是根据植物细胞的全能性，分离植物体的器官或组织的一部分外植体接种到培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其生长发育，并再生成完整植株的过程。其中器官培养是指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。

培养过程中需要消毒处理，处理过程为75%酒精30s；7%次氯酸钠15min；无菌水冲洗3-5次，每次3min。传统方法是应用多个小烧杯，在消毒过程中每次加入定量试剂，在实际操作过程中耗时较多且方法繁琐。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种简单、省时、准确的外植体消毒的方法，该法可真实有效地应用于大规模植物组织培养过程，有利于加快植物组织培养的试验消毒步骤。为此本发明设计了消毒装置对材料进行一次性同步消毒，不仅简单方便以节省时间，还可以减少外植体在消毒过程中的损伤。

实现上述发明的技术方案是：

本发明涉及一种植物组织培养过程的消毒装置，所述装置包括两种消毒工具：摆放不同材料外植体的多孔筛，盛放不同消毒试剂的多孔储液盒。

所述多孔筛被分割为个数>1的小隔间，小隔间之间相互隔开，小隔间底部为进出消毒试剂的过滤网；所述多孔储液盒被分割为个数>1的小隔间，小隔间之间相互隔开，大小与多孔筛相互配合，保证多孔筛每个小隔间可以放置于储液盒对应的隔间内。

进一步地，优选方案为所述多孔筛为九孔筛，可以一次性对9份试验材料进行处理（也可根据实际需求设计>1孔的多孔筛）。

更进一步地，所述多孔筛为九宫格正方形结构，每个小隔间用于容纳试验材料，小隔间之间相互隔开，底部为进出消毒试剂的过滤网，试验过程中只需要将试验材料放置于过小隔间的滤网上；所述储液盒也为九宫格正方形结构，每个小隔间用于容纳消毒试剂，大小与多孔筛相互配合，保证多孔筛每个小隔间可以放置于储液盒对应的隔间内。

更进一步地，所述多孔筛侧边还设置有一个把手1，用于消毒过程中对试验材料的浸泡与晾干。

本发明还提供上述装置的植物组织培养过程的消毒方法，包括以下步骤：

步骤一：将不同材料依据编号放入多孔筛的小隔间中；

步骤二：向对应的储液盒小隔间中依次加入消毒液；

步骤三：将多孔筛依次放入装有不同消毒液的储液盒内，对不同材料依次进行消毒过程。

步骤一中，所述操作如下：对九份不同材料的植物器官，按照多孔筛的编号将其依次放小隔间中。

步骤二中，在工作台上摆放五份多孔储液盒，依次加入75%酒精，7%次氯酸钠，3盒无菌水，以便后续消毒处理。

步骤三中，消毒处理过程中直接将多孔筛放入75%酒精储液盒，浸泡30s后拎出轻微抖动晾干；再放入7%次氯酸钠储液盒，15min后拎出轻微抖动晾干；最后放入无菌水中，清洗三次，每次3min；最终得到消毒后的外植体，以用于后续组织培养。

本发明的优点如下：

针对植物组织培养的优点与价值，以及传统消毒方法繁琐特点的局限性，本发明建立了一种植物组织培养过程中的消毒装置及方法，设计了两种消毒工具，分别是摆放不同材料外植体的多孔筛和盛放不同消毒试剂的多孔储液盒。所述消毒装置对材料进行一次性同步消毒，此发明不仅简单方便以节省时间，还可以减少外植体在消毒过程中的损伤。与传统消毒方法相比较，本发明具有简单、省时、准确的特点，因而本发明可以推广应用于大规模的植物组织培养的消毒过程。

附图说明

图1是传统小烧杯消毒方法示意图。

图2是本发明消毒方法摆放材料的多孔筛侧视图。

图3是本发明消毒方法盛放消毒试剂的储液盒侧视图。

图4是本发明消毒方法盛放消毒试剂的储液盒俯视图。

具体实施方式

下面以传统花药培养方案和本发明为实施例，进一步阐述本发明对消毒的消毒方法

对比例1.传统花药培养方法

于超净工作台上放置9个小烧杯，将9份试验材料放入大小一致的9个小烧杯中，依次向9个烧杯中加入75%酒精，轻轻晃动每个烧杯，使花蕾在酒精下处理充分，10s后开始倒出第一个烧杯中酒精，并使酒精倒出干净。随后向9个烧杯中加入7%次氯酸钠，轻轻晃动每个烧杯，15min后开始倒出第一个烧杯中次氯酸钠。最后用无菌水冲洗每个烧杯中材料3次。消毒处理后将花蕾中花药接到MS培养基上培养。

如图1，显示了传统消毒方法步骤，通过记录与观察，对9份试验材料整个消毒过程的时间约40-45min；在试验过程中，第一个烧杯的浸泡时长与最后一个烧杯存在差异；在倒出消毒试剂时会造成试验材料的损伤。

实施例2本发明的消毒方法

一种植物组织培养过程的消毒装置，所述装置包括两种消毒工具：摆放不同材料外植体的多孔筛，盛放不同消毒试剂的多孔储液盒。所述多孔筛被分割为个数>1的小隔间，小隔间之间相互隔开，小隔间底部为进出消毒试剂的过滤网；所述多孔储液盒被分割为个数>1的小隔间，小隔间之间相互隔开，大小与多孔筛相互配合，保证多孔筛每个小隔间可以放置于储液盒对应的隔间内。

如图2，为九孔筛，可以一次性对9份试验材料进行处理（也可根据实际需求设计≥1孔的多孔筛）。所述多孔筛为九宫格正方形结构，每个小隔间用于容纳试验材料，小隔间之间相互隔开，底部为进出消毒试剂的过滤网，试验过程中只需要将试验材料放置于过小隔间的滤网上。所述多孔筛侧边还设置有一个把手1，用于消毒过程中对试验材料的浸泡与晾干。

如图3，本发明还提供多个与多孔筛相对应的储液盒，所述储液盒也为九宫格正方形结构，每个小隔间用于容纳消毒试剂，大小与多孔筛相互配合，保证多孔筛每个小隔间可以放置于储液盒对应的隔间内，试验过程中将消毒试剂倒入盒中，然后将图2的多孔筛相对应的放入盒中。

消毒过程中，将图2的多孔筛放入图3的储液盒，消毒试剂从多孔筛底部的过滤网渗入，从而浸泡试验材料，通过把手可轻微晃动，使试验材料消毒充分，消毒时间结束后提起把手，消毒试剂从过滤网渗出回到储液盒，抖动把手使消毒试剂清除干净，随后放入下一步装有消毒试剂的储液盒中。

经过统计分析，整个过程的消毒时间约为30min，同时消毒过程操作简单、方便，对试验材料具有一定的保护性。

实施例3

一种植物组织培养过程中的消毒方法，包括以下四个步骤：

步骤一：将不同材料依据编号放入多孔筛中；

步骤二：向对应的储液盒中依次加入消毒液；

步骤三：对不同材料依次进行消毒过程；

步骤四：对传统消毒方法和本发明方法进行比较分析。

步骤一中，具体操作如下：以九孔的消毒筛为例，提取需要组织培养的九份不同材料的植物器官，依据多孔筛的编号依次放入不同材料

步骤二中，在工作台上摆放五份多孔储液盒，依次加入75%酒精，7%次氯酸钠，3盒无菌水，以便后续消毒处理。

步骤三中，消毒处理过程中直接将九孔筛放入75%酒精储液盒，浸泡30s后拎出轻微抖动晾干；再放入7%次氯酸钠储液盒，15min后拎出轻微抖动晾干；最后放入无菌水中，清洗三次，每次3min，最终得到消毒后的外植体，以用于后续组织培养。

步骤四中，与传统消毒方法比较，在处理九份不同材料外植体时，传统方法是依次在烧杯中加入消毒液，消毒结束后在缓慢倒出消毒液，传统方法在消毒过程中不尽操作繁琐，消耗大量时间，而且在倒出消毒液时，往往出现消毒液不完全倒出和倒出外植体材料的现象。而本发明可以防止消毒液清理不干净和外植体倒出的现象，并且操作简单省时，适合于大量材料消毒过程。试验研究表明，在处理九份不同材料时，本发明方法比传统方法可以省时10-15min。

比较分析

通过比较分析，本发明对消毒的消毒方法具有以下优点：

（1）本发明对植物组织培养的外植体材料进行同时消毒，整个消毒过程的时间约30min，此改进方法省时10-15min。

（2）本发明可以保护外植体完整性，使材料不受损伤，对试验提供了一定的保障。

综上所述，本发明对消毒的消毒方法具有可实施性，对植物组织培养的试验过程具有一定的重要意义，可以在大规模的植物组织培养的试验上进行推广利用，对其研究具有重大意义。

Claims (8)

1.一种植物组织培养过程的消毒装置，其特征在于，所述装置包括两种消毒工具：摆放不同材料外植体的多孔筛，盛放不同消毒试剂的多孔储液盒；

所述多孔筛被分割为个数>1的小隔间，小隔间之间相互隔开，小隔间底部为进出消毒试剂的过滤网；所述多孔储液盒被分割为个数>1的小隔间，小隔间之间相互隔开，大小与多孔筛相互配合，保证多孔筛每个小隔间可以放置于储液盒对应的隔间内。

2.根据权利要求1所述的消毒装置，其特征在于，所述多孔筛为九孔筛，可以一次性对9份试验材料进行处理。

3.根据权利要求2所述的消毒装置，其特征在于，所述多孔筛为九宫格正方形结构，每个小隔间用于容纳试验材料，小隔间之间相互隔开，底部为进出消毒试剂的过滤网，试验过程中只需要将试验材料放置于过小隔间的滤网上；所述储液盒也为九宫格正方形结构，每个小隔间用于容纳消毒试剂，大小与多孔筛相互配合，保证多孔筛每个小隔间可以放置于储液盒对应的隔间内。

4.根据权利要求1~3任一所述的消毒装置，其特征在于，所述多孔筛侧边还设置有一个把手1，用于消毒过程中对试验材料的浸泡与晾干。

5.基于权利要求1所述装置的植物组织培养过程的消毒方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤一：将不同材料依据编号放入多孔筛的小隔间中；

步骤二：向对应的储液盒小隔间中依次加入消毒液；

步骤三：将多孔筛依次放入装有不同消毒液的储液盒内，对不同材料依次进行消毒过程。

6.如权利要求5所述的消毒方法，其特征在于，步骤一中，所述操作如下：对九份不同材料的植物器官，按照多孔筛的编号将其依次放小隔间中。

7.如权利要求5所述的消毒方法，其特征在于，步骤二中，在工作台上摆放五份多孔储液盒，依次加入75%酒精，7%次氯酸钠，3盒无菌水，以便后续消毒处理。

8.如权利要求5所述的消毒方法，其特征在于，步骤三中，消毒处理过程中直接将多孔筛放入75%酒精储液盒，浸泡30s后拎出轻微抖动晾干；再放入7%次氯酸钠储液盒，15min后拎出轻微抖动晾干；最后放入无菌水中，清洗三次，每次3min；最终得到消毒后的外植体，以用于后续组织培养。