CN107311775A - 一种使用糖滤泥制备的微生物肥料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种使用糖滤泥制备的微生物肥料及其制备方法。所述微生物肥料选用耐受性能较好的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌,对糖滤泥进行发酵,将难处理的糖滤泥作为碳源和微量元素添加剂,生产出能够应用于作物的微生物肥料,不仅处理了糖滤泥,还得到了适用于作物,特别是甜菜的微生物肥料,所述微生物肥料能够显著提高作物的产量。另外,在对混合菌种进行发酵培养的过程中,加入了黄芪粉,黄芪粉能够提高枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的活菌数和芽胞形成率,减少在发酵完成后的干燥过程中的失活,以保证所述微生物肥料的活性。

Description

一种使用糖滤泥制备的微生物肥料及其制备方法
技术领域
本发明属于微生物肥料技术领域,具体涉及一种使用糖滤泥制备的微生物肥料及其制备方法。
背景技术
甘蔗和甜菜制糖过程中,甘蔗汁和甜菜汁通过澄清、由压滤机或真空吸滤机过滤后的残渣叫糖滤泥。糖滤泥含有粗纤维、糖分,凝结胶体、蛋白质、磷酸钙,还夹带随原料带来的砂泥,这些成分多来自甘蔗和甜菜本身,而钙质物多数是甘蔗汁和甜菜汁澄清处理时加入的,除此以外,滤泥还含有少量的铁、锌等微量元素。
但糖滤泥由于其水分含量高,一般都在70-80%之间,无法直接利用,加之其中还含有较多的残糖和蛋白质等营养物质,颗粒小、粘度高、透气性差,极易变质发臭,难以储存,处理利用难度大,基本只适合用作有机肥料原料,经济价值相对较低,目前基本没有得到规范的工厂化环保处理和资源化利用,而是大量地直接露天堆放于田地里,既污染地下水、地表水,又污染大气,已经成为当地生态环境最为主要的有机污染源之一。
目前,有采用生物发酵的方法将糖滤泥转化为生物肥料的技术,但是由于糖滤泥的含糖量高且成分复杂,在发酵过程中容易产生严重的臭味,导致出现严重的二次环境污染问题,达不到环保的要求;并且还存在发酵效率低、发酵周期长、产品肥效低等问题。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题,本发明提供了一种使用糖滤泥制备的微生物肥料及其制备方法。所述微生物肥料选用耐受性能较好的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌,对糖滤泥进行发酵,得到了能够应用于作物的微生物肥料。
本发明的目的之一是提供一种使用糖滤泥制备的微生物肥料。
本发明的再一目的是提供一种使用糖滤泥制备微生物肥料的方法。
根据本发明的使用糖滤泥制备的微生物肥料,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在35-37℃的条件下静置培养4-6天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在29-32℃的条件下进行活化培养28-42小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥6-10%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸镁0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.1-7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7-9%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、魔芋粉0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.0-7.4;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,在27-33℃、发酵压力为0.03-0.04MPa、通气量为0.6-0.8v/v·min、搅拌转速为160-240rpm的条件下培养14-16小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3-5%、糖滤泥20-25%、牛肉膏0.2-0.5%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、磷酸氢二钾0.02-0.03%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.1-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在27-33℃、通气量为0.8-1.0v/v·min、搅拌转速为160-210rpm的条件下培养8-12天,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥15-25%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.5-1.3%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%、硫酸镁0.1-1%、硫酸锰0.1-1%、粒径为1-75um的黄芪粉0.6-0.8%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液干燥后过筛,制备成粒径小于1.2mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
根据本发明的微生物肥料,其中,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在121-123℃灭菌12-14分钟,然后冷却至25-35℃。
根据本发明的微生物肥料,其中,步骤B、培养种子菌液中,将步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的25-45%。
根据本发明的微生物肥料,其中,步骤C、发酵培养中,发酵培养过程中,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均90%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到350亿/克以上时,得到混合菌发酵液。
根据本发明的微生物肥料,其中,步骤C、发酵培养中,所述发酵培养基还包括0.1-0.3%的消泡剂。
根据本发明的微生物肥料,其中,步骤D、干燥制粒中,在进风温度为75-82℃的沸腾床中干燥至水分≤8%,然后过0.8-1.2mm的筛网,即为所述微生物肥料。
根据本发明的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,包括以下步骤:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在35-37℃的条件下静置培养4-6天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在29-32℃的条件下进行活化培养28-42小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥6-10%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸镁0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.1-7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7-9%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、魔芋粉0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.0-7.4;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,在27-33℃、发酵压力为0.03-0.04MPa、通气量为0.6-0.8v/v·min、搅拌转速为160-240rpm的条件下培养14-16小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3-5%、糖滤泥20-25%、牛肉膏0.2-0.5%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、磷酸氢二钾0.02-0.03%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.1-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在27-33℃、通气量为0.8-1.0v/v·min、搅拌转速为160-210rpm的条件下培养8-12天,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥15-25%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.5-1.3%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%、硫酸镁0.1-1%、硫酸锰0.1-1%、粒径为1-75um的黄芪粉0.6-0.8%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液干燥后过筛,制备成粒径小于1.2mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
根据本发明的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其中,所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7-9%、牛肉膏0.2-0.3%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.4-1.2%、氯化钠0.3-0.5%、硫酸镁0.3-0.4%、琼脂3-4%,余量为水,pH值为7.1-7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7.5-8.5%、牛肉膏0.2-0.3%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.4-1.2%、魔芋粉0.3-0.4%、琼脂3-4%,余量为水,pH值为7.0-7.4。
根据本发明的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其中,所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3.5-4.5%、糖滤泥22-23%、牛肉膏0.3-0.4%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.4-1.2%、磷酸氢二钾0.022-0.028%、磷酸二氢钾0.022-0.028%、氯化钠0.2-0.5%、硫酸亚铁0.3-0.8%,余量为水,pH值为7.0-7.5。
根据本发明的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其中,所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥17-23%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.7-1.1%、磷酸二氢钾0.022-0.028%、氯化钠0.3-0.5%、硫酸亚铁0.3-0.8%、硫酸镁0.3-0.8%、硫酸锰0.3-0.8%、粒径为20-60um的黄芪粉0.65-0.75%,余量为水,pH值为7.0-7.5。
本发明的有益效果为:
1、所述微生物肥料选用耐受性能较好的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌,对糖滤泥进行发酵,将难处理的糖滤泥作为碳源和微量元素添加剂,生产出能够应用于作物的微生物肥料,不仅处理了糖滤泥,还得到了适用于作物,特别是甜菜的微生物肥料,所述微生物肥料能够显著提高作物的产量。另外,在对混合菌种进行发酵培养的过程中,加入了黄芪粉,黄芪粉能够提高枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的活菌数和芽胞形成率,减少在发酵完成后的干燥过程中的失活,以保证所述微生物肥料的活性。
2、所述微生物肥料,为颗粒状,方便保存、运输和施用。
3、所述使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,对枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌依次进行激活、培养种子菌液和发酵培养,根据枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的不同生长状态选用不同的培养基和培养条件,从而快速、低成本地得到所述微生物肥料。
4、在对枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌进行培养之前,对培养基进行灭菌处理,以避免培养基被杂菌污染,影响发酵的正常进行。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式,都属于本发明所保护的范围。
在本发明中,若非特指,所有的份、百分比均为重量单位,所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。下述实施例中的方法,如无特别说明,均为本领域的常规方法。
实施例1
一种使用糖滤泥制备的微生物肥料,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在35℃的条件下静置培养6天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在29℃的条件下进行活化培养42小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥6%、牛肉膏0.4%、酵母浸出物0.3%、蛋白胨1.5%、氯化钠0.2%、硫酸镁0.5%、琼脂2.5%,余量为水,pH值为7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7%、牛肉膏0.4%、酵母浸出物0.3%、蛋白胨1.5%、魔芋粉0.2%、琼脂4.5%,余量为水,pH值为7.0;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的45%;在27℃、发酵压力为0.04MPa、通气量为0.6v/v·min、搅拌转速为240rpm的条件下培养14小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉5%、糖滤泥20%、牛肉膏0.5%、酵母浸出物0.3%、蛋白胨1.5%、磷酸氢二钾0.02%、磷酸二氢钾0.03%、氯化钠0.1%、硫酸亚铁1%,余量为水,pH值为7.0;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在33℃、通气量为0.8v/v·min、搅拌转速为210rpm的条件下培养8天,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均90%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到350亿/克以上时,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥25%、酵母浸出物0.3%、蛋白胨1.3%、磷酸二氢钾0.02%、氯化钠0.6%、硫酸亚铁0.1%、硫酸镁1%、硫酸锰0.1%、消泡剂0.3%、粒径为1um的黄芪粉0.8%,余量为水,pH值为7.0;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液在进风温度为82℃的沸腾床中干燥至水分≤8%,然后过0.8mm的筛网,制备成粒径小于0.8mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
其中,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在123℃灭菌12分钟,然后冷却至35℃。
实施例2
一种使用糖滤泥制备的微生物肥料,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在37℃的条件下静置培养4天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在32℃的条件下进行活化培养28小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥10%、牛肉膏0.1%、酵母浸出物0.5%、蛋白胨0.1%、氯化钠0.6%、硫酸镁0.2%、琼脂4.5%,余量为水,pH值为7.1;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥9%、牛肉膏0.1%、酵母浸出物0.5%、蛋白胨0.1%、魔芋粉0.5%、琼脂2.5%,余量为水,pH值为7.4;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的25%;在33℃、发酵压力为0.03MPa、通气量为0.8v/v·min、搅拌转速为160rpm的条件下培养16小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3%、糖滤泥25%、牛肉膏0.2%、酵母浸出物0.5%、蛋白胨0.1%、磷酸氢二钾0.03%、磷酸二氢钾0.02%、氯化钠0.6%、硫酸亚铁0.1%,余量为水,pH值为7.5;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在27℃、通气量为1.0v/v·min、搅拌转速为160rpm的条件下培养12天,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均92%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到360亿/克以上时,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥15%、酵母浸出物0.5%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.03%、氯化钠0.2%、硫酸亚铁1%、硫酸镁0.1%、硫酸锰1%、消泡剂0.1%、粒径为75um的黄芪粉0.6%,余量为水,pH值为7.5;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液在进风温度为75℃的沸腾床中干燥至水分≤5%,然后过1.2mm的筛网,制备成粒径小于1.2mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
其中,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在121℃灭菌14分钟,然后冷却至25℃。
实施例3
一种使用糖滤泥制备的微生物肥料,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在36℃的条件下静置培养5天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在31℃的条件下进行活化培养35小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥8%、牛肉膏0.25%、酵母浸出物0.4%、蛋白胨0.8%、氯化钠0.4%、硫酸镁0.35%、琼脂3.5%,余量为水,pH值为7.3;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥8%、牛肉膏0.25%、酵母浸出物0.4%、蛋白胨0.8%、魔芋粉0.35%、琼脂3.5%,余量为水,pH值为7.2;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的35%;在30℃、发酵压力为0.035MPa、通气量为0.7v/v·min、搅拌转速为200rpm的条件下培养15小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉4%、糖滤泥22%、牛肉膏0.35%、酵母浸出物0.4%、蛋白胨0.8%、磷酸氢二钾0.025%、磷酸二氢钾0.025%、氯化钠0.35%、硫酸亚铁0.55%,余量为水,pH值为7.2;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在30℃、通气量为0.9v/v·min、搅拌转速为185rpm的条件下培养10天,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均91%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到370亿/克以上时,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥20%、酵母浸出物0.4%、蛋白胨0.9%、磷酸二氢钾0.025%、氯化钠0.4%、硫酸亚铁0.55%、硫酸镁0.55%、硫酸锰0.55%、消泡剂0.2%、粒径为40um的黄芪粉0.7%,余量为水,pH值为7.2;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液在进风温度为78℃的沸腾床中干燥至水分≤6%,然后过1mm的筛网,制备成粒径小于1mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
其中,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在122℃灭菌13分钟,然后冷却至30℃。
实施例4
一种使用糖滤泥制备的微生物肥料,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在37℃的条件下静置培养4天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在30℃的条件下进行活化培养38小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7%、牛肉膏0.3%、酵母浸出物0.35%、蛋白胨1.2%、氯化钠0.3%、硫酸镁0.4%、琼脂3%,余量为水,pH值为7.4;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7.5%、牛肉膏0.3%、酵母浸出物0.35%、蛋白胨1.2%、魔芋粉0.3%、琼脂4%,余量为水,pH值为7.1;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的40%;在29℃、发酵压力为0.035MPa、通气量为0.75v/v·min、搅拌转速为220rpm的条件下培养14小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉4.5%、糖滤泥22%、牛肉膏0.4%、酵母浸出物0.35%、蛋白胨1.2%、磷酸氢二钾0.022%、磷酸二氢钾0.028%、氯化钠0.2%、硫酸亚铁0.8%,余量为水,pH值为7.2;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在32℃、通气量为0.8v/v·min、搅拌转速为200rpm的条件下培养8天,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均92%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到355亿/克以上时,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥23%、酵母浸出物0.35%、蛋白胨1.1%、磷酸二氢钾0.022%、氯化钠0.5%、硫酸亚铁0.3%、硫酸镁0.8%、硫酸锰0.3%、粒径为60um的黄芪粉0.65%,余量为水,pH值为7.4;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液在进风温度为80℃的沸腾床中干燥至水分≤7%,然后过1.1mm的筛网,制备成粒径小于1.1mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
其中,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在121℃灭菌14分钟,然后冷却至25℃。
实施例5
一种使用糖滤泥制备的微生物肥料,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在35℃的条件下静置培养6天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在31℃的条件下进行活化培养32小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥9%、牛肉膏0.2%、酵母浸出物0.45%、蛋白胨0.4%、氯化钠0.5%、硫酸镁0.3%、琼脂4%,余量为水,pH值为7.2;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥8.5%、牛肉膏0.2%、酵母浸出物0.45%、蛋白胨0.4%、魔芋粉0.4%、琼脂3%,余量为水,pH值为7.3;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的30%;在31℃、发酵压力为0.035MPa、通气量为0.65v/v·min、搅拌转速为180rpm的条件下培养16小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3.5%、糖滤泥23%、牛肉膏0.3%、酵母浸出物0.45%、蛋白胨0.4%、磷酸氢二钾0.028%、磷酸二氢钾0.022%、氯化钠0.5%、硫酸亚铁0.3%,余量为水,pH值为7.4;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在28℃、通气量为1.0v/v·min、搅拌转速为170rpm的条件下培养12天,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均91%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到360亿/克以上时,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥17%、酵母浸出物0.45%、蛋白胨0.7%、磷酸二氢钾0.028%、氯化钠0.3%、硫酸亚铁0.8%、硫酸镁0.3%、硫酸锰0.8%、粒径为20um的黄芪粉0.75%,余量为水,pH值为7.2;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液在进风温度为77℃的沸腾床中干燥至水分≤8%,然后过0.9mm的筛网,制备成粒径小于0.9mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
其中,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在123℃灭菌12分钟,然后冷却至35℃。
试验例
本试验例为对所述微生物肥料进行的肥效试验。
1.试验设计
本实验例设置4个处理组,每个处理组采用如下处理:
处理组1:实施例3所述的微生物肥料50kg/667m2,随基肥一起施入。
处理组2:灭活的所述微生物肥料50kg/667m2,随基肥一起施入。
处理组3:市场其它同类产品50kg/667m2,随基肥一起施入。
对照组(CK):只施基肥。
2.试验作物及检测项目
试验作物:甜菜KWS9442,由德国KWS种子公司育成;
检测项目:块根单株重量、亩产量和块根含糖量;
3.试验结果
试验检测结果如表1所示。
表1:试验结果表
检测项目 处理组1 处理组2 处理组3 处理组4
块根单株重量(kg) 0.93 0.88 0.82 0.77
亩产量(kg) 5964 5730 5682 5419
块根含糖量(%) 16.6 16.2 15.7 15.4
从试验结果能够看出,处理组1的亩产量与处理组2、处理组3、处理组4相比,分别增产4.08%、4.96、10.1%;块根单株重量分别提高5.68%、13.4%、20.8%,块根含糖量分别提高0.4、0.9和1.2个百分点,说明所述微生物肥料能够显著提高甜菜的块根单株重量、亩产量和块根含糖量。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (10)

1.一种使用糖滤泥制备的微生物肥料,其特征在于,所述微生物肥料由包括以下步骤的方法制备:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在35-37℃的条件下静置培养4-6天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在29-32℃的条件下进行活化培养28-42小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥6-10%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸镁0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.1-7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7-9%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、魔芋粉0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.0-7.4;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,在27-33℃、发酵压力为0.03-0.04MPa、通气量为0.6-0.8v/v·min、搅拌转速为160-240rpm的条件下培养14-16小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3-5%、糖滤泥20-25%、牛肉膏0.2-0.5%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、磷酸氢二钾0.02-0.03%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.1-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在27-33℃、通气量为0.8-1.0v/v·min、搅拌转速为160-210rpm的条件下培养8-12天,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥15-25%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.5-1.3%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%、硫酸镁0.1-1%、硫酸锰0.1-1%、粒径为1-75um的黄芪粉0.6-0.8%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液干燥后过筛,制备成粒径小于1.2mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
2.根据权利要求1所述的微生物肥料,其特征在于,所述枯草激活培养基、胶质激活培养基、灭菌培养基和发酵培养基在使用前均需经过杀菌处理,所述杀菌处理为:将培养基在121-123℃灭菌12-14分钟,然后冷却至25-35℃。
3.根据权利要求1所述的微生物肥料,其特征在于,步骤B、培养种子菌液中,将步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,灭菌培养基占发酵容器容积的25-45%。
4.根据权利要求1所述的微生物肥料,其特征在于,步骤C、发酵培养中,发酵培养过程中,镜检发酵物料,当发酵物料中枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均90%以上形成芽孢,且发酵物料中活菌数达到350亿/克以上时,得到混合菌发酵液。
5.根据权利要求1所述的微生物肥料,其特征在于,步骤C、发酵培养中,所述发酵培养基还包括0.1-0.3%的消泡剂。
6.根据权利要求1所述的微生物肥料,其特征在于,步骤D、干燥制粒中,在进风温度为75-82℃的沸腾床中干燥至水分≤8%,然后过0.8-1.2mm的筛网,即为所述微生物肥料。
7.一种使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、激活枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌:将枯草芽孢杆菌接种在枯草激活培养基上没在35-37℃的条件下静置培养4-6天,得到激活的枯草芽孢杆菌;将胶质芽胞杆菌接种在胶质激活培养基上,在29-32℃的条件下进行活化培养28-42小时,得到激活的胶质芽孢杆菌;
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥6-10%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸镁0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.1-7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7-9%、牛肉膏0.1-0.4%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、魔芋粉0.2-0.5%、琼脂2.5-4.5%,余量为水,pH值为7.0-7.4;
B、培养种子菌液:将步骤步骤A得到的激活的枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌混合后接种至灭菌培养基中,在27-33℃、发酵压力为0.03-0.04MPa、通气量为0.6-0.8v/v·min、搅拌转速为160-240rpm的条件下培养14-16小时,得到种子菌液;
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3-5%、糖滤泥20-25%、牛肉膏0.2-0.5%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.1-1.5%、磷酸氢二钾0.02-0.03%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.1-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
C、发酵培养:将步骤B得到的种子菌液接种至发酵培养基中,在27-33℃、通气量为0.8-1.0v/v·min、搅拌转速为160-210rpm的条件下培养8-12天,得到混合菌发酵液;
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥15-25%、酵母浸出物0.3-0.5%、蛋白胨0.5-1.3%、磷酸二氢钾0.02-0.03%、氯化钠0.2-0.6%、硫酸亚铁0.1-1%、硫酸镁0.1-1%、硫酸锰0.1-1%、粒径为1-75um的黄芪粉0.6-0.8%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
D、干燥制粒:将步骤C得到的混合菌发酵液干燥后过筛,制备成粒径小于1.2mm的颗粒,即为所述微生物肥料。
8.根据权利要求7所述的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其特征在于,
所述枯草激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7-9%、牛肉膏0.2-0.3%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.4-1.2%、氯化钠0.3-0.5%、硫酸镁0.3-0.4%、琼脂3-4%,余量为水,pH值为7.1-7.5;
所述胶质激活培养基由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥7.5-8.5%、牛肉膏0.2-0.3%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.4-1.2%、魔芋粉0.3-0.4%、琼脂3-4%,余量为水,pH值为7.0-7.4。
9.根据权利要求7所述的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其特征在于,
所述灭菌培养基由以下重量百分数的组分制成:豆粕粉3.5-4.5%、糖滤泥22-23%、牛肉膏0.3-0.4%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.4-1.2%、磷酸氢二钾0.022-0.028%、磷酸二氢钾0.022-0.028%、氯化钠0.2-0.5%、硫酸亚铁0.3-0.8%,余量为水,pH值为7.0-7.5。
10.根据权利要求7所述的使用糖滤泥制备微生物肥料的方法,其特征在于,
所述发酵培养基主要由以下重量百分数的组分制成:糖滤泥17-23%、酵母浸出物0.35-0.45%、蛋白胨0.7-1.1%、磷酸二氢钾0.022-0.028%、氯化钠0.3-0.5%、硫酸亚铁0.3-0.8%、硫酸镁0.3-0.8%、硫酸锰0.3-0.8%、粒径为20-60um的黄芪粉0.65-0.75%,余量为水,pH值为7.0-7.5。
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