CN111362751B - 一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于肥料领域,具体涉及一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥及制备方法。本发明所提供的菌肥包括20~60份芽孢杆菌类微生物菌粉、20~30份有机物、20~30份无机物、工业废渣及牲畜粪便共10~20份。本发明的菌肥中,采用了胶质芽孢杆菌菌粉、巨大芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉所组成的芽孢杆菌类微生物菌粉,具有很高的抗逆能力和抗菌防病作用。本发明使用方法所生产的菌肥,能够从根本上改善人参根际的微生态环境,所获得的人参其整株鲜重、干重以及根鲜重、根干重显著的高于各对比例;这说明通过本发明的微生物菌肥,改善了人参生长的微生态环境,对于促进其整株及根部生长,具有重要的积极的作用。

Description

一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥及其制备方法
技术领域
本发明属于肥料领域,具体涉及一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥,还涉及上述菌肥的制备方法。
背景技术
人参是名贵中药材,具有微温、补气、生津安神、益气等功效。随着健康和谐理念的发展及市场需求的增长,人工栽培人参的规模逐渐扩大,在人参种植过程中,人参锈腐病菌(Cylindrocarpondestructans)、人参菌核病菌(Sclerotiniaschinseng)、人参立枯病菌(Rhizoctoniasolani)、人参根腐病菌(Fusarium solani)以及人参黑斑病菌(Alternariapanax)是主要病害。长期以来人们依赖化学农药对人参土传病害进行防治,但一则化学农药难以从根本上解决病害,二则化学农药的长期使用和不合理使用会导致人参农药残留超标、人参品质下降、环境的污染和破坏,以及病原菌产生抗药性等不良后果。
CN101747095A披露了一种人参、西洋参微生物多抗菌肥,其特征在于:它由泾阳细黄链霉菌和木霉混合制成,其中泾阳细黄链霉菌和木霉的重量份数比为2∶3~7∶3。
该文献中表1所披露的方案较佳的是试验号1号,人参的出苗率达到70%,发病率为6.67%;此外,2~5中,发病率达到了26~46%,发病率相当高;表4中,发病率在38~56%之间。可见上述的文件中人参的发病率仍然较高。如何提高出苗率同时降低发病率,是亟待解决的问题。
CN1854109A公开了一种人参生物复合菌肥,其特征在于它由以下重量百分比的原料制成:有机肥26~39%,草碳土粉2.4~3.6%,磷矿石粉2%~3%,钙镁磷矿石粉2~3%份,熟石灰粉0.3~0.5%,山地有益菌土8~13.4%,EM增殖液1.3~3.2%,阔树叶粉6.4~9.6%,草木灰0.4~0.6%,水32~48%;所述的山地有益菌土为:阔叶树下腐殖土7.2~10.8%,骨粉0.3~1.8%,炕洞灰0.2~0.8%;所述的EM增殖液为:EM原露0.1~0.3%,红糖0.1~0.3%,土豆淀粉0.3~1%,豆浆0.8~1.6%。
CN1432549A披露了一种人参生物复合菌肥,其配制成份是:a、有机肥260-390;b、草碳粉24-36;c、磷矿石粉、钙镁磷矿粉40-60;d、熟石灰粉3-5;e、山地有益菌土80-134;f、EM增殖液13-32;g、阔树叶粉64-96;h、草木灰4-6;i、净水320-480。
上述的两篇专利文献其主要目的在于,解除土壤中农药化肥残留,改善参产品品质,提高其绿色化程度,但是关于是否解决了上述的问题,文献中并没有相关的数据来披露。并且关于如何提高人参专用复合微生物菌肥的抗病率,以及提高其出苗率,上述的专利文献也并未披露。
因此,需要发明一种具有良好的生防功效、利用这些拮抗微生物对人参土传病害进行生物防治,能够从根本上改善人参根际的微生态环境,无毒、无污染的人参专用的复合微生物抗病促生菌肥。
发明内容
为了解决上述的技术问题,本发明提供了一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥,还提供了上述菌肥的制备方法。
据相关报道,芽孢杆菌属微生物,尤其是枯草芽孢杆菌对人参土传病害菌具有良好的生防功效,利用这些拮抗微生物对人参土传病害进行生物防治,能够从根本上改善人参根际的微生态环境,无毒、无污染,是防治人参土传害的一条有效途径。
芽孢杆菌属微生物是土壤和植物微生态区系的优势生物种群,具有很高的抗逆能力和抗菌防病作用。其生长周期短,发酵成本低,以芽孢状态施用时环境适应性好,萌发率高,是理想的生防微生物。
本发明的菌肥包括芽孢杆菌类微生物菌粉、有机质、无机质、工业废渣、牲畜粪便。
上述的菌肥包括20~60份芽孢杆菌类微生物菌粉、20~30份有机物、20~30份无机物、工业废渣和/或牲畜粪便10~20份。
芽孢杆菌类微生物菌粉包括3~10份胶质芽孢杆菌菌粉、3~10份巨大芽孢杆菌菌粉、5~20份枯草芽孢杆菌菌粉、5~20份地衣芽孢杆菌菌粉。
上述的芽孢杆菌类微生物菌粉的制备方法如下:
(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于试管中,灭菌,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,培养;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,灭菌,制成平板,空培养,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,培养;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,灭菌,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,摇床培养;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培,培养;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养,发酵结束,添加赋形剂,直接喷雾干燥。
本发明所使用的芽孢杆菌,对土传病害菌有较明显的抑制作用,可以有效预防人参锈腐病菌、人参菌核病菌、人参立枯病菌、人参根腐病菌以及人参黑斑病菌等病害的发生,降低发病几率。均具有不同程度的土壤微生态调节、生物刺激素代谢以及解磷解钾等功效。作为生物肥料施用,抗病效果持久且绿色安全。
本发明所添加的各类有机质、无机质,可以作为常规化肥的补充,以及所施用的芽孢杆菌他抱萌发和繁殖的营养基质。
优选的,上述的芽孢杆菌类微生物菌粉的制备方法如下:
(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于20×20cm的试管中,装液量6~10mL,121℃灭菌25~35min,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,35~39℃培养22~26小时;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,121℃灭菌25~35min后,制成平板,经35~39℃空培养22~26小时后,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,35~39℃倒置培养过夜;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,装液量18~22%,121℃灭菌25~35min,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,35~39℃,180~220rpm摇床培养16~20小时;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培,培养温度35~39℃,通气比0.5~1.5,搅拌转速180~220rpm,培养16~20小时;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养温度37℃,通气比1.0~1.5,搅拌转速200rpm,至芽孢形成90%以上时,发酵结束,添加20%赋形剂,直接喷雾干燥。
更优选的,上述的芽孢杆菌类微生物菌粉的制备方法如下:
(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于20×20cm的试管中,装液量8mL,121℃灭菌30min,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,37℃培养24小时;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,121℃灭菌30min后,制成平板,经37℃空培养24小时后,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,37℃倒置培养过夜;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,装液量20%,121℃灭菌30min,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,37℃,200rpm摇床培养18小时;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培,培养温度37℃,通气比0.5~1.5,搅拌转速200rpm,培养18小时;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养温度37℃,通气比1.0~1.5,搅拌转速200rpm,至芽孢形成90%以上时,发酵结束,添加20%赋形剂,直接喷雾干燥。
有机物包括麦麸、秸秆、豆粕、酒渣、玉米芯中的至少一种。
无机物包括尿素、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硼砂中的至少一种。
上述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥的制备方法,包括以下的步骤:
(1)取20~60份芽孢杆菌类微生物菌粉、20~30份有机物、20~30份无机物、工业废渣及牲畜粪便共10~20份;
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,37~42℃下干燥,获得粉状肥料。
上述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥的制备方法,包括以下的步骤:
(1)取40份芽孢杆菌类微生物菌粉、20份麦麸、30份无机物、工业废渣及牲畜粪便共10份;
胶质芽孢杆菌菌粉5份、巨大芽孢杆菌菌粉5份、枯草芽孢杆菌菌粉20份、地衣芽孢杆菌菌粉10份;
无机物如下:尿素10份、硫酸镁4份、硫酸亚铁3份、硫酸锌3份、硼砂10份
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,40℃下干燥,获得粉状复合微生物抗病促生菌肥。
本发明的菌肥使用方法:在人参生长期施用,施用方式为地下灌施,频率每生长周期(一半6个月)2-3次,一般施用量为50公斤每帘(约15平米),根据人参生长年限增加提高施肥量。
本发明的有益效果在于:
(1)本发明的菌肥中,采用了胶质芽孢杆菌菌粉、巨大芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉所组成的芽孢杆菌类微生物菌粉,具有很高的抗逆能力和抗菌防病作用,可使人参在生长中病害发生率从2年生第一次施用时发病率6.67%降低到第三次施用时发病率仅为3.33%;
对于3年生的人参,从第一次施用时发病率为5.00%,直至第三次施用时发病率保持在5.00%;
4年生的人参,经三次施肥之后,发病率控制在10%左右;这说明本发明的菌肥对于人参土传病害菌具有良好的生防功效;
(2)本发明使用方法所生产的菌肥,能够从根本上改善人参根际的微生态环境,所获得的人参其整株鲜重、干重以及根鲜重、根干重显著的高于各对比例;这说明通过本发明的微生物菌肥,改善了人参生长的微生态环境,对于促进其整株及根部生长,具有重要的积极的作用;
(3)本发明的菌肥,来源于工业废渣及牲畜粪便,所采用的机物为麦麸、秸秆、豆粕、酒渣、玉米芯等,上述的原料来源广泛,成本低廉;所以本发明的菌肥整体上生产成本低廉;
(4)本发明的菌肥对环境友好,安全性高,无毒,是人参生长期理想的抗病复合肥。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明,以便本领域的技术人员更了解本发明,但并不因此限制本发明。
实施例1
巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法如下:
(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于20×20cm的试管中,装液量8mL,121℃灭菌30min,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,37℃培养24小时;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,121℃灭菌30min后,制成平板。经37℃空培养24小时后,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,37℃倒置培养过夜;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,装液量20%,121℃灭菌30min,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,37℃,200rpm摇床培养18小时;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培。培养温度37℃,通气比1.2左右,搅拌转速200rpm,培养18小时;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养温度37℃,通气比1.2左右,搅拌转速200rpm,至芽孢形成90%以上时,发酵结束。添加20%赋形剂,直接喷雾干燥;
通过梯度稀释法进行菌活计数,计数结果为3.1×109cfu/mL。
其他芽孢杆菌(胶质芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉)按上述工艺步骤及参数进行发酵。
实施例2
人参专用的复合微生物抗病促生菌肥的制备方法,包括以下的步骤:
(1)按以下的重量份数准备原料:
微生物菌粉40份;胶质芽孢杆菌菌粉5份、巨大芽孢杆菌菌粉5份、枯草芽孢杆菌菌粉20份、地衣芽孢杆菌菌粉10份;
有机物(麦麸)20份;
无机物(尿素10份、硫酸镁4份、硫酸亚铁3份、硫酸锌3份、硼砂10份)30份;
牲畜粪便10份;
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,于40℃干燥,获得粉状人参专用的复合微生物抗病促生菌肥。
实施例3
与实施例2的不同在于,(1)按以下的重量份数准备原料:
微生物菌粉60份;其中胶质芽孢杆菌菌粉10份、巨大芽孢杆菌菌粉10份、枯草芽孢杆菌菌粉20份、地衣芽孢杆菌菌粉20份;
有机物(玉米芯)20份;
无机物(尿素10份、硫酸镁4份、硫酸亚铁3份、硫酸锌3份、硼砂10份)30份;
牲畜粪便10份;
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,于40℃干燥,获得粉状人参专用的复合微生物抗病促生菌肥。
实施例4
与实施例2的不同在于,(1)按以下的重量份数准备原料:
微生物菌粉20份;其中胶质芽孢杆菌菌粉5份、巨大芽孢杆菌菌粉5份、枯草芽孢杆菌菌粉5份、地衣芽孢杆菌菌粉5份;
有机物(酒渣)25份;
无机物(尿素5份、硫酸镁4份、硫酸亚铁3份、硫酸锌3份、硼砂10份)25份;
牲畜粪便10份;
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,于40℃干燥,获得粉状人参专用的复合微生物抗病促生菌肥。
实施例5
本发明的菌肥使用方法:在人参生长期施用,施用方式为地下灌施,频率每生长周期(一半6个月)2-3次,一般施用量为50公斤每帘(约15平米),根据人参生长年限增加提高施肥量。
实施例6
关于本发明,发明人做了如下的对照,详见对比例1~8,具体如下:
对比例1
等量清水对照。
对比例2
等量的市售生物肥。
对比例3
在对比例2的基础上添加多菌灵稀释液。
对比例4
与实施例2的不同在于,减少微生物菌粉的用量,(1)按以下的重量份数准备原料:
微生物菌粉10份;其中胶质芽孢杆菌菌粉2份、巨大芽孢杆菌菌粉3份、枯草芽孢杆菌菌粉2份、地衣芽孢杆菌菌粉3份;其余与实施例2相同。
对比例5
与实施例2的不同在于,(1)按以下的重量份数准备原料:胶质芽孢杆菌菌粉40份,其余与实施例2相同。
对比例6
与实施例2的不同在于,(1)按以下的重量份数准备原料:巨大芽孢杆菌菌粉40份,其余与实施例2相同。
对比例7
与实施例2的不同在于,(1)按以下的重量份数准备原料:枯草芽孢杆菌菌粉40份,其余与实施例2相同。
对比例8
与实施例2的不同在于,(1)按以下的重量份数准备原料:地衣芽孢杆菌菌粉40份,其余与实施例2相同。
各实施例与对比例的促生效果和抗病效果分析如下:
实验对象:实施例2~4、对比例1~8。
取老参地土壤,灭菌后与处理条件2:1比例充分混合,填装于适宜体积的花盆中。其中处理条件分别为实施例2、对比例2以及对比例1。每组条件设置20个平行。取人参种植基地3年生人参苗,随机移栽于花盆中。待人参苗生长30天后,从每组分别随机抽取5株人参苗,小心将整株挖出,洗去浮土,测量各项数据进行的对照。结果如表1。
表1复合菌肥对人参的促生作用
处理条件 整株鲜重(g) 整株干重(g) 根鲜重(g) 根干重(g)
实施例2 12.82±0.74 5.62±0.07 5.81±0.49 2.59±0.52
实施例3 12.81±0.14 5.58±0.23 5.69±0.32 2.45±0.47
实施例4 12.26±0.11 5.44±0.25 5.53±0.35 2.23±0.24
对比例1 8.38±0.19 1.95±0.46 2.13±0.16 0.84±0.25
对比例2 11.40±0.35 4.82±0.75 5.33±0.72 1.98±0.33
对比例3 11.87±0.24 4.93±0.84 5.49±0.26 2.04±0.17
对比例4 12.02±0.35 5.13±0.75 5.54±0.72 2.28±0.33
对比例5 11.84±0.36 4.98±0.42 5.16±0.29 1.86±0.78
对比例6 11.92±0.36 5.12±0.25 5.21±0.32 1.79±0.24
对比例7 12.16±0.36 5.09±0.37 5.14±0.47 1.97±0.63
对比例8 12.07±0.36 4.87±0.24 5.26±0.38 2.06±0.37
从以上表1中的数据可以看出,相比对比例1中的清水对照,对比例2中的市售生物肥对于人参的生长具有促进作用,表现在人参的整株鲜重、整株干重以及根鲜重、根干重都较对比例1有显著的提高;
对比例3中加入了多菌灵,上述的指标较对比例2略好;
对比例4中减少了微生物菌粉的用量,结果人参的整株鲜重、整株干重以及根鲜重、根干重都较实施例2~4要明显的偏低;
对比例5~8中仅采用本发明中所提供的某一种菌粉,结果人参的整株鲜重、整株干重以及根鲜重、根干重都要显著的低于实施例2~4;
由此可见,芽孢杆菌菌粉在人参的生长中,具有良好的促生功效,较一般的生物肥具有明显的优势。
实施例7
抗病复合菌肥对人参病害的田间防治试验
实验对象:实施例3、对比例3、对比例1;
在平原田块土地上,选择2年生、3年生、4年生人参进行复合肥抗病试验。人参采用随机区间排列,每小区种植20株人参,设置3组重复。人参开始发病时,对处理组人参灌施复合肥(50公斤每帘),以100毫升多菌灵可溶液的500倍稀释液灌根为对照,以清水灌根为空白对照。每隔15天灌施一次,共施用3次。每次使用完毕的3天后检查发病率。结果如表2。
表2复合菌肥对人参土传病害的抗病试验
Figure BDA0002464964600000131
Figure BDA0002464964600000141
结果表明,复合肥和多菌灵对人参病害均有一定的抗病效果,能够将发病率降低50%左右。同时由于施用量固定,没有随人参年份而增加用量,因此2年份、3年份、4年份人参发病率逐渐升高。从以上的对比来看,本发明中的复合菌肥在抗病能力表现上要远远的优于对比例1、3。
对于种植1年后人参后土壤物理性状是否有改变,本发明人进行了如下的实验:
表3施用菌肥对土壤物理性状的影响
项目 容重(g/cm<sup>-3</sup>) 总孔度(%) 含水量(%) 有机质(g/kg<sup>-1</sup>)
实施例2 0.89 59.6 35.7 46.8
实施例3 0.91 59.3 35.5 45.9
实施例4 0.94 58.6 34.8 45.1
对比例1 1.16 52.3 30.9 40.4
对比例2 1.03 56.7 32.1 44.3
对比例3 1.04 56.4 32.5 44.1
对比例4 0.99 57.9 33.3 44.0
对比例5 0.97 57.4 32.6 44.2
对比例6 1.01 55.1 33.4 43.9
对比例7 0.96 56.9 33.7 43.9
对比例8 1.03 55.2 32.8 43.6
从以上表3中的数据可以看出,实施例2~4中的土壤容重较低,对比例1中的土壤容重最高;对比例2~3中采用的市售生物肥,土壤容重略高于实施例2~4;
从总孔度来看,实施例2~4中的总孔度较高,对比例1中土壤总孔度较远远低于实施例2~4,对比例4~8中的总孔度低于实施例2~4,这说明本发明促生菌肥的使用可以大大疏松土壤,使得土壤中总孔度增加,透气性提高;单一的芽孢杆菌对于疏松土壤有一定的效果,但是总体效果不如实施例2~4。
并且,本发明实施例2~4中的含水量以及有机质含量较高,可能是由于本发明的菌粉作用于土壤所带来的,本发明中菌肥的施用加速了土壤中有机物质的分解,使得土壤中的有机质增加,为人参的生长提供了良好的环境。

Claims (6)

1.一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥,其特征在于,所述的菌肥由20~60份芽孢杆菌类微生物菌粉、20~30份有机物、20~30份无机物、10~20份牲畜粪便组成;
其中,芽孢杆菌类微生物菌粉由3~10份胶质芽孢杆菌菌粉、3~10份巨大芽孢杆菌菌粉、5~20份枯草芽孢杆菌菌粉、5~20份地衣芽孢杆菌菌粉组成;
有机物选自麦麸、秸秆、豆粕、酒渣、玉米芯中的至少一种;
无机物包括尿素、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硼砂中的至少一种。
2.如权利要求1所述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥,其特征在于,所述的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法如下:
(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于试管中,灭菌,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,培养;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,灭菌,制成平板,空培养,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,培养;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,灭菌,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,摇床培养;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培,培养;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养,发酵结束,添加赋形剂,直接喷雾干燥;
胶质芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉按上述工艺步骤及参数进行发酵。
3.如权利要求1所述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥,其特征在于,所述的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法如下:(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于20×20cm的试管中,装液量6~10mL,121℃灭菌25~35min,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,35~39℃培养22~26小时;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,121℃灭菌25~35min后,制成平板,经35~39℃空培养22~26小时后,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,35~39℃倒置培养过夜;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,装液量18~22%,121℃灭菌25~35min,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,35~39℃,180~220rpm摇床培养16~20小时;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培,培养温度35~39℃,通气比0.5~1.5,搅拌转速180~220rpm,培养16~20小时;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养温度37℃,通气比1.0~1.5,搅拌转速200rpm,至芽孢形成90%以上时,发酵结束,添加20%赋形剂,直接喷雾干燥;
胶质芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉按上述工艺步骤及参数进行发酵。
4.如权利要求1所述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥,其特征在于,所述的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法如下:
(1)斜面菌种活化:配置营养琼脂培养基,分装于20×20cm的试管中,装液量8mL,121℃灭菌30min,制成斜面;将甘油管保藏的巨大芽孢杆菌接种于斜面培养基,37℃培养24小时;
(2)平板传代:配置营养琼脂培养基,121℃灭菌30min后,制成平板,经37℃空培养24小时后,将斜面种子转接于平板,采用三线法划线,37℃倒置培养过夜;
(3)液体种子制备:配置液体种子培养基,装液量20%,121℃灭菌30min,无菌条件下将平板传代的种子转接于液体摇瓶中,37℃,200rpm摇床培养18小时;
(4)种子罐培养:将培养好的液体种子转接到种子罐中进行种子扩培,培养温度37℃,通气比0.5~1.5,搅拌转速200rpm,培养18小时;
(5)发酵罐发酵:将种子罐液体种子转接到发酵罐中,培养温度37℃,通气比1.0~1.5,搅拌转速200rpm,至芽孢形成90%以上时,发酵结束,添加20%赋形剂,直接喷雾干燥;
胶质芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉按上述工艺步骤及参数进行发酵。
5.如权利要求1所述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥的制备方法,包括以下的步骤:(1)取20~60份芽孢杆菌类微生物菌粉、20~30份有机物、20~30份无机物、牲畜粪便共10~20份;
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,37~42℃下干燥,获得粉状复合微生物抗病促生菌肥。
6.如权利要求5所述的一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥的制备方法,包括以下的步骤:
(1)取40份芽孢杆菌类微生物菌粉、20份麦麸、30份无机物、牲畜粪便共10份;
胶质芽孢杆菌菌粉5份、巨大芽孢杆菌菌粉5份、枯草芽孢杆菌菌粉20份、地衣芽孢杆菌菌粉10份;
无机物如下:尿素10份、硫酸镁4份、硫酸亚铁3份、硫酸锌3份、硼砂10份;
(2)将(1)中的原料充分粉碎、混合、过筛后,40℃下干燥,获得粉状复合微生物抗病促生菌肥。
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