CN107226807A - 端锚聚合酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及通式(Ⅰ)所示的端锚聚合酶抑制剂、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中R1、R2、R3、m、n、Z、L、Q、A、X1、X2和Y如说明书中所定义。本发明还涉及这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物制剂和药物组合物，以及该化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体在制备治疗和/或预防由端锚聚合酶介导的癌症及相关疾病的药物中的应用。

Description

端锚聚合酶抑制剂
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及端锚聚合酶抑制剂、或其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物及其立体异构体，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物制剂及药物组合物，以及这些化合物在制备治疗和/或预防癌症、阿尔兹海默症、骨质疏松症、皮肤病、心血管疾病、II型糖尿病的药物中的应用。
背景技术
众所周知，癌症已经成为威胁人类生命和健康最严重的疾病之一，全世界每年约有九百余万人罹患恶性肿瘤。因此，找到预防和治疗癌症的有效药物和方法，成为当今社会刻不容缓的任务。癌症是一种以丧失对细胞生长适当控制为特征的疾病。据报道，经典的wnt信号通路即β-Catenin介导的wnt信号通路，与很多生物过程相关，例如细胞命运、细胞增殖、干细胞的维持等。Wnt信号通路的异常激活可以导致多种癌症，因此该信号通路成为抗肿瘤治疗的热门通路。
β-Catenin和Axin蛋白是经典wnt信号通路的重要组成部分。β-Catenin过多会导致wnt信号传导增加及相关核转录因子的活化，而Axin过量会导致细胞内β-Catenin降解并减少信号传导。因此，wnt信号的传导受到此两种蛋白的相对稳定性来控制。当细胞没有接受wnt信号刺激时，细胞质内大部分β-Catenin都是以降解复合体的形式被蛋白酶体降解。而当wnt信号通路被异常激活后，β-Catenin随之被降解复合体大量解放，细胞质中增加的自由β-Catenin，最终进入细胞核与淋巴增强子结合因子1相互作用，调节下游基因的表达。这些下游基因与许多癌症有牵连。
β-Catenin降解过程中形成的降解复合物主要由β-Catenin、APC、Axin、CK1、GSK3β组成。其中Axin是一种支架蛋白，具有与其他蛋白作用的位点，能将β-Catenin、APC、CK1、GSK3β结合在一起。CK1是一种酪氨酸激酶，能将β-Catenin的Ser45磷酸化，随后GSK3β将β-Catenin的Thr41、Ser37、Ser33磷酸化，磷酸化的β-Catenin再结合到β-TRCP蛋白上，受泛素的共价修饰，从而被蛋白酶体降解。APC蛋白的作用是增强降解复合体与β-Catenin的亲和力。当wnt信号通路被激活后，活化的DVL蛋白会破坏降解复合体，使β-Catenin大量释放，引起游离β-Catenin积累。有文献报道，通过稳定细胞中Axin蛋白，可以有效提高降解复合物的浓度，从促进β-Catenin的降解。
端锚聚合酶Tankyrases属于ADP-核糖聚合酶(PARP)蛋白家族，人类的Tankyrase1(TNKS1)和2(TNKS2)也分别被称为PARP-5a和PARP-5b。端锚聚合酶能使Axin蛋白发生聚ADP核糖基 化，为其后续进行泛素化及蛋白酶体降解进行标记，因此通过抑制端锚聚合酶的活性，可以使Axin蛋白的浓度上升，从而导致β-Catenin降解复合体的浓度升高，促进β-Catenin的降解及wnt信号传导减少。有文献报道XAV939和IWR-1-endo都属于小分子端锚聚合酶抑制剂，可以稳定Axin蛋白水平并抑制wnt信号通路。因此，通过抑制端锚聚合酶的作用，对癌症治疗的研究具有重大的意义。此外，wnt信号通路除于癌症相关外，针对纠正wnt信号传导异常还可以应用到其他的疾病领域，例如阿尔兹海默症、骨质疏松症、皮肤病、心血管疾病、II型糖尿病。尽管本文重点介绍的是wnt通路与癌症的关系，但此通路在其他疾病中同样具有潜在的应用价值。同时，对端锚聚合酶的抑制也可以对其他生物功能产生影响，例如染色体末端保护(端粒)、有丝分裂期间的纺锤体组装及脂肪细胞的葡萄糖转运。因此，可以预见端锚聚合酶抑制剂还可以用于治疗由此类抑制所介导的疾病。
目前还未有针对端锚聚合酶的小分子抑制剂进入临床研究，因此针对此靶点在癌症治疗领域的应用存在巨大的需求。为此，我们希望可以开发出新结构的高效低毒的针对端锚聚合酶靶点的抗肿瘤药物。本发明将提供一种新型结构的端锚聚合酶抑制剂，此结构的化合物对TNKS1和TNKS2具有较高的抑制作用，同时针对PARP蛋白家族中的PARP1和PARP2具较好的选择性，表现出较好的抗肿瘤作用。
发明内容
本发明以开发针对端锚聚合酶的小分子抑制剂为目标，发明了对治疗和/或预防端锚聚合酶介导的癌症及相关疾病具有良好效果的端锚聚合酶抑制剂。具体的技术方案为如下：
方案1.通式(Ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体：
其中，X1、Z、L各自独立的选自CH、N原子；
X2选自NH；
R1选自氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、氨基磺酰基C1-6烷基、氨基磺酰氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烷基C1-6烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基或5-12元杂芳基C1-6烷基；
所述3-14元环烷基、3-14元环烷基C1-6烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基、或5-12元杂芳基C1-6烷基可任选被卤素原子、氰基、氨基、硝基、羧基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基磺酰氨基取代；
Y选自任选被P1取代的C1-6烷基，P1选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基酰氨基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺酰基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基、羧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烷基C1-6烷基、3-14元环烷基C1-6烷氧基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、3-8元杂环基C1-6烷氧基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基或5-12元杂芳基C1-6烷基；
Q选自键、CRbRc、NRd、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、C(O)OCRbRc、S(O)或S(O)2；
Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基磺酰氨基；
Rd选自氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺酰基或C1-6烷基酰氨基；
R2、R3分别独立地选自氢原子、卤素原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基C1-6烷氧基；
环A选自任选被取代基P2取代的6-14元芳基、5-12元杂芳基、3-14元环烷基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基羰氧基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基磺酰氨基；
m选自1、2、3或4；
n选自0、1、2、3、4或5。
方案2.如方案1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、Z、L各自独立的选自CH、N原子；
X2选自NH；
R1选自氢原子、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-4烷基、4-6元杂环基、4-6元杂环基C1-4烷基、苯基、苯基C1-4烷基、5-6元杂芳基或5-6元杂芳基C1-4烷基；
所述3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-4烷基、4-6元杂环基、4-6元杂环基C1-4烷基、苯基、苯基C1-4烷基、5-6元杂芳基或5-6元杂芳基C1-4烷基可任选被卤素原子、氰基、氨基、硝基、羧基、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基取代；
Y选自任选被P1取代的C1-4烷基，P1选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基羰基氧基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基；
Q选自键、CRbRc、NRd、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、S(O)或S(O)2；
Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
Rd选自氢原子、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷基羰基或C1-4烷基磺酰基；
R2、R3分别独立地选自氢原子、卤素原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基或羧基C1-4烷基；
环A选自任选被取代基P2取代的苯基、5-6元杂芳基、5-6元环烷基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基羰氧基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基；
m选自1、2或3；
n选自0、1、2、3或4。
方案2-1.如方案2所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、Z、L各自独立的选自CH、N原子；
X2选自NH；
R1选自环丙基、环丙基甲基、环丙基乙基、环丙基丙基、环丁基、环丁基甲基或环丁基乙基；
Y选自任选被P1取代的甲基、乙基或丙基，P1选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
环A选自任选被取代基P2取代的苯基、5-6元杂芳基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基；
m选自1、2或3；
n选自0、1、2、3或4。
方案2-2.如方案2-1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、Z、L各自独立的选自CH、N原子；
X2选自NH；
R1选自环丙基、环丙基甲基、环丙基乙基、环丙基丙基、环丁基、环丁基甲基或环丁基乙基；
Y选自任选被P1取代的甲基、乙基或丙基，P1选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、甲氨基或二甲氨基；
Q选自键、CRbRc、NRd、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、S(O)、S(O)2；
其中Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、氟原子、溴原子、氯原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、甲酰基、乙酰基、甲基氨基、乙基氨基或二甲氨基；
Rd选自氢原子、甲基、乙基、丙基、甲酰基、乙酰基、甲基磺酰基或乙基磺酰基；
R2、R3选自氢原子、卤素原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、甲基、乙基、丙基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、羟基甲基、氨基甲基或羧基甲基；
环A选自任选被取代基P2取代的苯基、5元含1-2个N原子的杂芳基、6元含1-2个N原子的杂芳基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、甲基氨基、二甲氨基、甲酰基、甲磺酰基、甲酰氨基或甲基磺酰氨基；
m选自1、2；
n选自0、1、2。
方案3.如方案2或2-1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异 构体，具有式(Ⅱ)所述的结构，
方案4.如方案3所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、L各自独立的选自CH、N原子；
环A选自任选被取代基P2取代的苯基或5-6元含氮杂芳基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基。
方案5.如方案4所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、甲基氨基、二甲氨基、甲酰基、甲磺酰基、甲酰氨基或甲基磺酰氨基；
Q选自CRbRc、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、S(O)或S(O)2；
Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、甲酰基、乙酰基、甲基氨基、乙基氨基或二甲氨基；
R2、R3选自氢原子、氟原子、氯原子、溴原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、甲基、乙基、丙基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、羟基甲基、氨基甲基或羧基甲基。
方案6.如方案4或5所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、L各自独立的选自CH、N原子；
环A选自苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基。
方案7.如方案4或5所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，具有式(Ⅱ-1)所述的结构，
其中，X1、L各自独立的选自CH、N原子；
n选自0、1、2、3。
方案8.如方案4或5所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，环A选自5元含氮杂芳基。
方案9.如方案8所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，环A选自5元含2个氮原子的杂芳基。
上述方案中的技术特征可以任意组合，所得到的技术方案均记载于本发明中。
本发明的部分化合物
发明详述
在本申请的说明书和权利要求书中，化合物都是依据化学结构式而命名的，如果表示同一化合物时化合物的命名与化学结构式不符，以化学结构式或化学反应式为准。
本发明所述的“卤素原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子等。
本发明所述的“C1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“C1-4烷基”、“C1-3烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。
本发明所述的“C2-8烯基”是指含有至少一个双键的碳原子数为2-8的直链或支链或环状的烯基，包括例如“C2-6烯基”、“C2-4烯基”、“C2-3烯基”等，具体实例包括但不限于：乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基等。
本发明所述的“C2-8炔基”是指含有三键的碳原子数为2-8的直链或支链的炔基，其中包括例如“C2-6炔基”、“C2-4炔基”、“C2-3炔基”等，具体实例包括但不限于：乙炔基、1-丙炔基、2-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、1,1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、2-己炔基、3-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、1,1-二甲基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基、2-庚炔基、3-庚炔基等。
本发明所述的“C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基酰氨基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺酰基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基”是指以C1-6烷基-O-、C1-6烷基-NH-、(C1-6烷基)2-N-、C1-6烷基-S-、C1-6烷基-C(O)-、C1-6烷基-O-C(O)-、C1-6烷基-C(O)-O-、C1-6烷基-C(O)-NH-、C1-6烷基-SO2-、C1-6烷基-SO2-NH-、C1-6烷基-NH-SO2-、(C1-6烷基)2-NH-SO2-方式形成的基团，其中“C1-6烷基”的定义如前文所述。
本发明所述的“C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基硫基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基羰基氧基、C1-4烷基酰氨基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基磺酰氨基、C1-4烷基氨基磺酰基、二(C1-4烷基)氨基磺酰基”是指以C1-4烷基-O-、C1-4烷基-NH-、(C1-4烷基)2-N-、C1-4烷基-S-、C1-4烷基-C(O)-、C1-4烷基-O-C(O)-、C1-4烷基-C(O)-O-、C1-4烷基-C(O)-NH-、C1-4烷基-SO2-、C1-4烷基-SO2-NH-、C1-4烷基-NH-SO2-、(C1-4烷基)2-NH-SO2-方式形成的基团，其中“C1-4烷基”的定义如前文所述。
本发明所述的“卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、氨基磺酰基C1-6烷基、氨基磺酰氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基”是指一至多个，例如1～4个、1～3个、1～2个卤素原子、羟基、氨基、羧基、氨基磺酰基、 氨基磺酰氨基、C1-6烷氧基分别取代C1-6烷基、C1-6烷氧基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述的“卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、氨基磺酰基C1-4烷基、氨基磺酰氨基C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基”是指一至多个，例如1～4个、1～3个、1～2个卤素原子、羟基、氨基、羧基、氨基磺酰基、氨基磺酰氨基、C1-4烷氧基分别取代C1-4烷基、C1-4烷氧基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述的“3～14元环烷基”，是指含有3～14个碳原子的烷烃部分去除一个氢原子衍生的环状烷基，包括例如“3～12元环烷基”、“3～8元环烷基”、“3～6元环烷基”、“3～5元环烷基”、“3～4元环烷基”、“4～7元环烷基”、“4～8元环烷基”、“4～6元环烷基”、“5～6元环烷基”等。其实例包括但不限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基、甲基环丙烷基、二甲基环丙烷基、甲基环丁烷基、二甲基环丁烷基、甲基环戊烷基、二甲基环戊烷基、甲基环己烷基、二甲基环己烷基等。
本发明所述的“杂原子”是指N、O、C(O)、S、SO和/或SO2等，优选N、O、S，更优选N、O。
本发明所述的“3～8元杂环基”是指含有3～8个环原子、且含有至少一个(例如1、2、3、4或5个)杂原子的饱和或部分饱和的单环杂环化合物除去一个氢原子得到的基团，包括例如“3～7元杂环基”、“3～6元杂环基”、“4～7元杂环基”、“4～6元杂环基”、“5～6元杂环基”、“5～6元含氮杂环基”、“5元含氮杂环基”、“6元含氮杂环基”、“5元饱和杂环基”、“6元饱和杂环基”等。具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2H-氮杂环丙烷基、二氮杂环丙烷基、3H-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基、4,5-二氢噻唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、4,5-二氢噁唑基、4,5-二氢异噁唑基、2,3-二氢异噁唑基、2H-1,2-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,3-噻嗪基、6H-1,3-噻嗪基、2H-吡喃基、2H-吡喃-2-酮基、3,4-二氢-2H-吡喃基等。
本发明所述的“5～12元杂芳基”是指含有5～12个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的环状基团。包括例如“5～10元杂芳基”、“5～8元杂芳基”、“5～6元杂芳基”、“6～12元杂芳基”、“5-6元含氮杂芳基”、“5元含氮杂芳基”、“5～6元含1-2个N原子的杂芳基”、“5～6元含1个N原子的杂芳基”、“5～6元含2个N原子的杂芳基”、“5元含1-2个N原子的杂芳基”、“6元含1-2个N原子的杂芳基”、“5元含2个氮原子的杂芳基”等。具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、 1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、1,4-二氧杂环己二烯基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮杂环庚三烯基、1,3-二氮杂环庚三烯基、氮杂环辛四烯基等。所述“5～6元杂芳基”是指5～14元杂芳基中含有5～6个环原子的具体实例。
本发明所述的“6～14元芳基”是指含有6～14个环碳原子的芳基，包括例如“6～8元芳基”、“6～7元芳基”其实例包括但不限于：苯基、萘基、环辛四烯基等。
本发明所述的“3-14元环烷基C1-6烷基、3-8元杂环基C1-6烷基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基C1-6烷基”是指以3-14元环烷基、3-8元杂环基、6-14元芳基、5-12元杂芳基取代C1-6烷基中的氢原子形成的基团。
本发明所述的“3-6元环烷基C1-4烷基、4-6元杂环基C1-4烷基、苯基C1-4烷基、5-6元杂芳基C1-4烷基”是指以3-6元环烷基、4-6元杂环基、苯基、5-6元杂芳基取代C1-4烷基中的氢原子形成的基团。
本发明所述的是指单键或双键。
本发明还提供了上述化合物的两个制备方法，但不仅限于以下方法，反应方程式如下：
制备方法一：
反应步骤：
步骤1 中间体1的制备
通过购买或制备得到中间体1。
步骤2 中间体2的制备
中间体1和原料1溶于适当溶剂(例如三乙胺与N,N-二甲基甲酰胺的混合溶液)中，室温反应完全，加入水和有机溶剂(如二氯甲烷)，分液，有机相干燥，浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体2。
步骤3 中间体3的制备
将中间体2溶于适当溶剂(例如四氢呋喃)中，0℃下加入原料2，室温反应(例如10-20小时)，反应完全，过滤，加入水和有机溶剂(如二氯甲烷)，分液，有机相干燥，浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体3。
步骤4 中间体4的制备
原料3和原料4溶于适当溶剂(例如二氯甲烷)中，加入适当反应物，室温反应(例如2-6小时)，加入水和有机溶剂(如二氯甲烷)，分液，有机相干燥，浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体4。
步骤5 中间体5的制备
将中间体4溶于适当溶剂(例如二氯甲烷和三氟乙酸的混合溶剂)中，室温搅拌(例如0.2-5小时)，反应完全，浓缩，加入碱性溶液和有机溶剂，分液，有机相干燥，浓缩得中间体5。
步骤6 通式(Ⅰ)化合物的制备
将中间体3和中间体5溶于适当溶剂(例如四氢呋喃)中，室温反应(例如0.2-1小时)，降至0℃，加入碱性溶剂(例如三乙胺)，升温(例如20-30℃)，搅拌(例如1-5小时)，加入水和有机溶剂(例如乙酸乙酯)，分液，有机相干燥，浓缩，经制备液相分离得通式(Ⅰ)化合物。
制备方法二：
反应步骤：
步骤1 中间体1的制备
通过购买或制备得到中间体1。
步骤2 中间体2的制备
见制备方法一“中间体2的制备”。
步骤3 中间体3的制备
通过购买或制备得到中间体3。
步骤4 中间体4的制备
原料2和中间体3溶于适当溶剂(例如二氯甲烷)中，室温反应(例如1-5小时)，反应完毕，加入碎冰，加入浓盐酸，用有机相(例如二氯甲烷)萃取，有机相浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体4。
步骤5 中间体5的制备
将中间体4悬浮于水中，加入浓盐酸，加热，反应(例如10-20小时)，浓缩，加入有机溶剂(例如二氯甲烷和甲醇的混合溶剂)，过滤，滤饼干燥得中间体5。
步骤6 中间体6的制备
将中间体5和原料3溶于有机溶剂(例如乙腈)，加入碱性试剂，加热(例如30-80℃)，反应(例如2-5小时)，过滤，滤液浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体6。
步骤7 通式(Ⅰ)化合物的制备
将中间体6、HATU、二异丙基乙胺溶于适当溶剂(例如THF/DCM)中，加入中间体2，室温反应(例如0.5-3小时)，浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得通式(Ⅰ)化合物。
反应方程式中，R1、R2、R3、m、n、Z、L、Q、A、X1、X2和Y如前文所定义。
本发明式(I)化合物的“立体异构体”是指当式(I)化合物存在不对称碳原子时，会产生对映异构体，当化合物存在碳碳双键或环状结构时，会产生顺反异构体，当化合物存在酮或肟时，会产生互变异构体，所有式(I)化合物的对映异构体、非对映异构体、消旋异构体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物，均包括在本发明范围中。
本发明的通式(I)所示的任一化合物合成得到的若是消旋体，所需要的对映体纯的化合物可以通过常规的手性拆分方法获得，所述手性拆分的方法包括但不限于：手性固定相的色谱法(像高压制备液相色谱、超临界流体色谱)、化学拆分、膜拆分、毛细管电泳拆分等。
本发明的通式(I)所示的任一化合物药学上可接受的盐是指由药学上可接受的、非毒性碱或酸制备的盐，包括有机酸盐、无机酸盐、有机碱盐、无机碱盐。
有机酸盐包括甲酸、乙酸、三氟乙酸盐、苯磺酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、粘酸、双羟萘酸、泛酸、琥珀酸、酒石酸等的盐。
无机酸盐包括氢溴酸、氢氯酸、硝酸、硫酸、磷酸等的盐。
有机碱盐包括伯、仲和叔胺，被取代胺包括天然存在的取代胺、环胺和碱离子交换树脂，选自甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-吗啉、N-乙基哌啶、葡甲胺、氨基葡萄糖、海巴明、异丙基胺、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等的盐。天然氨基酸盐如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、正亮氨酸、酪氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、羟基脯氨酸、组氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、精氨酸、丝氨酸等的盐。
无机碱盐包括铵以及锂、钠、钾、钙、镁、锌、钡、铝、铁、酮、亚铁、锰、二价锰等的盐。
本发明式(I)化合物的“酯”是指，当式(I)化合物存在羧基时，可以与醇发生酯化反应而形成的酯，当式(I)化合物存在羟基时，可以与有机酸、无机酸、有机酸盐等发生酯化反应而形成的酯。酯在酸或者碱存在的条件下，可以发生水解反应生成相应的酸或醇。
通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体可以是溶剂化物形式。若溶剂化物是水合物的情况下，水合作用可以在制备过程中完成或者可以利用原始无水产物的吸湿性逐渐进行。
本发明进一步要求保护包括上述的式(I)所示的任一化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物，可以制成药学上可接受的任一剂型。如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂、注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液、栓剂、吸入剂或喷雾剂等。
本发明所述的“载体”包括但不限于填充剂、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂、防腐剂、着色剂、矫味剂、芳香剂、泡腾剂、乳化剂、絮凝剂、反絮凝剂、抑菌剂、增溶剂。
本发明进一步要求保护包括上面所述的式(I)任一化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体与其它一种或多种抗肿瘤剂和/或免疫抑制剂的药物组合物。所述的抗肿瘤剂和/或免疫抑制剂为抗代谢物，包括但不限于卡培他滨、吉西他滨、培美曲塞二钠；为生长因子抑制剂，包括但不限于帕唑帕尼、伊马替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、吉非替尼、凡德他尼；为抗体，包括但不限于赫赛汀、贝伐单抗；为有丝分裂抑制剂，选自紫杉醇、长春瑞滨、多西他赛、多柔比星；为抗肿瘤激素类，包括但不限于来曲唑、他莫西芬、氟维司群、氟他胺、曲普瑞林；为烷化剂类，包括但不限于环磷酰胺、氮芥、马法兰、瘤可宁、卡莫司汀；为金属铂类，包括但不限于卡铂、顺铂、奥沙利铂；为拓扑异构酶抑制剂，包括但不限于拓扑特肯喜树碱、拓扑替康、依立替康；为免疫抑制类，包括但不限于依维莫司、西罗莫司、特癌适；为嘌呤类似物，包括但不限于6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、硫唑嘌呤；为抗生素类，包括但不限于菌素D、柔红霉素、阿霉素、米托蒽醌、博来霉素、普卡霉素；为肾上腺皮质抑制剂类，包括但不限于氨鲁米特、地塞米松；为组蛋白去乙酰化酶抑制剂，包括但不限于伏立诺他。
本发明还提供了本发明式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体在制备治疗和/或预防端锚聚合酶介导的癌症或相关疾病的药物中的应用，所述癌症相关的疾病包括但不限于脑癌，肺癌，非小细胞性肺癌，鳞状上皮细胞癌，膀胱癌，胃癌，卵巢癌，腹膜癌，胰腺癌，乳腺癌，头颈癌，子宫颈癌，子宫内膜癌，直肠癌，肝癌，肾癌，食管腺癌，食管鳞状细胞癌，实体瘤，前列腺癌，甲状腺癌，雌性生殖道癌，原位癌，淋巴瘤，神经纤维瘤，骨癌，皮肤癌，脑癌、结肠癌，睾丸癌，小细胞肺癌，胃肠道间质瘤，前列腺肿瘤，肥大细胞肿瘤，多发性骨髓瘤，黑色素瘤，胶质瘤，肉瘤，胶质母细胞瘤，星形细胞瘤，神经母细胞瘤，非霍奇金淋巴瘤，脑瘤，中枢神经系统肿瘤，神经胶质瘤，多形性 胶质母细胞瘤，胶质肉瘤，组织细胞淋巴瘤；所述的相关疾病，包括但不限于阿尔兹海默症、骨质疏松症、皮肤病、心血管疾病、II型糖尿病。
本发明化合物具有以下优点：
(1)本发明式(I)化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体具有优异的端锚聚合酶抑制活性，且能显著增加AXIN2的蛋白量；
(2)本发明式(I)化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体显示出良好的生物稳定性，作用更持久，生物利用度高；
(3)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高，质量稳定，易于进行大规模工业生产。
以下通过生物学实验进一步阐述本发明化合物有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。
下述中实验的缩写所代表的含义如下：
ADP：腺苷二磷酸； PARP：多聚ADP-核糖聚合酶
TNKS：端锚聚合酶； DMSO：二甲基亚砜
Tween-20：吐温-20； FBS：胎牛血清
P/S：青-链霉素； CCK-8：细胞增殖-毒性检测试剂盒
1×、5×其中的“×”：倍
实验例1 本发明化合物的体外酶学活性实验
供试品：本发明化合物，其化学名称和制备方法见化合物的制备实施例。
(一)化合物配制
化合物10mM储备液的配制：分别称取供试品适量(具体称样量请见下表)，加入适量DMSO溶解，混匀，备用。
分别取10mM的储备液，用DMSO稀释成浓度为1mM的溶液，作为母液。用DMSO将上述母液10倍逐级稀释制成一系列浓度的溶液，然后分别用水稀释10倍，制成含10％DMSO的溶液，浓度分别为：100μM、10μM、1μM、0.1μM。
(二)实验方法
1.配制pH7.4的1×PBS
2.配制PBST(1×PBS，含0.05％Tween-20)向烧杯中加入约200mL的1×PBS(PH7.4)，然后加入100μL Tween-20，混匀，即得PBST。
3.激酶反应
3.1包被组氨酸至96孔板
3.1.1用1×PBS稀释5×组氨酸混合液1:5，每孔加入50μL1×组氨酸，4℃过夜；
3.1.2每孔用200μL PBST洗3次，每次用干净的纸巾吸净；
3.1.3每孔加入150μL封闭液，室温孵育60-90min；
3.1.4每孔用200μL PBST洗3次，每次用干净的纸巾吸净。
3.2核糖基化反应
3.2.1.激酶在冰上融化，用前将激酶用1×PARP分析缓冲液稀释至说明书建议浓度，一直置于冰上，稀释后不能重复利用；
3.2.2按说明书依次加入各反应液及化合物后室温孵育1h；
3.2.3移弃反应液，200μLPBST洗三次，每次用干净的纸巾吸净。
3.3检测
3.3.1Streptavidin-HRP用封闭液稀释50倍；
3.3.2每孔加入50μL稀释的Streptavidin-HRP，室温孵育30min；
3.3.3每孔用200μL PBST洗三次，每次用干净的纸巾吸净；
3.3.4用前将HRP化学发光底物A和B各50μL冰上混匀，每孔加入100μL；
3.3.5酶标仪读数。
4.计算公式
抑制率％＝[1-(T-P)/(P-B)]*100％
其中P是指阳性对照孔的化学发光读数，B是指空白孔的化学发光读数。T是指待测化合物孔的化学发光读数。
(三)结果与结论：
表1.各个激酶酶学评价结果
由表1可见：本发明化合物对TNKS1/2有较高的抑制活性，化合物1、化合物2、化合物6、化合物9、化合物20的IC50均小于10nM，化合物3、化合物4、化合物7、化合物10、化合物11的IC50均小于100nM，同时检测本发明化合物对PARP1/2的抑制作用，显示IC50均在1000nM左右。说明本发明化合物针对TNKS1/2具有较高的选择性。
实验例2 本发明化合物对SW480细胞中AXIN2的蛋白的影响
供试品：本发明化合物，其化学名称和制备方法见化合物的制备实施例。
(一)供试品的配制
化合物10mM储备液的配制：分别称取化合物适量(具体称样量请见下表)，加入适量DMSO溶解，混匀，备用。
分别取10mM的储备液，用DMSO将上述母液逐级稀释制成浓度为1mM，0.2mM的母液(×1000)，再分别用培养基稀释1000倍，然后加入到6孔板相应的孔中，得到化合物溶液最终浓度为：1μM，0.2μM。
(二)实验方法
1.细胞培养：人结直肠癌细胞SW480，用Leibovitz's L-15培养基+10％FBS+1％P/S的完全培养基，在无CO2、37℃条件的培养箱中，培养细胞至80％融合度。
2.接种细胞：细胞传两代左右选择生长状态良好的细胞，消化、接种500,000细胞于6孔板中，37℃培养箱中培养过夜。
3.化合物处理：第二天，取出培养板，加入化合物(终浓度为0.2μM、1μM)，刺激细胞以及0.5％DMSO对照，再放入37℃培养箱中培养。
4.24小时以后，吸弃培养基，冰上预冷的PBS洗两次，尽量吸尽残余的PBS。
5.10×细胞裂解液用双蒸水稀释成1×细胞裂解液。1×细胞裂解液加入蛋白酶抑制剂、丝/苏氨酸磷酸酶抑制剂,、酪氨酸磷酸酶抑制剂。200μL/孔，冰上静置5min，用细胞刮刮下细胞，在冰上静置5min中，将细胞裂解液移至1.5mL离心管中，14000rpm，4℃，10min。取上清液移至新的离心管中，即为细胞总蛋白。
6.以BCA蛋白定量试剂盒进行蛋白定量，加入相应的5×上样缓冲液，煮沸10分钟，短暂离心。-20℃保存或直接进行蛋白电泳。
7.根据标准操作进行电泳、转膜，根据相应抗体的说明书进行一抗和二抗结合，以XRS凝胶成像系统扫膜。用Image J进行半定量分析。
(三)实验结果与结论
表2本发明化合物对AXIN2的蛋白量的影响
由表2可见，本发明化合物能增加AXIN2的蛋白量。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
制备例1
(1)2-(氯甲基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备
将2-氨基-苯甲酸甲酯(2.0g,13.2mmol)，2-氯乙腈(1.0g,13.2mmol)溶于1,4-二氧六环(20mL)中，加入浓盐酸(20mL)，加热至60℃，反应6小时。将固体过滤，滤饼用乙酸乙酯(50mL)洗涤，得产物(1.6g,产率62.1％)。
(2)2-(((环丙甲基)氨基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备
将2-(氯甲基)喹唑啉-4(3H)-酮(1.0g,5.1mmol)溶于三乙胺(15mL,107.5mmol)和四氢呋喃(15mL)的混合溶液中，加入环丙甲胺(3.6g,50.6mmol)，25℃下反应16小时，LC-MS检测反应完成，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得产物(0.8g,产率68.4％)。
(3)2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(((环丙甲基)氨基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮(0.8g,3.5mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入2-氯乙酰氯(2.0g,17.7mmol)，25℃下反应16小时，LC-MS检测反应完成，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得产物(0.6g,产率56.1％)。
制备例2
(1)1-乙酰哌啶-4-羧酸的制备
将哌啶-4-甲酸(6.78g,52.5mmol)加入到乙酸酐(50mL)中，升温至50℃反应16小时。反应液浓缩，加入水(300mL)和乙酸乙酯(400mL)，分液，有机相用饱和食盐水(200mL)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，将所得固体加入乙醇(50mL)中，抽滤得产物(8.51g,产率:94.8％)。
(2)1-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酮的制备
将1-乙酰哌啶-4-羧酸(8.42g,49.2mmol)溶解于二氯甲烷(150mL)，加入N,N-二甲基甲酰胺(0.1mL)和草酰氯(5mL，59.04mmol)，25℃下反应2小时。反应液浓缩，再加入二氯甲烷(100mL)溶解。0℃下滴加到含有苯甲醚(10.64g,98.4mmol)和三氯化铝(19.68g,147.6mmol)的二氯甲烷(400mL)中，滴加完毕继续搅拌3小时。向反应液中加入4mol/L的盐酸(100mL)淬灭，加入水(300mL)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(6.35g,产率:49.4％)。
(3)(4-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲酮的制备
将1-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酮(6.35g,24.3mmol)加入到6mol/L的盐酸(100mL)中，升温至100℃反应16小时。反应液用碳酸氢钠调节pH值至8，用乙酸乙酯(300mL×2)萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得产物(4.78g,产率:89.7％)。(4)2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸乙酯的制备
将(4-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲酮(4.38g,20.0mmol)、2-溴乙酸乙酯(3.67g,22.0mmol)和N,N-二异丙基乙胺(5.16g,40.0mmol)溶于乙腈(100mL)，升温到85℃反应16小时。反应液真空浓缩，加入水(200mL)，乙酸乙酯萃取(200mL×2)，有机相合并，饱和食盐水洗(300mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(5.43g,产率:89.0％)。
(5)2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸乙酯(5.40g,17.7mmol)溶解于甲醇(30mL)中，加入2mol/L的氢氧化锂溶液(27mL)，搅拌3小时。将反应液浓缩至约35mL，加入乙酸乙酯(20mL)萃取，所得水相用1mol/L的盐酸调pH值至3，浓缩，将所得固体混合物加入四氢呋喃(100mL)中搅拌1小时，抽滤，滤饼用四氢呋喃(30mL)洗，滤液浓缩 得产物(4.63g,产率:94.5％)。
制备例3
(1)4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸(10.0g,63.7mmol)溶于甲醇(100mL)中，加入二氯亚砜(11.4g,95.8mmol)，25℃下反应2小时，加热至60℃，反应2小时。反应液真空浓缩，加入甲基叔丁基醚(80mL)，过滤得白色固体，真空干燥得产物(10.2g,产率:93.6％)。
(2)4-硝基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(3.0g,17.5mmol)，4-甲基苯磺酸(0.3g,1.7mmol)溶解于二氯甲烷(50mL)中，冷却至0℃，缓慢滴加3,4-二氢-2H-吡喃(2.2g,26.2mmol)。加完后升至25℃反应3小时，加入二氯甲烷(50mL)和水(50mL)，分液，有机相真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化得产物(3.4g,产率:76.2％)。
(3)4-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(3.3g,12.9mmol)溶于甲醇(50mL)，加入钯碳(300mg)，通入氢气，25℃下反应3小时。TLC检测反应完全，过滤，滤液真空浓缩得产物(2.9g粗品)，不经纯化直接用于下一步。
(4)4-((1-氨基-2-氯亚乙基)氨基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(2.9g粗品,12.9mmol)和2-氯乙腈(2.0g,26.5mmol)溶于氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mol/L,30mL)中，25℃下反应3小时，减压蒸除溶剂，加入乙酸乙酯(30mL)，过滤，得到产物(2.5g,产率:89.3％)。
(5)5-(氯甲基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将4-((1-氨基-2-氯亚乙基)氨基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(2.5g,11.5mmol)悬浮于乙腈(40mL)中，加入饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)，加热至50℃反应16小时。反应液真空浓缩，加入水(40mL)，过滤，固体用乙酸乙酯(20mL)洗涤，得产物(1.7g,产率:80.1％)。
(6)5-(氯甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将5-(氯甲基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(1.7g,9.2mmol)，4-甲基苯磺酸(0.16g,0.9mmol)溶解于二氯甲烷(30mL)中，冷却至0℃，缓慢滴加3,4-二氢-2H-吡喃(1.2g,14.3mmol)，加完升至25℃反应3小时。加入二氯甲烷(50mL)和水(50mL)，分液，有机相真空浓缩，残余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(1.1g,产率:44.5％)。
(7)5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将5-(氯甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(1.1g,4.1mmol)和环丙基甲胺(582mg,8.2mmol)溶于乙腈(50mL)中，加入碳酸钾(3.0g,21.7mmol)，加热至50℃反应2小时。反应液过滤，滤液真空浓缩，残余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化得产物(0.85g,产率:68.4％)。
制备例4
(1)叔丁基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯的制备
将叔丁基-4-氧代哌啶-1-甲酸酯(5.0g,25.1mmol)溶解于四氢呋喃(150mL)中，加入 硼氢化钠(1.9g,50.3mmol)，25℃下反应16小时，TLC检测反应完成(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)。加入水(50mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(150mL×2)，合并有机相，旋转蒸发除去溶剂，剩余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到产物(4.5g,产率90％)。
(2)叔丁基4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-甲酸酯的制备
将叔丁基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(4.5g,22.4mmol)，4-羟基苯甲腈(2.7g,22.7mmol)和三苯基膦(8.8g,33.5mmol)溶解于四氢呋喃(80mL)中，冷却至0℃，加入偶氮二甲酸二乙酯(5.8g,33.3mmol)。25℃下反应4小时，LC-MS检测反应完成，浓缩，加入乙酸乙酯(150mL)和水(50mL)，分液，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取，合并有机相，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到产物(4.6g,产率67.6％)。
(3)4-(哌啶-4-基氧基)苯甲腈的制备
将叔丁基-4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(3.5g,11.6mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中，加入10mL三氟乙酸，25℃下搅拌4小时，浓缩，剩余物溶解在二氯甲烷(50mL)中，加入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得产物(2.0g,产率85.2％)。
制备例5
(1)4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸(10.0g,63.7mmol)溶于甲醇(100mL)中，加入二氯亚砜(11.4g,95.8mmol)，25℃下反应16小时。反应液真空浓缩，残余物加入甲苯(80mL)，真空浓缩得产物(10.41g,产率:95.6％)。
(2)1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(3.4g,19.9mmol)溶解于丙酮(50mL)中，加入碘甲烷(5.7g,40.22mmol)和碳酸钾(5.5g,39.9mmol)，加热至50℃，反应4小时。冷却至室温，过滤，滤液真空浓缩，残余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化得产物(1.27g,产率:34.5％)。
(3)4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的制备
将1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(1.0g,5.4mmol)溶于甲醇(30mL)中，加入钯碳(100mg)，通入氢气，25℃下反应3小时，过滤，滤液真空浓缩得产物(0.8g,产率:95.2％)。
(4)4-((1-氨基-2-氯亚乙基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的制备
将4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(0.8g,5.2mmol)和2-氯乙腈(0.8g,10.6mmol)溶于氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mol/L,12mL)中，25℃下反应3小时。反应液真空浓缩，加入乙酸乙酯(30mL)，过滤得产物(0.8g,产率:66.7％)。
(5)5-(氯甲基)-1-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将4-((1-氨基-2-氯亚乙基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(0.8g,3.5mmol)悬浮于乙腈(20mL)中，加入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)，加热至50℃反应16小时。反应液真空浓缩，加入水(40mL)，过滤，所得固体用乙酸乙酯(20mL)洗涤，得产物(0.5g,产率:71.4％)。
(6)5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将5-(氯甲基)-1-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(0.5g,2.5mmol)溶于乙腈(30mL)中，加入环丙基甲胺(0.71g,10.0mmol)，25℃反应16小时。反应液浓缩，粗品 经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得产物(0.36g,产率:61.0％)。
制备例6
(1)4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸(20.0g,0.127mol)溶于甲醇(100mL)中，加入二氯亚砜(18.1g,0.152mol)，25℃下反应2小时，加热至60℃，反应2小时。反应液真空浓缩，加入甲基叔丁基醚(80mL)，过滤得白色固体，真空干燥得产物(20.0g,产率92.1％)。
(2)1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(20.0g,0.117mol)和碳酸钾(32.3g,0.234mol)加入到乙腈(200mL)中，0℃滴加对甲氧基苄氯(21.9g,0.14mol)，滴加完毕25℃反应16小时，反应液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化得标题化合物(20.5g,产率60.2％)。
(3)4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的制备
将1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(20.5g,70.4mmol)、氯化铵(5.65g,105.6mmol)和铁粉(19.7g,352mmol)加入到乙醇(300mL)和水(100mL)的混合溶液中，加热至85℃反应3小时。冷却，过滤，滤液真空浓缩至约200mL，加入水(200mL)，乙酸乙酯萃取(500mL×2)，有机相合并，饱和食盐水(300mL)洗，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得产物(17.5g,产率95.2％)。
(4)5-(氯甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(6.0g,23.0mmol)和2-氯乙腈(3.47g,46.0mmol)溶于氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mol/L,200mL)中，100℃反应12小时。反应液真空浓缩，加入乙酸乙酯(150mL)和水(100mL)，分液，有机相真空浓缩得产物(5.5g,产率78.4％)。
(5)5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将5-(氯甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(5.5g,18.0mmol)和环丙基甲胺(2.55g,36.0mmol)溶于乙腈(50mL)中，加入碳酸钾(7.45g,54.0mmol)，25℃反应2小时。反应液过滤，滤液真空浓缩，残余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化得产物(2.0g,产率32.8％)。
制备例7
(1)4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸(30.0g,191.0mmol)溶于甲醇(300mL)中，加入二氯亚砜(34.1g,286.5mol)，25℃下反应16小时。反应液真空浓缩，加入饱和碳酸氢钠溶液(400mL)，乙酸乙酯萃取(500mL×2)，有机相合并，饱和食盐水洗(300mL)，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得产物(31.7g,产率96.9％)。
(2)1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(27.67g,161.8mol)和碳酸钾(26.79g,194.2mol)加入到乙腈(500mL)中，0℃滴加对甲氧基苄氯(27.87g,178.0mol)，滴加完毕25℃反应16小时，反应液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化得产物(28.5g,产率60.5％)。
(3)4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(28.5g,97.8mmol)、氯化铵(3.67g,68.5mmol)和铁粉(32.9g,587.6mmol)加入到乙醇(300mL)和水(100mL)的混合溶液中， 加热至85℃反应3小时。冷却，过滤，滤液真空浓缩至约200mL，加入水(200mL)，乙酸乙酯萃取(500mL×2)，有机相合并，饱和食盐水(300mL)洗，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得产物(24.9g,产率97.5％)。
(4)4-((1-氨基-2-氯亚乙基)氨基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯的制备
将4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(14.4g,55.0mmol)和2-氯乙腈(6.19g,82.0mmol)溶于氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mol/L,200mL)中，搅拌3小时。反应液真空浓缩，加入乙酸乙酯(30mL)，过滤得产物(13.1g,产率70.7％)。
(5)5-(氯甲基)-2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将4-((1-氨基-2-氯亚乙基)氨基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(13.1g,38.9mmol)悬浮于乙腈(100mL)中，加入饱和碳酸氢钠溶液(100mL)，加热至50℃反应16小时。反应液真空浓缩，加入水(100mL)，过滤，所得固体用乙酸乙酯(100mL)洗涤，真空干燥得产物(8.46g,产率71.4％)。
(6)5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮的制备
将5-(氯甲基)-2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(8.46g,27.8mmol)溶于乙腈(200mL)中，加入环丙基甲胺(9.88g,139.0mmol)，25℃反应16小时。反应液真空浓缩，残余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得产物(7.48g,产率79.4％)。
实施例1 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((4-氧代- 3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺(化合物1)的制备
(1)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸(0.3g)，HATU(246mg,0.65mmol),二异丙基乙胺(140mg,1.08mmol)溶于THF/DCM(20mL,1:1)中，加入2-(((环丙基甲基)氨基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮(124mg,0.54mmol)，25℃反应1小时，反应完毕后减压蒸干，残余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得产物(0.16g,产率:60.5％)。
分子式:C28H32N4O4 分子量:488.59 LC-MS(m/z):489.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：.13.23(t,J＝6.8Hz,1H),8.26-8.31(m,1H),7.95(s,2H),7.68-7.74(m,2H),7.48(s,1H),6.95(s,2H),4.63(s,1H),4.53(s,1H),3.87(s,3H),3.30-3.41(m,5H),2.99-3.10(m,2H),2.65(s,1H),2.52(s,2H),1.86-2.32(m,3H),1.00(s,1H),0.08-0.55(m,4H)。
实施例2 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((1-氧代- 1,2-二氢异喹啉-3-基)甲基)乙酰胺(化合物2)的制备
(1)(Z)-2-(2-叠氮基-3-乙氧基-3-氧代丙烷-1-烯-1-基)苯甲酸的制备
将金属钠(1.38g,60mmol)溶于(200mL)乙醇中，加入2-甲酰基苯甲酸(1.5g,10mmol)，降温至-10℃，缓慢滴加叠氮乙酸乙酯(5.16g,40mmol)的乙醇溶液(50mL)，滴加完毕继续反应16小时，TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)检测反应完毕，稀盐酸调节pH＝2，乙酸乙酯(50mL×3)萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝200:1)纯化得产物(900mg,产率34.5％)。
(2)乙基1-氧代-1,2-二氢异喹啉-3-甲酸酯的制备
将(Z)-2-(2-叠氮基-3-乙氧基-3-氧代丙烷-1-烯-1-基)苯甲酸(500mg,1.91mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，加入亚磷酸三乙酯(477mg,2.87mmol)，25℃搅拌16小时，TLC检测(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)反应完毕，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得产物(205mg,产率49.3％)。
(3)3-(羟甲基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
将乙基1-氧代-1,2-二氢异喹啉-3-甲酸酯(205mg,0.944mmol)溶于甲醇(20mL)中，加入硼氢化钠(71.4mg,1.89mmol)，25℃反应16小时，TLC检测(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)反应完毕，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(155mg,产率93.7％)。
(4)1-氧代-1,2-二氢异喹啉-3-甲醛的制备
将3-(羟甲基)异喹啉-1(2H)-酮(155mg,0.885mmol)，溶于二氯甲烷(20mL)中，0℃加入戴斯-马丁氧化剂(525.9mg,1.24mmol)，25℃反应16小时，TLC检测反应完毕(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)，滤去不溶物，滤液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(103mg,产率67.2％)。
(5)3-(((环丙基甲基)氨基)甲基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
将1-氧代-1,2-二氢异喹啉-3-甲醛(103mg,0.595mmol)溶于甲醇(15mL)中，加入环丙甲胺(84.6mg,1.19mmol)，分批加入氰基硼氢化钠(93.6mg,1.49mmol)，25℃反应16小时，TLC检测反应完成(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化得产物(55mg,产率40.5％)。
(6)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((1-氧代-1,2-二氢异喹啉-3-基)甲基)乙酰胺的制备
将3-(((环丙基甲基)氨基)甲基)异喹啉-1(2H)-酮(55mg,0.241mmol)和2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸(66.8mg,0.241mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(137.6mg,0.362mmol)和N,N-二异丙基乙胺(77.6mg,0.6mmol)，25℃反应1小时，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝50:1)纯化得产物(32mg,产率27.2％)。
分子式：C29H33N3O4 分子量：487.6 LC-MS(m/z)：488.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.50-10.02(m,1H),8.33(d,J＝7.2,1H),7.94-7.92(m,2H),7.65-7.63(m,1H),7.52-7.48(m,2H),7.01-6.96(m,2H),6.51-6.42(m,1H),4.70-4.55(m,3H),3.89-3.67(m,7H),3.29-3.22(m,2H),2.75-2.45(m,2H),2.25-2.01(m,3H),0.91-0.87(m,2H),0.64-0.62(m,2H),0.49-0.44(m,1H),0.28-0.18(m,2H).
实施例3 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((4-氧代- 3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺(化合物3)的制备
(1)叔丁基4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸酯的制备
将4-甲氧基苯甲酸(1.52g,10mmol)和1-叔丁氧羰基哌嗪(1.86g,10mmol)加入到二氯甲烷(80mL)中，25℃搅拌下加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(2.3g,12mmol)和4-二甲氨基吡啶(121mg,1.0mmol)，加料完毕后，25℃反应4小时，加水(100mL)和二氯甲烷(60mL)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，得产物(2.8g,产率87.5％)。
(2)(4-甲氧基苯基)(哌嗪-1-基)甲酮的制备
将叔丁基4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸酯(2.8g,8.7mmol)加入到二氯甲烷(20mL)和三氟乙酸(20mL)的混合溶剂中，25℃搅拌0.5小时，TLC检测反应完全，浓缩，残留液加入饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)和二氯甲烷(100mL)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩得产物(862mg,产率44.9％)。
(3)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺(642.2mg粗品)和(4-甲氧基苯基)(哌嗪-1-基)甲酮(460mg,2.1mmol)溶于四氢呋喃(70mL)中，25℃搅拌0.5小时，降温至0℃，加入三乙胺(636mg,6.3mmol)，缓慢升温至25℃，搅拌3小时，加水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，粗品经中压制备液相分离(反相柱，乙腈/H2O＝0～64％)得终产物(300mg,产率:30.6％)。
分子式:C27H31N5O4 分子量:489.58 LC-MS(m/z)：490.3(M+H+)
1H NMR(400MHz,MeOD)δ:8.23-8.17(m,1H),7.85-7.78(m,1H),7.70-7.50(m,2H),7.40-7.36(m,2H),7.01-6.97(m,2H),4.76(s,1H),4.66(s,1H),3.84-3.64(m,6H),3.55(d,J＝6.8Hz,1H),3.45(d,J＝12.4Hz,2H),3.38(d,J＝6.8Hz,1H),2.75-2.56(m,4H),1.35-1.30(m,1H),1.12-1.01(m,1H),0.57(d,J＝7.6Hz,1H),0.43-0.40(m,1H),0.30(d,J＝5.2Hz,1H),0.22(d,J＝4.8Hz,1H).
实施例4 2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((4-氧代-3,4- 二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺(化合物4)的制备
(1)2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基) 乙酰胺的制备
将2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺(306mg,1.0mmol)，4-(哌啶-4-基氧基)苯甲腈(303mg,1.5mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入三乙胺(202mg,2.0mmol)，25℃下反应16小时，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得终产物(0.11g,产率23.4％)。
分子式:C27H29N5O3 分子量:471.56 LC-MS(M/e):472.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,MeOD)δ:8.18-8.23(m,1H),7.78-7.84(m,1H),7.56-7.71(m,2H),7.64(d,J＝8.8Hz,2H),7.08(d,J＝8.8Hz,2H),4.74(s,2H),4.59(s,3H),3.36-3.44(m,2H),2.84-2.88(m,2H),2.50-2.64(m,2H),2.05-2.16(m,2H),1.84-1.95(m,2H),0.82-1.05(m,1H),0.40-0.58(m,2H),0.20-0.32(m,2H).
实施例5 N-(环丙基甲基)-2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-基)-N-((4-氧 代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺(化合物5)的制备
(1)叔丁基4-((甲基磺酰基)氧基)哌啶-1-羧酸酯的制备
将4-羟基哌啶(3g,29.7mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，0℃加入三乙胺(7.52g,74.3mmol)，滴加二碳酸二叔丁酯(6.81g,31.2mmol)，滴加完毕25℃反应16小时，TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)检测反应完毕，降温至0℃，滴加甲磺酰氯(3.74g,32.67mmol)，滴加完毕25℃反应3小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)检测反应完毕，加水(100mL)，分液，有机相无水硫酸钠干燥，真空浓缩得产物(7.1g,产率85.6％)。
(2)叔丁基4-((4-甲氧基苯基)硫基)哌啶-1-羧酸酯的制备
将叔丁基4-((甲基磺酰基)氧基)哌啶-1-羧酸酯(2.79g,9.99mmol)溶于N,N-二甲基甲 酰胺(30mL)中，加入对甲氧基苯硫酚(1.4g,9.99mmol)和碳酸钾(3.46g,25mmol)，75℃搅拌16小时，TLC(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)检测反应完毕，滤去不溶物，加水(50mL)，乙酸乙酯(30mL×2)萃取，有机相水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化得产物(1.4g,产率43.3％)。
(3)叔丁基4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-羧酸酯的制备
将叔丁基4-((4-甲氧基苯基)硫基)哌啶-1-羧酸酯(1g,3.09mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中，0℃下加入间氯过氧苯甲酸(质量分数70％,2.29g,9.27mmol)，加完后升温至25℃搅拌16小时，TLC检测反应完毕(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，滤去不溶物，滤液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(800mg,产率72.8％)。
(4)4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶的制备
将叔丁基4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-羧酸酯(100mg,0.28mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，25℃搅拌1小时，TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)检测反应完毕，真空浓缩得产物(70mg,产率97.5％)。
(5)2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-基)乙酸乙酯的制备
将4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶(70mg,0.274mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入三乙胺(55.5mg,0.548mmol)，溴乙酸乙酯(50.1mg,0.3mmol)，加完后升至85℃搅拌1小时，TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)检测反应完毕，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1)得产物(85mg,产率90.8％)。
(6)2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-基)乙酸的制备
将2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-基)乙酸乙酯(85mg,0.249mmol)溶于甲醇(3mL)中，加入一水合氢氧化锂(26mg,0.62mmol)，25℃搅拌2小时，TLC(二氯甲烷:甲 醇＝10:1)检测反应完毕，稀盐酸调节pH＝2，减压蒸除甲醇，加水(2mL)，乙酸乙酯萃取(5mL×5)，有机相合并，真空浓缩得产物(71mg,产率91％)。
(7)N-(环丙基甲基)-2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-基)-N-((4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌啶-1-基)乙酸(71mg,0.227mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入2-(((环丙基甲基)氨基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮(52mg,0.227mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(129.3mg,0.34mmol)和N,N-二异丙基乙胺(73.4mg,0.568mmol)，25℃搅拌16小时，TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)检测反应完毕，浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝50:1)得终产物(32mg,产率26.9％)。
分子式：C27H32N4O5S 分子量：524.64 LC-MS(m/z)：525.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:12.7-10.3(m,1H),8.26-8.24(m,1H),7.85-7.72(m,3H),7.67-7.64(m,1H),7.49-7.47(m,1H),7.06-7.01(m,2H),4.58-4.48(m,2H),3.92-3.89(m,3H),3.36-3.26(m,4H),3.22-2.85(m,3H),2.50-2.45(m,1H),2.22-2.16(m,3H),2.05-1.72(m,3H),0.96-0.83(m,2H),0.53-0.20(m,4H)。
实施例6 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代- 6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物6)的制备
(1)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸(150mg,0.54mmol)和N,N-二异丙基乙胺 (139mg,1.08mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(224mg,0.59mmol)，25℃下反应15分钟，再加入5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(164mg,0.54mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(2mL)，25℃下反应30分钟。加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，分液，有机相真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝40:1)纯化得到产物(210mg,产率69.1％)。
(2)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(0.21g,0.37mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mol/L,5mL)，25℃下反应3小时，真空浓缩，残余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得终产物(110mg,产率:62.1％)。
分子式：C25H30N6O4 分子量：478.55 LC-MS(m/z)：479.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.04-7.92(m,3H),6.97-6.93(m,2H),4.53(s,1H),3.88(s,3H),3.46-3.24(m,6H),2.65-2.29(m,3H),2.10-1.89(m,3H),1.10-0.85(m,3H),0.57-0.40(m,2H),0.28-0.18(m,2H).
实施例9 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((1-甲基- 7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物9)的制备
(1)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((1-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(360mg,1.5mmol)、2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸(416mg,1.5mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(684mg,1.8mmol)和N,N-二异丙基乙胺(581mg,4.5mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，室温搅拌2小时。加入水(80mL)，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，有机相合并，用饱和食盐水(150mL)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得产物(80mg,产率:10.1％)。
分子式：C26H32N6O4 分子量：492.2 LC-MS(m/z)：493.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.02-7.90(m,2H),7.90-7.81(m,1H),7.00-6.91(m,2H),4.62-4.42(m,2H),4.35-4.25(m,3H),3.88(s,3H),3.50-3.38(m,3H),3.30-3.22(m,1H),3.20-1.98(m，2H),2.78-2.60(m,1H),2.40-2.25(m,1H),2.12-2.03(m,1H),2.03-1.96(m,1H),1.96-1.80(m,1H),1.03-0.82(m,4H),0.62-0.36(m,2H),0.35-0.18(m,2H).
实施例10 2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-6,7- 二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物10)的制备
(1)2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将5-((环丙基甲基氨基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(0.85g,2.8mmol)和三乙胺(1.1g,10.9mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，冷却至0℃，缓慢滴加2-氯乙酰氯(0.63g,5.6mmol)，升温至25℃，反应16小时，LC-MS检测反应完成，将溶剂浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)和水(20mL)，分液，有机相浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得产物(0.53g,产率49.8％)。
(2)2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(500mg,1.3mmol)，4-(哌啶-4-基氧基)苯乙腈(0.26g,1.3mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入三乙胺(0.26g,2.6mmol)，25℃下反应16小时，LC-MS检测反应完成，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得产物(0.21g,产率29.6％)。
(3)2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(0.21g,0.38mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入氯化氢1,4-二氧六环溶液(5mL)，25℃下反应3小时，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得终产物(0.11g,产率61.1％)。
分子式:C24H27N7O3 分子量:461.5 LC-MS(m/z):462.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:14.12(s,1H),12.73(s,1H),8.06(s,1H),7.70-7.74(m,2H),7.07-7.12(m,2H),4.49-4.65(m,3H),3.20-3.43(m,4H),2.72-2.81(m,2H),2.30-2.37(m,2H),1.87-2.02(m,2H),1.58-1.65(m,2H),0.82-1.03(m,1H),0.32-0.45(m,2H),0.11-0.23(m,2H)。
实施例11 2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((1-甲基-7-氧 代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物11)的制备
(1)2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((1-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将5-((环丙基甲基氨基)甲基)-1-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(0.58g,2.5mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，冰水浴下加入2-氯乙酰氯(1.4g,12.4mmol)，升至25℃，反应16小时，LC-MS检测反应完成，浓缩，剩余物加入乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠溶液(20mL)，分液，有机相浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得产物(0.52g,产率67.5％)。
(2)2-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((1-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-氯-N-(环丙基甲基)-N-((1-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(500mg,1.6mmol)，4-(哌啶-4-基氧基)苯甲腈(0.32g,1.6mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入三乙胺(0.32g,3.2mmol)，25℃下反应16小时，LC-MS检测反应完成，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得终产物(151mg,产率：19.9％)。
分子式:C25H29N7O3 分子量:475.5 LC-MS(m/z):476.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.78(s,1H),7.93(s,1H),7.70-7.73(m,2H),7.08-7.12(m,2H),4.64(s,2H),4.48-4.51(m,1H),4.17(s,3H),3.20-3.42(m,4H),2.72-2.81(m,2H),2.30-2.37(m,2H),1.87-2.02(m,2H),1.58-1.65(m,2H),0.82-1.03(m,1H),0.32-0.45(m,2H),0.11-0.23(m,2H).
实施例12 N-(环丙基甲基)-2-(4-(羟基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)-N- ((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物12)的制备
(1)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸(0.4g,1.4mmol)，5-(((环丙基甲基)氨基) 甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(0.42g,1.4mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入二异丙基乙胺(0.36g,2.8mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N,N′-四甲基脲六氟磷酸酯(0.64g,1.7mmol)，25℃下，反应3小时，加入100mL水，乙酸乙酯(2×30mL)萃取，合并有机相，旋干，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得产物(0.46g,产率58.2％)。
(2)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(0.46g,0.8mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入氯化氢1,4-二氧六环溶液(5mL)，25℃下反应3小时，旋干，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得产物(0.25g,产率65.8％)。
(3)N-(环丙基甲基)-2-(4-(羟基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(0.25g,0.5mmol)溶于甲醇(25mL)中，加入硼氢化钠(0.1g,2.6mmol)，25℃下反应3小时，加入5mL水，浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得产物(0.15g,产率62.5％)。
分子式:C25H32N6O4 分子量:480.6 LC-MS(m/z):481.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,MeOD-d4)δ:7.23,7.90(s,s,1H),7.20(d,J＝8.8Hz,2H),6.87(d,J＝8.4Hz,2H),4.61-4.68(m,2H),4.25(d,J＝8.2Hz,1H),3.81(s,3H),3.44-3.50(m,2H),3.28-3.33(m,2H), 3.12-3.15(m,1H),2.94-2.98(m,1H),1.98-2.15(m,3H),1.44-1.71(m,3H),0.95-1.18(m,2H),0.39-0.54(m,2H),0.17-0.26(m,2H).
实施例13 N-(环丙基甲基)-2-(4-(甲氧基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)-N- ((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物13)的制备
(1)2-(4-(羟基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酸甲酯的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸甲酯(0.6g,2.0mmol)溶于甲醇(25mL)中，加入硼氢化钠(0.15g,4.0mmol)，25℃下反应3小时，加入5mL水，旋干，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝40:1)得产物(0.35g,产率57.4％)。
(2)2-(4-(羟基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酸的制备
将2-(4-(羟基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酸甲酯(0.35g,1.1mmol)溶于甲醇(20mL)中，加入2N氢氧化钠(3.0mL,6.0mmol)，25℃下，反应3小时，浓缩，剩余物中加入20mL水，调节pH＝4，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得标题产物0.23g，产率：74.2％。
(3)N-(环丙基甲基)-2-(4-(羟基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
参考实施例12第(1)步的制备方法制备。
(4)N-(环丙基甲基)-2-(4-(甲氧基(4-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
参考实施例12第(2)步的制备方法制备。
分子式:C26H34N6O4 分子量:494.6 LC-MS(m/z):495.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,MeOD-d4)δ:7.92,8.02(s,s,1H),7.13-7.19(m,2H),6.88-6.93(m,2H),4.59-4.66(m,3H),3.79(s,3H),3.77-3.84(m,1H),3.41-3.43(m,2H),3.30(s,3H),2.95-3.17(m,2H),2.07-2.21(m,2H),1.29-1.62(m,4H),0.88-1.01(m,3H),0.39-0.56(m,2H),0.10-0.20(m,2H)
实施例14 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((7-氧代- 6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物14)的制备
(1)乙基2-(哌嗪-1-基)乙酸酯的制备
将叔丁基4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸(300mg,1.1mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，反应2小时，反应液直接浓缩得产物(192mg粗品)， 不经纯化直接用于下一步。
(2)乙基2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸酯的制备
将乙基2-(哌嗪-1-基)乙酸酯(192mg粗品,1.1mmol)和三乙胺(333mg,3.3mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，加入4-甲氧基苯甲酰氯(290mg,1.7mmol)，25℃下反应2小时，加入水(80mL)和二氯甲烷(80mL)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(285mg,两步产率83.4％)。
(3)2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸的制备
将乙基2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸酯(285mg,0.9mmol)溶解于甲醇(10mL)中，加入2mol/L的氢氧化锂溶液(4mL)，室温搅拌3小时。将反应液浓缩至约8mL，加入乙酸乙酯(10mL)萃取，所得水相用1mol/L的盐酸调pH值至3后浓缩。将所得固体混合物加入四氢呋喃(20mL)中，搅拌0.5小时，抽滤，滤饼用四氢呋喃洗(10mL)，滤液浓缩得产物(230mg,产率88.9％)。
(4)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((2-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸(230mg,0.8mmol)、5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(272mg,0.8mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(380mg,1.0mmol)和N,N-二异丙基乙胺(310mg,2.4mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中，室温搅拌2小时。加入水(50mL)，乙酸乙酯(60mL×2)萃取，有机相合并，饱和食盐水(150mL)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得产物(280mg,产率56.5％)。
(5)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并 [4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((2-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(280mg,0.5mmol)溶解于三氟乙酸(10mL)中，加入苯甲醚(0.3mL)，加热至回流反应8小时。反应液直接浓缩，粗品经硅胶柱层析得产物(25mg,产率11.2％)。
分子式：C24H29N7O4 分子量：479.54 LC-MS(m/z)：480.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:13.45,11.05(s,1H),8.10-7.95(m,1H),7.50-7.40(m,2H),7.02-6.89(m,2H),4.90-4.50(m,2H),4.18-3.95(m,2H),3.95-3.72(m,5H),3.65-3.55(m,1H),3.45-3.42(m,1H),3.40-3.25(m,2H),2.98-2.60(m,4H),1.10-0.80(m,2H),0.68-0.55(m,1H),0.50-0.38(m,1H),0.35-0.20(m,2H).
实施例15 N-(环丙基甲基)-2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-基)-N-((7- 氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物15)的制备
(1)叔丁基4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
将叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(2.79g,15mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，加入三乙胺(3.03g,3.0mmol)，冰浴下慢慢加入4-甲氧基苯磺酰氯(3.1g,15mmol)，升至25℃反应12小时。反应液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化得到产物(4.0g,产率74.9％)。
(2)1-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪的制备
将叔丁基4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-羧酸酯(4.0g,11.2mmol)加到二氯甲烷(20mL)中，加入三氟乙酸(10mL)，25℃下反应4小时。反应液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝50:1)纯化得到产物(2.5g,产率87.1％)。
(3)乙基2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-基)乙酸酯的制备
将1-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪(233mg,0.91mmol)和三乙胺(184mg,1.82mmol)溶于乙腈(20mL)，冰浴下滴加2-溴乙酸乙酯(167mg,1.0mmol)，滴加完毕，升温到85℃继续反应8小时。反应液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化得产物(250mg,产率80.3％)。
(4)2-(4-(4-甲氧基苯磺酰基)哌嗪-1-基)乙酸的制备
将乙基2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-基)乙酸酯(250mg,0.73mmol)加入到乙醇(6mL)中，然后加入氢氧化钠(84mg,2.1mmol)的水溶液(2mL)，25℃下反应8小时。用盐酸将调节pH值到4，真空浓缩，所得粗品使用二氯甲烷/甲醇(10/1，20mL×2)洗涤，过滤除掉氯化钠，所得滤液真空浓缩得到产物(200mg,产率87.3％)。
(5)N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯磺酰基)哌嗪-1-基)乙酰胺的制备
将2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-基)乙酸(170mg,0.54mmol)和N,N-二异丙基乙胺(139mg,1.08mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，再加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(224mg,0.59mmol)，反应液25℃下反应15分钟，再加入5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(183mg,0.54mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液，25℃下反应30分钟。加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，分液，有机相真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝40:1)纯化得到产物(200mg,产率58.2％)。
(6)N-(环丙基甲基)-2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-(4-((4-甲氧基苯基)磺酰基)哌嗪-1-基)乙酰胺(200mg,0.31mmol)溶于三氟乙酸(20mL)中，加入催化量的苯甲醚(0.2mL)，于90℃下反应12小时。反应液真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得终产物(120mg,产率75.1％)。
分子式：C23H29N7O5S 分子量：515.59 LC-MS(m/z)：516.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.78(brs,1H),8.01(brs,1H),7.73-7.60(m,2H),7.22-7.14(m,2H),4.56-4.48(m,2H),3.87-3.84(m,3H),3.70-3.00(m,8H),2.80-2.60(m,2H),0.90-0.80(m,1H),0.45-0.15(m,4H).
实施例16 N-(环丙基甲基)-2-(4-(2-(4-甲氧基苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)-N- ((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物16)的制备
(1)N-(环丙基甲基)-N-((2-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-(4-(2-(4-甲氧基苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-N-((2-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基) 甲基)-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺(465mg,1.0mmol)和对甲氧基苯乙酸(166mg,1.0mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中，搅拌下加入三乙胺(202mg,2.0mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(494mg,1.3mmol)，25℃下搅拌反应2小时，LC-MS检测反应完全，加水(100mL)和乙酸乙酯(150mL)，分液，有机相用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩得产物(600mg,产率97.8％)。
(2)N-(环丙基甲基)-2-(4-(2-(4-甲氧基苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-N-((2-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-(4-(2-(4-甲氧基苯基)乙酰基)哌嗪-1-基)乙酰胺(600mg,0.98mmol)加入到三氟乙酸(50mL)和苯甲醚(0.5mL)中，升温至80℃反应16小时。冷却至室温，减压蒸除溶剂，加饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)，超声震荡出现沉淀，抽滤，滤饼用水(100mL)洗涤，真空干燥得终产物(410mg,产率84.8％)。
分子式：C25H31N7O4 分子量：493.57 LC-MS(m/z)：494.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:13.21,11.15(s,1H),8.04-7.97(m,1H),7.19-7.16(m,2H),6.89-6.86(m,2H),4.72(s,1H),4.55(s,1H),3.98-3.88(m,3H),3.81(s,3H),3.72(d,J＝3.6Hz,3H),3.52-3.27(m,4H),2.71-2.67(m,2H),2.60-2.50(m,2H),0.99-0.91(m,1H),0.59-0.19(m,4H).
实施例17 2-(4-(4-氰基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-6, 7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物17)的制备
(1)2-(4-(4-氰基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将4-氰基苯甲酸(0.147g,1.0mmol)和N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺(0.466g,1.0mmol)，溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.418g,1.1mmol)，三乙胺(0.152g,1.5mmol)，25℃反应1小时后，倒入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到产物(0.405g,产率68.1％)。
(2)2-(4-(4-氰基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-氰基苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(0.100g，0.17mmol)，溶于三氟乙酸(5mL)，滴加苯甲醚(0.1mL)，升温至90℃反应2小时，反应完毕，将反应液浓缩，加入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，经柱层析(二氯甲烷:甲醇＝10:1)得到终产物(50mg,产率61.7％)。
分子式：C24H26N8O3 分子量：474.5 LC-MS(m/z)：475.3(M+H+)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:14.03-14.15(m,1H),12.07-12.58(m,1H),8.15-8.29(m,1H),7.86-7.90(m,2H),7.51-7.57(m,2H),4.64(d,J＝21.6Hz,1H),4.48(d,J＝17.2Hz,1H),3.61(d,J＝28.4Hz,2H),3.39-3.41(m,1H),3.19-3.32(m,5H),2.43-2.54(m,4H),0.87-1.03(m,1H),0.43(d,J＝7.6Hz,1H),0.32(d,J＝7.2Hz,1H),0.26(s,1H),0.10(s,1H).
实施例18 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((7-氧代-6,7- 二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物18)的制备
(1)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺(466mg,1.0mmol)，三乙胺(203mg,2.0mmol),加入到二氯甲烷(30mL)中，降至0℃，然后缓慢滴加4-氟苯甲酰氯(159mg,1.0mmol)保持0℃反应1小时，反应完毕后减压蒸干，得产物(0.6g,粗品)。
(2)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(0.6g,粗品)溶于三氟乙酸(10mL)中，然后加入苯甲醚(0.1mL)。加热至90℃反应3小时，反应完毕后，浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝20:1)得产物(0.26g,两步产率:55.6％)。
分子式：C23H26FN7O3 分子量：467.5 LC-MS(m/z)：468.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：7.99,8.06(s,s,1H),7.45-7.53(m,2H),7.09-7.14(m,2H),4.58,4.74(s,s,2H),3.72-4.20(m,4H),3.60(s,1H),3.44(s,1H),3.28-3.34(m,2H),2.76(s,4H),0.99-1.00(m,1H),0.59(d,J＝7.6Hz,1H),0.43(d,J＝7.6Hz,1H),0.27(d,J＝4.4Hz,1H),0.22(d,J＝4.4Hz,1H).
实施例19 2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-6,7- 二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(化合物19)的制备
(1)4-氯苯甲酰氯的制备
将4-氯苯甲酸(1.57g,10.0mmol)溶于干燥的二氯甲烷(100mL)中，加入催化量的DMF(0.1mL)，冰浴，氮气保护下缓慢加入草酰氯(1.52g,12.0mmol)，加完升至室温(25℃)反应2小时。反应完毕，浓缩，加入二氯甲烷(20mL)，再次浓缩得产物1.7g,产率97.1％。
(2)叔丁基4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸酯的制备
将4-氯苯甲酰氯(1.7g,9.7mmol)溶于二氯甲烷中(20mL)，冰浴冷却，加入三乙胺(1.01g 10.0mmol)，缓慢加入N-Boc-哌嗪(1.86g,10.0mmol)，加完后，升温至25℃搅拌1小时，将反应液倒入水(50mL)中。用乙酸乙酯(100mL)萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题产物2.9g，产率92.1％。
(3)(4-氯苯基)(哌嗪-1-基)甲酮的制备
将叔丁基4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸酯(2.9g,8.9mmol)溶于二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(10mL)的混合溶液中，室温25℃反应2小时。反应完毕，浓缩得到粗产物1.8g。
(4)2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯的制备
将(4-氯苯基)(哌嗪-1-基)甲酮(1.8g,8.0mmol)溶于乙腈中(50mL)，加入溴乙酸乙酯(1.34g,8.0mmol)、碳酸钾(1.1g,8.0mmol)，60℃反应4小时。反应完毕，抽滤，滤液减压脱除溶剂得到粗产物，柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)分离得产物2.0g，产率80.3％。
(5)2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸的制备
将2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(2.0g,6.4mmol)溶于甲醇中(30mL)，加入氢氧化锂(154mg,6.4mmol)，室温(25℃)反应4小时。反应完毕，加入稀盐酸(1mol/L,10mL)，用乙酸乙酯(100mL)萃取，无水硫酸钠干燥，柱色谱分离(DCM:MeOH＝20:1)得产物1.5g，产率82.4％。
(6)2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酰氯的制备
将2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酸(566mg,2.0mmol)溶于干燥的二氯甲烷(20mL)中，加入催化量的DMF(0.05mL)，冰浴，氮气保护下缓慢加入草酰氯(279mg,2.2mmol)，加完升至室温(25℃)反应2小时。反应完毕，浓缩，加入二氯甲烷(20mL)，再次浓缩得产物550mg,产率91.4％。
(7)2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙酰氯(550mg,1.83mmol)溶于二氯甲烷中(20mL)，冰浴，加入三乙胺(202mg,2.0mmol)，缓慢加入5-(((环丙基甲基)氨基)甲基)-1-(4-甲氧基苄基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(510mg,1.5mmol)，加完后，升至25℃搅拌1小时，将反应液倒入水(50mL)中。用乙酸乙酯(100mL)萃取，无水硫酸钠干燥，柱色谱分离(DCM:MeOH＝20:1)得产物207mg，产率22.8％。
(8)2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶 -5-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)-N-(环丙基甲基)-N-((1-(4-甲氧基苄基)-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)甲基)乙酰胺(207mg,0.34mmol)溶于三氟乙酸(10mL)中，90℃反应2小时。反应完毕，冷至室温(25℃)，加入乙酸乙酯(20mL)，析出固体，抽滤，滤出的固体干燥得产物100mg，产率60.2％。
分子式：C23H26ClN7O3 分子量：484.0 LC-MS(m/z):484.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,MeOD-d4)δ:7.90-8.05(m,1H),7.44(d,J＝6.8Hz,2H),7.41(d,J＝6.4Hz,2H),4.63,4.67(s,s,2H),3.75-3.90(m,2H),3.50-3.65(m,2H),3.30-3.50(m,4H),2.55-2.75(m,4H),0.85-1.00(m,1H),0.40-0.60(m,2H),0.20-0.35(m,2H).
实施例20 N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((4-氧代- 3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)甲基)乙酰胺(化合物20)的制备
(1)1-氨基-1H-咪唑-5-甲酸甲酯的制备
将1H-咪唑-5-甲酸甲酯(2g,15.86mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50mL)，0℃加入氢化钠(质量分数60％,760mg,19mmol)，搅拌0.5小时，加入O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(3.47g,17.45mmol)，升温至25℃反应16小时，TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)检测反应完全，加水(50mL)，乙酸乙酯萃取(50mL×2)，有机相合并，水洗(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得产物(1.1g,产率49.1％)。
(2)2-(氯甲基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮的制备
将1-氨基-1H-咪唑-5-甲酸甲酯(1.1g,7.8mmol)溶于氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4mol/L,10mL)中，加入氯乙腈(883.4mg,11.7mmol)，25℃搅拌1小时，真空浓缩，加入乙腈(10mL)和饱和碳酸氢钠溶液(2mL)，50℃搅拌1小时。TLC检测反应完全(二氯甲烷:甲醇＝20:1)，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝50:1)纯化得产物(720mg,产率50％)。
(3)2-(((环丙基甲基)氨基)甲基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮的制备
将2-(氯甲基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮(500mg,2.71mmol)溶于乙腈(25mL)中，加入环丙甲胺(770.7mg,10.84mmol)，25℃反应16小时，TLC检测反应完毕(二氯甲烷:甲醇＝10:1)，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得产物(50mg,产率8.4％)。
(4)N-(环丙基甲基)-2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)-N-((4-氧代-3,4-二氢咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)甲基)乙酰胺的制备
将2-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酸(63.2mg,0.228mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入2-(((环丙基甲基)氨基)甲基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮(50mg,0.228mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(104.2mg,0.274mmol)和N,N-二异丙基乙胺(88.4mg,0.684mmol)，25℃搅拌1小时。TLC检测反应完全(二氯甲烷:甲醇＝10:1)，加水(5mL)，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相合并，水洗，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化得终产物(65mg,产率59.6％)。
分子式：C25H30N6O4 分子量：478.55 LC-MS(m/z)：479.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.07-8.06(m,1H),7.96-7.86(m,3H),7.12-6.81(m,3H),4.52-4.40(m,2H),3.89(s,3H),3.43-3.25(m,4H),3.15-2.96(m,2H),2.68-2.57(m,1H),2.40-2.25(m,2H),2.10-2.00(m,2H),1.90-1.85(m,2H),0.98-0.85(m,1H),0.63-0.46(m,2H),0.34-0.24(m,2H)。

Claims (10)

1.通式(Ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体：
其中，X1、Z、L各自独立的选自CH、N原子；
X2选自NH；
R1选自氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、氨基磺酰基C1-6烷基、氨基磺酰氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烷基C1-6烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基或5-12元杂芳基C1-6烷基；
所述3-14元环烷基、3-14元环烷基C1-6烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基、或5-12元杂芳基C1-6烷基可任选被卤素原子、氰基、氨基、硝基、羧基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基磺酰氨基取代；
Y选自任选被P1取代的C1-6烷基，P1选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基酰氨基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺酰基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基、羧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烷基C1-6烷基、3-14元环烷基C1-6烷氧基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、3-8元杂环基C1-6烷氧基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-12元杂芳基或5-12元杂芳基C1-6烷基；
Q选自键、CRbRc、NRd、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、C(O)OCRbRc、S(O)或S(O)2；
Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基磺酰氨基；
Rd选自氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺酰基或C1-6烷基酰氨基；
R2、R3分别独立地选自氢原子、卤素原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基C1-6烷氧基；
环A选自任选被取代基P2取代的6-14元芳基、5-12元杂芳基、3-14元环烷基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基羰氧基、C1-6烷基酰氨基或C1-6烷基磺酰氨基；
m选自1、2、3或4；
n选自0、1、2、3、4或5。
2.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、Z、L各自独立的选自CH、N原子；
X2选自NH；
R1选自氢原子、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-4烷基、4-6元杂环基、4-6元杂环基C1-4烷基、苯基、苯基C1-4烷基、5-6元杂芳基或5-6元杂芳基C1-4烷基；
所述3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-4烷基、4-6元杂环基、4-6元杂环基C1-4烷基、苯基、苯基C1-4烷基、5-6元杂芳基或5-6元杂芳基C1-4烷基可任选被卤素原子、氰基、氨基、硝基、羧基、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基取代；
Y选自任选被P1取代的C1-4烷基，P1选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基羰基氧基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基；
Q选自键、CRbRc、NRd、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、S(O)或S(O)2；
Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
Rd选自氢原子、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷基羰基或C1-4烷基磺酰基；
R2、R3分别独立地选自氢原子、卤素原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基或羧基C1-4烷基；
环A选自任选被取代基P2取代的苯基、5-6元杂芳基、5-6元环烷基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基羰氧基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基；
m选自1、2或3；
n选自0、1、2、3或4。
3.根据权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，具有式(Ⅱ)所述的结构，
4.根据权利要求3所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、L各自独立的选自CH、N原子；
环A选自任选被取代基P2取代的苯基或5-6元含氮杂芳基；
P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基酰氨基或C1-4烷基磺酰氨基。
5.根据权利要求4所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，P2选自羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、卤素原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、甲基氨基、二甲氨基、甲酰基、甲磺酰基、甲酰氨基或甲基磺酰氨基；
Q选自CRbRc、O、S、C(O)、C(O)CRbRc、S(O)或S(O)2；
Rb、Rc分别独立地选自氢原子、羟基、氨基、羧基、硝基、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、甲酰基、乙酰基、甲基氨基、乙基氨基或二甲氨基；
R2、R3选自氢原子、氟原子、氯原子、溴原子、氰基、羟基、氨基、羧基、硝基、甲基、乙基、丙基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、羟基甲基、氨基甲基或羧基甲基。
6.根据权利要求4或5所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，
其中，X1、L各自独立的选自CH、N原子；
环A选自苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基或吡嗪基。
7.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，所述化合物选自：
8.药物组合物，该组合物含有权利要求1～7任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其特征在于含有一种或多种药用载体。
9.如权利要求8所述的药物组合物，进一步含有一种或多种抗肿瘤剂和/或免疫抑制剂，所述的抗肿瘤剂和/或免疫抑制剂为
(1)抗代谢物，选自卡培他滨、吉西他滨、培美曲塞二钠；
(2)生长因子抑制剂，选自帕唑帕尼、伊马替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、吉非替尼、凡德他尼；
(3)抗体，选自赫赛汀、贝伐单抗；
(4)有丝分裂抑制剂，选自紫杉醇、长春瑞滨、多西他赛、多柔比星；
(5)抗肿瘤激素类，选自来曲唑、他莫西芬、氟维司群、氟他胺、曲普瑞林；
(6)烷化剂类，选自环磷酰胺、氮芥、马法兰、瘤可宁、卡莫司汀；
(7)金属铂类，选自卡铂、顺铂、奥沙利铂；
(8)拓扑异构酶抑制剂，选自拓扑特肯喜树碱、拓扑替康、依立替康；
(9)免疫抑制剂类，选自依维莫司、西罗莫司、特癌适；
(10)嘌呤类似物，选自6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、硫唑嘌呤；
(11)抗生素类，选自菌素D、柔红霉素、阿霉素、米托蒽醌、博来霉素、普卡霉素；
(12)肾上腺皮质激素抑制剂，选自氨鲁米特、地塞米松；
(13)组蛋白去乙酰化酶抑制剂，选自伏立诺他。
10.权利要求1-7任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体在制备治疗和/或预防端锚聚合酶介导的癌症及相关疾病的药物中的用途，所述癌症选自脑瘤、肺癌、非小细胞性肺癌、鳞状上皮细胞癌、膀胱癌、胃癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、头颈癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、直肠癌、肝癌、肾癌、食管腺癌、食管鳞状细胞癌、实体瘤、前列腺癌、甲状腺癌、雌性生殖道癌、原位癌、淋巴瘤、神经纤维瘤、骨癌、皮肤癌、脑癌、结肠癌、睾丸癌、小细胞肺癌、胃肠道间质瘤、前列腺肿瘤、肥大细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、胶质瘤或肉瘤；所述的相关疾病包括阿尔兹海默症、骨质疏松症、皮肤病、心血管疾病、II型糖尿病。
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