CN107200611A - 一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用 - Google Patents
一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107200611A CN107200611A CN201710580102.9A CN201710580102A CN107200611A CN 107200611 A CN107200611 A CN 107200611A CN 201710580102 A CN201710580102 A CN 201710580102A CN 107200611 A CN107200611 A CN 107200611A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- trichoderma atroviride
- bacterial manure
- sweet wormwood
- trichoderma
- seedling
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N3/00—Spore forming or isolating processes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Fertilizers (AREA)
Abstract
本发明提供了一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，所述青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥中深绿木霉菌的特征核苷酸序列为T‑a21特异序列。本发明提供的深绿木霉菌肥具有改善土质的作用；木霉菌肥具有较强抑制病原菌的作用，可降低作物病害发生率；菌肥和化肥复配可提高化肥的利用效率，而单施化肥造成养分的流失和固定，利用率越来越低；菌肥生产过程无污染，可利用废物，耗能较低。化肥生产过程污染严重，且高耗能耗资源。
Description
技术领域
本发明涉及一种有机菌肥，更具体的说涉及一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用。
技术背景
有机菌肥是将一种或多种有益微生物植入有机物中制备而成的一种新型肥料，多效有机菌肥的有机物既是肥力的基础，又是有益微生物的培养基质。这种新型肥料兼具促生长、抗病、改善土质、无农残等多重优点，目前已在国内外得到大量应用，且取得了显著效果。
木霉(Trichoderma Pers.ex Fr.)属真菌属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目的黏菌种类，，土壤中较多，腐烂的木材中也常发现。其形态特征：菌丝透明有隔，分枝丰富，分枝上可再分枝，分枝顶端为小梗，瓶状，束生、对生、互生或单生，由小梗生出分生孢子，多个分生孢子粘聚成球形的孢子头。由于它能产纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、几丁质酶和蛋白酶等酶类化合物，又能合成核黄素、抗生素、转化甾族化合物，所以它是重要工业制剂的生产菌；此外，它与植物共生时能促进植物的生长发育，且能诱发植物自身免疫功能，对多种植物病原菌具有拮抗作用，所以它常作为植物病害的生物防治菌；木霉可以分解纤维素，从而促进植物对土壤养分的吸收，因此能够促进植物生长；木霉还可以降解农药；少数木霉能引起食用菌的病害及果实、薯块、蔬菜的腐烂。目前发现的木霉多种多样，包括侵占木霉(T.aggressivum)、棘孢木霉(T.asperellum)、深绿木霉(T.atroviride)、黄绿木霉(T.aureoviride)、短密木霉(T.brevicompactum)、蜡素木霉(T.cerinum)、绿孢木霉(T.chlorosporum)、橘绿木霉(T.citrinoviride)、致密木霉(T.compactum)、猬木霉(T.erinaceum)、顶孢木霉(T.fertile)、钩状木霉(T.hamatum)、哈茨木霉(T.harzianum)、交织木霉(T.intricatum)康宁木霉(T.koningii)、拟康宁木霉(T.koningiopsis)、长枝木霉(T.longibranchiatum)、长毛木霉(T.longipile)、微孢木霉(T.minutisporum)、矩孢木霉(T.oblongisporum)、侧耳木霉(T.pleuroticola)、多孢木霉(T.polysporum)、假康宁木霉(T.pseudokoningii)、软毛木霉(T.pubescens)、李氏木霉(T.reeseii)、中国木霉(T.sinensis)、螺旋木霉(T.spirale)、粗壮木霉(T.strigosum)、绒毛木霉(T.tomentosum)、毛簇木霉(T.velutinum)、粘绿木霉(T.virens)、绿色木霉(T.viride)、云南木霉(T.yunnanense)等。总之，木霉是研发有机菌肥的优质菌种之一。
以绿色木霉为主要成分的利江牌微生物肥(绿色木霉)，是利江实业公司研制的一种木霉微生物肥料。该菌肥对黄瓜、芹菜、油菜等都有显著的增产作用，并且能够促进早熟，改善作物品质，还可抑制病虫害的发生。可见，以绿色木霉为主要成分的木霉微生物肥料具有多种效果，而且符合当今农产品生产绿色环保无公害无农残及可持续发展的要求，具有广阔的市场前景。
发明内容
本发明提供了一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，所述青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥中深绿木霉菌孢子中，深绿木霉菌的特征核苷酸序列为T-a21特异序列。
上述青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，其特征在于，所述深绿木霉菌肥制备包括以下步骤：
1)细木屑:麦粒＝15-20:1，混匀，浸泡透心,挤干多余水分，装罐头瓶，高温高压灭菌；
2)冷却后接种深绿木霉试管种，25℃培养，每天光照/黑暗各12小时，诱导分生孢子；
3)约5-7天分生孢子大量出现后，清水多次洗涤培养基，洗下分生孢子；
4)制备孢子悬浮液，得到深绿木霉菌肥。
上述青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，其特征在于：所述深绿木霉菌为从青蒿侧枝中分离，并经过专用培养基培养得到。
上述的一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥在青蒿幼苗生长时施用。
4-5月份，在青蒿幼苗长至15-20厘米左右时，在苗根际施用分生孢子悬浮液约3-5ml/株。
本发明的有益技术效果是：现有深绿木霉孢子培养培养基一般有纯麦麸、麦麸+泥土、纯麦粒、麦麸+稻壳等。纯麦粒成本高，且我们的研究发现，纯麦粒、纯麦麸均不能产生分生孢子，可见其培养效果不稳定。麸皮加泥土或稻壳，因深绿木霉对纤维素降解利用能力不强，因此麸皮稻壳养分不足，不能多次多批长出健壮孢子，利用效率低，相对成本较高。本发明采用细木屑与麦粒的组合，大量加入木屑可以降低培养基成本，麦粒中的淀粉可为木霉提供充足养分，保证可以长出多批健壮的分生孢子,提高了培养基利用效率。此外，生产上制作菌肥，麦粒粉碎后，麦粉可以为深绿木霉分生孢子在土壤中萌发生长提供充足的养分，利于木霉充分发挥其促生抗病作用。
化肥造成土壤板结，污染水体，且会影响药材的品质；本发明提供的深绿木霉菌肥具有改善土质的作用，可提高药材品质；化肥含重金属，污染土壤和作物。微生物肥不含重金属，且对重金属污染的土壤有修复作用；化肥降低作物根际菌群多样性，增加病害发生率。木霉菌肥具有较强抑制病原菌的作用，可降低作物病害发生率；菌肥和化肥复配可提高化肥的利用效率，而单施化肥造成养分的流失和固定，利用率越来越低；菌肥生产过程无污染，可利用废物，耗能较低。化肥生产过程污染严重，且高耗能耗资源。
具体实施方式
实施例1深绿木霉的分离及菌肥培养
从青蒿侧枝中分离深绿木霉菌菌株，经过筛选获得强壮的深绿霉菌菌株(测定菌株孢子生长速度快的菌株)，经送宝生物工程(大连)有限公司(大连TakaRa公司)测序证实为深绿木霉菌变异株，其特异序列见核苷酸序列表T-a21特异序列。
利用上述深绿木霉菌株进行分生孢子诱导技术研究，设置以下9种培养方式，比较分生孢子发生效率，优选最佳培养方式。具体如表1所示。
表1深绿木霉产孢培养条件研究
发现除1、2两种实验室用基质以外，以细木屑和麦粒混合的基质，深绿木霉菌孢子表现出最好的生长特性。进一步考察细木屑和麦粒的组合，具体如表2所示。
表2深绿木霉产孢培养条件优化
从表2可见，“2、3、4”号处理的孢子发生情况最好，且均能持续生产数茬孢子。但从减少麦粒用量，节约成本角度出发，以2,3号处理为佳。即可以将细木屑：麦粒＝15-20:1作为深绿木霉菌肥孢子培养的基质。
实施例2深绿木霉菌肥对青蒿幼苗的促生效果考察试验1
选择地势平坦，向阳的试验地，3月在育苗格中培养青蒿苗，间苗后留苗1株/格。4月下旬，青蒿苗长至15-20厘米左右时，在苗根际施用实施例1制备的深绿木霉分生孢子悬浮液约5ml/株，部分青蒿苗在10-15天后施用第二次菌肥5ml/株。以施用氮磷钾复合肥100mg/株一次和施用清水为对照。50-60株/处理。施肥约25-30天左右，统计苗的各项生长指标，比较不同处理的效果，结果如表3。
表3深绿木霉分生孢子不同施用次数对青蒿幼苗生长的影响
| 处理 | 根粗(mm) | 茎粗(mm) | 根长(cm) | 株高(cm) | 地下鲜重(g) |
| 复合肥 | 4.27±1.1a | 4.35±0.91a | 17.67±3.59a | 45.31±9.38a | 1.32±0.72a |
| 菌肥二次 | 4.22±0.92a | 4.12±0.74a | 18.47±3.92a | 39.59±8.35b | 1.39±0.67a |
| 菌肥一次 | 4.17±0.79a | 4.23±0.76a | 17.79±3.53a | 39.77±9.51b | 1.31±0.56a |
| 清水对照 | 3.45±0.78b | 3.57±0.81b | 18.79±3.4a | 30.75±8.16c | 0.9±0.45b |
| 处理 | 地上鲜重(g) | 地上干重(g) | 地下干重(g) | 总鲜重(g) | 总干重(g) |
| 复合肥 | 10.63±5.42a | 1.3±0.73a | 0.21±0.14b | 11.95±6.08a | 1.51±0.86a |
| 菌肥二次 | 8.7±4.3b | 1.14±0.59a | 0.23±0.13b | 10.09±4.9b | 1.37±0.71a |
| 菌肥一次 | 9.12±4.59ab | 1.2±0.52a | 0.33±0.23a | 10.43±4.96ab | 1.53±0.69a |
| 清水对照 | 5.19±2.96c | 0.72±0.42b | 0.13±0.09c | 6.1±3.38c | 0.85±0.51b |
从以上结果可见，相对于清水对照，施用深绿木霉分生孢子对青蒿幼苗生长有显著促进作用，其大多数指标与复合肥处理没有显著差异。而施肥次数对促生长作用没有显著影响，这一特性也节约了人工和肥料成本。
实施例3深绿木霉菌肥对青蒿幼苗的促生效果考察试验2
选择地势平坦，向阳的试验地，3月在育苗格中培养青蒿苗，间苗后留苗1株/格。4月下旬，青蒿苗长至15-20±3厘米时，在苗根际施用实施例1制备的深绿木霉分生孢子悬浮液约5ml/株，在10-15天后施用第二次深绿木霉分生孢子悬浮液5ml/株。以施用氮磷钾复合肥100mg/株一次和施用清水为对照。50-60株/处理。施肥约25-30天左右，统计苗的各项生长指标，比较不同处理的效果，结果如表4。
表4施用深绿木霉分生孢子对青蒿幼苗生长的影响
| 处理 | 根粗(mm) | 茎粗(mm) | 株高(cm) | 根长(cm) | 地下鲜重(g) |
| 菌肥 | 4.02±1.1a | 4.06±1.01a | 54.52±12.56a | 17.53±3.62a | 1.17±0.83a |
| 清水对照 | 2.82±0.76b | 2.86±0.72b | 37.71±10.75c | 15.14±2.96b | 0.5±0.34b |
| 复合肥 | 3.74±1.12a | 3.76±0.92a | 45.57±12.85b | 17.63±5.25a | 1.23±0.81a |
| 处理 | 地上鲜重(g) | 地上干重(g) | 地下干重(g) | 总鲜重(g) | 总干重(g) |
| 菌肥 | 11.2±7.31a | 1.32±0.93a | 0.25±0.18a | 12.37±8.11a | 1.57±1.1a |
| 清水对照 | 4.78±2.97c | 0.61±0.41b | 0.13±0.08b | 5.28±3.29c | 0.74±0.48b |
| 复合肥 | 8.43±5.34b | 1.13±0.73a | 0.27±0.18a | 9.67±6.12b | 1.4±0.91a |
从以上结果可以看出，施用菌肥相对于清水对照对青蒿幼苗有显著的促生长作用，且其增产效果和施用复合肥基本没有显著差别，部分指标甚至超过复合肥处理。可见深绿木霉分生孢子可作为青蒿的苗肥，全部代替或部分代替化肥。
SEQUENCE LISTING
<110> 重庆市中药研究院
<120> 一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用
<130> 2017
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 553
<212> DNA
<213> T-a21特异序列
<400> 1
cgagtttaca actcccaaac ccaatgtgaa ccataccaaa ctgttgcctc ggcggggtca 60
cgccccgggt gcgtcgcagc cccggaacca ggcgcccgcc ggagggacca accaaactct 120
ttctgtagtc ccctcgcgga cgttatttct tacagctctg agcaaaaatt caaaatgaat 180
caaaactttc aacaacggat ctcttggttc tggcatcgat gaagaacgca gcgaaatgcg 240
ataagtaatg tgaattgcag aattcagtga atcatcgaat ctttgaacgc acattgcgcc 300
cgccagtatt ctggcgggca tgcctgtccg agcgtcattt caaccctcga acccctccgg 360
gggtccggcg ttggggatcg ggaaccccta agacgggatc ccggccccga aatacagtgg 420
cggtctcgcc gcagcctctc atgcgcagta gtttgcacaa ctcgcaccgg gagcgcggcg 480
cgtccacgtc cgtaaaacac ccaacttctg aaatgttgac ctcggatcag gtaggaatac 540
ccgctgaact taa 553
Claims (5)
1.一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，其特征在于：所述青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥为深绿木霉菌的孢子悬浮液；其中，深绿木霉菌的特征核苷酸序列为T-a21特异序列。
2.根据权利要求1所述的青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，其特征在于：所述深绿木霉菌肥制作包括以下步骤：
1)细木屑:麦粒＝15-20:1，混匀，浸泡透心,挤干多余水分，装罐头瓶，高温高压灭菌；
2)冷却后接种深绿木霉试管种，25℃，每天光照/黑暗各12小时，诱导分生孢子；
3)约5-7天分生孢子大量出现后，清水多次洗涤培养基，洗下分生孢子；
4)制备孢子悬浮液，得到深绿木霉菌肥。
3.根据权利要求2所述的青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥，其特征在于：所述深绿木霉菌为从青蒿侧枝中分离，并经过专用培养基培养方法得到。
4.一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥在青蒿幼苗期生长中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：当年的4-5月份，在青蒿幼苗长至15-20±3厘米时，在苗根际施用深绿木霉分生孢子悬浮液约3-5ml/株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710580102.9A CN107200611A (zh) | 2017-07-17 | 2017-07-17 | 一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710580102.9A CN107200611A (zh) | 2017-07-17 | 2017-07-17 | 一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107200611A true CN107200611A (zh) | 2017-09-26 |
Family
ID=59910861
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710580102.9A Pending CN107200611A (zh) | 2017-07-17 | 2017-07-17 | 一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107200611A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113913304A (zh) * | 2021-11-15 | 2022-01-11 | 中国农业科学院特产研究所 | 一种短密木霉、人参病原菌抑菌剂及其应用 |
| CN114032177A (zh) * | 2021-03-04 | 2022-02-11 | 上海万力华生物科技有限公司 | 一种矩孢木霉及其土壤修复菌剂 |
| CN114736812A (zh) * | 2022-05-12 | 2022-07-12 | 重庆市中药研究院 | 一种复合木霉菌剂及其制备方法和在黄连种植中的应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106613276A (zh) * | 2017-01-09 | 2017-05-10 | 重庆市中药研究院 | 一种青蒿幼苗培育方法及其专用深绿木霉菌肥 |
-
2017
- 2017-07-17 CN CN201710580102.9A patent/CN107200611A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106613276A (zh) * | 2017-01-09 | 2017-05-10 | 重庆市中药研究院 | 一种青蒿幼苗培育方法及其专用深绿木霉菌肥 |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114032177A (zh) * | 2021-03-04 | 2022-02-11 | 上海万力华生物科技有限公司 | 一种矩孢木霉及其土壤修复菌剂 |
| CN114032177B (zh) * | 2021-03-04 | 2024-03-08 | 上海万力华生物科技有限公司 | 一种矩孢木霉及其土壤修复菌剂 |
| CN113913304A (zh) * | 2021-11-15 | 2022-01-11 | 中国农业科学院特产研究所 | 一种短密木霉、人参病原菌抑菌剂及其应用 |
| CN114736812A (zh) * | 2022-05-12 | 2022-07-12 | 重庆市中药研究院 | 一种复合木霉菌剂及其制备方法和在黄连种植中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107371812B (zh) | 一种以桉木屑为主栽培料的猴头菇栽培方法 | |
| CN103329941B (zh) | 一种松杉人工林抗逆促生复合菌根菌剂及其制备和应用方法 | |
| CN106399132B (zh) | 一株白囊耙齿菌及其应用 | |
| CN103250529B (zh) | 一种利用益生菌营养物栽培菊花的方法 | |
| CN107047060A (zh) | 川圆芝1号灵芝新菌株及其繁殖方法 | |
| CN104195056B (zh) | 一种二型伞霉及其在铁皮石斛促生、抗旱中的应用 | |
| CN107200611A (zh) | 一种青蒿幼苗专用深绿木霉菌肥及应用 | |
| CN1245502C (zh) | 一种高效抗旱、耐高磷营养丛枝菌根真菌及其生产方法 | |
| CN101012440A (zh) | 提高矿区复垦效果的丛枝菌根菌剂培养方法 | |
| CN108260473A (zh) | 以桉树加工剩余物为主栽培料栽培灵芝的方法 | |
| CN103320371A (zh) | 一种与am真菌协同促生作用的细菌及在蔬菜促生的应用 | |
| EP3289878A1 (en) | Method for producing an organic substrate for promoting growth during plant germination and development, and organic substrate | |
| Vilas et al. | Effect of cultural variability on mycellial growth of eleven mushroom isolates of Pleurotus spp. | |
| CN107641600A (zh) | 适于低温出菇的平菇jk02菌株及其栽培方法和应用 | |
| CN107810782A (zh) | 一种玉米苞叶栽培灵芝的高产方法 | |
| KR101199763B1 (ko) | 베타글루칸 함량이 높은 꽃송이버섯의 재배방법 | |
| CN108610112A (zh) | 一种栽培秀珍菇的新配方及其方法 | |
| CN116590155A (zh) | 一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用 | |
| CN107986845B (zh) | 利用银耳段木废料栽培香菇的培养基料及其制备方法 | |
| CN106591152B (zh) | 米根霉菌株及用其制备高活力固体菌剂的方法 | |
| CN103045500B (zh) | 中慢生根瘤菌kdrm295及其应用 | |
| CN106348888B (zh) | 一种利用大葱葱叶废弃物生产木霉生物有机肥的方法 | |
| CN105254407A (zh) | 一种黑木耳培养料及黑木耳培养方法 | |
| CN103650918B (zh) | 用大块阔叶树木屑制作萌发菌菌种的方法 | |
| CN103044160B (zh) | 一种用于栽培罗勒的木屑质菌糠营养剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170926 |