CN116590155A - 一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用 - Google Patents
一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用,涉及微生物技术领域,所述菌株为粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)LZU‑W1,保藏编号为CGMCC NO.40534。通过采用粉红螺旋聚孢霉菌株LZU‑W1进行平板拮抗试验,结果表明其对尖孢镰刀菌、燕麦镰刀菌、锐顶镰刀菌均具有较强的抑制活性;将其制成微生物菌剂在基质育苗、普通农田土未作其他任何处理的情况下,能够通过抑制基质和土壤中植物病原菌的生长,有效缓解育苗和种植时作物种苗根腐病的发生,提高存苗率,对作物根、茎、叶生长具有显著的促生作用,优化了土壤的菌落生态环境,丰富了土壤有益菌群;是一种极具应用前景的生物防治剂。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用。
背景技术
化学农药的应用带来了粮食的增产,但随之产生的农药残留和环境污染问题也给人类健康带来了严重影响,特别是倡导可持续发展的今天,如何减少农药的使用是当今社会的一项重要课题。施用微生物菌剂可以使有益微生物在土壤中大量繁殖,通过生物间的竞争作用、拮抗作用和寄生作用来抑制土壤中植物病原菌的数量和生命活动,是如今新兴的生物防治措施中的一种。实践证明,作为一种新兴增产措施,微生物菌剂具有无毒、无害、无污染、高效且不产生抗药性的优点。微生物菌剂的使用是当今农业发展必不可少的措施之一,具有广阔的应用前景。通过筛选优良菌种,促进微生物产业的发展,对于农业生产和生态环境都具有积极作用。
植物根腐病主要是由镰刀菌、丝孢菌,腐烂菌等真菌感染引起的一种土传病害,能够侵害多种常见农作物,在我国各地都有普遍发生。轻者水肥输送受阻、供应不足,植物长势衰弱、生长缓慢,产量下降;重者不仅完全切断水分和养分供应,并且使根系腐烂,整株植物枯萎死亡。病害一旦发生,往往会导致田间成片作物死亡,轻则减产10%-30%,严重时可导致绝收,给农户造成重大经济损失。对于根腐病的防治,目前经常采用的方法包括合理轮作,进行深耕等传统农业方法,但工作量大,投入高且成效不明显;施加农药进行化学防治,药效时间短,用药量大,易造成农药残留与环境污染,且会使得病原菌对农药产生抗药性导致防治效果下降,不利于可持续发展。
粉红螺旋聚孢霉是一种重要的生防真菌,因其强大的破坏力成为很多植物致病真菌的克星。据报道粉红螺旋聚孢霉对葡萄灰霉病,草莓、番茄、小麦等作物的根腐病等可有效缓解甚至根治的效果;各种作物的线虫病也能通过使用粉红螺旋聚孢霉进行生物防治。同时,粉红螺旋聚孢霉还具有溶磷、释钾和固氮功能,活化土壤中的硅、钙、镁,提高铁、锰、铜、锌、钼、硼等元素利用率。在繁殖中可产生有机酸、氨基酸、多糖,分泌植物生长激素及酶等多种有利于植物生长的物质,提高或延长肥效,减少化肥用量。提高作物抗逆性,预防或减轻病害。鉴于此,本发明提供一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种粉红螺旋聚孢霉菌株、微生物菌剂及制备方法和应用。目的是提供一株粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)LZU-W1,其能有效防治植物根腐病。
本发明为了解决上述技术问题,第一方面提供一种粉红螺旋聚孢霉菌株,所述菌株为粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)LZU-W1,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO.40534,保藏时间为2023年3月23日。
上述的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1从中国甘肃省兰州地区黄河沿岸收集的新鲜土样中分离获得。菌株形态如下:培养两天内菌落菌丝为白色丝状,菌丝匍匐,较疏松;第三天时菌落形态为圆形,边缘整齐,白色菌丝均匀平铺在培养基上,呈圆形向四周扩散,在接种点附近开始产生分生孢子,分生孢子产于白色的产孢簇,以接种点为圆心分布于整个菌落表面;菌落正面初期为白色,后期呈粉红色,菌落表面有少许水溢出,并且有少量气生菌丝,背面黄色,有橙黄色色素渗入;菌丝存在分支结构,无色,有隔膜,末端生有菌环;分生孢子梗具扫帚状分支,分生孢子呈椭圆形,粘连在一起聚集成团状。
本发明的有益效果是:
(1)通过采用本发明的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1进行平板拮抗试验,结果表明该菌株对尖孢镰刀菌、燕麦镰刀菌、锐顶镰刀菌均具有较强的抑制活性。
(2)利用本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1制成的微生物菌剂在育苗基质、普通农田土未作任何处理的情况下,能够通过抑制基质和土壤中植物病原菌的生长,有效缓解育苗和种植时作物种苗根腐病的发生,提高存苗率,对作物根、茎、叶生长具有显著的促生作用,优化了土壤的菌落生态环境,丰富了土壤有益菌群,因此该微生物菌剂可以作为生物农药或生物肥料,高效防治根腐病,是一种极具应用前景的生物防治剂。
第二方面提供一种微生物菌剂,包含如上述中所述粉红螺旋聚孢霉LZU-W1。
上述的微生物菌剂在常温下可以保存18个月以上。
进一步,所述微生物菌剂为固体菌剂,所述微生物菌剂中含有的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1的活菌数量为2.2×109-27.0×109cfu·g-1。
进一步,所述微生物菌剂还包括惰性固体载体、营养物质、粘结剂和阳离子盐,各组分的重量比为所述惰性固体载体:所述营养物质:所述粘结剂:所述阳离子盐等于(37-48):(55-65):(4.5-5):(2.55-3.59)。
进一步,所述惰性固体载体由以下重量份数的组分组成:20-25份的凹凸棒土,15-20份的高岭土,1-1.5份的聚羧酸盐和1-1.5份的磺酸盐;所述营养物质由以下重量份数的组分组成:45-50份的玉米面粉和10-15份的葡萄糖;所述粘结剂为4.5-5份玉米淀粉;所述阳离子盐为1.5-2份的碳酸钙,1-1.5份的氯化钠,0.01-0.02份的氯化钾,0.01-0.02份的硫酸锌和0.03-0.05份的硫酸镁。
第三方面提供一种上述所述微生物菌剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)制备粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株的种子液;
(2)将所述种子液在无菌环境下接种到已灭菌的培养液中,在26-30℃下恒温培养5-7天,得到发酵液;
(3)向所述发酵液中依次添加惰性固体载体、营养物质、粘结剂和阳离子盐,搅匀后避光晾干,得到所述微生物菌剂。
进一步,步骤(1)中,采用PDB培养液制备粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株的种子液。例如可以采用PDB培养液在26-30℃下恒温培养1-2天。
更进一步,所述PDB培养液由以下重量含量的成分组成:0.50%土豆浸粉,2.00%葡萄糖,其余为水;pH为6.8-7.0。
上述步骤(2)中液体发酵培养液为优化的PDB培养液,由以下重量含量的成分组成:2.00%葡萄糖,1.00%酵母粉,1.00%氯化钠,0.50%土豆浸粉,0.40%碳酸钙,0.03%硫酸镁,0.01%硫酸锌,0.01%氯化钾,其余为水;pH为6.8-7.0。
上述的0.50%土豆浸粉可以用质量含有为20%去皮土豆加水煮沸30分钟过滤得到的上清液替代。
第四方面提供一种如上述所述微生物菌剂的应用,所述微生物菌剂用于防治植物根腐病。
进一步,所述微生物菌剂用于防治由真菌感染引发的植物根腐病。
上述的真菌包括尖孢镰刀菌、燕麦镰刀菌、锐顶镰刀菌等。
附图说明
图1为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1的菌株平皿图;
图2为本发明微生物菌剂实物图;
图3为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1对尖孢镰刀菌的平板抑菌图,其中A为尖孢镰刀菌,B为LZU-W1菌株抑制尖孢镰刀菌;
图4为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1对燕麦镰刀菌的平板抑菌图,其中A为燕麦镰刀菌,B为LZU-W1菌株抑制燕麦镰刀菌;
图5为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1对锐顶镰刀菌的平板抑菌照片,其中A为锐顶镰刀菌,B为LZU-W1菌株抑制锐顶镰刀菌;
图6为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1微生物菌剂在芹菜育苗盘中的实验照片,其中A为正常芹菜育苗,B为用LZU-W1微生物固体菌剂芹菜育苗;
图7为芹菜育苗盘基质育苗时对照组发生的根腐现象照片;
图8为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1微生物菌剂在芹菜农田种植中的实验照片,其中A为正常芹菜大田种植,B为用LZU-W1微生物固体菌剂芹菜大田种植;
图9为本发明粉红螺旋聚孢霉LZU-W1微生物菌剂在芹菜农田种植,收获芹菜称重实验照片,其中A为正常芹菜大田种植测产量,B为用LZU-W1微生物固体菌剂芹菜大田种植测产量。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件,或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可通过正规渠道商购得的常规产品。
下述的实施例中使用的试剂和材料的说明:
凹凸棒土购买于明光市海港凹坭矿业有限公司;
高岭土购买于山东临城县宏森化工贸易有限公司;
聚羧酸盐购买于山东德胜精细化工研究院有限公司;
磺酸盐购买于安阳市双环助剂有限责任公司;
玉米面粉购买于兰州城关区兰大医学院晓星菜店;
玉米淀粉购买于兰州城关区兰大医学院晓星菜店。
葡萄糖生产于天津大茂化学试剂厂;
碳酸钙生产于上海源叶生物科技有限公司;
氯化钠生产于上海源叶生物科技有限公司;
氯化钾生产于天津市光复科技发展有限公司;
硫酸锌生产于天津市光复科技发展有限公司;
硫酸镁生产于天津市光复科技发展有限公司。
实施例1:粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)LZU-W1菌株本实施例涉及一种粉红螺旋聚孢霉菌株,所述菌株为粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)LZU-W1,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO.40534,保藏时间为2023年3月23日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本实施例涉及粉红螺旋聚孢霉LZU-W1从中国甘肃省兰州地区黄河沿岸收集的新鲜土样中分离获得。
其中,粉红螺旋聚孢霉LZU-W1固体培养、保存采用PDA培养基;所述PDA培养基由以下重量含量的成分组成:0.5%土豆浸粉,2.0%葡萄糖,1.5%琼脂,其余为水,pH为6.8-7.0。
其中,粉红螺旋聚孢霉LZU-W1的种子液培养采用PDB培养液;所述PDB培养液由以下重量含量的成分组成:0.5%土豆浸粉,2.0%葡萄糖,其余为水;pH为6.8-7.0。
其中,粉红螺旋聚孢霉LZU-W1的液体发酵采用优化的PDB培养液,由以下重量含量的成分组成:2.00%葡萄糖,1.00%酵母粉,1.00%氯化钠,0.50%土豆浸粉,0.40%碳酸钙,0.03%硫酸镁,0.01%硫酸锌,0.01%氯化钾,其余为水;pH为6.8-7.0。
上述0.50%土豆浸粉可以用质量含有为20%去皮土豆加水煮沸30分钟过滤得到的上清液替代。
本实施例涉及粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株形态如下(如图1):培养两天内菌落菌丝为白色丝状,菌丝匍匐,较疏松;第三天时菌落形态为圆形,边缘整齐,白色菌丝均匀平铺在培养基上,呈圆形向四周扩散,在接种点附近开始产生分生孢子,分生孢子产于白色的产孢簇,以接种点为圆心分布于整个菌落表面;菌落正面初期为白色,后期呈粉红色,菌落表面有少许水溢出,并且有少量气生菌丝,背面黄色,有橙黄色色素渗入;菌丝存在分支结构,无色,有隔膜,末端生有菌环;分生孢子梗具扫帚状分支,分生孢子呈椭圆形,粘连在一起聚集成团状。
本实施例涉及粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌种鉴定:利用引物ITS1(序列:TCCGTAGGTGAACCTGCGG,SEQ ID NO:2)和ITS4(序列:TCCTCCGCTTATTGATATGC,SEQ ID NO:3),以菌株LZU-W1基因组DNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物送至擎科生物有限公司进行测序,将菌株的ITS序列输入NCBI进行比对,应用BLAST和DNAMAN等软件进行分析,能在GenBank中找到同源性非常高的相近菌株序列。通过rDNA-ITS序列长度为545bp与LZU-W1菌株相似性最高的是Clonostachys rosea,同源性达到99%。根据形态特征及其18SrDNA序(GenBank登录号KU306742),结合形态学分类和分子生物学鉴定结果,可以确认本发明的菌株LZU-W1为粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)。本申请菌株LZU-W1的rDNA-ITS序列(SEQ ID NO:1)如下:
实施例2-6:微生物菌剂
本实施例涉及一种微生物菌剂(如图2),包含如实施例1中所述粉红螺旋聚孢霉LZU-W1。
优选的,所述微生物菌剂为固体菌剂,所述微生物菌剂中含有的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1的活菌数量为2.2×109-27.0×109cfu·g-1。
优选的,所述微生物菌剂还包括惰性固体载体、营养物质、粘结剂和阳离子盐,各组分的重量比为所述惰性固体载体:所述营养物质:所述粘结剂:所述阳离子盐等于(37-48):(55-65):(4.5-5):(2.55-3.59)。
优选的,所述惰性固体载体由以下重量份数的组分组成:20-25份的凹凸棒土,15-20份的高岭土,1-1.5份的聚羧酸盐和1-1.5份的磺酸盐;所述营养物质由以下重量份数的组分组成:45-50份的玉米面粉和10-15份的葡萄糖;所述粘结剂为4.5-5份玉米淀粉;所述阳离子盐为1.5-2份的碳酸钙,1-1.5份的氯化钠,0.01-0.02份的氯化钾,0.01-0.02份的硫酸锌和0.03-0.05份的硫酸镁。
本实施例提供一种上述所述微生物菌剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)制备粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株的种子液;
(2)将所述种子液在无菌环境下接种到已灭菌的培养液中,在26-30℃下恒温培养5-7天,得到发酵液;
(3)将粉红螺旋聚孢霉LZU-W1发酵液用固体载体进行吸附,每200-300mL发酵液添加200-300g惰性固体载体、营养物质、粘结剂和阳离子盐,搅匀后避光晾干,其中每克微生物菌剂含粉红螺旋聚孢霉LZU-W1有效活菌数为2.2×109至27.0×109cfu。
优选的,步骤(1)中,采用PDB培养液制备粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株的种子液。
具体的,所述PDB培养液由以下重量含量的成分组成:0.50%土豆浸粉,2.00%葡萄糖,其余为水;pH为6.8-7.0。
具体的,步骤(2)中液体发酵培养液为优化的PDB培养液,由以下重量含量的成分组成:2.00%葡萄糖,1.00%酵母粉,1.00%氯化钠,0.50%土豆浸粉,0.40%碳酸钙,0.03%硫酸镁,0.01%硫酸锌,0.01%氯化钾,其余为水;pH为6.8-7.0。
其中,0.50%土豆浸粉可以用质量含有为20%去皮土豆加水煮沸30分钟过滤得到的上清液替代。
其中实施例2-6的微生物菌剂具体的成分含量如下表1:
表1实施例2-6的微生物菌剂成分含量
对照例1
按照上述实施例2步骤(3)中固体载体成分减去氯化钾、硫酸锌、硫酸镁,按照上述实施例2步骤(3)中比例混合其他固体载体,按照上述实施例2步骤(3)中方法制备得到微生物固体菌剂LZU-W1-A。
对照例2
按照上述实施例2步骤(3)中固体载体成分减去高岭土、磺酸盐,按照上述实施例2步骤(3)中比例混合其他固体载体,按照上述实施例2步骤(3)中方法制备得到微生物固体菌剂LZU-W1-B。
对照例3
按照上述实施例2步骤(3)中固体载体成分减去玉米淀粉,按照上述实施例2步骤(3)中比例混合其他固体载体,按照上述实施例2步骤(3)中方法制备得到微生物固体菌剂LZU-W1-C。
试验例
(1)稳定性实验
将实施例2制备的LZU-W1和对照例1-3制备的LZU-W1-A、LZU-W1-B及LZU-W1-C系列固体菌剂在室温下储存,并在储存1个月、3个月、6个月、12个月和18个月时测定LZU-W1系列固体菌剂中的活菌数,结果见表2。结果表明本发明制备的微生物菌剂在常温下可以保存18个月以上。
表2LZU-W1系列固体菌剂不同储存时间活菌数统计
(2)平板拮抗实验
粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株对根腐病致病真菌镰刀菌的平板拮抗实验如下:
PDA平板圆心处接种直径3mm的病原真菌菌饼,病原真菌菌饼芹菜根腐病原真菌,具体为尖孢镰刀菌菌饼、燕麦镰刀菌菌饼和锐顶镰刀菌菌饼,在距圆心28mm处接种直径3mm的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌饼,以在圆心处接种病原真菌的平板为对照,25-28℃培养10-23d,记录病原真菌菌落直径,计算抑制率(%)。
抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-3)×100%。
如说明书附图3-5中的A和B所示,平板拮抗实验研究表明,该粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株在平板拮抗试验条件下,能够抑制植物根腐病原真菌的生长,从而有效缓解种植时植物种苗根腐病的发生。对于会引起植物根腐病的各种病原真菌的抑制率如下表3:
表3平板拮抗实验结果
(3)防治植物根腐病方面的应用
(i)防治芹菜根腐病育苗试验验证
将上述实施例2所制得的微生物固体菌剂进行育苗盘育苗试验验证,选用中蔬种业科技(北京)有限公司的皇冠102芹菜种子。试验选在甘肃省兰州市榆中夏盛蔬菜产销专业合作社进行。
共设置对照组、试验组两个处理,每组处理20个5.5mm×128孔育苗盘,每组3个平行。对照组为常规种植,实验组为上述微生物固体菌剂与育苗基质混合均匀施用。
基质配制:泥炭土、珍珠岩、园艺蛭石、发酵羊粪,按1:1:1:1成份进行配制。60个5.5mm×128孔育苗盘用80-100升基质。
对照组:基质用水润湿,用水量为基质的60%,将润湿后的基质填充到育苗盘的穴孔中,每孔播芹菜种子2-3颗,播种深度0.5cm左右,基质覆盖,小水勤浇,正常看护。50-60天后,统计出苗率,检查根腐情况。
试验组:微生物固体菌剂与基质按照1Kg:10升混合,再用水润湿,用水量为菌剂加基质的60%,将润湿后的菌剂加基质填充到育苗盘的穴孔中,每孔播芹菜种子2-3颗,播种深度0.5cm左右,菌剂加基质覆盖,小水勤浇,正常看护。50-60天后,统计出苗率,检查根腐情况。微生物固体菌剂对芹菜育苗盘基质育苗改善效果如下表4。
表4微生物固体菌剂对芹菜育苗盘基质育苗改善效果
试验结果显示,利用粉红螺旋聚孢霉LZU-W1制得的微生物固体菌剂对芹菜育苗盘基质育苗具有显著抗病、促生作用。如说明书附图6A和B所示,具体效果为:对照组出苗率85%,实验组出苗率>99%,对照组15%孔穴有根腐现象,实验组<1%孔穴有根腐现象。育苗根腐现象如说明书附图7所示。
(i i)防治芹菜根腐病田间试验验证
在耕地时将本发明的实施例2微生物菌剂与土壤均匀混合后使用,或穴施、沟施、随水施用等。具体地,每1亩农田施用4-6kg微生物菌剂,将其与土壤混合均匀施用。
将上述步骤所制得的微生物固体菌剂进行田间效果的验证,如说明书附图8A和B所示,试验选在甘肃省兰州市榆中夏盛蔬菜产销专业合作社进行。
共设置对照组、实验组两个处理,每组处理2m2,每组3个平行。对照组为常规种植,实验组为本发明微生物固体菌剂与土壤混合均匀施用。
对照组:在上一季芹菜根腐病严重的田里进行重茬实验。发酵羊粪做基肥,旋根机深翻土壤30cm,将生长状况一致、苗龄为50-60天的健康芹菜幼苗移栽至田里,株距15-20cm,行距15-20cm,正常浇水,看护。65-75天后,统计芹菜株高、质量,检查根腐情况。
试验组:在上一季芹菜根腐病严重的田里进行重茬实验。发酵羊粪做基肥,按照每亩地4-6Kg上述制备的微生物固体菌剂撒施,旋根机深翻土壤30cm,将生长状况一致、苗龄为50-60天的健康芹菜幼苗移栽至田里,株距15-20cm,行距15-20cm,正常浇水,看护。65-75天后,统计芹菜株高、质量,检查根腐情况。
微生物固体菌剂对芹菜促生长效果如下表5。
表5微生物固体菌剂对芹菜促生长效果
存苗率/% | 平均柱高/cm | 产量/(kg/m2) | |
对照组 | 50 | 53 | 4.5 |
实验组 | 95 | 80 | 12.6 |
试验结果显示,利用本发明的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1制得的微生物固体菌剂对芹菜田间种植具有显著的提高存苗率、抗逆性,促进生长的作用。具有良好的防治根腐病作用,有利于重茬种植。具体效果为:对照组存苗率50%,实验组存苗率95%;对照组50%有根腐、死颗现象,对照组<5%有根腐、死颗现象。芹菜测产量如说明书附图9A和B所示,试验组芹菜产量是对照组芹菜产量的2.8倍。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,在不相互矛盾的情况下,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种粉红螺旋聚孢霉菌株,其特征在于,所述菌株为粉红螺旋聚孢霉LZU-W1,拉丁文学名为Clonostachys rosea,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO.40534,保藏时间为2023年3月23日。
2.一种微生物菌剂,其特征在于,包含如权利要求1中所述粉红螺旋聚孢霉LZU-W1。
3.根据权利要求2所述一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为固体菌剂,所述微生物菌剂中含有的粉红螺旋聚孢霉LZU-W1的活菌数量为2.2×109-27.0×109cfu·g-1。
4.根据权利要求3所述一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂还包括惰性固体载体、营养物质、粘结剂和阳离子盐,各组分的重量比为所述惰性固体载体:所述营养物质:所述粘结剂:所述阳离子盐等于(37-48):(55-65):(4.5-5):(2.55-3.59)。
5.根据权利要求4所述一种微生物菌剂,其特征在于,所述惰性固体载体由以下重量份数的组分组成:20-25份的凹凸棒土,15-20份的高岭土,1-1.5份的聚羧酸盐和1-1.5份的磺酸盐;所述营养物质由以下重量份数的组分组成:45-50份的玉米面粉和10-15份的葡萄糖;所述粘结剂为4.5-5份玉米淀粉;所述阳离子盐为1.5-2份的碳酸钙,1-1.5份的氯化钠,0.01-0.02份的氯化钾,0.01-0.02份的硫酸锌和0.03-0.05份的硫酸镁。
6.一种如权利要求2至5任一项所述微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制备粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株的种子液;
(2)将所述种子液在无菌环境下接种到已灭菌的培养液中,在26-30℃下恒温培养5-7天,得到发酵液;
(3)向所述发酵液中依次添加惰性固体载体、营养物质、粘结剂和阳离子盐,搅匀后避光晾干,得到所述微生物菌剂。
7.根据权利要求6所述微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,采用PDB培养液制备粉红螺旋聚孢霉LZU-W1菌株的种子液。
8.根据权利要求7所述微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述PDB培养液由以下重量含量的成分组成:0.50%土豆浸粉,2.00%葡萄糖,其余为水;pH为6.8-7.0。
9.一种如权利要求2至5任一项所述微生物菌剂的应用,其特征在于,所述微生物菌剂用于防治植物根腐病。
10.根据权利要求9所述微生物菌剂的应用,其特征在于,所述微生物菌剂用于防治由真菌感染引发的植物根腐病。
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