CN107157979A

CN107157979A - 款冬素酯在制备抗癌药物中的应用

Info

Publication number: CN107157979A
Application number: CN201710423547.6A
Authority: CN
Inventors: 李震宇; 聂佳慧; 王晶; 秦雪梅
Original assignee: Shanxi University
Current assignee: Shanxi University
Priority date: 2017-06-07
Filing date: 2017-06-07
Publication date: 2017-09-15

Abstract

本发明提供了款冬素酯在制备抗癌药物中的应用，属于中药款冬素酯活性成分的新用途。体外细胞实验结果显示，款冬素酯在浓度为25μmol/L对LLC肺癌细胞增殖的抑制率可达53.6％，说明其对LLC小鼠肺癌细胞的增殖具有明显的抑制作用；与顺铂联合使用可提高顺铂对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率。款冬素酯可作为活性成分用于制备抗癌和抗癌辅助药物。

Description

款冬素酯在制备抗癌药物中的应用

技术领域

本发明涉及中药活性成分，特别涉及一种款冬素酯的新用途，具体是款冬素酯在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

肺癌是一种常见的肺部恶性肿瘤，因其发病率和死亡率较高，成为对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。绝大多数肺癌起源于支气管粘膜上皮。近50年来，随着吸烟和各种环境因素的影响，世界各国特别是工业发达国家，肺癌的发病率和病死率均迅速上升，死于癌病的男性病人中肺癌已居首位。根据国家癌症中心近日发布《2013年中国恶性肿瘤发病和死亡分析》报告报告显示，全国恶性肿瘤发病率及全国恶性肿瘤死亡排第1位的是肺癌，并且目前对肺癌的治疗并不十分有效。因此，研发针对肺癌的有效治疗药物一直是医药界的研究热点。

顺铂是一种广泛应用于癌症治疗的药物，是肺癌化学药物治疗的经典药物之一。但是癌细胞对顺铂可很快产生耐药性，使后续疗效降低。研究发现通过联合用药可以降低顺铂的耐药性，增加其化疗敏感性。

款冬素酯(farfaratine)是从中药款冬花(Tussilagofarfara L.)中分离出的一种活性单体成分。研究表明款冬素酯具有抑制血小板聚集的活性，但是未见其抗癌和增加化疗药物敏感性的作用报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种款冬素酯的医药新用途，以充分发挥款冬素酯的药用价值。

本发明提供一种以款冬素酯为活性成分在制备抗癌药物和抗癌辅助药物中的应用。

所述款冬素酯的结构式如下：

所述款冬素酯采用现有技术制备得到。

本发明以款冬素酯为活性成分，采用LLC小鼠肺癌细胞观察款冬素酯对癌细胞的影响，发现款冬素酯抑制肺癌细胞增殖的IC50值为23.5μmol/L。40μmol/L的顺铂对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率为53.2％，与浓度为35μmol/L的款冬素酯联合使用时，其对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率可提高到65.3％。说明款冬素酯作为活性成分可用于制备抗癌药物和抗癌辅助药物。

根据本发明的上述内容，还可将款冬素酯与其它中药和/或化学药物，共同组成中药复方或中西药复方制剂，并按照常规方法制成口服片剂、胶囊、口服液、注射液、外用洗剂等多种剂型，用于预防或治疗癌症等疾病。

本发明的有益效果：本发明将款冬素酯作为活性成分用于制备抗癌和抗癌辅助药物，具有明显的抗癌效果。采用LLC小鼠肺癌细胞观察款冬素酯对癌细胞的影响，发现款冬素酯抑制肺癌细胞增殖的IC50值为23.5μmol/L。40μmol/L的顺铂对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率为53.2％，与浓度为35μmol/L的款冬素酯联合使用时，其对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率可提高到65.3％。另外，还可将款冬素酯与其它中药和/或化学药物，共同组成中药复方或中西药复方制剂，用于预防或治疗癌症等疾病。

具体实施方式

以下通过具体实施例，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。

实施例1款冬素酯的制备

取干燥的款冬花750g粉碎，100％石油醚超声提取100分钟，提取液过滤，减压浓缩得粗提取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水(10:5:11:3)置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相用泵将固定相灌满分离柱，取粗提取物溶于上相中上样，当高速逆流色谱仪主机转速达到800rpm，以1mL/min流速泵入流动相，当流动相流出时根据检测器图谱收集目标成分，浓缩、干燥。以石油醚-乙酸乙酯(45:1)为流动相对款冬素酯进行纯化，即可得到纯度98％的款冬素酯。

实施例2款冬素酯体外抑制LLC肺癌细胞的实验

药品及试剂：款冬素酯按实施例1制备得到，为黄色油状物；LLC小鼠肺癌细胞，购自中国科学院细胞库。

实验方法：采用MTT法，款冬素酯用二甲基亚砜(DMSO)配成100mmol/L溶液，4℃保存备用，临用时培养液稀释成所需浓度。在对数生长期的贴壁肿瘤细胞中加入胰酶，消化后，加入培养液(10％胎牛血清的DMEM)，得细胞悬液(100000个/mL)，取96孔培养板，每孔接种100μL，培养24h。按实验组和对照组分别更换等体积不同药物浓度的培养液，每组6个平行，相同条件下培养24h。弃去上清液，每孔加入10μL新鲜配制的MTT(5mg/ml)，继续培养4h后，终止培养，小心吸去孔内培养液，加入100μL DMSO溶解、振荡、混匀，酶标法570nm下测定所得溶液光密度值，带入公式求得不同浓度药物作用后肿瘤细胞生长抑制率，计算半数抑制浓度IC50。实验结果见表1。

表1款冬素酯对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率及半数抑制浓度(IC50，μmol/L)

实验结果表明，款冬素酯对LLC小鼠肺癌细胞有明显抑制作用。

实施例3款冬素酯、顺铂联合使用体外抑制LLC小鼠肺癌细胞的实验

药品及试剂：款冬素酯按实施例1制备得到，为黄色油状物；LLC小鼠肺癌细胞，购自中国科学院细胞库；顺铂，Solarbio公司。

实验方法：采用MTT法，款冬素酯、顺铂用二甲基亚砜(DMSO)配成100mM溶液，4℃保存备用，临用时培养液稀释成所需浓度。在对数生长期的贴壁肿瘤细胞中加入胰酶，消化后，加入培养液(10％胎牛血清的DMEM)，得细胞悬液(100000个/mL)，取96孔培养板，每孔接种100μL，培养24h。按实验组和对照组分别更换得等体积的含药培养液，每组设6个平行，相同条件下培养24h。弃去上清液，每孔加入10μL新鲜配制的MTT(5mg/ml)，继续培养4h后，终止培养，小心吸去孔内培养液，加入100μL DMSO溶解、振荡、混匀，酶标法570nm下测定所得溶液光密度值，带入公式求得药物作用后肿瘤细胞生长抑制率。实验结果如下。

单独使用浓度为40μmol/L顺铂时，其对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率为53.2％；将40μmol/L的顺铂与浓度为35μmol/L的款冬素酯联合使用时，其对LLC小鼠肺癌细胞的抑制率为65.3％。

实验结果表明，款冬素酯与顺铂联合使用可增强顺铂对LLC小鼠肺癌细胞的抑制作用。

Claims

1.款冬素酯在制备抗癌药物中的应用。

2.款冬素酯与顺铂联合在制备抗癌辅助药物中的应用。