CN107138143B - 具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法 - Google Patents
具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107138143B CN107138143B CN201710352979.2A CN201710352979A CN107138143B CN 107138143 B CN107138143 B CN 107138143B CN 201710352979 A CN201710352979 A CN 201710352979A CN 107138143 B CN107138143 B CN 107138143B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- edma
- gma
- stationary phases
- chromatographic stationary
- negative charge
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J7/00—Chemical treatment or coating of shaped articles made of macromolecular substances
- C08J7/12—Chemical modification
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
- B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2333/00—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers
- C08J2333/04—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers esters
- C08J2333/14—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers esters of esters containing halogen, nitrogen, sulfur, or oxygen atoms in addition to the carboxy oxygen
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相,以聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球为基质,将其表面环氧基水解后生成邻二醇基,在NaOH的作用下使羟基与环氧氯丙烷发生反应,再在二氧六环中使环氧基与N‑甲基葡糖胺发生反应,得到一种含有多羟基及胺基的特殊色谱固定相。该固定相含有大量不带电荷的羟基以及带微弱正电荷的胺基,但在阳离子交换模式下表现出极好的分离性能,从而可以使用填充该色谱固定相的色谱柱对碱性蛋白质进行分离纯化。
Description
技术领域
本发明涉及用于蛋白质分离的高效液相色谱固定相领域,尤其涉及一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法。
背景技术
高效液相色谱(HPLC)由于柱效高和分离条件温和,已经发展成为分离和分析生物大分子的强有力手段。离子交换色谱(IEC)是一种高效的分离方法,是HPLC中必不可少的分离模式。
它是通过带电的溶质分子与离子交换色谱固定相中可交换的离子通过交换而达到分离纯化的方法,也可以认为是蛋白质分子中带电的氨基酸残基与带相反电荷的色谱固定相相互作用达到分离纯化的方法。所以当前都是带正电荷或者负电荷的离子型色谱固定相,带电功能基团决定了离子交换的基本性质,功能基团的类型决定了离子交换的类型和强弱,它们的总量和有效数量决定了离子交换剂的总交换容量和有效交换容量。
发明内容
本发明所要提供的是一种非负电荷型色谱固定相,是一种与当前离子型色谱固定相不同的新型固定相,原理是NaCl溶液为洗脱液,固定相上的羟基会与洗脱液的氯离子形成 O—H…Cl的弱氢键作用,使得色谱固定相带上负电荷,因此具有了阳离子交换功能。
本发明所采用的技术方案是:
一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相,结构式为:
其中为聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球,R为H或CH3,n为1~8的整数。
一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,包括以下步骤:
基质表面环氧基水解:将PGMA/EDMA微球I分散于H2SO4溶液中,接着搅拌至完全反应, 得到环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMA II;
第一次清洗干燥:将得到的环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMA II分别用水和甲 醇洗涤,接着真空干燥,得到干燥微球PGMA/EDMA II;
基质表面环氧化:将得到的干燥微球PGMA/EDMA II分散于混合溶液一中,边搅拌边加 入环氧氯丙烷,接着搅拌至完全反应,其中混合溶液一包括二甲亚砜溶液和NaOH溶液,得到 环氧化微球PGMA/EDMAIII;
第二次清洗干燥:将得到的环氧化微球PGMA/EDMAIII分别用水和甲醇洗涤,接着真空 干燥,得到干燥微球PGMA/EDMAIII;
非负电荷型色谱固定相获得:将得到的干燥微球PGMA/EDMAIII分散于二氧六环中,边搅 拌边加入含多羟基的有机胺,搅拌至完全反应,得到多羟基有机胺改性的色谱固定相微球 PGMA/EDMAIV;
第三次清洗干燥:将得到的多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV分别用 水和甲醇洗涤,接着真空干燥,得到阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相。
最优的,所述基质表面环氧基水解步骤具体为:按照6克的PGMA/EDMA微球I分散于至 少100mL的H2SO4溶液中的比例将PGMA/EDMA微球I分散于H2SO4溶液中,其中H2SO4溶液浓度为 0.1mol/L,在60℃水浴条件下搅拌反应至少10小时,得到环氧基水解成邻二醇基微球 PGMA/EDMA II。
最优的,所述基质表面环氧化步骤具体为:按照6克干燥微球PGMA/EDMA II分散于至 少60mL的混合溶液一中的比例将干燥微球PGMA/EDMA II分散于混合溶液一中,室温边搅拌边 加入5mL环氧氯丙烷,接着在60℃水浴条件下搅拌反应4~6小时,其中混合溶液一包括二甲 亚砜溶液和NaOH溶液,得到环氧化微球PGMA/EDMAIII。
最优的,所述基质表面环氧化步骤中的混合溶液一包括5体积份的二甲亚砜溶液和1体积份的NaOH溶液。
最优的,所述非负电荷型色谱固定相获得步骤具体为:按照6克干燥微球PGMA/EDMAIII 分散于至少50mL的二氧六环中的比例将干燥微球PGMA/EDMAIII分散于二氧六环中,边搅拌边 加入含多羟基的有机胺,室温搅拌反应4~6小时,得到多羟基有机胺改性的色谱固定相微 球PGMA/EDMAIV。
最优的,所述非负电荷型色谱固定相获得步骤中,含多羟基的有机胺为N-甲基葡糖 胺,且6克干燥微球PGMA/EDMAIII分散于至少50mL的二氧六环中,室温边搅拌边加入2克N-甲基 葡糖胺。
最优的,所述第一次清洗干燥步骤具体为:将得到的环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMA II分别用水和甲醇各洗涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到干燥微球PGMA/EDMA II;所述第二次清洗干燥步骤具体为:将得到的环氧化微球PGMA/EDMAIII分别用水和甲醇各洗 涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到干燥微球PGMA/EDMAIII;所述第三次清洗干燥步骤具体 为:将得到的多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV分别用水和甲醇各洗涤2~4 次,接着50℃真空干燥4h,得到阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相。
最优的,所述PGMA/EDMA微球I的结构式为:
所述环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMA II和干燥微球PGMA/EDMA II的结构式均 为:
所述环氧化微球PGMA/EDMAIII和干燥微球PGMA/EDMAIII的结构式均为:
所述多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV和阳离子交换功能的非离子 型色谱固定相结构式均为:
其中为聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球,R为H或CH3,n为1~8的整数。
由上述技术方案可知,本发明提供的阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相,以 聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球为基质,将其表面环氧基水解后生成邻二醇基,在NaOH的作用 下使羟基与环氧氯丙烷发生反应,再在二氧六环中使环氧基与含多羟基的有机胺发生反 应,得到一种含有多羟基及胺基的特殊色谱固定相。该固定相含有大量不带电荷的羟基以 及带微弱正电荷的胺基,在阳离子交换模式下表现出极好的分离性能,从而可以使用填充 该色谱固定相的色谱柱对碱性蛋白质进行分离纯化。
附图说明
附图1:具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相反应原理图。
附图2:具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相对五种标准蛋白的色谱分离 图。
图中1、2、3、4、5分别为核糖核酸B、核糖核酸酶A、细胞色素C、α-糜蛋白酶原A、溶菌酶。
具体实施方式
结合本发明的附图,对发明实施例的技术方案做进一步的详细阐述。
一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相,结构式为:
其中为聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球,R为H或CH3,n为1~8的整数。
参照附图1所示,一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,包 括以下步骤:
S1:基质表面环氧基水解:按照6克的PGMA/EDMA微球I分散于至少100mL的H2SO4溶液 中的比例将PGMA/EDMA微球I分散于H2SO4溶液中,其中H2SO4溶液浓度为0.1mol/L,在60℃水浴 条件下搅拌反应至少10小时,得到环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMA II。其中PGMA/EDMA微 球I的结构式为:
S2:第一次清洗干燥:将得到的环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMA II分别用水和 甲醇各洗涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到干燥微球PGMA/EDMA II。其中环氧基水解成邻 二醇基微球PGMA/EDMA II和干燥微球PGMA/EDMA II的结构式均为:
S3:基质表面环氧化:按照6克干燥微球PGMA/EDMA II分散于至少60mL的混合溶液一 中的比例将干燥微球PGMA/EDMA II分散于混合溶液一中,室温边搅拌边加入5mL环氧氯丙烷, 接着在60℃水浴条件下搅拌反应4~6小时,其中混合溶液一包括5体积份的二甲亚砜溶液 和1体积份的NaOH溶液,得到环氧化微球PGMA/EDMAIII。
S4:第二次清洗干燥:将得到的环氧化微球PGMA/EDMAIII分别用水和甲醇各洗涤2~4 次,接着50℃真空干燥4h,得到干燥微球PGMA/EDMAIII。其中环氧化微球PGMA/EDMAIII和干燥微 球PGMA/EDMAIII的结构式均为:
S5:非负电荷型色谱固定相获得:按照6克干燥微球PGMA/EDMAIII分散于至少50mL的二 氧六环中的比例将干燥微球PGMA/EDMAIII分散于二氧六环中,边搅拌边加入2克的N-甲基葡糖胺,室温搅拌反应4~6小时,得到多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV。
S6:第三次清洗干燥:将得到的多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV分 别用水和甲醇各洗涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到阳离子交换功能的非离子型色谱 固定相。其中多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV和阳离子交换功能的非离子型 色谱固定相结构式均为:
其中为聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球,R为H或CH3,n为1~8的整数。
接着将得到的阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相装柱,在离子交换模式下对 五种标准蛋白进行分离。
分离条件如下所述:
流动相:A液是20mmol/L的Tris,且Tris的pH是7.5;B液是20mmol/LTris+1.0mol/LNaCl,且B液的pH是7.5。线性梯度洗脱,初始时流动相A占流动相总体积的90%,流动相B占流动相总体积的10%,接下来的30min内流动相A占流动相总体积的份数降至40%,流动相B占流动相总体积的份数升至60%,流速为1.0mL/min,对核糖核酸B、核糖核酸酶A、细胞色素C、α-糜蛋白酶原A、溶菌酶等五种蛋白质实现了良好的分离,分离结果如附图2所示,图中1、2、3、4、5分别为核糖核酸B、核糖核酸酶A、细胞色素C、α-糜蛋白酶原A、溶菌酶,可以看出本发明所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相,可以将上述五种标准蛋白达到基线分离。
Claims (7)
1.一种具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其特征在于,
所述具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的基础结构为:
其中为聚甲基丙烯酸环氧丙脂微球,R为CH3,n等于4;
包括以下步骤:
基质表面环氧基水解:将PGMA/EDMA微球I分散于H2SO4溶液中,接着搅拌至完全反应,得到环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMAII;
第一次清洗干燥:将得到的环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMAII分别用水和甲醇洗涤,接着真空干燥,得到干燥微球PGMA/EDMAII;
基质表面环氧化:将得到的干燥微球PGMA/EDMAII分散于混合溶液一中,边搅拌边加入环氧氯丙烷,接着搅拌至完全反应,其中混合溶液一包括二甲亚砜溶液和NaOH溶液,得到环氧化微球PGMA/EDMAIII;
第二次清洗干燥:将得到的环氧化微球PGMA/EDMAIII分别用水和甲醇洗涤,接着真空干燥,得到干燥微球PGMA/EDMAIII;
非负电荷型色谱固定相获得:将得到的干燥微球PGMA/EDMAIII分散于二氧六环中,边搅拌边加入N-甲基葡糖胺,搅拌至完全反应,得到多羟基有机胺改性的色谱固定相微球 PGMA/ EDMAIV;
第三次清洗干燥:将得到的多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV分别用水和甲醇洗涤,接着真空干燥,得到具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相;
所得到的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相在使用时有必要进行洗脱,其具体步骤为:用20mmol/L的Tris与1.0mol/L的NaCl的混合液作为洗脱液,且洗脱液的pH为7.5,对所述具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相进行洗脱,所述具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相上的羟基会与洗脱液中的氯离子形成O-H…Cl的弱氢键作用,以使所述具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相带负电荷。
2.根据权利要求1所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其特征在于,所述基质表面环氧基水解步骤具体为:按照6克的PGMA/EDMA微球I分散于至少100mL 的H2SO4溶液中的比例将PGMA/EDMA微球I分散于H2SO4溶液中,其中H2SO4溶液浓度为0.1mol/L, 在60℃水浴条件下搅拌反应至少10小时,得到环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMAII。
3.根据权利要求2所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其特征在于,所述基质表面环氧化步骤具体为:按照6克干燥微球PGMA/EDMAII分散于至少60mL的混合溶液一中的比例将干燥微球PGMA/EDMAII分散于混合溶液一中,室温边搅拌边加入5mL环氧氯丙烷,接着在60℃水浴条件下搅拌反应4~6小时,其中混合溶液一包括二甲亚砜溶液和NaOH溶液,得到环氧化微球PGMA/EDMAIII。
4.根据权利要求3所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其特征在于:所述基质表面环氧化步骤中的混合溶液一包括5体积份的二甲亚砜溶液和1体积份的NaOH溶液。
5.根据权利要求4所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其 特征在于,所述非负电荷型色谱固定相获得步骤具体为:按照6克干燥微球PGMA/EDMAIII分散于至少50mL的二氧六环中的比例将干燥微球PGMA/EDMAIII分散于二氧六环中,边搅拌边加入N-甲基葡糖胺,室温搅拌反应4~6小时,得到多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV。
6.根据权利要求5所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其特征在于:所述非负电荷型色谱固定相获得步骤中,将6克干燥微球PGMA/EDMAIII分散于至少50mL的二氧六环中,室温边搅拌边加入2克N-甲基葡糖胺。
7.根据权利要求6所述的具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法,其特征在于,所述第一次清洗干燥步骤具体为:将得到的环氧基水解成邻二醇基微球PGMA/EDMAII分别用水和甲醇各洗涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到干燥微球PGMA/EDMA II;所述第二次清洗干燥步骤具体为:将得到的环氧化微球PGMA/EDMA III分别用水和甲醇各洗涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到干燥微球PGMA/EDMAIII;所述第三次清洗干燥步骤具体为:将得到的多羟基有机胺改性的色谱固定相微球PGMA/EDMAIV分别用水和甲醇各洗涤2~4次,接着50℃真空干燥4h,得到具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710352979.2A CN107138143B (zh) | 2017-05-18 | 2017-05-18 | 具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710352979.2A CN107138143B (zh) | 2017-05-18 | 2017-05-18 | 具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107138143A CN107138143A (zh) | 2017-09-08 |
CN107138143B true CN107138143B (zh) | 2019-11-05 |
Family
ID=59777756
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710352979.2A Expired - Fee Related CN107138143B (zh) | 2017-05-18 | 2017-05-18 | 具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107138143B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110252258A (zh) * | 2019-07-09 | 2019-09-20 | 宁夏大学 | 重金属吸附固定材料及其制备方法和应用 |
CN112973655B (zh) * | 2019-12-02 | 2022-07-19 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种离子交换色谱固定相及其制备和应用 |
CN112756015A (zh) * | 2020-12-11 | 2021-05-07 | 安徽皖仪科技股份有限公司 | 一种阴离子交换树脂及其制备方法、应用 |
CN112756016A (zh) * | 2020-12-11 | 2021-05-07 | 安徽皖仪科技股份有限公司 | 一种接枝型阴离子交换树脂色谱填料及其制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1785526A (zh) * | 2005-11-09 | 2006-06-14 | 宁夏大学 | 无孔单分散聚合物弱阳离子交换树脂及其制备方法和用途 |
CN104289209A (zh) * | 2014-09-24 | 2015-01-21 | 西北大学 | 一种用于蛋白质分离的wcx/hic双功能混合模式聚合物基质色谱固定相及其制备方法 |
CN105903455A (zh) * | 2016-06-07 | 2016-08-31 | 中国科学院兰州化学物理研究所 | 一种新型葡萄糖基离子液体固定相及其应用 |
-
2017
- 2017-05-18 CN CN201710352979.2A patent/CN107138143B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1785526A (zh) * | 2005-11-09 | 2006-06-14 | 宁夏大学 | 无孔单分散聚合物弱阳离子交换树脂及其制备方法和用途 |
CN104289209A (zh) * | 2014-09-24 | 2015-01-21 | 西北大学 | 一种用于蛋白质分离的wcx/hic双功能混合模式聚合物基质色谱固定相及其制备方法 |
CN105903455A (zh) * | 2016-06-07 | 2016-08-31 | 中国科学院兰州化学物理研究所 | 一种新型葡萄糖基离子液体固定相及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
新型单分散聚合物基质高效疏水作用色谱填料的合成及性能研究;龚波林等;《分析化学》;20060630;第34卷(第6期);第809-810页第2.2.1节 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107138143A (zh) | 2017-09-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107138143B (zh) | 具有阳离子交换功能的非负电荷型色谱固定相的制备方法 | |
CN103706341B (zh) | 离子液体键合聚硅氧烷固定相及其制备方法 | |
Jiang et al. | Synthesis and evaluation of polymer-based zwitterionic stationary phases for separation of ionic species | |
CN103357390A (zh) | 多层结构键合硅胶液相色谱填料及其合成方法 | |
CN104289209B (zh) | 一种用于蛋白质分离的wcx/hic双功能混合模式聚合物基质色谱固定相及其制备方法 | |
Zhang et al. | Hyperbranched anion exchangers prepared from thiol-ene modified polymeric substrates for suppressed ion chromatography | |
CN106824307A (zh) | 一种混合型阴离子交换介质及其制备方法 | |
Tian et al. | Simultaneous separation of acidic and basic proteins using gemini pyrrolidinium surfactants and hexafluoroisopropanol as dynamic coating additives in capillary electrophoresis | |
CN103102388A (zh) | 一种顺序富集多磷酸化肽和单磷酸化肽的方法 | |
Pataj et al. | Effect of mobile phase composition on the liquid chromatographic enantioseparation of bulky monoterpene‐based β‐amino acids by applying chiral stationary phases based on Cinchona alkaloid | |
Chen et al. | Extraction of Tryptophan enantiomers by aqueous two‐phase systems of ethanol and (NH4) 2SO4 | |
Li et al. | Light-triggered switchable ionic liquid aqueous two-phase systems | |
CN102958602A (zh) | 层析方法及为此使用的介质 | |
CN106588728B (zh) | 一种含硫脲结构的离子液体及其合成方法与应用 | |
CN107474060B (zh) | 一种具有选择性吸附分离阴离子染料性能的金属-有机框架材料及其制备方法和应用 | |
CN103550954B (zh) | 一种苯基咪唑离子液体-硅胶杂化毛细管整体柱 | |
CN104785230B (zh) | 一种两性键合硅胶固定相及其制备方法和应用 | |
CN108114705A (zh) | 一种硅胶基质碱性氨基酸键合固定相及其制备和应用 | |
CN106552610B (zh) | 一种亲水作用色谱/离子交换色谱混合固定相及其制备和应用 | |
CN101185881B (zh) | 用于免疫球蛋白类蛋白质分离纯化的色谱介质及其制备方法 | |
CN1325516C (zh) | 卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法 | |
CN108906008A (zh) | 一种多齿化氨基极性内嵌型混合模式高效液相色谱填料及其制备方法和应用 | |
CN109248715A (zh) | 阴离子交换树脂及其制备方法和用途 | |
CN101234994A (zh) | 二甲基酰胺与硫氰酸盐形成的离子液体及制备方法和应用 | |
CN103285814B (zh) | 一种基于强螯合配体的固定金属亲和色谱固定相及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20191105 Termination date: 20210518 |