CN107082822B

CN107082822B - 一种芒果加工副产物多糖脱蛋白及脱色方法

Info

Publication number: CN107082822B
Application number: CN201710394098.7A
Authority: CN
Inventors: 胡会刚; 赵巧丽; 谢江辉; 胡玉林; 陈晶晶; 段雅婕
Original assignee: South Subtropical Crops Research Institute CATAS
Current assignee: South Subtropical Crops Research Institute CATAS
Priority date: 2017-05-28
Filing date: 2017-05-28
Publication date: 2018-12-25
Anticipated expiration: 2037-05-28
Also published as: CN107082822A

Abstract

本发明公开了一种芒果加工副产物多糖脱蛋白及脱色方法，是将芒果皮渣经预处理制得芒果皮渣匀浆，以超声波辅助纤维素酶法提取粗多糖，再进行粗多糖脱蛋白及脱色，获得芒果多糖半纯品。采用超声波辅助纤维素酶法提取粗多糖，超声波的次级振动效能能加速多糖的扩散释放，纤维素酶处理可有效破坏细胞壁，提高多糖得率，还能保持多糖的生物活性；采用优化后的TCA‑正丁醇法脱蛋白可获得较佳的脱蛋白效果，采用活性炭对脱蛋白后的多糖溶液进行脱色，可获得较高的脱色率和多糖保留率；以芒果加工副产物为原料，有利于提高芒果深加工产业的附加值，减轻环境污染；本发明方法简单、快速，与传统的干燥粉碎样前处理方式相比，简化了提取工艺，降低了生产成本。

Description

一种芒果加工副产物多糖脱蛋白及脱色方法

技术领域

本发明属于园艺作物产品深加工技术领域，特别涉及一种芒果加工副产物多糖脱蛋白和脱色方法。

背景技术

芒果，又名蜜望、檬果，是一种热带漆树科常绿乔木，在我国热带亚热带地区广泛种植，因其果肉细腻、营养丰富、风味独特而深受大众喜爱，具有益胃、解渴、润肤、止呕的功效。每年在芒果生产加工过程中约产生数百万吨皮渣，常被当作垃圾堆积处理，严重污染环境。

多糖是芒果皮渣中的主要活性成分之一，具有抗氧化、抑菌、抗肿瘤、免疫调节、降血糖、降血脂等功效。近年来，芒果皮渣中多糖的提取已受到许多研究者的广泛关注。李金花等（2012）采用水提醇沉法从芒果叶中提取粗多糖，测得其含量为1.51%；王维民等（2005）以红芒果皮渣为原料，在料液比1:5g/mL，温度90℃，时间2h的条件下提取多糖，提取率可达3.538%。目前，本实验室已从芒果皮渣中分离出粗多糖，但制得的多糖蛋白质含量较高，颜色较深（呈褐色），这不但影响多糖作为食品添加剂或功能性食品基料的外观，而且对后续多糖的纯化产生很大影响，所以脱去与活性多糖相结合的蛋白质分子和色素成分迫在眉睫。为了在芒果粗多糖的处理过程中获得更多具有高活性的多糖，研究一种能在高效脱除蛋白质和色素时保留较高多糖有效成分的脱蛋白和脱色方法是十分必要的。

多糖的脱蛋白方法常用的有Sevage法、三氯乙酸（TCA）法、TCA-正丁醇法、酶法、盐酸法、树脂法等，往往因多糖来源不同而有差异；脱色方法主要有活性炭法、壳聚糖法、H₂O₂法、聚酰胺法、大孔吸附树脂法等，活性炭由于具有较高的吸附能力，脱色成本低且不易影响待脱色物质的生物活性而在工业化生产中得到了广泛应用。但在此之前，几乎没有关于芒果多糖的脱蛋白和脱色工艺优化研究。

发明内容

本发明的在于提供一种芒果加工副产物多糖的脱蛋白和脱色方法，本发明是通过将芒果皮渣经预处理后制得芒果皮渣匀浆，采用超声波辅助纤维素酶法提取粗多糖，并进行粗多糖的脱蛋白及脱色，获得芒果多糖半纯品，本发明方法简单、快速，具有较高的脱蛋白率、脱色率和多糖保留率。

本发明采用如下技术方案：一种芒果加工副产物多糖的脱蛋白和脱色方法，包括以下步骤：

（1）芒果加工副产物的预处理：选取无损伤、无病害的芒果，取皮渣，清洗，切片，沸水浴灭活2 min，按1:4~1:5g/mL料液比将芒果皮渣与蒸馏水混合，于捣碎机中匀浆，得芒果皮渣匀浆，4℃冷藏备用；

（2）芒果粗多糖的提取：取步骤（1）制得的芒果皮渣匀浆，以蒸馏水为提取剂，采用超声波辅助纤维素酶法提取多糖；取提取液分离出上清液，真空减压浓缩至10mL，加入浓缩液3~5倍体积分数95%乙醇，4℃沉析过夜，以转速4000~5000r/min离心5~10min，所得沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2~4次，得到透明胶状多糖；

（3）芒果粗多糖的脱蛋白：将步骤（2）所得的透明胶状多糖复溶于蒸馏水中，配置成5mg/mL的多糖溶液，加入TCA-正丁醇混合溶液，于恒温摇床中振荡反应脱蛋白，静置分层后取下层溶液，为脱蛋白后的芒果粗多糖溶液，测定其中蛋白质含量和多糖含量；

（4）芒果粗多糖的脱色：取20mL脱蛋白后的芒果粗多糖溶液，加入粉末活性炭于恒温摇床中振荡吸附脱色，6000~8000r/min离心10~20min，取上清液过膜，得脱色后的多糖溶液，测定多糖含量，并在多糖溶液最大吸收波长下测定吸光度，计算脱色率；将脱色后的多糖溶液转移至透析袋中，流动蒸馏水透析72h，真空冷冻干燥即得芒果粗多糖。

进一步的，所述步骤（2）中，芒果粗多糖的提取条件为：取芒果皮渣匀浆，以1:2~1:5g/mL料液比加入蒸馏水，复水30min，调节pH为3.0~6.0，加入0.5%~1.5%（以芒果皮渣质量计）纤维素酶，于超声波清洗仪中以120W~300W的功率于40~60℃提取40~80min，升温至90℃灭酶30min，所得提取液经6000r/min离心10min，收集上清液，残渣重复提取1~2次。

进一步的，所述步骤（3）中，芒果粗多糖的脱蛋白条件为：TCA-正丁醇混合溶液与多糖溶液体积比为2:1~1:2、TCA-正丁醇混合溶液中TCA与正丁醇体积比为1:5~1:20、静置时间1~3h、振荡时间1~3h。

优选的，所述步骤（3）中，芒果粗多糖的脱蛋白条件为：TCA-正丁醇混合溶液与多糖溶液体积比为2:1、TCA-正丁醇混合溶液中TCA与正丁醇体积比为1:20、静置时间2h、振荡时间2h，振荡速度160r/min。

进一步的，所述步骤（4）中，粉末活性炭的脱色条件为：调节多糖溶液pH为3.0~5.0，添加0.5~2.0%（m/V，以多糖溶液体积计）活性炭，40~60℃振荡脱色40~80min；过膜方法为：0.22µm微孔水系滤膜，真空泵抽滤。

优选的，所述步骤（4）中，粉末活性炭的脱色条件为：调节多糖溶液pH为3.0，添加1.5%（m/V，以多糖溶液体积计）活性炭，50℃振荡脱色75min；过膜方法为：0.22µm微孔水系滤膜，真空泵抽滤。

所述步骤（3）芒果粗多糖的脱蛋白以蛋白质脱除率和多糖保留率为评价指标，试验数据采用综合加权评分法，评分标准为：设定蛋白质脱除率和多糖保留率的权重系数为0.5，将各项中的指标分别除以该列中的最大值再乘以100即为该项的得分，综合评分Z=0.5X+0.5Y，其中X为蛋白质脱除率，Y为多糖保留率。所述步骤（4）芒果粗多糖的脱色的评价指标为脱色率和多糖保留率，试验数据采用综合加权评分法，评分标准参照芒果粗多糖脱蛋白实验中的方法。

本发明技术方案中，对芒果粗多糖脱蛋白方法、脱色方法、脱蛋白条件和脱色条件进行了筛选或优化，获得最优的技术方案为：采用TCA-正丁醇法对芒果多糖进行脱蛋白，脱蛋白最佳工艺条件为：TCA-正丁醇与多糖溶液体积比2:1，三氯乙酸与正丁醇体积比1:20，静置时间2h，振荡时间2h；采用活性炭法脱色，活性炭脱色最佳条件为：脱色温度50℃，脱色时间75min，活性炭添加量1.5%，pH为3.0；具体说明如下。

1、芒果粗多糖脱蛋白方法的筛选：配置5mg/mL的芒果粗多糖溶液，取30mL分别按以下方法进行脱蛋白试验。

（1）TCA法：向多糖溶液中加入等体积20% TCA，160r/min振荡2h，4000r/min离心10min，取上清液分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（2）TCA-正丁醇法：向多糖溶液中加入60mL TCA-正丁醇溶液（TCA浓度20%，TCA:正丁醇=1:10），160r/min振荡2h，静置分层后取下层溶液，测定其中蛋白质含量和多糖含量。

（3）Sevage法：向多糖溶液中加入1/4体积的Sevage试剂（氯仿:正丁醇=1:4），180r/min振荡60min，4000r/min离心10min，取上清液分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（4）TCA-Sevage联用法：取多糖溶液，采用上述TCA法（TCA浓度为10%）处理后，再采用Sevage法脱蛋白，分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（5）木瓜蛋白酶法：取多糖溶液，调节pH为6.5，加入5%木瓜蛋白酶（酶浓度1mg/mL），65℃水解5h，沸水浴中灭酶5min，冷却至室温，4000r/min离心10min，取上清液分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（6）木瓜蛋白酶-Sevage联用法：取多糖溶液，依次用木瓜蛋白酶法和Sevage法脱蛋白，分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（7）木瓜蛋白酶-TCA联用法：取多糖溶液，依次用木瓜蛋白酶法和TCA法脱蛋白，分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（8）木瓜蛋白酶+TCA-正丁醇联用法：取多糖溶液，依次用木瓜蛋白酶法和TCA-正丁醇法脱蛋白，分别测定蛋白质含量和多糖含量。

（9）HCl法：向多糖溶液中加入等体积1mol/L HCl，160r/min振荡2h，4000r/min离心10min，取上清液分别测定蛋白质含量和多糖含量。

结果表明，TCA-正丁醇法和木瓜蛋白酶与TCA-正丁醇联用法对粗多糖中的蛋白质脱除效果较好，脱除率均高于80%，但后者的多糖保留率较低，这可能是由于多次操作造成部分多糖损失。TCA法、TCA-Sevage法、HCl法、木瓜蛋白酶-TCA联用法对粗多糖的蛋白质脱除率均高于50%，但多糖损失较严重，这可能是由于TCA法、HCl法在脱除蛋白的同时，过酸的环境造成多糖的降解；Sevag法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶-Sevage联用法的脱蛋白效果较差，脱除率仅为10%。因此，本发明技术方案中选择TCA-正丁醇法对芒果多糖进行脱蛋白（图1）。

2、TCA-正丁醇法脱蛋白条件优化：选取TCA-正丁醇与样液（多糖溶液）体积比（A）、TCA与正丁醇体积比（B）、静置时间（C/h）、振荡时间（D/h）4个因素，按L₉(3⁴)正交表设计实验，以确定最佳脱蛋白条件，因素水平见表1

。

结果表明，影响TCA-正丁醇法脱蛋白效果的因素大小顺序为：A>B>D>C，即TCA-正丁醇与样液的体积比对脱蛋白效果影响最大，其次为TCA与正丁醇的体积比，再次是振荡时间，静置时间对脱蛋白效果影响最小。TCA-正丁醇法脱蛋白的最佳工艺条件为A₁B₃C₂D₂，即TCA-正丁醇与样液体积比2:1，三氯乙酸与正丁醇体积比1:20，静置时间2h，振荡时间2h。对正交试验结果进行方差分析，结果如表3。由于静置时间引起的偏差平方和最小，故选静置时间列为误差所在列，由表3可知，因素A、B、D对蛋白质脱除率影响显著，C影响不显著。对最佳工艺进行验证试验，得出蛋白质脱除率为90.08%，多糖保留率为94.40%，表明试验所得工艺条件为最优工艺条件。

3、活性炭法不同脱色条件对脱蛋白后多糖溶液脱色效果的影响

（1）单因素实验设计：单因素设定因素为活性炭用量、脱色温度、脱色时间、样液pH值，分别考察4个因素对脱蛋白后多糖溶液脱色效果的影响。固定多糖溶液pH为3.0，脱色温度50℃、振荡时间1h，活性炭用量0.5、1.0、1.5、2.0、2.5%；固定多糖溶液pH为3.0，活性炭用量1.0%，振荡时间1h，脱色温度30、40、50、60、70℃；固定多糖溶液pH为3.0，活性炭用量1.0%，脱色温度50℃、脱色时间20、40、60、80、100、120min；固定活性炭用量1.0%，脱色温度50℃、脱色时间80min，多糖溶液pH为1.0、3.0、5.0、7.0、9.0。

结果表明，随着活性炭用量的增加，脱色率逐渐增大，而多糖保留率却逐渐降低，综合考虑，活性炭用量在0.5%～1.5%为宜（图2）。脱色温度在40～70℃的范围内，脱色率较大，50℃时达到最大；多糖保留率在40℃时达到最大，此后继续升高温度，多糖保留率缓慢降低。故选取50℃进行脱色效果较好（图3）。随着时间的延长，脱色率呈先增加后减小趋势，60min时达到最大值；多糖保留率随着脱色时间的延长缓慢降低，在60～100min的范围内降低趋势较平缓，综合考虑选择最佳脱色时间为60min（图4）。随着pH的增加，脱色率逐渐增加，当pH大于3.0后，脱色率反而开始下降；多糖保留率随着pH的增加先减小后增加，当pH达到5.0后，增加十分缓慢。综合考虑选择样液pH为4.0（图5）。

（2）正交优化实验设计：根据单因素试验结果，选取脱色温度（A/℃）、脱色时间（B/min）、活性炭添加量（C/%）、pH值（D）4个因素按L₉(3⁴)正交表设计试验，因素水平见表4：

。

结果表明，影响活性炭脱色效果的因素大小顺序为：A>C>B>D，即脱色温度对脱色效果影响最大，其次为活性炭添加量，再次是脱色时间，pH值对脱色效果影响最小。活性炭法脱色的最佳条件为A₁B₃C₃D₁，即脱色温度50℃，脱色时间75min，活性炭添加量1.5%，pH为3.0。按优化的工艺条件进行验证试验，得脱色率为70.98%，多糖保留率为92.77%，表明试验确定的工艺条件为最佳工艺条件。

4、不同脱色方法对芒果多糖脱色率的影响。

方法一：H₂O₂法：取20mL脱蛋白后的多糖溶液，用2mol/L NaOH调pH至8.0～9.0，滴加30% H₂O₂至浅黄色（多糖液/H₂O₂=4:1，V/V），于40℃恒温摇床中振荡脱色2h，离心取上清液分别测定脱色率和多糖保留率。

方法二：大孔吸附树脂脱色法：取20mL脱蛋白的多糖溶液，加入4g S-8树脂，于30℃恒温摇床中以160r/min振荡吸附12h，过滤后取上清液分别测定脱色率和多糖保留率。

方法三：活性炭脱色法：按上述优化的最佳作用条件行脱色试验，分别测定脱色率和多糖保留率。

结果表明，活性炭法对芒果多糖的脱色效果较好，脱除率达到67.3%，分别高出H₂O₂法和大孔吸附树脂法45.4%和53.1%，且多糖保留率也较高，故本发明选择活性炭法对多糖液进行脱色（图6）。

本发明涉及的样品（包括芒果粗多糖溶液、脱蛋白/脱色后的多糖溶液）各项含量的测定方法说明如下：

（1）样品蛋白质含量的测定采用考马斯亮蓝G-250比色法，将样品稀释5~10x，取1mL加入5mL考马斯亮蓝G-250，静置2~10min，在595nm波长下测定OD值，利用公式y=0.0007x+0.0057，（R ²=0.9996）计算蛋白质含量；

（2）样品粗多糖含量的测定采用苯酚-硫酸法，将样品稀释10~25x，取1mL加蒸馏水稀释至2mL，后加入1mL 6%苯酚，5mL浓硫酸，振荡均匀后静置30min在490nm波长下测定OD值，利用公式y=0.0110x-0.0002（R ²=0.9994）计算多糖含量；

（3）样品色素含量的测定方法为：将经粉末活性炭脱色后的多糖样品离心、过膜后，于310nm波长下测定吸光度，进而计算脱色率，脱色率的计算公式如下：

脱色率=（脱色前吸光度-脱色后吸光度）/脱色前吸光度×100%

本发明相对于现有技术具有如下有益效果：

（1）利用芒果加工副产物皮渣为原料提取粗多糖，一方面有利于提高芒果深加工产业的附加值，减轻环境污染；另一方面，本发明直接利用废弃物鲜样提取多糖，与传统的干燥粉碎样前处理方式相比，简化了提取工艺，降低了企业的生产成本；

（2）本发明设计采用超声波辅助纤维素酶法提取芒果加工副产物多糖，纤维素酶能酶解细胞壁中的纤维素，超声波的空化效应和振动作用，能促进细胞壁的破裂，有利于多糖的溶出，同时超声波还有助于纤维素酶与细胞壁中纤维素充分接触，是一种新的、有效的芒果多糖提取方法；

（3）本发明优化后的TCA-正丁醇法对芒果皮渣中的芒果粗多糖具有良好的脱蛋白效果，在蛋白质脱除率高达90.08%，此时多糖保留率为94.4%；

（4）本发明采用活性炭对脱蛋白后的多糖溶液进行脱色，简单、快速，可获得较高的脱色率（70.98%）和多糖保留率（92.77%）；

（5）本方法为后续芒果多糖的分离纯化及结构鉴定提供了理论参考，制得的芒果多糖半纯品可用于食品和化妆品的配制。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1 不同方法对蛋白质脱除率和多糖损失率的影响。

图2 活性炭用量对芒果多糖脱色率和多糖保留率的影响。

图3 脱色温度对芒果多糖脱色率和多糖保留率的影响。

图4 脱色时间对芒果多糖脱色率和多糖保留率的影响。

图5 样液pH对芒果多糖脱色率和多糖保留率的影响。

图6 不同方法对芒果多糖脱色率和多糖保留率的影响。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。

实施例1采用以下步骤实现本发明：

（1）芒果加工副产物的预处理：选取无损伤、无病害的芒果，取皮渣，清洗，切片，沸水浴灭活2 min，以1:5 g/mL料液比将芒果皮渣与蒸馏水混合，于捣碎机中匀浆，得芒果皮渣匀浆，4℃冷藏备用；

（2）芒果粗多糖的提取：取经步骤（1）处理的芒果皮渣匀浆30g，加入90mL蒸馏水，复水30min、调节pH为 5.0、加入芒果皮渣质量1.0%的纤维素酶、于超声波清洗仪中以240W的功率，于50℃提取60min，升温至90℃灭酶30min；所得提取液经6000r/min离心10min，收集上清液，残渣重复提取1次；提取液分离出上清液，真空减压浓缩至10mL，加入浓缩液4倍体积95%乙醇，4℃沉析过夜，5000r/min离心10min，所得的沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2次，得到透明胶状多糖；

（3）芒果粗多糖的脱蛋白：将透明胶状多糖复溶于蒸馏水中，配置成5mg/mL的多糖溶液，取30mL，加入60mL TCA-正丁醇混合溶液（TCA与正丁醇体积比为1:10），于28℃恒温摇床中160r/min振荡反应2h，将多糖溶液转移至分液漏斗中静置1h，分层后取下层溶液测定其中蛋白质和多糖含量；测得蛋白质脱除率83.45%，多糖保留率92.56%；

（4）芒果粗多糖的脱色：取20mL上述脱蛋白后的芒果粗多糖溶液，调节pH为3.0，加入1.0%（m/V，以多糖溶液体积计）的粉末活性炭，于50℃、160r/min振荡吸附脱色100min，8000r/min离心20min，取上清液过0.22µm滤膜去除活性炭，测定多糖含量，并在310nm波长下测定上清液的吸光度，计算脱色率；测得脱色率为60.38%，多糖保留率为88.11%。

实施例2采用以下步骤实现本发明：

（1）芒果加工副产物的预处理：选取无损伤、无病害的芒果，取皮渣，清洗，切片，沸水浴灭活2 min，以1:4 g/mL料液比将芒果皮渣与蒸馏水混合，于捣碎机中匀浆，得芒果皮渣匀浆，4℃冷藏备用；

（2）芒果粗多糖的提取：取经步骤（1）处理的芒果皮渣匀浆30g，加入120mL蒸馏水，复水30min、调节pH为 5.0、加入芒果皮渣质量0.8%的纤维素酶、于超声波清洗仪中以300W的功率于50℃提取80min，升温至90℃灭酶30min。所得提取液经5000r/min离心10min，收集上清液，残渣重复提取1次；提取液分离出上清液，真空减压浓缩至10mL，加入浓缩液5倍体积95%乙醇，4℃沉析过夜，4000r/min离心10min，所得的沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2次，得到透明胶状多糖；

（3）芒果粗多糖的脱蛋白：将透明胶状多糖复溶于蒸馏水中，配置成5mg/mL的多糖溶液，取30mL，加入30mL TCA-正丁醇混合溶液（TCA与正丁醇体积比为1:10），于28℃恒温摇床中160r/min振荡反应2h，将多糖溶液转移至分液漏斗中静置3h，分层后取下层溶液测定其中蛋白质和多糖含量；测得蛋白质脱除率73.56%，多糖保留率80.79%；

（4）芒果粗多糖的脱色：取20mL上述脱蛋白后的芒果粗多糖溶液，调节pH为5.0，加入1.0%（m/V，以多糖溶液体积计）的粉末活性炭，于50℃、160r/min振荡吸附脱色60min，8000r/min离心10min，取上清液过0.22µm滤膜去除活性炭，测定多糖含量，并在310nm波长下测定上清液的吸光度，计算脱色率；测得脱色率为61.48%，多糖保留率为89.72%。

Claims

1.一种芒果加工副产物多糖脱蛋白和脱色方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）芒果加工副产物的预处理：选取无损伤、无病害的芒果，取皮渣，清洗，切片，沸水浴灭活2min，按1:4~1:5g/mL料液比将芒果皮渣与蒸馏水混合，于捣碎机中匀浆，得芒果皮渣匀浆，4℃冷藏备用；

（2）芒果粗多糖的提取：取步骤（1）制得的芒果皮渣匀浆，以蒸馏水为提取剂，采用超声波辅助纤维素酶法提取多糖，提取条件为：取芒果皮渣匀浆，以1:2~1:5g/mL料液比加入蒸馏水，复水30min，调节pH为3.0~6.0，加入以芒果皮渣质量计，用量为0.5%~1.5%的纤维素酶，于超声波清洗仪中以120W~300W的功率于40~60℃提取40~80min，升温至90℃灭酶30min，所得提取液经6000r/min离心10min，收集上清液，残渣重复提取1~2次；取提取液分离出上清液，真空减压浓缩至10mL，加入浓缩液3~5倍体积分数95%的乙醇，4℃沉析过夜，以转速4000~5000r/min离心5~10min，所得沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2~4次，得到透明胶状多糖；

（3）芒果粗多糖的脱蛋白：将步骤（2）所得的透明胶状多糖复溶于蒸馏水中，配置成5mg/mL的多糖溶液，加入TCA-正丁醇混合溶液，于恒温摇床中振荡反应脱蛋白，静置分层后取下层溶液，为脱蛋白后的芒果粗多糖溶液，测定其中蛋白质含量和多糖含量；所述TCA-正丁醇混合溶液与多糖溶液体积比为2:1~1:2、TCA-正丁醇混合溶液中TCA与正丁醇体积比为1:5~1:20、静置时间1~3h、振荡时间1~3h；

（4）芒果粗多糖的脱色：取20mL脱蛋白后的芒果粗多糖溶液，加入粉末活性炭于恒温摇床中振荡吸附脱色，6000~8000r/min离心10~20min，取上清液过膜，得脱色后的多糖溶液，测定多糖含量，并在多糖溶液最大吸收波长下测定吸光度，计算脱色率；将脱色后的多糖溶液转移至透析袋中，流动蒸馏水透析72h，真空冷冻干燥即得芒果多糖半纯品；所述粉末活性炭的脱色条件为：调节多糖溶液pH为3.0~5.0，添加以多糖溶液体积计，用量为0.5%~2.0%的活性炭，40~60℃振荡脱色40~80min；所述过膜方法为：0.22µm微孔水系滤膜，真空泵抽滤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，芒果粗多糖的脱蛋白条件为：TCA-正丁醇混合溶液与多糖溶液体积比为2:1、TCA-正丁醇混合溶液中TCA与正丁醇体积比为1:20、静置时间2h、振荡时间2h，振荡速度160r/min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（4）中，粉末活性炭的脱色条件为：调节多糖溶液pH为3.0，添加1.5%的活性炭，50℃振荡脱色75min；过膜方法为：0.22µm微孔水系滤膜，真空泵抽滤。