CN107073117A - 用于识别wls蛋白特定基序的抗体和含有其的药物组合物 - Google Patents
用于识别wls蛋白特定基序的抗体和含有其的药物组合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种识别WLS蛋白的特定基序以抑制Wnt信号转导通路过度活化从而预防或治疗与Wnt信号转导通路相关的疾病的抗体，以及包含其的药物组合物。
Description
技术领域
本发明涉及识别WLS蛋白的特定基序的抗体，其抑制Wnt信号转导通路(Wntsignaling pathway)的过度活化从而预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病，以及包含其的药物组合物。
背景技术
细胞信号转导(Cell signaling)是一个多步骤的过程，其中外源性刺激(激素、生长因子、神经递质等)被递送到细胞中以引起多种细胞应答，包括基因表达、细胞分化、分裂、生长和死亡。一种或多种细胞信号传导损伤和异常经常引起疾病。因为现代人的四种主要疾病(癌症、心血管疾病、免疫疾病和脑部疾病)几乎都是由细胞信号转导通路的异常引起的，经发现，靶向信号转导蛋白的药物或筛选调节细胞信号转导通路活性的药物成为新药开发的主要目标，并且这类药物占制药行业的50％以上。
在这些细胞信号转导通路中，Wnt/β-连环蛋白信号转导通路是一种在脊椎动物发育、生长和体内平衡中发挥重要作用的信号转导通路。Wnt信号转导对于胚胎发育和成年动物的体内平衡都很重要。Wnt传导通路通常由调节以下过程的蛋白质网络组成：1.Wnt蛋白的产生和分泌；2.Wnt与细胞受体的结合；和3.由相互作用引起的生物化学反应的细胞内转导(Mikels和Nusse，2006；MacDonald，2009；Moon，2005)。
Wnt蛋白与细胞表面共受体卷曲蛋白(Frizzled)LRP5/6的结合引发了所谓经典Wnt通路，这导致了到达细胞核的β-连环蛋白的量的变化，并在其中与TCF/LEF家族转录因子相互作用，从而促进了特定基因的转录。
由一组不同的细胞内蛋白质转导的非经典Wnt通路控制了昆虫中的平面细胞极性和几种过程，如脊椎动物中的原肠胚形成。
Wnt信号转导也因其在胚胎和成体干细胞的多能性和分化控制中的作用被公知(Nusse，2008)。例如，在原肠胚形成过程中的原条形成与类胚体中Wnt的局部活化相关(tenBerge，2008)。源自胚胎干细胞或iPS细胞的许多细胞类型，例如心脏细胞、胰腺β细胞、多巴胺能神经元和肝细胞的衍生受Wnt调节(Yang,2008；D'Amour,2006；Inestrosa andArenas,2010；Sullivan,2010)。Wnt通路在骨组织发育如骨形成和软骨形成中起着特别重要的作用(Hoeppner，2009；Chun，2008)。Wnt信号转导也与成人中枢神经系统的神经元再生有关(Lie，2005)。
疾病可能由Wnt通路活性的改变而引起。例如，经典Wnt通路的过度激活可导致异常的细胞生长(Reya和Clevers，2005)。值得注意的是，90％的结直肠癌是由Wnt/β-连环蛋白通路的抑制因子——腺瘤性结肠息肉病(adenomatosis polyposis coli，APC)基因的丢失所引发(Kinzler和Vogelstein，1996)。Wnt蛋白的表达增加和通常抑制Wnt蛋白功能的细胞外抑制剂的减少可能引起Wnt依赖性肿瘤(Polakis，2007)。另一方面，非经典的Wnt通路也被证实在某些癌症的进展中发挥了作用(Camilli和Weeraratna，2010)。最近，Wnt信号转导也在癌症干细胞中有所涉及(Takahashi-Yanaga和Kahn，2010)。
证据表明，靶向于Wnt介导的信号转导通路在大量的疾病治疗中都具有作用(Barker和Clevers，2006)。导致经典Wnt通路组成型激活的APC、β-连环蛋白或axin-1的突变是多种人类癌症，包括结直肠癌、黑素瘤、肝细胞癌、胃癌、卵巢癌和其他癌症中的关键事件(Polakis，2007)。已经证明使用遗传或化学方法阻断多种癌症中的Wnt通路可以消除异常的细胞生长(Herbst和Kolligs，2007)。此外，抑制该通路可能直接影响维持癌细胞生长和转移并且对传统化疗剂具有抗性的细胞。
除了由受体下游的基因产物突变引起的活化之外，由其他机制引起的异常Wnt通路活性已经与大量癌症相关。这些癌症包括但不限于：肺(小细胞和非小细胞)癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、瘢痕瘤(scarcinoma)，食道癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤，脂肪肉瘤、甲状腺、急性髓细胞白血病(AML)和慢性髓细胞白血病(CML)。现在有多个依赖于自分泌或旁分泌Wnt信号转导上调的癌细胞实例，来自骨肉瘤，乳腺，头颈部和卵巢癌的细胞系已经显示出通过自分泌或旁分泌Wnt信号转导保护免于细胞凋亡(Kansara，2009；Bafico，2004；Akiri，2009；DeAlmeida，2007；Chan，2007；Chen，2009；Rhee，2002)。
此外，异常Wnt通路涉及了纤维化的发展，包括但不限于：肺纤维化，如特发性肺纤维化和放射诱导的纤维化、肾纤维化和肝纤维化(Morrisey，2003；Hwang，2009；Cheng，2008)。
与Wnt信号转导异常相关的其它病症包括但不限于骨和关节软骨疾病，例如骨质疏松症和骨关节炎、肥胖相关的II型糖尿病和神经退行性疾病如阿尔茨海默病(Hoeppner，2009；Ouchi，2010；Blom，2010；Boonen，2009)。Wnt信号转导也有助于HSC的自我更新和维持，并且Wnt信号转导的功能失调是造成由HSC产生各种疾病的原因，如白血病和多种其他与血液相关的癌症(Reya，2005)。
【发明公开】
【技术问题】
本发明的目的是提供一种用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，其通过使用一种识别WLS蛋白特定基序的抗体从而抑制Wnt信号转导通路的过度活化，所述WLS蛋白调节Wnt信号转导中Wnt蛋白的分泌。
然而，本发明要实现的技术目的不限于上述技术目的，并且本领域技术人员从下面的描述中可以清楚理解上面未提及的其它目的。
【技术方案】
在下文中，将参照附图描述本文描述的各实施例。在下面的描述中，为了提供对本发明的透彻理解，阐述了许多具体细节，例如具体的配置，组成和过程等。然而，某些实施例可以在没有这些具体细节中的一种或多种的情况下实施，或者与其他已知的方法和配置结合使用。在其它情况下，未对已知的方法和制备技术进行特别详细的描述，从而不会对本发明造成不必要的混淆。在本说明书中对“一实施例”或“一个实施例”的引用意味着结合该实施例描述的特定特征、配置、组成或特性包括在本发明的至少一个实施例中。因此，在本说明书的各个地方，短语“一个实施例”或“实施例”的出现不一定指代本发明的相同实施例。另外，特定特征、配置、组成或特性可以在一个或多个实施例中以任何合适的方式组合。
除非本说明书另有规定，本说明书中使用的所有科学技术术语具有与本发明所属技术领域的技术人员通常理解的相同的含义。
在本发明的一个实施方案中，Wnt蛋白是参与多种发育过程的信号蛋白，如胚胎发生期干细胞控制。Wnt蛋白具有约40kDa的分子量，并含有几个保守的半胱氨酸。2003年，小鼠Wnt3a蛋白首次被成功纯化，并发现是脂质调节蛋白。添加到Wnt中的脂质是有效信号转导所必需的，因为与受体结合的Wnt蛋白中一个区域的脂质部分扩散到口袋形受体并结合至受体。大多数哺乳动物，包括人类，有19个Wnt基因，其中12个属于保守的亚家族。单细胞生物没有Wnt基因，这表明Wnt信号转导在多细胞动物进化开始时可发挥非常重要的作用。
在本发明的一个实施方案中，WLS(Wntless)蛋白是在Wnt信号转导中分泌Wnt蛋白所必需的蛋白，也称为G蛋白偶联受体177(GPR177)、Clorf139、EVI、MRP、sprinter或mig-14。在分泌Wnt蛋白的细胞中，WLS基因编码所述Wnt蛋白的受体。WLS蛋白(Wnt受体)是由卷曲蛋白(Frizzled protein，Fz)和脂蛋白受体相关蛋白5/6(LRP5/6)组成的异二聚体结构。Fz蛋白是穿过细胞膜七次的受体，其含有N末端富含半胱氨酸的结构域(CRD)，并通过CRD在不同位置与Wnt相互作用。Fz与被称为LRP家族的受体(其穿过细胞膜一次)一起结合Wnt。Wnt受体的结构通过与其结合的配体而改变，其中主要的靶蛋白被磷酸化。信号转导的关键步骤是Axin与LRP细胞质末端的结合，其受LRP6尾部的磷酸化调节。在其他信号转导通路中，一种激酶的功能是可以通过磷酸化几种底物来扩增信号。然而，通过Wnt的LRP6磷酸化的功能是对在破坏复合物中作为负调节剂的Axin进行稀释。也就是说，有一个主要的区别在于，使用了化学计量机制，而不是催化机制。
在本发明的一个实施方案中，“血管新生”是指血管内皮细胞增殖并被重构以从现有血管网形成新血管的细胞过程。因为通过其提供氧气和营养物质的新生血管是癌细胞的增殖和生长所必需的，所以可以通过抑制血管新生诱导抑制肿瘤转移。
在本发明的一个实施方案中，“转移”是指癌细胞从其原始器官扩散到其它器官。将癌症扩散到身体的其它部位主要分为癌细胞在原发性癌症中生长并直接扩散到周围器官的过程，以及癌细胞通过血管或淋巴管转移到不同器官的过程。可以通过抑制致癌相关基因的表达或抑制所述基因编码的蛋白质的活性来控制转移。
在本发明的一个实施方案中，可以通过与靶基因互补的反义寡核苷酸、siRNA、shRNA或微小RNA来实现基因表达的抑制。
反义寡核苷酸是与某一DNA或RNA靶标呈反义(或互补)的短合成DNA链(或DNA类似物)。所述反义寡核苷酸用于在体内和体外实现基因特异性抑制。反义寡核苷酸被用来阻止由DNA或RNA靶标编码的蛋白质的表达。为此，反义寡核苷酸与靶标结合，从而在转录、翻译或剪接阶段阻止蛋白质表达。此外，反义寡核苷酸已成功应用于疾病的细胞培养和动物模型。可以通过本领域技术人员已知的任何常规方法进行反义寡核苷酸的额外修饰以确保寡核苷酸更稳定并且抗体内核酸酶降解。如本文所用，术语“反义寡核苷酸”包括双链DNA(dsDNA)或单链DNA(ssDNA)、dsRNA或ssRNA，DNA/RNA杂交体、DNA和RNA类似物，以及具有碱基、糖、和/或骨架修饰的寡核苷酸。根据本领域已知的常规方法，可以对寡核苷酸进行化学修饰以改善其稳定性并增加对核酸酶降解的抗性。这些修饰方法在本领域中通常是已知的，并且可以包括但不限于：寡核苷酸骨架、糖部分和碱基的修饰。
siRNA(小干扰RNA)是可以介导RNA干扰或基因沉默的核酸分子。由于siRNA可以抑制靶基因的表达，其可以用作有效的基因敲除方法或基因治疗方法。如果在本发明中使用siRNA分子，则其可以具有双链结构，其中正义链(对应于WLS mRNA序列的序列)和反义链(与WLS mRNA序列互补的序列)为位于彼此相对的位置，或具有自互补正义和反义链的单链结构。其中两个RNA链配对的siRNA的双链RNA部分不限于完全配对的siRNA，并且可包含由于错配(相应的核苷酸不互补)或凸起(一条链上缺少相应的互补核苷酸)而产生的非配对部分。只要siRNA可以由于其RNA干扰(RNAi)作用而抑制靶基因表达，siRNA的末端结构可以是平的或粘性的。粘末端结构不限于仅3'突出端，并且可以包括5'突出结构。siRNA分子的总长度为15-30个核苷酸，优选19-21个核苷酸，但不限于此。
shRNA(短发夹RNA)是长度为45-70个核苷酸的单链RNA。当与靶基因siRNA序列正义链互补的反义链之间3-10个核苷酸的接头相连的寡核苷酸合成后，然后克隆到质粒载体中时，或当shRNA被插入逆转录病毒、慢病毒或腺病毒并在其中表达时，通过细胞内核酸内切酶(Dicer)制备环状发夹shRNA并转化成siRNA，以表现出RNAi效应。
微小RNA调节各种生物过程，包括发育、分化、增殖、保护和凋亡。微小RNA通常使靶mRNA不稳定或干扰翻译，从而调节编码靶mRNA的基因的表达。
可用于具有反义寡核苷酸siRNA、shRNA或微小RNA的表达构建体/载体的控制序列(例如，组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子，或其组合)也可以适当地从本领域已知技术中选择。除了反义寡核苷酸siRNA、shRNA或微小RNA外，只要能抑制基因的表达，任何物质都可以用作基因表达的抑制剂。
在本发明的一个实施方案中，可以通过靶蛋白特异性抗体或其抗原结合片段来实现蛋白质表达的抑制。
如本文所用，术语“抗体”是本领域已知的术语，并且是指针对抗原位点的特异性蛋白质分子。为了本发明的目的，所述抗体是指与表达WLS基因的蛋白质特异性结合的抗体，所述WLS基因为本发明的标记。可以根据常规方法，通过将每个基因克隆到表达载体中以获得由标记基因编码的蛋白，并根据常规方法由所获得的蛋白产生抗体来制备所述的抗体。所述蛋白包括可从所述蛋白产生的部分肽，并且本发明的部分肽包含至少7个氨基酸，优选至少9个氨基酸，更优选至少12个氨基酸。本发明抗体的形式没有特别限制，本发明抗体包括具有抗原结合能力的多克隆抗体、单克隆抗体或其部分，本发明抗体还包括所有免疫球蛋白抗体。此外，本发明的抗体还包括特异性抗体，例如人源化抗体。本发明用于检测癌症标志物的抗体不仅包括具有两条全长轻链和两条全长重链的完整抗体，而且还包括抗体分子的功能性片段。“抗体分子的功能性片段”是指至少具有抗原结合能力的片段，功能性片段的实例包括Fab、F(ab')、F(ab')2和Fv。
在本发明的一个实施方案中，“诊断”是指对病理状态存在或特征的鉴定。关于本发明的目的，“诊断”是指胃癌发展和转移的确定。
在一个实施方案中，术语“诊断标记”，“诊断标志”或“诊断标记物”是指能够通过区分正常细胞和癌细胞来诊断癌细胞的物质，并且包括有机生物分子如多肽、核酸(例如mRNA等)、脂质、糖脂、糖蛋白或糖(单糖、二糖，寡糖等)，与正常细胞相比，这些物质在癌细胞中的量增加或减少。关于本发明的目的，根据本发明的用于诊断癌症的标志物是WLS基因的mRNA或由其编码的蛋白，其在胃癌细胞中的特异性表达水平高于正常对象组织的细胞。
在本发明的一个实施方案中，“mRNA表达水平的测量”是指确定生物样品中癌症标志物基因mRNA的存在和表达水平以诊断癌症的过程，并且mRNA表达水平的测量可以通过测量mRNA的量来进行。这种测量的测定包括但不限于：逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、竞争性RT-PCR、实时RT-PCR、RNA酶保护测定(RPA)、Northern印迹或DNA芯片测定。
“用于测量基因mRNA表达水平的试剂”是指可以通过测定WLS基因的表达水平从而检测标志物的分子，其中所述WLS基因在癌细胞中的表达量上升。该试剂可优选为一种包含与该基因特异性结合的引物或探针的试剂，但不限于此。基于WLS的多核苷酸序列，本领域技术人员可以设计用于特异性扩增该基因特定区域的引物或探针。
如本文所用，术语“引物”是指具有短游离3'-端羟基的核酸序列，其是可与互补模板形成碱基对的短核酸序列，并且作为模板链复制的起始点。引物可以在合适的温度下在合适的缓冲液中，在聚合用试剂(例如DNA聚合酶或逆转录酶)和四种不同的核苷三磷酸的存在下引发DNA合成。在本发明中，可以使用WLS多核苷酸的正义和反义引物进行PCR扩增，并且可以基于PCR是否产生所需产物来诊断癌症。PCR条件和正义和反义引物的长度可以根据本领域已知的技术适当选择。
如本文所用，术语“探针”是指核酸的片段，例如RNA或DNA，其可以特异性结合mRNA并且长度为几个核苷酸至数百个核苷酸。所述探针可以确定特异性mRNA的存在或不存在，因为它是经标记的。探针可以构建为寡核苷酸探针、单链DNA探针、双链DNA探针、RNA探针等。在本发明中，可以通过使用与WLS多核苷酸互补的探针进行杂交并确定杂交是否发生来诊断癌症。可以根据本领域已知的技术选择合适的探针和杂交条件。
本发明的引物或探针可以通过氨基磷酸酯固体支持方法或其它众所周知的方法化学合成。该核酸序列也可以使用本领域已知的许多方法进行修饰。该修饰的非限制性实例包括甲基化、封端，用一个或多个天然核苷酸的同系物取代，以及核苷酸之间的修饰，例如修饰成不带电的连接子(例如，甲基磷酸酯、磷酸三酯、氨基磷酸酯、氨基甲酸酯等)或带电的连接子(例如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等)。
在本发明的一个实施方案中，“蛋白表达水平的测量”是指确定生物样品中由癌症标志物基因表达的蛋白的存在和表达水平以诊断癌症的过程。优选地，可以使用与蛋白特异性结合的抗体来确定由该基因编码的蛋白的量。该测量的测定包括但不限于免疫印迹、ELISA(酶联免疫吸附测定)、RIA(放射免疫测定)、放射免疫扩散、Ouchterlony免疫扩散测定、火箭免疫电泳测定、免疫组织染色测定、免疫沉淀测定、补体结合测定、荧光激活细胞分选仪(FACS)、蛋白芯片测定等。
“用于测量蛋白表达水平的试剂”是指可用于通过测定来自WLS基因的蛋白表达水平来检测标志物的分子，WLS基因是当Wnt信号转导通路过度活化时其表达增加的标志物。优选地，所述试剂可以是包含了特异性针对蛋白的抗体的试剂，但不限于此。基于由WLS基因表达的蛋白氨基酸序列，本领域技术人员可以设计对蛋白质特异性的抗体。
用于本发明的蛋白特异性单克隆抗体可以通过本领域已知的常规单克隆抗体构建方法构建或市售可得。此外，可以使用识别蛋白的多克隆抗体代替单克隆抗体，并且还可以通过本领域已知的常规抗血清构建方法构建。
在本发明的一个实施方案中，术语“试剂盒”是指用于特定目的所需的一组组合物和附件。关于本发明的目的，本发明试剂盒可以通过测定WLS的mRNA表达水平或由WLS编码的蛋白表达水平来诊断胃癌，WLS是用于诊断Wnt信号转导通路中异常的标志物。本发明的试剂盒不仅可以包括引物、探针或选择性识别标志物的抗体用于测定胃癌诊断标记物的表达水平，还可以包括一种或多种适用于分析的其它组合物，溶液或装置。
在本发明的一个实施方案中，“给药”是指通过任何合适的方法将本发明的组合物引入患者体内。本发明的组合物可以通过任何一般途径给药，只要其达到目标组织即可。具体而言，本发明的组合物可以口服、腹膜内、静脉内、肌肉内、皮下、皮内、鼻内、肺内、直肠内、腔内或鞘内给药，但不限于此。根据本发明的治疗方法可以包括施用药学有效量的药物组合物。在本发明中，所述有效量可以根据各种因素确定，包括疾病的种类、疾病的严重程度、组合物中活性成分和其他成分的种类和含量、制剂的种类、患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、给药时间、给药途径、组合物的分泌速度、治疗周期和其它同时使用的药物。对于成年人，基因表达的抑制剂或蛋白活性抑制剂可以一天施用一次或多次，在这种情况下，siRNA可以以0.01ng/kg至10mg/kg的剂量施用，用于该基因mRNA的反义寡核苷酸可以以的剂量施用，化合物可以以的剂量施用，蛋白的单克隆抗体可以以0.1ng/kg至10mg/kg的剂量施用。
基于组合物的总重量，组合物含有0.1-50％重量的针对SEQ ID NO：1至3中任一个或多个蛋白的抗体作为活性成分。根据常规方法，本发明的组合物还可以含有合适的载体，赋形剂或稀释剂。可以包含在本发明组合物中的载体，赋形剂和稀释剂包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。本发明组合物可以配制成口服剂型，包括粉末、颗粒、片剂、胶囊、悬浮液、乳剂、糖浆和气溶胶，外用制剂，栓剂或无菌注射溶液。具体而言，本发明组合物可以与常用的稀释剂或赋形剂如填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等一起配制。用于口服给药的固态制剂包括片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂等，并且除了组合物之外，这种固态制剂还包含至少一种赋形剂，例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等。除了简单的赋形剂之外，还可以使用润滑剂如硬脂酸镁或滑石粉。用于口服给药的液态制剂包括悬浮液、溶液、乳剂和糖浆，并且可以包含各种赋形剂，除了水和液体石蜡这些经常使用的简单稀释剂，还有例如润湿剂、调味剂、芳族化合物和防腐剂。用于肠胃外给药的制剂包括无菌水溶液、非水溶液、悬浮液、乳剂，冻干制剂和栓剂。对于非水溶剂或悬浮剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油、可注射的酯如油酸乙酯等。对于栓剂的基础，可以使用合成脂肪酸酯(witepsol)、聚乙二醇(Macrogol)、吐温61、可可脂、月桂脂甘油明胶等，但不限于此。
在本发明的一个实施方案中，术语“筛选”是指通过特定的操作或评价方法从由多种物质组成的候选组中选择具有任何特定性质的物质。关于本发明的目的，本发明的筛选是一种筛选方法，其中当将用于治疗癌症的候选物质施用于疑似患有癌症或转移性癌症的对象后，本发明的肽或核酸编码的蛋白质的活性被抑制，则候选物质被确定为癌症治疗剂。可以使用诸如分子生物学测定、数字成像、细胞学和组织学测试之类的方法来测量本发明的基因或蛋白在癌症病变或疑似具有转移性癌细胞的组织中的活性。
根据本发明的一个实施方案，提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
优选地，本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有特异性针对WLS蛋白的基序蛋白，如SEQ ID NO：4至6中至少一个所示，更优选为SEQ ID NO:6所示的WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
本发明中提供的抗体可以特异性结合WLS蛋白的特定基序，以阻止Wnt信号转导通路的过度活化，从而预防或治疗由于Wnt信号转导通路过度活化而引起的疾病。
在本发明中，由Wnt信号转导通路过度活化引起的疾病可以选自下组：如癌症、视网膜病变、黄斑变性、纤维化、真菌或病毒感染、骨或软骨疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、神经退行性疾病、糖尿病、消化系统疾病、心血管疾病和肾脏疾病，但不限于此(Science.2005Aug 19；309(5738):1256-9.；Gastroenterology.2005Aug；129(2):626-38.；GENES&DEVELOPMENT19:1596-1611；Trends Cell Biol.2006Mar；16(3):151-8.Epub2006Feb 7.；J Physiol.2013Mar 15；591(Pt 6):1409-32.；IUBMB Life.2007Apr-May；59(4-5):316-21.；Organogenesis.2008Apr-Jun；4(2):55-59.；Mol Pharmacol 82:168-177,2012；J Cell Biochem.2012January；113(1):49-60.；Science.2010March 26；327(5973):1650-1653.；Life Sciences 89(2011)545-554.)。
这里、癌症可以选自下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、肾癌、头癌、骨癌、颈部鳞状细胞癌、食管癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤、甲状腺癌、硬纤维瘤、急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)。优选地，所述癌症可以是胃癌、乳腺癌、皮肤癌、肾癌或结直肠癌。更优选地，癌症可以是胃癌或结肠直肠癌。
纤维化可以选自下组：皮肤纤维化；硬皮病；进行性全身纤维化；肺纤维化；肌肉纤维化；肾纤维化；肾小球硬化症；肾小球性肾炎；增生性瘢痕形成(hypertropic scarformation)；子宫纤维化；肾纤维化；肝硬化、肝纤维化；粘连，如发生在腹部、骨盆、脊柱或肌腱上的粘连；慢性阻塞性肺疾病；心肌梗死后纤维化；肺纤维化；与纤维化和弥漫性间质性肺病相关的瘢痕形成；中枢神经系统纤维化，如卒中后纤维化；与神经退行性疾病如阿尔茨海默病或多发性硬化相关的纤维化；与增生性玻璃体视网膜病变(PVR)相关的纤维化；再狭窄；子宫内膜异位症；缺血性疾病和放射性纤维化。优选地，所述纤维化可以是肺纤维化。
真菌或病毒感染可以是疱疹病毒、水痘病毒、艾普斯登－巴尔病毒(Epstein-Barrvirus)、辛德毕斯病毒(Sindbis virus)或腺病毒感染。
神经退行性疾病可以是阿尔茨海默氏病、额颞叶变性、路易体痴呆、朊病毒病、帕金森病、亨廷顿氏舞蹈病、进行性核上眼肌麻痹(progressive supranuclearophthalmoplegia)、皮质基底节变性(corticobasal degeneration)、多系统萎缩症、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、包涵体肌炎、孤独症、退行性神经根病、糖尿病性神经病变、其它代谢性神经病变、内分泌神经病变、直立性低血压、多发性硬化症和进行性腓骨肌萎缩症(Charcot-Marie-Tooth disease)。
心血管疾病可以是心脏肥大或心肌梗死。
肾脏疾病可以选自下组：囊性肾脏疾病、急性肾功能衰竭、糖尿病性肾病和缺血性损伤。
根据本发明的另一个实施方案，提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对选自下组的氨基酸序列的编码基因：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因。
优选地，本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对由SEQ ID NO：4至6至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因，更优选地，WLS蛋白的基序蛋白如SEQ ID NO：6所示。
在本发明中提供的siRNA、shRNA和微小RNA可以特异性地结合至WLS蛋白的特定基序，以阻止Wnt信号转导通路的过度活化，从而预防或治疗Wnt信号转导通路过度活化引起的疾病。
在本发明中，Wnt信号转导通路过度活化引起的疾病种类如上所述，因此省略其说明。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于抑制血管新生的药物组合物，该组合物含有特异性针对选自下组中的氨基酸序列所示蛋白的抗体：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了用于抑制血管新生的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
优选地，本发明提供了用于抑制血管新生的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：4至6中至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体，更优选地，所述WLS蛋白的基序蛋白如SEQ ID NO：6所示。
在本发明中提供的组合物可以阻止Wnt信号转导通路的过度活化以抑制由Wnt信号转导通路的过度活化引起的血管新生，从而预防和/或治疗癌症生长或转移。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于抑制血管新生的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对选自下组的氨基酸序列的编码基因：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因。
优选地，本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对SEQ ID NO：4至6中至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白、更优选为SEQ ID NO:6所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因。
在本发明中提供的组合物可以阻止Wnt信号转导通路的过度活化以抑制由Wnt信号转导通路的过度活化引起的血管新生，从而预防和/或治疗癌症生长或转移。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：(i)由SEQ ID NO：1至3中的任一所代表的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3所示任一氨基酸序列中至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
优选地，本发明提供了一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：4至6中至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白、更优选地为SEQ ID NO：6所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
本发明提供的组合物可以阻止Wnt信号转导通路的过度活化，从而有效地预防和/或治疗由Wnt信号转导通路过度活化引起的癌症转移。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA的任何一种或多种，其特异性针对选自下组的氨基酸序列的编码基因：(i)SEQ ID NO：1至3任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因。
优选地，本发明提供了一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对SEQ ID NO：4至6中至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白、更优选地为SEQ ID NO：6所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因。
本发明提供的组合物可以阻止Wnt信号转导通路的过度活化，从而预防和/或治疗由Wnt信号转导通路过度活化引起的癌症转移。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体，(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
优选地，本发明提供了一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：4至6中至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白、更优选地为SEQ IDNO：6所示WLS蛋白的基序蛋白的抗体。
由于Wnt信号转导通路过度活化而发展或转移的癌细胞表现出WLS蛋白表达水平的上升。因此，根据本发明的诊断用组合物可以用于检测癌症生长或转移的病理学标志物，并且可以通过定量分析WLS蛋白的表达水平来诊断癌症生长或转移。更优选地，本发明组合物可以诊断胃癌或结直肠癌的生长或转移。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组氨基酸序列的编码基因的引物或探针：(i)SEQ IDNO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
优选地，本发明提供了一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：2所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因的引物或探针。
优选地，本发明提供了一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对SEQ ID NO：4至6中至少一个所示WLS蛋白的基序蛋白、更优选地为SEQ IDNO：6所示WLS蛋白的基序蛋白的编码基因的引物或探针。
如上所述，由于Wnt信号转导通路的过度活化而发展或转移的癌细胞表现出WLS蛋白表达水平的上升。因此，所述组合物可以通过定量分析编码WLS蛋白mRNA的表达水平来诊断癌症生长或转移。更优选地，本发明组合物可以诊断胃癌或结直肠癌的生长或转移。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于提供关于癌症或癌症转移的信息的方法，所述方法包括通过使用特异性针对选自下组氨基酸序列所示蛋白的抗体来测定对象中蛋白的表达水平：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于提供关于癌症或癌症转移的信息的方法，所述方法包括通过使用特异性针对选自下组氨基酸序列的编码基因的引物或探针来测定对象中WLS基因的mRNA表达水平：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于筛选癌症治疗剂的方法，所述方法包括：当将特异性针对SEQ ID NO：1-3任一所示WLS(Wntless)基序蛋白的抗体与所述候选物质组合施用时，与单独施用WLS抗体的情况相比，在WLS蛋白的表达被抑制的情况下，确定用于癌症治疗的候选物质是癌症治疗的辅助剂。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种用于筛选癌症治疗剂的方法，所述方法包括：当将特异性针对于SEQ ID NO：1-3任一所示WLS(Wntless)基序蛋白的编码基因的、选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种与所述候选物质组合施用时，与单独施用WLS抗体的情况相比，在WLS蛋白的表达被抑制的情况下，确定用于癌症治疗的候选物质是癌症治疗的辅助剂。
根据本发明的另一个实施方案，提供了由一种选自下组的氨基酸序列所示的蛋白：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
根据本发明的另一个实施方案，提供了一种特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
根据本发明的另一个实施方案，提供了选自下组的氨基酸序列所示蛋白的编码基因：(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
以下，对本发明的各步骤进行详细说明。
【有益效果】
本发明所提供抗体可以识别WLS蛋白的特定基序，其调节Wnt信号转导中Wnt蛋白的分泌，从而抑制Wnt信号转导的过度活化从而有效地预防或治疗与Wnt信号转导通路相关的疾病。
附图说明
图1为根据本发明的一个实施例中Wnt结合前后的WLS蛋白示意图。
图2为根据本发明的一个实施例中WLS蛋白的Wnt结合基序示意图。
图3显示了根据本发明的一个实施例，对WLS表达与胃癌预后之间相关性进行测定的结果。
图4显示了根据本发明的一个实施例，分为五段肽的WLS蛋白。
图5a显示了根据本发明的一个实施例，对在AGS胃癌细胞系中WLS#2，WLS#3，WLS#4和WLS#5抗体与WLS蛋白的反应性进行测定的结果。
图5b显示了根据本发明的一个实施例，对与肽一起使用的抗体对WLS检测能力的降低性进行检测的结果。
图6a显示了根据本发明的一个实施例，对siWLS#1对FLAG-WLS的表达抑制作用进行检测的结果。
图6b显示了根据本发明的一个实施例，对单克隆抗体与经免疫沉淀的FLAG-WLS蛋白的结合进行检测的结果。
图7a显示了根据本发明的一个实施例，通过免疫染色对AGS胃癌细胞系中WLS的定位进行检测的结果。
图7b显示了根据本发明的一个实施例，通过免疫印迹对细胞内部分WLS的表达图谱进行分析的结果。
图7c显示了根据本发明的一个实施例，通过免疫染色对AGS胃癌细胞系中WLS的定位进行检测的结果。
图7d显示了根据本发明的一个实施例，通过FACS分析对WLS#3抗体与AGS胃癌细胞系中内源性WLS的结合进行分析的结果。
图7e显示了根据本发明的一个实施例，通过FACS分析对WLS#4抗体与AGS胃癌细胞系中内源性WLS的结合进行分析的结果。
图8显示了根据本发明的一个实施例，对各种胃癌细胞系中WLS、Axin2和CyclinD1的表达水平进行分析的结果。
图9显示了根据本发明的一个实施例，对用1μg/ml的WLS单克隆抗体处理AGS胃癌细胞系时的细胞活力进行分析的结果。
图10a显示了根据本发明的一个实施例，对用4μg/ml的WLS单克隆抗体处理AGS胃癌细胞系时降低的细胞活力进行分析的结果。
图10b显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS单克隆抗体处理AGS胃癌细胞系时的异常细胞形态进行观察的结果。
图11显示了根据本发明的一个实施例，对WLS#3和WLS#4抗体对癌细胞存活的抑制效果进行检测的结果。
图12显示了根据本发明的一个实施例，当用单克隆抗体处理WLS基因显示不同表达图谱的两个胃癌细胞系时，细胞活力的检测结果。
图13a显示了根据本发明的一个实施例，通过qRt-PCR对MKN74和NI3-3细胞中WLS表达水平进行测定的结果。
图13b显示了根据本发明的一个实施例，通过免疫印迹对MKN74和NI3-3中WLS表达水平进行测定的结果。
图13c显示了根据本发明的一个实施例，对MKN74和NI3-3细胞中Wnt靶基因表达水平进行测定的结果。
图14显示了根据本发明的一个实施例，当用WLS单克隆抗体处理MKN74和NI3-3细胞时，对细胞活力进行检测的结果。
图15显示了根据本发明的一个实施例，当WLS的表达被抑制时，对细胞迁移率变化进行检测的结果。
图16显示了根据本发明的一个实施例，对WLS#4单克隆抗体对癌细胞迁移率的抑制效果进行检测的结果。
图17显示了根据本发明的一个实施例，对WLS#3单克隆抗体对癌细胞迁移率的抑制效果进行检测的结果。
图18显示了根据本发明的一个实施例，基于WLS的表达水平分离MKN74细胞的FACS分析结果。
图19显示了根据本发明的一个实施例，基于CD44的表达水平分离AGS细胞的FACS分析的结果。
图20显示了根据本发明的一个实施例，对具有高CD44表达的AGS细胞中WLS的表达水平进行分析的结果。
图21显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后结直肠癌细胞中β-连环蛋白的乙酰化程度进行分析的结果。
图22a显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后MKN74细胞的肿瘤大小进行测量的结果。
图22b显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#3单克隆抗体处理后MKN74细胞的肿瘤大小进行测量的结果。
图23显示了根据本发明的一个实施例，对有代谢饥饿的p-MKN74细胞和s-MKN74中WLS的mRNA表达水平进行检测的结果。
图24显示了根据本发明的一个实施例，对有代谢饥饿的p-MKN74细胞和s-MKN74的肿瘤大小进行检测的结果。
图25a显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#3和WLS#4单克隆抗体处理后p-MKN74细胞和s-MKN74的肿瘤大小进行测量的结果。
图25b显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#3和WLS#4单克隆抗体处理后p-MKN74细胞的肿瘤大小进行测量的结果。
图25c显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#3和WLS#4单克隆抗体处理后s-MKN74的肿瘤大小进行测量的结果。
图26显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后MCF7细胞中β-连环蛋白的表达水平进行检测的结果。
图27显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后WiDr细胞中β-连环蛋白的表达水平进行检测的结果。
图28显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后A431细胞中β-连环蛋白的表达水平进行检测的结果。
图29显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后转染的MCF7细胞中β-连环蛋白的表达水平进行检测的结果。
图30显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后转染的WiDr细胞中β-连环蛋白的表达水平进行检测的结果。
图31显示了根据本发明的一个实施例，对用WLS#4单克隆抗体处理后转染的A431细胞中β-连环蛋白的表达水平进行检测的结果。
【最佳方式】
本发明提供了用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组氨基酸序列所示蛋白的抗体：(i)SEQ IDNO：1至3中任一所示的氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
【发明方式】
以下，对本发明进行更详细的说明。对于本领域技术人员显而易见的是，这些实施例仅用于说明目的，并不意图限制本发明的范围。
实施例1：WLS基因的鉴定
为了筛选胃癌早期的靶基因，通过微阵列比较分析了78例接受胃切除术的早期胃癌患者的正常组织和癌组织。分析结果表明，特定基因表达水平高或低的组中出现预后差异。特别是在WLS基因的情况下，在WLS基因高度表达的组中癌症复发发生更多，并且该组预后不良。为了确认这些结果的统计学意义，将506名独立于上述组的胃癌患者分为WLS高表达组和WLS低表达组，并且观察这些患者的预后。结果表明，WLS高度表达的群体具有较高的风险比，根据年龄、性别和癌症进展的程度(癌症进展阶段)进行Cox分析，这种风险比被确认为具有统计学显著性差异(图3)。
实施例2：WLS单克隆抗体的构建
在可以作为抗原(靶向称为Wnt结合区域的部分)的WLS蛋白结构的部分中，共选择五种肽(肽No.1、2、3、4和5)。所选择的肽如图4和下表1所示。
表1
尝试构建五种肽的抗体。由于没有制备1号肽，因此不可能制备1号肽的抗体。使用2号到5号肽，构建了总共4种单克隆抗体。每种抗体的名称如下表2所示。
表2
| 抗体名称(单克隆抗体) | 肽编号 |
| WLS#2 | 2号肽 |
| WLS#3 | 3号肽(SEQ ID NO:2) |
| WLS#4 | 4号肽(SEQ ID NO:3) |
| WLS#5 | 5号肽 |
实施例3：WLS单克隆抗体的验证
将人WLS(NM_024911)的整个序列克隆到pSG5-KF2M1(FLAG标签在前)质粒载体和pSG-KM1F2(FLAG标签在后)质粒载体中，并使用pSG5空载体作为阴性对照。FLAG-WLS在AGS胃癌细胞系中表达，然后通过免疫印迹分析。将15μg细胞裂解物样品在SDS-PAGE凝胶上进行电泳，并且对WLS#2至WLS#5单克隆抗体在使用前用5wt％脱脂乳以1:500vol％稀释。显示WLS#2至WLS#5抗体检测到FLAG标记的WLS蛋白(图5a)。观察到当WLS#4抗体与肽一起用于治疗时，在免疫印迹上未检测到该特异性反应(图5b)。
实施例4：内源性WLS蛋白的分析
构建了靶向于人WLS基因的5种siRNA(使用Genolution预先设计siRNA服务)。使用WLS#4抗体的免疫印迹分析结果表明，这些siRNA的siWLS#1(正义链5'GUCAUCUUCUUCAUCGUUAUU3'；反义链5'UAACGAUGAAGAAGAUGACUU3')降低了FLAG-WLS的表达(图6a)。此外，使用FLAG-M2珠对FLAG-WLS蛋白进行免疫沉淀，然后使用WLS单克隆抗体(WLS#4)检测特异性结合(图6b)。
将WLS克隆到pEGFP-N1质粒载体中，并在AGS胃癌细胞系中表达，并检测其在细胞中的位置。使用WLS#4抗体的细胞的免疫荧光染色结果表明WLS广泛分布在细胞质中(图7a)。此外，未标记的WLS蛋白与FLAG-WLS一起表达并进行了比较，结果是，可以预测到内源性WLS在免疫印迹上的定位。使用如上所述构建的siRNA并分析，WLS在AGS胃癌细胞系中低表达，然后将细胞内部分分成细胞质和细胞膜，并通过免疫印迹分析WLS的表达图谱。结果表明，内源性WLS在细胞膜部分中表达(图7b)。
类似于上述pEGFP-WLS蛋白的表达图谱，通过使用WLS#3和WLS#4抗体的荧光染色检测AGS胃癌细胞系，结果显示内源性WLS蛋白存在于细胞膜中(图7c)。此外，通过FACS分析对细胞进行分析，结果表明，WLS#3和WLS#4抗体特异性结合AGS胃癌细胞系中的内源性WLS(图7d和7e)。
实施例5：胃癌细胞系分析
为了将上述构建的单克隆抗体应用于细胞实验，选择胃癌细胞，从选择的AGS、SNU-638、SNU-668、KATOIII、MKN28、MKN45和MKN74细胞系中提取RNA。自提取的RNA合成cDNA。然后，使用qRT-PCR技术分析了细胞中Axin2和CyclinD1(其是WLS-和Wnt靶向基因)的mRNA表达水平。结果表明，在AGS细胞系中WLS、Axin2和CyclinD1的表达水平通常较高，而在SNU-668、KATOIII、MKN28、MKN45和MKN74细胞中这些表达水平通常较低。例外地，在SNU-638细胞中，显示WLS的表达水平高，但Wnt靶向基因的表达水平低(图8)。
实施例6：检测WLS单克隆抗体降低细胞生长的能力
用0、0.5和1μg/ml的WLS单克隆抗体(WLS#4)处理WLS和Wnt靶向基因表达水平较高的AGS胃癌细胞系，48小时后，通过MTT测定分析细胞存活率(图9)。结果，当用1μg/ml所述抗体处理细胞时，其活力降低。此外，当通过肽降低1μg/ml抗体的特异性时，细胞的活力没有降低，表明抗体的特异性结合导致细胞活力的降低。此外，为了检测单克隆抗体降低细胞活力的能力，用抗体处理细胞，同时增加抗体的浓度直到细胞活力降低至50vol％。结果表明，在约4μg/ml的WLS#4抗体浓度下，出现约50vol％的细胞活力降低(图10a)。此外，当用WLS单克隆抗体(WLS#4)处理AGS胃癌细胞系时，与对照组不同(图10b)，出现了形态的异常。用2μg/ml的每种WLS单克隆抗体#3和#4处理细胞，并分析细胞的活力，结果显示WLS单克隆抗体#3和#4均显著降低了癌细胞的活力(图11)。
实施例7：检测WLS单克隆抗体的特异性结合和降低细胞活力的能力
使用WLS基因高表达水平的AGS胃癌细胞和WLS基因低表达水平的MKN45细胞，用WLS#4单克隆抗体处理细胞，并分析细胞的存活力。结果，即使WLS高度表达，单克隆抗体也是有效的(图12)。由于这种现象可归因于AGS和MKN45细胞本身的特征，因此制备了具有相同遗传背景的细胞模型。具体而言，将WLS基因低表达水平的MKN74细胞注射到大鼠的心脏中，并且使细胞转移到大鼠的脑中，然后培养大脑中生长的MKN74细胞并命名为“NI3-3“。通过qRt-PCR和使用WLS#4抗体的免疫印迹分析两种细胞类型中WLS基因的表达水平，结果表明，转移到脑细胞的细胞中WLS表达水平更高(图13a和13b)。此外，显示与原始MKN74细胞相比，转移细胞中的WLS、Axin2和CyclinD1基因(其是细胞内Wnt靶向基因)的活性增加(图13c)。以与上述相同的方式检测了WLS#4单克隆抗体降低细胞活力的能力，结果表明，仅具有WLS高表达水平的NI3-3细胞系的细胞活力降低，并且通过肽抑制实验显示这种细胞活力的降低是由抗体的特异性结合引起的(图14)。
实施例8：检测WLS单克隆抗体降低细胞迁移的能力
在AGS胃癌细胞系中表达Wnt基因，然后通过细胞迁移实验(划痕和愈合)检测细胞的迁移率。将AGS胃癌细胞在培养皿中培养至汇合，然后使用200μl吸头线性划伤单层细胞，之后计算细胞迁移6小时的面积。结果表明，当使用siWLS#1降低WLS的表达时，细胞的迁移率降低(图15)。此外，使用siRNA作为对照，测定了WLS#4单克隆抗体降低细胞迁移率的能力，结果表明，用WLS#4单克隆抗体处理的组中细胞的迁移率也降低(图16)，与通过siRNA降低WLS表达的组相似。此外，类似于WLS#4单克隆抗体，显示当癌细胞中的Wnt基因表达时，WLS#3单克隆抗体也降低了细胞的迁移率(图17)。
实施例9：WLS单克隆抗体的FACS分析
上述实施例的结果表明，WLS的高表达可对胃癌患者的预后产生不利影响，并且可导致细胞实验中转移能力的增加。因此，为了分析WLS高表达的细胞的特征，进行了FACS分析。通过使用WLS#4单克隆抗体的FACS分析，从MKN74细胞分离WLS高表达水平的细胞和WLS低表达水平的细胞(图18)。此外，使用决定胃癌细胞致瘤性的蛋白质CD44，通过FACS分析对AGS细胞进行了分析(图19)。结果表明，具有高水平CD44的AGS细胞中WLS的表达水平也很高(图20)。
实施例10：由Wnt信号转导通路过度活化引起的结直肠癌信号的抑制
用实施例2中构建的WLS#4单克隆抗体处理由Wnt信号转导通路过度活化引起的胃癌细胞系AGS和HT29以及SW480结直肠癌细胞系，然后观察到信号转导的变化。具体而言，用0、1、2和4μg/ml的WLS#4单克隆抗体处理各细胞系48小时，然后通过免疫印迹分析Wnt信号转导通路的主要转录调节物β-连环蛋白的乙酰化。结果表明，通过使用WLS#4单克隆抗体处理，由于Wnt信号转导通路过度活化而增加的β-连环蛋白的乙酰化被降低(图21)。
实施例11：WLS单克隆抗体的抗癌效果检测(1)
将总共1×104个MKN45细胞与基质胶(Matrigel)以1:2(v/v)的比例混合注射到免疫缺陷裸鼠的皮下组织中以形成胃肿瘤。约2周后肿瘤体积达到100mm3时，通过尾静脉注射实施例2中构建的WLS单克隆抗体。将WLS#4单克隆抗体以5mg/kg的浓度2周注射6次(n＝8)，并将WLS#3单克隆抗体以5mg/kg的浓度3周注射9次(n＝20)。在从首次注射单克隆抗体的那一天开始到最后注射单克隆抗体的那一天后的两天的期间内，使用卡尺根据下列方程测量肿瘤的体积：短轴2×长轴/2。结果显示，与未用抗体治疗的对照组相比，用WLS#3或WLS#4单克隆抗体治疗的测试组中肿瘤的大小显著降低(图22a和22b)。
实施例12：WLS单克隆抗体的抗癌效果检测(2)
对MKN45细胞系进行代谢饥饿以建立选择性MKN45细胞系(s-MKN45)。通过qRT-PCR实验分析了这种s-MKN45细胞中WLS的mRNA水平，结果表明，在s-MKN45细胞中WLS的表达水平高于非饥饿对照组(p-MKN45)(图23)。将总共1×107个p-MKN45细胞或s-MKN45细胞与基质胶(Matrigel)以1:2(v/v)的比例混合并注射到免疫缺陷裸鼠的皮下组织中以形成胃肿瘤，结果显示，s-MKN45细胞系的致瘤性高于p-MKN45细胞系的致瘤性(图24)。另外，将总共4×106个p-MKN45细胞或s-MKN45细胞以1:2(v/v)的比例与基质胶(Matrigel)混合注射到免疫缺陷裸鼠的皮下组织中以形成胃肿瘤，当大约2周后肿瘤体积达到100mm3时，通过尾静脉注射实施例2中构建的单克隆抗体。将1mg/ml的WLS#3和WLS#4单克隆抗体各100μL，注射2周共3次。在从首次注射单克隆抗体的那一天开始到最后注射单克隆抗体的那一天后的两天的期间内，使用卡尺根据下列方程测量肿瘤体积：短轴2×长轴/2。结果显示，与未用抗体治疗的对照组相比，用WLS#3或WLS#4单克隆抗体治疗的测试组中p-MKN45细胞系和s-MKN45细胞系的肿瘤大小显著降低(图25a至25c)。
实施例13：对由WLS单克隆抗体引起的β-连环蛋白表达变化的检测
用实施例2中构建的WLS#4单克隆抗体处理乳腺癌细胞系MCF7、结直肠癌细胞系WiDr和皮肤癌细胞系A431，72小时后，通过实时PCR分析各细胞系中β-连环蛋白的表达水平的变化。结果表明，通过用WLS#4单克隆抗体处理，所有乳腺癌细胞系，结直肠癌细胞系和皮肤癌细胞系中的β-连环蛋白的表达均降低(图26至28)。
实施例14：对由WLS单克隆抗体引起的β-连环蛋白表达变化的检测
用Wnt3a-pcDNA3.1质粒转染乳腺癌细胞系MCF7、结直肠癌细胞系WiDr和肾细胞系293T，24小时后，用实施例2中构建的WLS#4单克隆抗体处理每个转染的细胞系48小时。处理后，通过实时PCR分析每个细胞系中β-连环蛋白表达水平的变化。
乳腺癌细胞系中β-连环蛋白的表达如各种出版物(Carcinogenesis.2000年7月；21(7)：1453-6)中所报道。虽然MCF7细胞中β-连环蛋白的表达水平也被观察到较高，但是显示通过用WLS#4单克隆抗体处理，MCF7细胞中β-连环蛋白的表达水平降低(图29)。
结直肠癌细胞系中β-连环蛋白的表达如各种出版物(Nature Communications 4，文章编号：2610)所报道。虽然可以看出，WiDr细胞中β-连环蛋白的表达水平也被观察到较高，并且通过Wnt蛋白的连续刺激后，表达水平进一步上升，但是显示通过用WLS#4单克隆抗体处理，WiDr细胞中β-连环蛋白的表达水平降低(图30)。
据报道，肾组织中Wnt信号转导通路异常引起了各种疾病，包括肾癌(Organogenesis.2008Apr-Jun；4(2)：55-59)。为了证实这一报道，可以看出，293T细胞中β-连环蛋白的表达水平也被观察到较高，并且通过Wnt蛋白的连续刺激后，表达水平进一步上升，但是显示通过用WLS#4单克隆抗体处理，293T细胞中β-连环蛋白的表达水平降低(图31)。
实施例15：WLS单克隆抗体的表位图
进行实施例2中构建的WLS#4单克隆抗体肽(肽4)的表位作图。将4号肽的氨基酸序列分成三个氨基酸片段(重组肽4-1至4-3)，如下表3所示，并将每个片段与SNCA-6XHis靶标结合从而构建重组肽。使用Western印迹法，将每种重组肽与WLS#4单克隆抗体反应，选择与单克隆抗体结合的肽。结果显示重组肽编号4-3确实与WLS#4单克隆抗体结合。
表3
| 氨基酸序列 | 4号肽的作图结果 |
| TFTSPK | 重组肽编号4-1 |
| TPEHEG | 重组肽编号4-2 |
| RYYECDV | 重组肽编号4-3 |
【产业适用性】
如上所述，本发明涉及用于预防或治疗与Wnt信号转导通路相关疾病的抗体和涉及含有该抗体的药物组合物。
【序列表】
SEQ ID NO.1:AEWTEMAHERVPRKLKCTFTSPKTPEHEGRYYECDV
SEQ ID NO.2:AEWTEMAHERVPRKLKCTFT
SEQ ID NO.3:TFTSPKTPEHEGRYYECDV
SEQ ID NO.4:TFTSPK
SEQ ID NO.5:TPEHEG
SEQ ID NO.6:RYYECDV
序列表
<110> 延世大学校产学协力团
<120> 用于识别WLS蛋白特定基序的抗体和含有其的药物组合物
<130> PCB154219PCT
<150> KR 10-2014-0111398
<151> 2014-08-26
<160> 6
<170> KopatentIn 2.0
<210> 1
<211> 36
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
Ala Glu Trp Thr Glu Met Ala His Glu Arg Val Pro Arg Lys Leu Lys
1 5 10 15
Cys Thr Phe Thr Ser Pro Lys Thr Pro Glu His Glu Gly Arg Tyr Tyr
20 25 30
Glu Cys Asp Val
35
<210> 2
<211> 20
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
Ala Glu Trp Thr Glu Met Ala His Glu Arg Val Pro Arg Lys Leu Lys
1 5 10 15
Cys Thr Phe Thr
20
<210> 3
<211> 19
<212> PRT
<213> 智人
<400> 3
Thr Phe Thr Ser Pro Lys Thr Pro Glu His Glu Gly Arg Tyr Tyr Glu
1 5 10 15
Cys Asp Val
<210> 4
<211> 6
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
Thr Phe Thr Ser Pro Lys
1 5
<210> 5
<211> 6
<212> PRT
<213> 智人
<400> 5
Thr Pro Glu His Glu Gly
1 5
<210> 6
<211> 7
<212> PRT
<213> 智人
<400> 6
Arg Tyr Tyr Glu Cys Asp Val
1 5
Claims (36)
1.一种用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NO：2所示。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NOs:4至6中任一所示。
4.如权利要求3所述的药物组合物，其中所述蛋白质SEQ ID NO：6所示。
5.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述Wnt信号转导通路相关疾病选自下组：癌症、视网膜病变、黄斑变性、纤维化、真菌或病毒感染、骨或软骨疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、神经退行性疾病、糖尿病、消化系统疾病、心血管疾病和肾脏疾病。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其中所述Wnt信号转导通路相关疾病是癌症。
7.如权利要求6所述的药物组合物，其中所述癌症选自下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、肾癌、头癌、骨癌、颈部鳞状细胞癌、食管癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤、甲状腺癌、硬纤维瘤、急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)。
8.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述抗体特异性针对与(i)或(ii)的氨基酸序列具有100％同源性的氨基酸序列所示的蛋白。
9.一种用于预防或治疗Wnt信号转导通路相关疾病的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对选自下组的氨基酸序列的编码基因：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
10.如权利要求9所述的药物组合物，其中所述基因编码SEQ ID NO:2所示的蛋白。
11.如权利要求9所述的药物组合物，其中所述Wnt信号转导通路相关疾病选自下组：癌症、视网膜病变、黄斑变性、纤维化、真菌或病毒感染、骨或软骨疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、神经退行性疾病、糖尿病、消化系统疾病、心血管疾病和肾脏疾病。
12.一种用于抑制血管新生的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
13.如权利要求12所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NO：2所示。
14.如权利要求12所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NOs:4至6中任一所示。
15.如权利要求14所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NOs:6所示。
16.一种用于抑制血管新生的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对选自下组的氨基酸序列的编码基因：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
17.如权利要求16所述的药物组合物，其中所述基因编码SEQ ID NO:2所示的蛋白。
18.一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白质的抗体：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
19.如权利要求18所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NO：2所示。
20.如权利要求18所述的药物组合物，其中所述癌症选自下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、肾癌、头癌、骨癌、颈部鳞状细胞癌、食管癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤、甲状腺癌、硬纤维瘤、急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)。
21.一种用于抑制癌症转移的药物组合物，所述组合物含有选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种，其特异性针对选自下组的氨基酸序列的编码基因：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
22.如权利要求21所述的药物组合物，其中所述基因编码SEQ ID NO:2所示的蛋白。
23.如权利要求21所述的药物组合物，其中所述癌症选自下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、肾癌、头癌、骨癌、颈部鳞状细胞癌、食管癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤、甲状腺癌、硬纤维瘤、急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)。
24.一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
25.如权利要求24所述的药物组合物，其中所述蛋白如SEQ ID NO：2所示。
26.如权利要求24所述的药物组合物，其中所述癌症选自下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、肾癌、头癌、骨癌、颈部鳞状细胞癌、食管癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤、甲状腺癌、硬纤维瘤、急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)。
27.一种用于诊断癌症或癌症转移的药物组合物，所述组合物含有特异性针对选自下组氨基酸序列的编码基因的引物或探针：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
28.如权利要求27所述的药物组合物，其中所述基因编码SEQ ID NO:2所示的蛋白。
29.如权利要求27所述的药物组合物，其中所述癌症选自下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、类癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、肾癌、头癌、骨癌、颈部鳞状细胞癌、食管癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、黑素瘤、肉瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤、甲状腺癌、硬纤维瘤、急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)。
30.一种用于提供关于癌症或癌症转移信息的方法，所述方法包括通过使用特异性针对选自下组氨基酸序列所示蛋白的抗体来测定对象中蛋白的表达水平：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
31.一种用于提供关于癌症或癌症转移信息的方法，所述方法包括通过使用特异性针对选自下组氨基酸序列的编码基因的引物或探针来测定对象中WLS基因的mRNA表达水平：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
32.一种用于筛选癌症治疗剂的方法，所述方法包括：当将特异性针对SEQ ID NO：1-3任一所示WLS(Wntless)基序蛋白的抗体与候选物质组合施用时，与单独施用针对WLS基序蛋白的抗体的情况相比，在WLS蛋白的表达被抑制的情况下，确定用于癌症治疗的该候选物质是癌症治疗的辅助剂。
33.一种用于筛选癌症治疗剂的方法，所述方法包括：当将特异性针对SEQ ID NO：1-3任一所示WLS(Wntless)基序蛋白的编码基因的、选自反义寡核苷酸、siRNA、shRNA和微小RNA中的任何一种或多种与候选物质组合施用时，与单独施用针对WLS基序蛋白的抗体的情况相比，在WLS蛋白的表达被抑制的情况下，确定用于癌症治疗的该候选物质是癌症治疗的辅助剂。
34.一种选自下组的氨基酸序列所示蛋白：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
35.一种特异性针对选自下组的氨基酸序列所示蛋白的抗体：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
36.一种选自下组的氨基酸序列所示蛋白的编码基因：
(i)SEQ ID NO：1至3中任一所示的氨基酸序列；
(ii)包含SEQ ID NO：1至3任一所示氨基酸序列中的至少6个连续氨基酸的氨基酸序列；和
(iii)与(i)或(ii)的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1387537A (zh) * | 1999-09-13 | 2002-12-25 | 惠氏公司 | 应用分泌型卷曲相关蛋白的药用组合物和方法 |
| WO2006097336A2 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | The Genetics Company, Inc. | A novel component of the wg/wnt signaling pathway |
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Patent Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN1387537A (zh) * | 1999-09-13 | 2002-12-25 | 惠氏公司 | 应用分泌型卷曲相关蛋白的药用组合物和方法 |
| WO2006097336A2 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | The Genetics Company, Inc. | A novel component of the wg/wnt signaling pathway |
| WO2012143382A2 (en) * | 2011-04-18 | 2012-10-26 | Deutsches Krebsforschungszentrum | Gpr177 as target and marker in tumors |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109722448A (zh) * | 2017-10-27 | 2019-05-07 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 靶向wls基因RNA干扰重组慢病毒载体的构建方法 |
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