CN106987574B - 一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法 - Google Patents

一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106987574B
CN106987574B CN201710383169.3A CN201710383169A CN106987574B CN 106987574 B CN106987574 B CN 106987574B CN 201710383169 A CN201710383169 A CN 201710383169A CN 106987574 B CN106987574 B CN 106987574B
Authority
CN
China
Prior art keywords
carrageenan
oligosaccharide
carrageenan oligosaccharide
solution
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710383169.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106987574A (zh
Inventor
王丽丽
张斌
管昶
徐小龙
高芹芹
岳帆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Bz Oligo Biotech Co ltd
Original Assignee
Qingdao Bz Oligo Biotech Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Bz Oligo Biotech Co ltd filed Critical Qingdao Bz Oligo Biotech Co ltd
Priority to CN201710383169.3A priority Critical patent/CN106987574B/zh
Publication of CN106987574A publication Critical patent/CN106987574A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106987574B publication Critical patent/CN106987574B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2468—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on beta-galactose-glycoside bonds, e.g. carrageenases (3.2.1.83; 3.2.1.157); beta-agarase (3.2.1.81)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01083—Kappa-carrageenase (3.2.1.83)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
    • G01N21/314—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry with comparison of measurements at specific and non-specific wavelengths
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明涉及K‑卡拉胶寡糖领域，具体地说是一种具有抗氧化活性的K‑卡拉胶寡糖制备方法。其包括K‑卡拉胶酶的制备和K‑卡拉胶寡糖的制备，还包括K‑卡拉胶寡糖的清除羟自由基能力的测定和K‑卡拉胶寡糖的清除超氧阴离子能力的测定方法。本发明制备方法比现有的制备方法更简单、快捷。本发明采用酶法降解，使得制备过程简单快捷、产物的率高、质量稳定，并且该产品具有抗氧化活性，具有开发具有抗氧化功能的保健食品的前景。

Description

一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法
技术领域
本发明涉及K-卡拉胶寡糖领域，具体地说是一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法。
背景技术
卡拉胶作为一种结构独特的天然海洋硫酸多糖，被称为类肝素多糖，其生物活性已经成为当前多糖研究领域中的一个热点。近年来，卡拉胶在生理学和病理学研究中所显出来的生物活性已相继被人们发现。实验研究显示，卡拉胶具有抗血管新生、抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗菌、抗病毒、降血糖等生物学活性。但由于卡拉胶多糖分子量较大，溶解性和吸收性较差，结构复杂等原因，限制了其应用。而卡拉胶寡糖分子量较小，溶解性增强，结构简化，易于吸收，稳定性和安全性都有所增加，多糖链经过不同形式的断裂后活性基团充分暴露，其活性较卡拉胶有显著提高，同时寡糖还具有低毒性的特征，因此拓宽了卡拉胶的应用范围，目前卡拉胶寡糖活性的研究已日益受到关注。
卡拉胶寡糖是从红藻细胞壁中提取得到的一种水溶性硫酸寡糖，主要存在于红藻纲的角叉菜属(Chondrus)、杉藻属(Gigartina)、麒麟菜属(Eucheuma)和沙菜属中。
卡拉胶寡糖的基本结构是由β(1→3)-D-吡喃半乳糖(G)和α(1→4)-D-吡喃半乳糖(D)为基本骨架交替连接形成的硫酸线性寡糖。根据是否含有3，6-内醚半乳糖以及半乳糖上的硫酸基团的含量和分子中半乳糖所连接的位置不同，卡拉胶寡糖可分为八种类型：K-卡拉胶寡糖、γ-卡拉胶寡糖、ι-卡拉胶寡糖、ω-卡拉胶寡糖、λ-卡拉胶寡糖、υ-卡拉胶寡糖、ψ-卡拉胶寡糖、ξ-卡拉胶寡糖。常用的卡拉胶寡糖主要有K-、ι-、λ-型。
目前卡拉胶寡糖的制备主要有化学降解、物理降解和酶降解三种方法。化学和物理降解方法存在反应条件不易控制、降解产物不均一等缺点，在工业生产中受到限制，而酶降解法可以最大程度地保护反应底物的活性基团不会在降解过程中受到破坏，降解产物均一，反应条件温和，产物活性较高。在酶解制备卡拉胶寡糖方法有报道，但是未见具有抗氧化活性的酶解K-卡拉胶寡糖的报道。
发明内容
本发明要解决的问题是提供一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法，包括以下步骤：(a)K-卡拉胶酶的制备
将Cellulophagalytica strain N5-2菌种接种于活化培养基中，于20-30℃、150-250rpm/min摇床中培养15-20h，进行培养活化，得到种子液；
按2-4％的接种量将种子液接种到发酵培养基中，于20-30℃、150-250rpm/min摇床中培养15-20h，得到发酵液；
将发酵液在4℃条件下，于4000-5000r/min冷冻离心20min，离心后取上清液，得到粗酶液；
(b)K-卡拉胶寡糖的制备
K-卡拉胶的溶解：用0.1mol/L的Na2HPO4·12H2O将K-卡拉胶配置为浓度为1％的溶液，在40℃加热搅拌使之完全溶解，
K-卡拉胶的酶解：将粗酶液与溶解的K-卡拉胶溶液按照1:7～10的体积比混合，于40℃水浴加热搅拌5-10min，
酶解液灭活：将酶解后的液体于100℃灭活15min，
酶解液离心：将酶解灭活的产物于8000r/min，高速离心10min；
酶解液冻干：酶解液离心物真空冷冻干燥，得到K-卡拉胶寡糖粉末。
进一步的，本发明还包括上述具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖的清除羟自由基能力的测定，其包括以下步骤：
取1.0mL浓度为1.865mmol/L邻二氮菲的无水乙醇溶液于带塞试管中，分别加入浓度为0.2M的pH 7.4磷酸盐缓冲液2mL和1mL不同浓度系列的K-卡拉胶寡糖混合，浓度系列为1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml，充分混合后加入1.0mL浓度为1.865mmol/L的FeSO4·7H2O溶液，再次混匀后加入1.0mL0.03％(v/v)的H2O2，于37℃恒温水浴，保持60min；
最后，在536nm下分别测量各组混合溶液的吸光度值AS，以蒸馏水代替样品作为空白组测吸光度值Ab，以蒸馏水替代H2O2作为损伤组，测吸光度An，以抗坏血酸代替样品作为阳性对照，抗氧化剂的羟自由基清除率按以下公式计算：
羟自由基清除率(％)＝[(As-An)/(Ab-An)]×100。
进一步的，本发明还包括上述具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖的清除超氧阴离子能力的测定，包含以下步骤：
在96孔板孔中依次加入黄嘌呤与NBT的混合液、100μL的0.049units/ml黄嘌呤氧化酶、50μL不同浓度系列的K-卡拉胶寡糖溶液，混匀；
混匀后于37℃孵育30min，酶标仪测OD560值，不加样品溶液作为空白对照，维生素C为阳性对照，每个浓度的样品平行测定三次，分别计算清除率；
样品清除率＝(OD空白-OD样品)/OD空白×100％。
进一步的，上述中的黄嘌呤与NBT的混合液是将50μL黄嘌呤0.4mmol/l和50μL NBT0.24mmol/l溶于0.01mol/l pH＝8.0的PBS中，定容至150ml；不同浓度系列的K-卡拉胶寡糖分别为1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml。
本发明制备方法比现有的制备方法更简单、快捷。本发明采用酶法降解，使得制备过程简单快捷、产物的率高、质量稳定，并且该产品具有抗氧化活性，具有开发具有抗氧化功能的保健食品的前景。
附图说明
图1为K-卡拉胶寡糖HPLC检测图；
图2为K-卡拉胶四糖ESI-MS检测图；
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例对本发明进行进一步详细说明。
一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖的制备方法具体包括：
一、K-卡拉胶酶的制备
1、将筛选的Cellulophagalytica strain N5-2菌种先接种于活化培养基中，于20-30℃、150-250rpm/min摇床培养15-20h，进行培养活化，得到种子液。
2、按2-4％的接种量将种子液接种到发酵培养基中，20-30℃、150-250rpm/min摇床培养15-20h。
3、将发酵液在4℃条件下，4000-5000r/min冷冻离心20min，离心后取上清液，即为粗酶液。
二、K-卡拉胶寡糖的制备
1、K-卡拉胶的溶解：用0.1mol/L的Na2HPO4·12H2O将K-卡拉胶配置为浓度为1％的溶液，40℃加热搅拌使之完全溶解。
2、K-卡拉胶的酶解，将制备好的粗酶液与步骤1溶解的K-卡拉胶溶液按照1:7-10的体积比混合，40℃水浴加热搅拌5-10min即可。
3、酶解液灭活，将酶解后的液体100℃灭活15min；
4、酶解液离心，酶解的产物8000r/min，高速离心10min；
5、酶解液冻干，酶解液真空冷冻干燥后的K-卡拉胶寡糖粉末。
三、K-卡拉胶寡糖的检测分析
1、高效液相色谱(HPLC)分析
检测仪器：美国戴安Dionex UltiMate 3000液相色谱仪，色谱条件：色谱柱Kromasil C18(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：磷酸盐缓冲液/乙腈(83:17，V/V)；检测器：二极管阵列紫外检测器(DAD)。
表1 K-卡拉胶寡糖HPLC检测结果
Figure BDA0001305641630000061
由上表1及图1所示，K-卡拉胶寡糖主要含有K-卡拉胶二糖、四糖、六糖、八糖。根据高效液相色谱对降解后得到的K-卡拉胶寡糖的分析，其主要含有K-卡拉胶二糖、四糖、六糖、八糖，恰恰正是这种比例的各糖分布，使得其能够有效的促进机体的抗氧化功能，清除自由基对机体的损伤。
2、将K-卡拉胶寡糖用凝胶柱分离纯化后得到K-卡拉胶四糖，进行电喷雾质谱(ESI-MS)分析。结果如图2所示，本申请中的K-卡拉胶酶属于16族糖苷水解酶，为专一性内切酶，专门水解α-3,6-内醚-D-半乳糖和β-4-硫酸-D-半乳糖之间的β-1,4-糖苷键。K-卡拉胶酶专一性高、活性大，得到的产物分子量分布窄，对降解底物的硫酸根没有破坏。
四、K-卡拉胶寡糖的抗氧化活性的检测
1、K-卡拉胶寡糖清除羟自由基能力的测定
试剂：1.865mmol/L邻二氮菲、无水乙醇溶液、0.2M的pH 7.4磷酸盐缓冲液、1.865mmol/L的FeSO4·7H2O溶液、0.03％(v/v)的H2O2、1mg/ml抗坏血酸
测定方法：
取1.0mL浓度为1.865mmol/L邻二氮菲的无水乙醇溶液于带塞试管中，分别加入浓度为0.2M的pH 7.4磷酸盐缓冲液2mL和1mL不同浓度的K-卡拉胶寡糖(浓度分别为1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml)，充分混匀后加入1.0mL浓度为1.865mmol/L的FeSO4·7H2O溶液，再次混匀后加入1.0mL 0.03％(v/v)的H2O2，于37℃恒温水浴，60min后，在536nm下分别测量各组混合溶液的吸光度值得AS，以蒸馏水代替样品作为空白组测吸光度值得Ab，以蒸馏水替代H2O2作为损伤组，测其吸光度值An，以抗坏血酸代替样品作为阳性对照，抗氧化剂的羟自由基清除率按以下公式计算：
羟自由基清除率(％)＝[(As-An)/(Ab-An)]×100。
表2 K-卡拉胶寡糖对羟基自由基清除率
Figure BDA0001305641630000081
由表2可见，随着K-卡拉胶寡糖浓度逐渐增加，其清除羟自由基的能力逐渐增加，当K-卡拉胶寡糖浓度为8mg/ml时，其清除羟自由基的能力最大，达到阳性对照Vc的28倍。
五、K-卡拉胶寡糖清除超氧阴离子能力的测定
试剂
Xanthine(黄嘌呤):0.4mmol/l、Xanthine oxidase(黄嘌呤氧化酶)贮液:1unit/mL、0.05unit/mL、NBT:(Nitro blue tetrazolium chloride氯化硝基四氮唑蓝),0.24mmol、PBS(0.01mol/L,pH＝8.0)、PBS(0.01mol/L,pH＝7.4)、Ascorbic acid:1mg/mL、HCl：1mol/l、NaOH：1mol/l。
测定方法：
在96孔板孔中依次加入100μL黄嘌呤(0.4mmol/l)和NBT(0.24mmol/l)的混合液(每种各50μL，溶于0.01mol/l的PBS，pH＝8.0)，100μL黄嘌呤氧化酶(0.049units/ml),50μL不同浓度的K-卡拉胶寡糖溶液(浓度分别为1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml)。混匀后37℃孵育30min,酶标仪测OD560值(扣除OD800值)。不加样品溶液作为空白对照，Vc(维生素C)为阳性对照，每个浓度的样品平行测定三次，分别计算清除率及样品的IC50。
样品清除率＝(OD空白-OD样品)/OD空白×100％.
表3 K-卡拉胶寡糖对超氧阴离子清除率
Figure BDA0001305641630000091
由表3可见，随着K-卡拉胶寡糖浓度逐渐增加，其清除超氧阴离子的能力逐渐增加，当K-卡拉胶寡糖浓度为8mg/ml时，其清除超氧阴离子的能力最大，达到阳性对照Vc的21倍。
通过对抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖的测定，确定了抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖在对超氧阴离子清除率、清楚超氧阴离子能力具有很好的效果，且本发明制备简单、科学合理，具有较好的经济前景。
以上所述的本发明实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何在本发明的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的权利要求保护范围之内。

Claims (4)

1.一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（a）K-卡拉胶酶的制备
将Cellulophagalytica strain N5-2菌种接种于活化培养基中，于20-30℃、150-250rpm摇床中培养15-20h，进行培养活化，得到种子液；
按2-4%的接种量将种子液接种到发酵培养基中，于20-30℃、150-250rpm/min摇床中培养15-20h，得到发酵液；
将发酵液在4℃条件下，于4000-5000r/min冷冻离心20min,离心后取上清液，得到粗酶液；
（b）K-卡拉胶寡糖的制备
K-卡拉胶的溶解：用0.1mol/L的Na2HP04·12H20将K-卡拉胶配置为浓度为1%的溶液，在40℃加热搅拌使之完全溶解；
K-卡拉胶的酶解：将粗酶液与溶解的K-卡拉胶溶液按照1：7～10的体积比混合，于40℃水浴加热搅拌50-10min；
酶解液灭活：将酶解后的液体于100℃灭活15min；
酶解液离心：将酶解灭活的产物于8000r/min,高速离心10min；
酶解液冻干：酶解液离心物真空冷冻干燥，得到K-卡拉胶寡糖粉末。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法，其特征在于，所述K-卡拉胶寡糖的清除羟自由基能力的测定包括以下步骤：
取1.0mL浓度为1.865mmol/L邻二氮菲的无水乙醇溶液于带塞试管中，分别加入浓度为0.2M的pH=7.4的磷酸盐缓冲液2mL和1mL不同浓度系列的K-卡拉胶寡糖混合，浓度系列为1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml；充分混合后加入1.0mL浓度为1.865mmol/L的FeSO4·7H20溶液，再次混匀后加入1.0mL0.03%(v/v）的H202,，于37℃恒温水浴，保持60min；
最后，在536m下分别测量各组混合溶液的吸光度值As，以蒸馏水代替样品作为空白组测吸光度值Ab，以蒸馏水代替H202作为损伤组，测吸光度An，以抗坏血酸代替样品作为阳性对照，抗氧化剂的羟自由基清除率按以下公式计算:
羟自由基清除率百分率=[(As-An)/(Ab-An)]×100。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法，其特征在于，所述K-卡拉胶寡糖的清除超氧阴离子能力的测定包括以下步骤：
在96孔板孔中依次加入黄嘌呤与NBT的混合液，100μL的0.049units/ml黄嘌呤氧化酶、50μL不同浓度系列的K-卡拉胶寡糖溶液，混匀；
混匀后于37℃孵育30min，酶标仪测OD560值，不加样品溶液作为空白对照，维生素C为阳性对照，每个浓度的样品平行测定三次，分别计算清除率；
样品清除率=（OD空白-OD样品）/OD空白×100%。
4.根据权利要求3所述的一种具有抗氧化活性的K-卡拉胶寡糖制备方法，其特征在于，所述黄嘌呤与NBT的混合液是将50μL黄嘌呤0.4mmol/L和50μNBT0.24mmol/L溶液于0.01mol/L pH=8.0的PBS中，定容至150ml；所述不同浓度系列的K-卡拉胶寡糖溶液的浓度分别为1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml。
CN201710383169.3A 2017-05-26 2017-05-26 一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法 Active CN106987574B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710383169.3A CN106987574B (zh) 2017-05-26 2017-05-26 一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710383169.3A CN106987574B (zh) 2017-05-26 2017-05-26 一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106987574A CN106987574A (zh) 2017-07-28
CN106987574B true CN106987574B (zh) 2021-02-09

Family

ID=59421040

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710383169.3A Active CN106987574B (zh) 2017-05-26 2017-05-26 一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106987574B (zh)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107688019A (zh) * 2017-08-29 2018-02-13 宝鸡文理学院 一种微量法检测抗坏血酸对羟自由基抑制率的方法
CN109536548A (zh) * 2018-11-20 2019-03-29 青岛博智汇力生物科技有限公司 一种新kappa-卡拉胶寡糖单体的制备方法
CN109439709A (zh) * 2018-11-21 2019-03-08 青岛博智汇力生物科技有限公司 一种新Iota卡拉胶寡糖的制备方法
CN109371001A (zh) * 2018-11-23 2019-02-22 福州大学 一种功能性κ-卡拉胶寡糖的酶解制备方法
CN110373442A (zh) * 2019-08-10 2019-10-25 青岛博智汇力生物科技有限公司 一种具有高抗氧化活性琼二糖的制备方法及应用
CN112704110A (zh) * 2020-12-28 2021-04-27 青岛博智汇力生物科技有限公司 一种含海洋糖类的蛤肉抗冻保鲜剂
CN112494361A (zh) * 2020-12-28 2021-03-16 青岛博智汇力生物科技有限公司 一种抑菌抗辐射的海洋寡糖隔离乳及其制备方法
CN116124966B (zh) * 2023-02-02 2024-02-06 徐州市农产品质量安全中心 一种畜肉中κ-卡拉胶的液相色谱检测方法
CN116549372B (zh) * 2023-06-08 2024-05-24 诺德溯源(广州)生物科技有限公司 一种遇热增强的抗氧化组合物及其制备方法与应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103114113A (zh) * 2013-01-06 2013-05-22 威海康博尔生物药业有限公司 一种低聚合度κ-卡拉胶寡糖的制备

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103114113A (zh) * 2013-01-06 2013-05-22 威海康博尔生物药业有限公司 一种低聚合度κ-卡拉胶寡糖的制备

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
卡拉胶寡糖与衍生物的制备及生物活性研究;袁华茂;《道客巴巴》;20140303;摘要，第49页1.1部分，第50页2.1-2.2部分，第51页3.1-3.2部分 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106987574A (zh) 2017-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106987574B (zh) 一种具有抗氧化活性的k-卡拉胶寡糖制备方法
Yaphe The use of agarase from Pseudomonas atlantica in the identification of agar in marine algae (Rhodophyceae)
Kalyanasundaram et al. Production and downstream processing of (1→ 3)-β-D-glucan from mutant strain of Agrobacterium sp. ATCC 31750
Jouanneau et al. New insights into the structure of hybrid κ-/μ-carrageenan and its alkaline conversion
US11111317B2 (en) Cordyceps militaris medium polysaccharide, method for separating and purifying same, and use thereof
RU2193039C2 (ru) Соединение сахара
Boucelkha et al. Production of guluronate oligosaccharide of alginate from brown algae Stypocaulon scoparium using an alginate lyase
Liu et al. The antioxidant activities of carboxymethylated cushaw polysaccharide
Bouanati et al. Microwave-assisted depolymerization of carrageenans from Kappaphycus alvarezii and Eucheuma spinosum: Controlled and green production of oligosaccharides from the algae biomass
CN110331178A (zh) 一种酶切法制备小分子透明质酸的方法及所得小分子透明质酸与其应用
CN112760311B (zh) 一种具有较优β-甘露聚糖酶和α-半乳糖苷酶酶活比的酶液及其制备方法和应用
CN108949862B (zh) 一种复合酶制备的壳寡糖及其制备方法
Hreggviðsson et al. Biocatalytic refining of polysaccharides from brown seaweeds
CN117210439B (zh) 一种基于魔芋白绢病bj-y1菌株获得复合型糖苷水解酶的方法
CN110387392A (zh) 一种特定聚合度壳寡糖的制备方法及其在化妆品上的应用
Jouanneau et al. Hybridity of carrageenans water-and alkali-extracted from Chondracanthus chamissoi, Mazzaella laminarioides, Sarcothalia crispata, and Sarcothalia radula
CN117024615A (zh) 一种海藻多糖衍生物的制备方法与应用
MOU et al. Structural analysis of kappa‐carrageenan oligosaccharides released by carrageenase from marine cytophaga MCA‐2
Fournet et al. Floridean starch and carrageenan contents as responses of the red alga Solieria chordalis to culture conditions
CN110408664A (zh) 一种具有高抗氧化活性新琼六八糖的制备方法
Myklestad et al. Demonstration of exo-(β-1, 3)-D-glucanase activity in some planktonic diatoms
CN112662572B (zh) 一种高产壳聚糖酶的菌株及其应用
CN106282142B (zh) 一种β-甘露糖苷酶含量低的α-半乳糖苷酶的制备方法
CN112961891B (zh) 利用双相酶促反应制备淫羊藿苷的方法
Ekanayake et al. Novel anticoagulant compound from fermented red alga Pachymeniopsis elliptica

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant