CN106967637B - 一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂 - Google Patents

一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂 Download PDF

Info

Publication number
CN106967637B
CN106967637B CN201710199070.8A CN201710199070A CN106967637B CN 106967637 B CN106967637 B CN 106967637B CN 201710199070 A CN201710199070 A CN 201710199070A CN 106967637 B CN106967637 B CN 106967637B
Authority
CN
China
Prior art keywords
pear
bacterium
culture medium
branches
strain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710199070.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106967637A (zh
Inventor
董彩霞
张乃文
徐阳春
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Agricultural University
Original Assignee
Nanjing Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Agricultural University filed Critical Nanjing Agricultural University
Priority to CN201710199070.8A priority Critical patent/CN106967637B/zh
Publication of CN106967637A publication Critical patent/CN106967637A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106967637B publication Critical patent/CN106967637B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus
    • C12R2001/11—Bacillus megaterium
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)

Abstract

本发明公开了一株用于降解梨树枝条的细菌L2，分类命名为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，于2013年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.7899。本发明菌株L2可在以木质素类似物愈创木酚为唯一碳源或以梨树枝条粉末为唯一碳源的培养基上生长，且可在LB‑苯胺蓝平板上产生退色圈。试验表明，在该培养基上按1％接种量接种细菌L2的菌种悬液后，固态发酵30d，培养基失重率可到达10％。在21d的液态发酵过程中，产木质素过氧化物酶活力最高值为21.76U·mL‑1，产锰过氧化物酶活力最高值为106.36U·mL‑1。

Description

一株梨树枝条降解细菌L2及其菌剂
技术领域
本发明属于农业集约化生产技术，涉及一株农业废弃物梨树修剪枝条降解细菌L2及其菌剂，该细菌L2专用于降解废弃梨树枝条生产有机肥料，实现有机废弃物资源化利用。
背景技术
修剪是一项梨树栽培和管理的重要技术措施，适量的修剪对果树的生长和果实的产量品质都有积极的影响处于盛果期的梨园，修剪枝条量一般在1500-2250kg·hm-2。农业部市场与经济信息司统计的数据表明，2011年我国梨树的栽培面积为110万多公顷，据这个数字推算，我国梨园每年枝条的修剪数量可达161-242万吨。枝条中含有丰富的纤维素、木质素、蛋白质、糖类和脂肪等有机物，以及各种大中微量无机养分，是宝贵的农业资源，因此，梨树枝条资源的开发和利用有着非常广阔的前景。然而，梨树枝条中含有大量的木质素和纤维素，因此不易腐烂，不能就地进行还田处理。除了部分枝条应用于食用菌的栽培以外，绝大部分梨树枝条都被随意堆放在路边或就地焚烧，焚烧会造成严重的大气污染，堆放会诱发田间的病虫害，同时也造成了宝贵资源的浪费。
研究表明，修剪枝条等园林废弃物，作为堆肥物料的调理剂，对堆肥物料的含水率、孔隙度和碳氮比等有良好的调节作用。随着果树修剪枝条资源规模的不断扩大和再利用难度的困扰，将果树修剪枝条作为主要堆肥材料进行堆肥技术化的研究逐步增加。通过联合堆肥化实验的结果显示，枝条堆肥养分丰富全面，病菌数量达到无害化，是一种成熟稳定和富含营养的优质有机肥和土壤改良剂。可见将梨树枝条进行固体有机废弃物资源化(堆肥)是解决梨树枝条再利用问题的简单有效途径。
然而在堆肥过程中，纤维素、半纤维素和木质素等大分子的分解是限制堆肥腐熟的主要因素，通过接种木质素降解细菌菌剂，可以加速堆体升温，加快堆肥底物中木质素的分解，从而缩短堆肥腐熟的周期。若能筛选到相应的高效降解功能菌株，并将其用于梨树修剪枝条堆肥生产，具有良好的应用前景和实用价值。
发明内容
本发明的目的在于筛选一种能够高效分解梨树枝条木质素的细菌，通过其对木质素的高效降解效果，达到加速梨树枝条堆肥腐熟的目的。从而使梨树修剪枝条能够通过堆肥化得以大规模的资源化再利用，确保可持续农业的顺利发展。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一株能降解梨树枝条的细菌菌株L2，该菌株属于巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)，于2013年7月8日保藏于中国微生物菌种保存管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，菌种保藏号为CGMCC NO.7899。其生物学特征为：在LB平板上菌落近圆形，表面凸起，黄色，不透明，菌落2-4mm，边缘整齐，表面有光泽或较暗，不分泌色素；为革兰氏阳性细菌，杆状，1.2～1.5×2.0～4.0μm，不运动，芽孢椭圆形，端生，芽孢膨大不明显，液化明胶慢、胨化牛奶、水解淀粉、不还原硝酸。
细菌L2可在以木质素类似物愈创木酚为唯一碳源的培养基上生长；细菌L2在LB-愈创木酚平板上无显色反应，但可以在LB-苯胺蓝平板上产生褪色圈。
本发明的另一个目的是提供所述的细菌L2在梨树修剪枝条降解方面的应用。
本发明的另一个目的是提供一种含有所述的细菌L2的细菌菌剂。
所述的细菌菌剂是由以下方法制备而成：
(1)、将细菌L2接种于LB液体培养基中，28-37℃振荡培养，使含菌量达到109/mL，芽孢形成率达90％以上；
(2)、将步骤(1)培养好的菌悬液5000-6000rpm离心10min，用少量的LB液体培养基重悬，使细菌L2达到1×109～1010/mL，4℃保存备用。
所述的液体培养基由以下配制方法制得：烘干后粉碎的梨树枝条粉末20g，葡萄糖5g，(NH4)2SO4 2g，K2HPO4 2g，MgSO4·7H2O 0.3g，CaCl2 0.4g，胰蛋白胨1g，FeSO4·7H2O0.0075g，MnSO4·H2O 0.0025g，ZnSO4 0.002g，CoCl2 0.003g，水1000mL，pH自然。
所述的梨树枝条粉末的制备方法：梨树枝条烘干至恒重，粉碎过40-60目筛。
本发明的另一个目的是提供所述的细菌菌剂在梨树枝条降解方面的应用。
本发明的有益效果：
本发明菌株L2可在以木质素类似物愈创木酚为唯一碳源或以梨树枝条粉末为唯一碳源的培养基上生长，且可在LB-苯胺蓝平板上产生退色圈。试验表明，在该培养基上按1％接种量接种细菌L2的菌种悬液(1010/mL)后，固态发酵30d，培养基失重率可到达10％。在21d的液态发酵过程中，木质素过氧化物酶活力最高值为21.76U·mL-1，锰过氧化物酶活力最高值为106.36U·mL-1。
利用本发明细菌L2，采用微生物发酵的方法降解农业废弃物梨树修剪枝条，促进梨树枝条堆肥的腐熟进程，为梨树枝条堆肥化的推广利用提供技术支持，达到变废为宝、保护环境，促进农业可持续发展的目的，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为细菌L2的退色反应图(第6d退色反应)。
图2为细菌L2基于16S rDNA序列相似性的系统发育树。
图3为细菌L2的木质素过氧化物酶(Lip)的活性。
图4为细菌L2的锰过氧化物酶(MnP)的活性。
生物材料保藏信息
L2，分类命名为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，于2013年7月8日保藏于中国微生物菌种保存管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.7899。
具体实施方式
实施例1 梨树枝条降解细菌L2的富集、分离筛选及鉴定
1)梨树枝条高效降解菌的富集：降解菌样品采自兰州常年堆置的梨树腐烂枝条，过20目筛制成样品。取枝条样品0.2g混匀在20g以梨树枝条为唯一碳源的固态富集培养基中固态富集30d，挑取枝条表面碎屑有黑色降解斑的培养基0.2g，混匀接种到新的固态富集培养基中继续富集30d。继续挑取枝条表面碎屑有黑色降解斑的培养基1g接种到100mL液态富集培养基，160rpm摇床培养培养，定期补加无菌水；30d后接种1mL至新的液态富集培养基中，同样条件继续培养30d，获得对梨树枝条有高效降解效果的菌株。其中，固态富集培养基：烘干粉碎过20目筛的梨树枝条粉末20g，添加超纯水至湿润。液态富集培养基：(NH4)2SO40.5g，KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，水1L。
2)梨树枝条降解菌的分离筛选：利用梯度稀释涂布法将逐级稀释的富集样品的悬液涂布到愈创木酚选择培养基上，挑选生长较快的几株菌株进行分离纯化，然后接种到LB-愈创木酚平板和LB-苯胺蓝平板上观察其显色圈和褪色圈产生的时间和大小。最终获得对梨树枝条有高效降解效果的菌株L2。L2在LB-愈创木酚平板上无显色反应，在LB-苯胺蓝平板上接种2d开始产生褪色圈(见图1)，第6d时菌落直径为5mm，褪色圈直径为20mm，A值达到4(A＝D/d)。其中，愈创木酚选择培养基：愈创木酚1g，KNO3 2g，MgSO4 0.5g，KH2PO4 1g，NaCl1g，Na2HPO4 1g，琼脂20g，水1L。LB-愈创木酚培养基：LB培养基中加入1g·L-1愈创木酚。LB-苯胺蓝培养基：LB培养基加入0.1g·L-1苯胺蓝。
3)细菌L2的鉴定：
生物学特性为：在LB培养基上，37℃，培养36h，菌落近圆形，表面凸起，黄色，不透明，菌落2-4mm，边缘整齐，表面有光泽或较暗，不分泌色素；为革兰氏阳性细菌，杆状，1.2～1.5×2.0～4.0μm，不运动，芽孢椭圆形，端生，芽孢膨大不明显，液化明胶慢、胨化牛奶、水解淀粉、不还原硝酸。
采用细菌通用引物27f和1492r进行PCR扩增，在GenBank中以BLAST进行序列同源性比较，与Bacillus megaterium的同源性达99％，选取和它相近的一些菌株绘制系统发育进化树(见图2)，以及结合菌落特征，鉴定该菌株L2为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)。
实施例2 降解酶活力的测定
按1％接种量接种细菌L2的菌种悬液(107/mL)接入已装有100mL液态产酶培养基的三角瓶(250mL)中，置28℃下160r/min振荡培养21d。每2d取样1次，发酵液离心过滤除去菌体和杂质，得到粗酶液，测定其中木质素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(MnP)的活性。结果如图3和图4所示，菌株L2可以产木质素降解酶能力较强，产酶较快，产酶维持时间较长，菌株L2产以上两种酶的酶活均在第15天达到最高值，维持Lip酶活在10U·mL-1以上达3d多，具有良好的产Lip的效果。木质素过氧化物酶活最高值为21.76U·mL-1，锰过氧化物酶活最高值为106.36U·mL-1。
Lip的酶活定义为每分钟氧化1μmol的藜芦醇为一个酶活单位(U)。
MnP的酶活定义为每分钟氧化1μmoL的Mn2+为Mn3+为一个酶活单位(U)。
液态产酶培养基(/L)：葡萄糖20g，酒石酸铵0.2g，梨树枝条粉1g，基础培养基100mL，0.1mol/L NaAc-HAc缓冲液(pH＝4.5)100mL，吐温80 1.0g，VB1 1.0mg，加水定容至1L。
基础培养基(/L)：K2PO4 20g，MnSO4 5g，CaCl2 1g，微量元素液100mL，加水定容至1L
微量元素液(/L)：MgSO4 3.0g，MnSO4 0.5g，NaCl 1.0g，FeSO4·7H2SO4 0.1g，CoCl20.1g，CuSO4 0.1g，H3BO3 0.01g，ZnSO4·7H2O 0.1g，AlK(SO4)2·12H2O 0.01g，Na2MoO4·2H2O 0.01g，加水定容至1L。
实施例3 固态降解能力测定
制备L2细菌菌剂，方法如下：(1)、将细菌L2接种于LB液体培养基中，30℃振荡36h，使含菌量达到109/mL，芽孢形成率达90％以上；(2)、将步骤(1)培养好的菌悬液6000rpm离心10min，用少量的LB液体培养基重悬，使细菌L2达到1010/mL，4℃保存备用。
向分化罐中加入5g烘干梨树枝条粉(40-60目)和10mL固态培养营养液(固态培养营养液：NH4Cl 2.0g，MgSO4·7H2O 0.5g，KH2PO4 1.0g，Na2HPO4 0.2g，MnSO4 0.035g，CuSO4·5H2O 0.007g，FeSO4·7H2O 0.007g，水1L)，至固液混匀并显平坦状，121℃灭菌20min，按1％接种量接种L2细菌菌剂(1010/mL)，置于30℃恒温箱中培养30d。培养期间，每隔1d加5mL无菌水保持培养基表面湿润。实验设置重复三次。以接种等量无菌水作为空白试验。培养结束后，于105℃下烘干至恒重称重，测定降解率。
降解率＝(降解前总质量-降解后总质量)/5g×100％。
结果表明，细菌L2的降解率为10±0.03％。空白对照降解率为0.08±0.02％。

Claims (6)

1.一株用于降解梨树枝条的细菌L2，分类命名为巨大芽孢杆菌（Bacillusmegaterium），于2013年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO. 7899。
2.权利要求1所述的细菌L2在梨树修剪枝条降解方面的应用。
3.一种含有权利要求1所述的细菌L2的细菌菌剂。
4.根据权利要求3所述的细菌菌剂，其特征在于该细菌菌剂是由以下方法制备而成：
（1）、将细菌L2接种于LB液体培养基中，28～37℃振荡培养至含菌量达到109/mL；
（2）、将步骤（1）培养好的菌悬液5000-6000rpm离心，用LB液体培养基重悬，使细菌L2含菌量达到1×109～1010/mL。
5.根据权利要求4所述的细菌菌剂，其特征在于所述的LB液体培养基由以下配制方法制得：烘干后粉碎的梨树枝条粉末20 g，葡萄糖5 g，(NH4)2SO4 2 g，K2HPO4 2 g，MgSO4·7H2O0.3 g，CaCl2 0.4 g，胰蛋白胨1 g，FeSO4·7H2O 0.0075 g，MnSO4·H2O 0.0025 g，ZnSO40.002 g，CoCl2 0.003 g，水1000mL，pH自然。
6.权利要求3所述的细菌菌剂在梨树枝条降解方面的应用。
CN201710199070.8A 2017-03-29 2017-03-29 一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂 Active CN106967637B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710199070.8A CN106967637B (zh) 2017-03-29 2017-03-29 一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710199070.8A CN106967637B (zh) 2017-03-29 2017-03-29 一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106967637A CN106967637A (zh) 2017-07-21
CN106967637B true CN106967637B (zh) 2020-11-03

Family

ID=59335988

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710199070.8A Active CN106967637B (zh) 2017-03-29 2017-03-29 一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106967637B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108410780A (zh) * 2018-05-18 2018-08-17 陕西省微生物研究所 一种开放式发酵培养微生物菌剂及其制备方法和应用
CN115161218B (zh) * 2022-04-25 2023-05-09 江苏开放大学（江苏城市职业学院） 一种能降解农业枯枝落叶废弃物的细菌菌株、其筛选方法及应用
CN115181673B (zh) * 2022-05-27 2023-12-01 中国科学院成都生物研究所 一株隔孢伏革菌及其应用
CN114907152B (zh) * 2022-06-23 2023-07-18 河北冀微生物技术有限公司 巨大芽孢杆菌rl-126菌株在促进农作物秸秆腐熟中的应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103122328B (zh) * 2012-12-07 2014-09-03 贵州省烟草公司毕节市公司 一种巨大芽孢杆菌菌株及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN106967637A (zh) 2017-07-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110438037B (zh) 一株具有溶磷作用的克雷伯氏菌p5及其应用
CN109652329B (zh) 一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂的制备及应用
CN106967637B (zh) 一株梨树枝条降解细菌l2及其菌剂
CN112410244B (zh) 一种阿氏芽孢杆菌及其应用
CN105936881B (zh) 一种用于降解褐藻酸的嗜糖芽孢杆菌及其应用方法
CN108821875B (zh) 一种高活性微生物肥的制备方法
CN115505536B (zh) 一种黑曲霉ca-5及其应用
CN105695367A (zh) 一种降解秸秆的复配菌剂fx及其应用
CN116103204B (zh) 一种用于有机堆肥的微生物腐熟菌剂及其制备方法
CN103992957B (zh) 一株梨树枝条降解真菌及其菌剂
CN104894025B (zh) 一种链霉菌菌株及其应用
CN110835613B (zh) 含枯草芽孢杆菌的复合菌剂及在低温下降解秸秆中的应用
CN114752538B (zh) 具有土壤改良功能的油茶内生放线菌及其应用
CN114921362B (zh) 具有溶解难溶性磷和促生长功能的油茶内生放线菌及其应用
CN114317322B (zh) 一种耐温耐酸碱菌株、筛选方法、菌剂及应用
CN114907166A (zh) 一种蔬菜种植用高效生物有机肥及其制备方法
CN112280708B (zh) 一种纤维素降解复合菌剂及应用
CN108795796B (zh) 含解淀粉芽孢杆菌的低温降解秸秆微生物复合菌剂及应用
CN110042063B (zh) 一种粉红粘帚霉(Clonostachys rosea)菌株YZC3及其应用
CN110857431B (zh) 一种含地衣芽孢杆菌的降解秸秆的复合菌剂及其应用
CN106047775A (zh) 一株产纤维素酶的巨大芽孢杆菌及其应用方法
CN110938575A (zh) 一株高效降解纤维菌株及其应用
CN115161218B (zh) 一种能降解农业枯枝落叶废弃物的细菌菌株、其筛选方法及应用
CN113817625A (zh) 一株酸性黄杆菌及其在改良盐碱土壤中的应用
CN111320987A (zh) 一种基于农林废弃物的土壤修复剂、制备方法及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant