CN105695367A - 一种降解秸秆的复配菌剂fx及其应用 - Google Patents

一种降解秸秆的复配菌剂fx及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种降解秸秆的复配菌剂FX，包括枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株NJX501、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)菌株NJXy和烟曲霉(Aspergillus fumigatus)菌株NJZ501；由细菌OD值为0.5-1的NJX501的细菌菌液、细菌OD值为0.5-1的NJX502的细菌菌液、细菌OD值为0.5-1的NJXy的细菌菌液、孢子数目不少于104个/mlNJZ501孢子悬液等体积混合得到。本发明复配菌剂FX可以在高温条件下促进水稻秸秆的腐熟分解。

Description

一种降解秸秆的复配菌剂FX及其应用
技术领域
本发明属于农业集约化生产技术领域，涉及一种降解秸秆的复配菌剂FX及其应用。
背景技术
随着我国社会经济的快速发展，石油天然气等化石能源的普及推广，传统的以秸秆作为主要燃料已逐渐消逝；同时伴随农业生产的规模化和集约化，造成大量的秸秆资源废弃，由此不仅占用耕地而且严重浪费生物质资源，尤其是秸秆焚烧导致环境污染和引发火灾。
研究表明，水稻秸秆等秸秆类生物质资源，含有大量的木质素、纤维素，半纤维素类物质，同时含有氮磷钾等大量元素，养分全面丰富；秸秆既可以作为堆肥物料的调理剂也可以作为堆肥的主要原料，对堆肥物料的碳氮比、孔隙度和含水率等有较好的调节作用，同时以秸秆作为堆肥的主要原料，添加一定比例的氮源包括：畜禽粪便、污泥、中药渣和氨基酸废料等，利用秸秆降解腐熟菌剂的高效腐解作用可以实现堆肥过程中秸秆的高效降解，有利于堆肥腐熟的高效进行和堆肥质量提升。
但是在堆肥过程中，木质素、纤维素和半纤维素等大分子的分解以及堆肥本身温度的提升导致很多具有木质纤维素降解功能的菌株失去功能是限制高温堆肥腐熟的主要因素。在高温堆肥中接种木质纤维素降解菌株可以加快堆肥过程木质纤维素的降解，缩短堆肥腐熟的周期。高温堆肥过程中起主要作用的是一类耐高温细菌(如芽孢杆菌类菌株)和耐高温真菌(如嗜热曲霉)等，若能将细菌和真菌复配形成高效降解的功能复配菌株，并将其用于秸秆高温堆肥的生产，其具有良好的应用前景和市场价值。
发明内容
本发明的目的在于提供一组能够在高温条件下高效降解水稻秸秆的木质纤维素降解菌株混合物，通过其对木质纤维素的高效降解效果，达到加速高效推进秸秆高温腐熟的目的，从而使水稻秸秆能够通过堆肥化得以大规模的资源化利用，实现节约资源、循环利用及可持续农业的发展。
本发明的技术方案是通过以下技术方案实现的：
一种降解秸秆的复配菌剂FX，所述的复配菌剂FX包括枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株NJX501、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)菌株NJXy和烟曲霉(Aspergillusfumigatus)菌株NJZ501。
本发明所述的降解秸秆的复配菌剂FX是由细菌OD值为0.5-1的枯草芽孢杆菌菌株NJX501的细菌菌液、细菌OD值为0.5-1的枯草芽孢杆菌菌株NJX502的细菌菌液、细菌OD值为0.5-1的甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液、真菌孢子数目不少于104个/ml烟曲霉菌株NJZ501孢子悬液等体积混合得到的。
优选的，本发明所述的降解秸秆的复配菌剂FX是由细菌OD值为0.5的枯草芽孢杆菌菌株NJX501的细菌菌液、细菌OD值为0.5的枯草芽孢杆菌菌株NJX502的细菌菌液、细菌OD值为0.5的甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液、真菌孢子数目为104个/ml烟曲霉菌株NJZ501孢子悬液等体积混合得到的。
本发明所述的降解秸秆的复配菌剂FX的制备方法，包括：将枯草芽孢杆菌菌株NJX501、枯草芽孢杆菌菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy分别单独的接种到LB培养基上，温度30-50℃，170-200rpm，振荡培养1-2天，离心后去掉上清液取沉淀，再用15-30ml的0.9％灭菌生理盐水重悬，得到细菌菌液，调节细菌菌液的细菌OD值为0.5-1；将烟曲霉菌株NJZ501接种至PDA培养基上，30-50℃静置培养4-7天，用15-30ml的0.9％灭菌生理盐水振荡，过滤培养物后得到真菌孢子数目不少于104个/ml孢子悬液；将上述3个细菌的细菌菌液和真菌的孢子悬液等体积混合得到复配菌剂FX。
本发明所述菌剂FX复配过程中，优选的，调节枯草芽孢杆菌菌株NJX501、枯草芽孢杆菌菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液的OD值为0.5；烟曲霉菌株NJZ501的孢子悬液中真菌孢子数目为104个/ml。
LB培养基：蛋白胨10g、酵母粉5g、NaCl10g、琼脂20g、水1000mL，pH自然。
PDA培养基：土豆200.0g，蔗糖20.0g，琼脂20.00g，水1000ml。
枯草芽孢杆菌菌株NJX501，2015年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，菌种保藏号为CGMCCNO.11823。其生物学特性为：在LB平板上，24h后长出菌落，革兰氏阳性G+，菌落生长快，菌落表面相对光滑，单个菌株呈杆状，大小1-2μm；生理生化试验结果显示菌株淀粉水解、果胶分解、乙酰甲基甲醇试验、柠檬酸盐、氨硝、产硫化氢、吲哚试验都呈阳性“+”；而甲基红试验、石蕊牛乳试验和苯丙氨酸脱氢酶试验呈阴性“-”。
枯草芽孢杆菌菌株NJX502，2015年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，菌种保藏号为CGMCCNO.11824。其生物学特性为：在LB平板上，24h后长出菌落，革兰氏阳性G+，菌落生长快，菌落表面相对光滑，单个菌株呈杆状，大小1-2μm；生理生化试验结果显示菌株淀粉水解、果胶分解、乙酰甲基甲醇试验、柠檬酸盐、氨硝、产硫化氢都呈阳性“+”；而甲基红试验、石蕊牛乳试验、吲哚试验和苯丙氨酸脱氢酶试验呈阴性“-”。
甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy，2015年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，菌种保藏号为CGMCCNO.11825。其生物学特性为：在LB平板上，24h后长出菌落，革兰氏阳性G+，菌落生长相对慢，表面粗糙，单个菌株呈杆状，大小1-2μm；生理生化试验结果显示菌株淀粉水解、果胶分解、甲基红试验、乙酰甲基甲醇试验、柠檬酸盐、氨硝、都呈阳性“+”；而产硫化氢、石蕊牛乳试验、吲哚试验和苯丙氨酸脱氢酶试验呈阴性“-”。
烟曲霉菌株NJZ501，2015年12月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，菌种保藏号为CGMCCNO.11826。其生物学特性为：在PDA平板上，3天后长出，快速形成孢子，孢子颜色呈绿色，菌丝生长速度慢，平板上观察不明显，在显微镜下，菌丝上附着大量孢子。
高温50℃条件下，枯草芽孢杆菌菌株NJX501、枯草芽孢杆菌菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy和烟曲霉菌株NJZ501分别在刚果红平板上产生透明圈。
刚果红培养基：羧甲基纤维素钠(CMC-Na)10.0g、刚果红0.2g、琼脂20.0g+无机盐培养基1000ml；无机盐培养基：尿素0.3g、(NH4)2SO41.4g、KH2PO40.5g、CaCl2·2H2O0.4g、MgSO4·7H2O0.3g、蛋白胨1.0g、FeSO4·7H2O5.0mg、MnSO4·H2O1.6mg、ZnSO4·7H2O1.4mg、CoCl2·6H2O2.0mg，水1000ml，pH自然。
本发明的另一个目的是提供所述的降解秸秆的复配菌剂FX在降解水稻秸秆方面的应用。
所述的降解秸秆的复配菌剂FX进行水稻秸秆液体发酵降解的方法，包括：按照体积比1％将本发明所述的复配菌剂FX接种至水稻秸秆培养基，或将复配菌剂FX和烘干水稻秸秆段(长度2-3cm)按照1ml：2g进行接种，在温度50-70℃下进行发酵。
所述的水稻秸秆培养基为：2.0g水稻秸秆段(长度2-3cm)和100ml无机盐培养基；所述的无机盐培养基配制方法为：尿素0.3g、(NH4)2SO41.4g、KH2PO40.5g、CaCl2·2H2O0.4g、MgSO4·7H2O0.3g、蛋白胨1.0g、FeSO4·7H2O5.0mg、MnSO4·H2O1.6mg、ZnSO4·7H2O1.4mg、CoCl2·6H2O2.0mg，水1000ml，pH自然，121℃高压灭菌20min。
所述的水稻秸秆段为经烘干至恒重、长度2-3cm的水稻秸秆段。
本发明的另一个目的是提供所述的降解秸秆的复配菌剂FX在水稻秸秆高温堆肥生产有机肥料的应用。
水稻秸秆高温堆肥过程中，在堆肥开始阶段即可按照秸秆干基质量的2-5‰比例添加本发明所述的复配菌剂FX混合，调节好秸秆和相关辅料的碳氮比、水分含量，根据环境温度实际情况，可选择覆膜方法促进温度升高和保温。
本发明所述的高温是指50-70℃。
本发明的有益效果：
在以水稻秸秆为唯一碳源的液体培养基上接种1％本发明复配菌剂，50℃条件下，液体发酵7天和15天后，水稻秸秆的降解率分别可达到46.5％和57.25％。经过7-15天的液体发酵，测定粗酶液中滤纸酶活、纤维素酶活和木聚糖酶活，期间滤纸酶活、纤维素酶活和木聚糖酶活最高值分别为：0.41、0.40和49.5U。说明在高温条件下，复配菌剂产生的木质纤维素水解酶可以显著加快秸秆的分解和其中成分的转化，加速底物的分解和转化，且复配菌剂对水稻秸秆的降解作用显著强于单一菌株对水稻秸秆的降解作用。
本发明是利用高温微生物发酵的方法降解农业废弃物水稻秸秆，促进水稻秸秆的腐熟分解，为水稻秸秆堆肥化的推广利用提供技术支持。实现生物质资源的循环利用，保护环境和促进农业的可持续发展，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为烟曲霉菌株NJZ501的电镜扫描图。
图2为枯草芽孢杆菌菌株NJX501基于16srDNA序列相似性的系统发育树。
图3为枯草芽孢杆菌菌株NJX502基于16srDNA序列相似性的系统发育树。
图4为甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy基于16srDNA序列相似性的系统发育树。
图5为烟曲霉菌株NJZ501基于rDNA-ITS序列相似性的系统发育树。
图6为菌株NJX501、NJX502、NJXy和NJZ501液体发酵7天后的滤纸酶活。
图7为菌株NJX501、NJX502、NJXy和NJZ501液体发酵7天后的纤维素酶活。
图8为菌株NJX501、NJX502、NJXy和NJZ501液体发酵7天后的木聚糖酶活。
图9为复配菌剂FX(1.0表示菌株复配菌剂：NJX501、NJX502、NJXy和NJZ501)的滤纸酶活等值线图，右上角黑色区域表示在50℃，pH＝7，复配菌剂在第15天的滤纸酶活达到最高值。
图10为复配菌剂FX(1.0表示菌株复配菌剂：NJX501、NJX502、NJXy和NJZ501)的纤维素酶活等值线图，右上角黑色区域表示在50℃，pH＝7，复配菌剂在第15天的纤维素酶活达到最高值。
图11为复配菌剂FX(1.0表示菌株复配菌剂：NJX501、NJX502、NJXy和NJZ501)的木聚糖酶活等值线图，右上角黑色或灰色区域表示在50℃，pH＝5，复配菌剂FX在第7天的木聚糖酶活接近最高值。
图12为水稻秸秆在不同处理条件下50℃液体发酵7天的降解效果；图12A为水稻秸秆段在无菌条件下50℃液体发酵7天的降解效果(空白对照)；图12B为水稻秸秆段接种枯草芽孢杆菌菌株NJX501的细菌菌剂50℃液体发酵7天的降解效果；图12C为水稻秸秆段接种枯草芽孢杆菌菌株NJX502的细菌菌剂50℃液体发酵7天的降解效果；图12D为水稻秸秆段接种甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌剂50℃液体发酵7天的降解效果；图12E为水稻秸秆段接种烟曲霉菌株NJZ501的孢子悬液50℃液体发酵7天的降解效果；图12F为水稻秸秆段接种复配菌剂FX50℃液体发酵7天的降解效果。
图13为水稻秸秆段接种复配菌剂FX50℃液体发酵15天的降解效果。
生物材料保藏信息
NJX501，分类命名为Bacillussubtilis，于2015年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌种保藏号为CGMCCNO.11823。
NJX502，分类命名为Bacillussubtilis，于2015年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌种保藏号为CGMCCNO.11824。
NJXy，分类命名为Bacillusmethylotrophicus，于2015年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌种保藏号为CGMCCNO.11825。
NJZ501，分类命名为Aspergillusfumigatus，于2015年12月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌种保藏号为CGMCCNO.11826。
具体实施方式
实施例1
水稻秸秆降解菌株的筛选：
降解菌样品来源于江苏省南京市八卦洲南京明珠肥料有限公司工厂化堆肥高温阶段50℃-70℃的混合有机物料。称取混合样品10g，通过一周以水稻秸秆粉为唯一碳源的液体富集培养基(液体富集培养基为：烘干至恒重、粉碎后过20目筛的水稻秸秆粉2g，添加无菌水90ml)富集，富集2天后，吸取10ml富集液接种至新的液体富集培养基中继续培养第二代，依此类推培养至第三代后，吸取0.1ml稀释涂布于刚果红培养基上，50℃培养3-7天，挑选生长较快尤其是可以产生透明圈的菌株进行分离纯化，最终能得到具有降解水稻秸秆能力的菌株，细菌NJX501、NJX502和NJXy；真菌NJZ501。
水稻秸秆降解菌株的鉴定：
菌株NJX501的生物学特性：在LB平板上，24h后长出菌落，革兰氏阳性G+，菌落生长快，菌落表面相对光滑，单个菌株呈杆状，大小1-2μm；生理生化试验结果显示菌株淀粉水解、果胶分解、乙酰甲基甲醇试验、柠檬酸盐、氨硝、产硫化氢、吲哚试验都呈阳性“+”；而甲基红试验、石蕊牛乳试验和苯丙氨酸脱氢酶试验呈阴性“-”。
菌株NJX502的生物学特性：在LB平板上，24h后长出菌落，革兰氏阳性G+，菌落生长快，菌落表面相对光滑，单个菌株呈杆状，大小1-2μm；生理生化试验结果显示菌株淀粉水解、果胶分解、乙酰甲基甲醇试验、柠檬酸盐、氨硝、产硫化氢都呈阳性“+”；而甲基红试验、石蕊牛乳试验、吲哚试验和苯丙氨酸脱氢酶试验呈阴性“-”。
菌株NJXy的生物学特性：在LB平板上，24h后长出菌落，革兰氏阳性G+，菌落生长相对慢，表面粗糙，单个菌株呈杆状，大小1-2μm；生理生化试验结果显示菌株淀粉水解、果胶分解、甲基红试验、乙酰甲基甲醇试验、柠檬酸盐、氨硝、都呈阳性“+”；而产硫化氢、石蕊牛乳试验、吲哚试验和苯丙氨酸脱氢酶试验呈阴性“-”。
菌株NJZ501的生物学特性：在PDA平板上，3天后长出，快速形成孢子，孢子颜色呈绿色，菌丝生长速度慢，平板上观察不明显，在显微镜下(见图1)，菌丝上附着大量孢子。
参照《细菌鉴定手册》和《真菌鉴定手册》初步鉴定菌株NJX501、NJX502和NJXy为芽孢杆菌，菌株NJZ501为丝状真菌。
采用细菌通用引物27F和1492R，所得序列经NCBI比对，菌株NJX501和NJX502与Bacillussubtilis，NJXy与Bacillusmethylotrophicus有99％的相似度；采用真菌通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，所得序列经NCBI比对，菌株NJZ501与AspergillusFumigatus有99％的相似度。选取和它相近的一些菌株利用Mega.3软件做系统发育进化树(见图2-5)，结合菌落或菌丝形态学特征，NJX501和NJX502均为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，NJXy为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)；NJZ501为烟曲霉(AspergillusFumigatus)。
实施例2水稻秸秆降解复配菌剂FX的制备
将枯草芽孢杆菌菌株NJX501、枯草芽孢杆菌菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy分别单独的接种到LB培养基上，温度50℃，转速170rpm，振荡培养1-2天，离心后去掉上清液取沉淀，再用30ml的0.9％灭菌生理盐水重悬，得到细菌菌液，调节细菌菌液的细菌OD值为0.5；将烟曲霉菌株NJZ501接种至PDA培养基上，50℃静置培养4-7天，用20ml的0.9％灭菌生理盐水振荡，过滤培养物后得到真菌孢子数目104个/ml的孢子悬液；将上述3个细菌的细菌菌液和真菌的孢子悬液等体积混合得到复配菌剂FX。
LB培养基为：蛋白胨10g、酵母粉5g、NaCl10g、琼脂20g、水1000mL，pH自然。
PDA培养基为：土豆200.0g，蔗糖20.0g，琼脂20.00g，水1000ml。
实施例3水稻秸秆降解复配菌株FX酶活力测定
实施例2制得的3个细菌的细菌菌液、真菌的孢子悬液、复配菌剂FX，分别单独的按照体积比1％接种至装有100ml水稻秸秆段培养基的三角瓶中，50℃条件下170rpm振荡培养7天和15天后取样，发酵液8000rpm/min、4℃离心5min；过滤除去菌体和固体杂质后得到粗酶液，测定滤纸酶活(FPase)、纤维素酶活(CMCase)和木聚糖酶活(Xylanase)。
酶活力定义：酶活力的定义参照国际标准，即在相应的条件下(50℃)1min内催化底物水解生成1μmol还原糖的酶量定义为一个酶活力国际单位(IU)，简称U。
水稻秸秆段培养基为：20g水稻秸秆段(长度2-3cm)、尿素0.3g、(NH4)2SO41.4g、KH2PO40.5g、CaCl2·2H2O0.4g、MgSO4·7H2O0.3g、蛋白胨1.0g、FeSO4·7H2O5.0mg、MnSO4·H2O1.6mg、ZnSO4·7H2O1.4mg、CoCl2·6H2O2.0mg，水1000ml，pH自然。
由图6可知，7天后单株菌的滤纸酶活：真菌NJZ501的滤纸酶活在0.30U，3个细菌NJX501、NJX502和NJXy的滤纸酶活差异不大，在0.15U左右，分别为0.15U、0.16U、0.14U；由图7可知，7天后单株菌的纤维素酶活：真菌的纤维素酶活在0.23U，3个细菌NJX501、NJX502和NJXy的纤维素酶活差异不大，在0.1U左右，分别为0.11U、0.11U、0.12U；由图8可知，7天后单株菌的木聚糖酶活：真菌的木聚糖酶活在34.6U，3个细菌NJX501、NJX502和NJXy的木聚糖酶活差异不大，在25U左右，分别为26.5U、27U和26U。
实施例2制得的复配菌剂FX按照体积比1％接种至装有100ml水稻秸秆段培养基的三角瓶中，采用2水平因子设计方法研究了复配菌剂FX在30℃-50℃，170rpm振荡，液体发酵7天-15天的酶活变化情况，如图9-11所示，在高温50℃条件下，水稻秸秆接种复配菌剂FX(等值线图中赋值为+1)可以产生大量木质纤维素酶类，产酶较快且维持时间较长。第15天，50℃条件下、滤纸酶活和纤维素酶活达到最高值，最高值分别为0.41U和0.40U，与单株菌的液体发酵最高滤纸酶活0.3U和纤维素酶活0.23U有显著差异，分别提高26.8％和73.9％；在第7天，50℃条件下、木聚糖酶活达到最高值为49.5U，大于单株菌的最高木聚糖酶活34.6U，增加百分比43.1％。说明各菌株复配后的酶活提高，体现了较好的协同作用。可知：复配菌剂FX在高温50℃条件下，以水稻秸秆段作为诱导底物，其与秸秆降解相关的滤纸酶活、纤维素酶活和木聚糖酶活表现出较高的酶活，也证明了高温菌剂的作用机理：在高温条件下，复配菌剂FX产生的木质纤维素水解酶活性较高，水解作用较强，故在高温下表现出较好的降解水稻秸秆的作用。
实施例4水稻秸秆降解复配菌剂对稻秆段的降解
取多个250ml的三角瓶，向250ml三角瓶中加入2.0g水稻秸秆段(长度2-3cm)和100ml无机盐培养基，121℃灭菌后，分别单独的按体积比接种1％实施例2制得的3个细菌的细菌菌液、真菌的孢子悬液、复配菌剂FX，置于50℃，170rpm中振荡发酵7天和/或15天，实验设置重复二次。以接种等量无菌水作为空白对照。
以1000ml无机盐培养基为例：尿素0.3g、(NH4)2SO41.4g、KH2PO40.5g、CaCl2·2H2O0.4g、MgSO4·7H2O0.3g、蛋白胨1.0g、FeSO4·7H2O5.0mg、MnSO4·H2O1.6mg、ZnSO4·7H2O1.4mg、CoCl2·6H2O2.0mg，水1000ml，pH5-7。
液体发酵结束后，去除稻秆表面的菌体或菌丝孢子，与105℃烘干至恒重称重，测定降解率，降解率＝(降解前总质量-降解后总质量)/2g×100％。
稻秆段降解效果如图12所示，结果表明，液体发酵7天，枯草芽孢杆菌菌株NJX501的细菌菌液、枯草芽孢杆菌菌株NJX502的细菌菌液、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液、烟曲霉菌株NJZ501的孢子悬液的稻秆段降解率分别为22.5％、24.5％、24.5％、32.5％；而复配菌剂FX的降解率可达46.5％，空白对照降解率小于8％。如图13所示，采用复配菌剂FX50℃液体发酵降解稻秆段15天，降解率可达57.25％。说明在高温条件下，复配菌剂产生的木质纤维素水解酶可以显著加快秸秆的分解和其中成分的转化，加速底物的分解和转化，且复配菌剂对水稻秸秆的降解作用明显强于单一菌株对水稻秸秆的降解作用。

Claims (8)

1.一种降解秸秆的复配菌剂FX，其特征在于所述的复配菌剂FX包括枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株NJX501、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)菌株NJXy和烟曲霉(Aspergillusfumigatus)菌株NJZ501。
2.根据权利要求1所述的降解秸秆的复配菌剂FX，其特征在于所述的降解秸秆的复配菌剂FX是由细菌OD值为0.5-1的枯草芽孢杆菌菌株NJX501的细菌菌液、细菌OD值为0.5-1的枯草芽孢杆菌菌株NJX502的细菌菌液、细菌OD值为0.5-1的甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液、真菌孢子数目不少于104个/ml烟曲霉菌株NJZ501孢子悬液等体积混合得到的。
3.根据权利要求1所述的降解秸秆的复配菌剂FX，其特征在于所述的降解秸秆的复配菌剂FX是由细菌OD值为0.5的枯草芽孢杆菌菌株NJX501的细菌菌液、细菌OD值为0.5的枯草芽孢杆菌菌株NJX502的细菌菌液、细菌OD值为0.5的甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液、真菌孢子数目为104个/ml烟曲霉菌株NJZ501孢子悬液等体积混合得到的。
4.权利要求1所述的降解秸秆的复配菌剂FX的制备方法，其特征在于包括：将枯草芽孢杆菌菌株NJX501、枯草芽孢杆菌菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy分别单独的接种到LB培养基上，温度30-50℃，转速170-220rpm，振荡培养1-2天，离心后去掉上清液取沉淀，再用15-30ml的0.9％灭菌生理盐水重悬，得到细菌菌液，调节细菌菌液的细菌OD值为0.5-1；将烟曲霉菌株NJZ501接种至PDA培养基上，30-50℃静置培养4-7天，用15-30ml的0.9％灭菌生理盐水振荡，过滤培养物后得到真菌孢子数目不少于104个/ml孢子悬液；将上述3个细菌的细菌菌液和真菌的孢子悬液等体积混合得到复配菌剂FX。
5.根据权利要求4所述的降解秸秆的复配菌剂FX的制备方法，其特征在于调节枯草芽孢杆菌菌株NJX501、枯草芽孢杆菌菌株NJX502、甲基营养型芽孢杆菌菌株NJXy的细菌菌液的OD值为0.5；烟曲霉菌株NJZ501的孢子悬液中真菌孢子数目为104个/ml。
6.根据权利要求4所述的降解秸秆的复配菌剂FX的制备方法，其特征在于LB培养基：蛋白胨10g、酵母粉5g、NaCl10g、琼脂20g、水1000mL，pH自然；
PDA培养基：土豆200.0g，蔗糖20.0g，琼脂20.00g，水1000ml。
7.权利要求1所述的降解秸秆的复配菌剂FX在降解水稻秸秆方面的应用。
8.权利要求1所述的降解秸秆的复配菌剂FX在水稻秸秆高温堆肥生产有机肥料的应用。
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