CN106963785A - 一种螺旋藻提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种螺旋藻提取物的制备方法,包括以下步骤:在螺旋藻干粉中加入PH6.5‑7.5、8‑15mmol/L的磷酸盐缓冲液,获得螺旋藻悬浊液;将螺旋藻悬浊液进行高压均质破壁,对破壁后的液体进行离心,获取上清液;将上清液进行微滤膜过滤,获得螺旋藻提取物粗提液;在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,获取沉淀物,对沉淀物进行4℃透析以去除硫酸铵,真空干燥,获得螺旋藻提取物。本发明还公开一种上述方法制备的螺旋藻提取物及该提取物的应用。该提取物可用于治疗肿瘤,且无副作用。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域,特别是涉及一种螺旋藻提取物及其制备方法和应用。
背景技术
螺旋藻是一种光能自养型生物,细胞内没有真正的细胞核,其生长不仅受到光强度的影响,而且因光的色值不同,反应各异。螺旋藻中蛋白质含量高,氨基酸组成十分合理,同时含有多种维生素、矿物质及微量元素,营养价值及其丰富。大量实验证明,螺旋藻具有抗肿瘤、防癌的效用。
肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下,局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致异常增生和分化所形成的新生物。新生物一旦形成,其生长不受机体的调节,同时破坏正常组织与器官。目前,肿瘤的治疗方法有放疗、化疗等方法,放疗、化疗在消灭肿瘤细胞的同时,均会对人体产生副作用。
如何提供一种可治疗肿瘤的纯天然物质,是肿瘤治疗领域亟待解决的问题之一。
发明内容
本发明的目的在于解决上述至少一个问题,提供一种螺旋藻提取物及其制备方法和应用。
为解决上述技术问题,本发明提供一种螺旋藻提取物的制备方法,包括以下步骤:在螺旋藻干粉中加入PH6.5-7.5、8-15mmol/L的磷酸盐缓冲液,获得螺旋藻悬浊液;将螺旋藻悬浊液进行高压均质破壁,对破壁后的液体进行离心,获取上清液;将上清液进行微滤膜过滤,获得螺旋藻提取物粗提液;在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,获取沉淀物,对沉淀物进行4℃透析以去除硫酸铵,真空干燥,获得螺旋藻提取物。
其中,螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为1:1.3-1:1.6。
其中,微滤膜为0.2μm微滤膜。
其中,在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵的步骤包括:在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,至硫酸铵饱和。
其中,获得螺旋藻提取物后,在螺旋藻提取物中加入20-30mmol/L的磷酸盐缓冲液,并过凝胶柱,利用螺旋藻提取物中加入的缓冲液进行洗脱,缓冲液的洗脱量为2-3BV,获取洗脱液,对洗脱液进行透析除磷酸盐,冷冻干燥,再次获得螺旋藻提取物。
其中,螺旋藻干粉中加入的磷酸盐缓冲液为PH7.1、11mmol/L的磷酸盐缓冲液。
其中,螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为1:1.4。
其中,螺旋藻提取物中加入的磷酸盐缓冲液为PH7.1、25mmol/L的磷酸盐缓冲液。
为解决上述技术问题,本发明提供一种上述制备方法制备得到的螺旋藻提取物。
为解决上述技术问题,本发明提供一种螺旋藻提取物作为治疗肿瘤药物或保健品的应用。具体地,螺旋藻提取物作为治疗肿瘤药物或保健品的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。
本发明的有益效果是:区别于现有技术的情况,本发明的螺旋藻提取物的制备方法包括以下步骤:在螺旋藻干粉中加入PH6.5-7.5、8-15mmol/L的磷酸盐缓冲液,获得螺旋藻悬浊液;将螺旋藻悬浊液进行高压均质破壁,对破壁后的液体进行离心,获取上清液;将上清液进行微滤膜过滤,获得螺旋藻提取物粗提液;在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,获取沉淀物,对沉淀物进行4℃透析以去除硫酸铵,真空干燥,获得螺旋藻提取物。上述方法制备的螺旋藻提取物可用于治疗肿瘤,且螺旋藻提取物为纯天然物质,在治疗过程中,对人体无副作用。
具体实施方式
实施例1
螺旋藻提取物的制备方法包括以下步骤:在螺旋藻干粉中加入PH7.1、11mmol/L的磷酸盐缓冲液,获得螺旋藻悬浊液,其中,螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为1:1.4;将螺旋藻悬浊液进行高压均质破壁,对破壁后的液体进行离心,获取上清液;将上清液进行0.2μm微滤膜过滤,获得螺旋藻提取物粗提液;在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,获取沉淀物,对沉淀物进行4℃透析以去除硫酸铵,真空干燥,获得螺旋藻提取物。
在本实施例中,在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵的步骤具体为:在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,至硫酸铵饱和。
在本实施例中,螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为质量比。
本实施例制备的螺旋藻提取物可用于治疗肿瘤,且无副作用。其中,对于肿瘤的治疗,如:乳腺癌治疗、皮肤癌治疗、白血病治疗、胃癌治疗等,本实施例治疗的肿瘤种类,不限于上述所列几种。
实施例2
螺旋藻提取物的制备方法包括以下步骤:在螺旋藻干粉中加入PH7.1、13mmol/L的磷酸盐缓冲液,获得螺旋藻悬浊液,其中,螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为1:1.5;将螺旋藻悬浊液进行高压均质破壁,对破壁后的液体进行离心,获取上清液;将上清液进行0.2μm微滤膜过滤,获得螺旋藻提取物粗提液;在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,获取沉淀物,对沉淀物进行4℃透析以去除硫酸铵,真空干燥,获得螺旋藻提取物。
在本实施例中,在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵的步骤具体为:在螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,至硫酸铵饱和。
在本实施例中,螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为质量比。
本实施例制备的螺旋藻提取物可用于治疗肿瘤,且无副作用。其中,对于肿瘤的治疗,如:乳腺癌治疗、皮肤癌治疗、白血病治疗、胃癌治疗等,本实施例治疗的肿瘤种类,不限于上述所列几种。
实施例3
在实施例1的基础上,在获得的螺旋藻提取物中加入25mmol/L的磷酸盐缓冲液,并过凝胶柱,利用螺旋藻提取物中加入的缓冲液进行洗脱,缓冲液的洗脱量为3BV,获取洗脱液,对该洗脱液进行透析除磷酸盐,冷冻干燥,再次获得螺旋藻提取物。
实施例4
在实施例2的基础上,在获得的螺旋藻提取物中加入25mmol/L的磷酸盐缓冲液,并过凝胶柱,利用螺旋藻提取物中加入的缓冲液进行洗脱,缓冲液的洗脱量为3BV,获取洗脱液,对该洗脱液进行透析除磷酸盐,冷冻干燥,再次获得螺旋藻提取物。
实施例5
螺旋藻提取物片剂的制备:将实施例3或实施例4制备的螺旋藻提取物用单冲压片机打成直径为7mm,重量为350mg的片,即得螺旋藻提取物片剂。
实施例6
螺旋藻提取物胶囊剂的制备:将实施例3或实施例4制备的螺旋藻提取物以350mg填充入1号肠溶胶囊,即得螺旋藻提取物胶囊剂。
实施例7
螺旋藻提取物颗粒剂的制备:将实施例3或实施例4制备的螺旋藻提取物加水制成软材,过15目筛进行造粒,干燥后即得螺旋藻提取物颗粒剂。
实施例8
螺旋藻提取物散剂的制备:将实施例3或实施例4制备的螺旋藻提取物过250目筛,即得螺旋藻提取物散剂。
临床数据一:选取300例肿瘤患者,其中,乳腺癌75例、皮肤癌60例、白血病75例、胃癌90例,各类型患者每天3次内服实施例1或实施例2制备的螺旋藻提取物,连续服用6个月。治疗结束后,检测患者的肿瘤体积和临床症状。其中,检测结果判断标准为:显效,肿瘤瘤体缩小10%以上,主要临床症状消失;有效,肿瘤瘤体缩小1-10%,临床症状明显改善;无效,肿瘤瘤体继续增长,临床症状无改善或加重。
检测结果:75例乳腺癌患者,有效40例,无效35例;60例皮肤癌患者,有效35例,无效25例;75例白血病患者,有效41例,无效34例;90例胃癌患者,有效50例,无效40例。且所有患者在治疗过程中,均无副作用。
根据检测结果,说明实施例1或实施例2制备的螺旋藻提取物具有治疗肿瘤的效用,且无副作用。
临床数据二:选取肿瘤患者200例,随机分为两组,各100人,第一组每天3次内服实施例1或实施例2制备的螺旋藻提取物,第二组每天3次内服纯化的藻蓝蛋白,各组连续服用6个月。治疗结束后,检测患者的肿瘤体积和临床症状。其中,检测结果判断标准为:显效,肿瘤瘤体缩小10%以上,主要临床症状消失;有效,肿瘤瘤体缩小1-10%,临床症状明显改善;无效,肿瘤瘤体继续增长,临床症状无改善或加重。
检测结果:第一组,有效55例,无效45例;第二组,有效30例,无效70例。
根据检测结果,说明实施例1或实施例2制备的螺旋藻提取物比纯化的藻蓝蛋白具有更好的肿瘤治疗效用。
临床数据三:选取肿瘤患者200例,随机分为四组,各组50人,第一组每天3次内服实施例1制备的螺旋藻提取物,第二组每天3次内服实施例2制备的螺旋藻提取物,第三组每天3次内服实施例3制备的螺旋藻提取物,第四组每天3次内服实施例4制备的螺旋藻提取物,各组连续服用6个月。治疗结束后,检测患者的肿瘤体积和临床症状。其中,检测结果判断标准为:显效,肿瘤瘤体缩小10%以上,主要临床症状消失;有效,肿瘤瘤体缩小1-10%,临床症状明显改善;无效,肿瘤瘤体继续增长,临床症状无改善或加重。
检测结果:第一组,有效30例,无效20例;第二组,有效28例,无效22例;第三组,有效35例,无效15例;第四组,有效34例,无效16例。
根据检测结果,说明实施例3、实施例4精制的螺旋藻提取物较实施例1、实施例2制备的螺旋藻提取物具有更好的肿瘤治疗效用。
综上所述,本发明制备的螺旋藻提取物可用于治疗肿瘤,且螺旋藻提取物为纯天然物质,在治疗过程中,对人体无副作用。
以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书内容所作的等效变换,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
在螺旋藻干粉中加入PH6.5-7.5、8-15mmol/L的磷酸盐缓冲液,获得螺旋藻悬浊液;
将所述螺旋藻悬浊液进行高压均质破壁,对破壁后的液体进行离心,获取上清液;
将所述上清液进行微滤膜过滤,获得螺旋藻提取物粗提液;
在所述螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,获取沉淀物,对所述沉淀物进行4℃透析以去除硫酸铵,真空干燥,获得螺旋藻提取物。
2.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,所述螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为1:1.3-1:1.6。
3.根据权利要求2所述的螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,所述微滤膜为0.2μm微滤膜。
4.根据权利要求3所述的螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,所述在所述螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵的步骤包括:在所述螺旋藻提取物粗提液中加入硫酸铵,至硫酸铵饱和。
5.根据权利要求4所述的螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,在所述螺旋藻提取物中加入20-30mmol/L的磷酸盐缓冲液,并过凝胶柱,利用螺旋藻提取物中加入的缓冲液进行洗脱,缓冲液的洗脱量为2-3BV,获取洗脱液,对所述洗脱液进行透析除磷酸盐,冷冻干燥,获得螺旋藻提取物。
6.根据权利要求4所述的螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,所述螺旋藻干粉中加入的磷酸盐缓冲液为PH7.1、11mmol/L的磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求6所述的螺旋藻提取物的制备方法,其特征在于,所述螺旋藻干粉与磷酸盐缓冲液的料液比为1:1.4。
8.权利要求1-7任意一项所述的制备方法制备得到的螺旋藻提取物。
9.权利要求8所述螺旋藻提取物作为治疗肿瘤药物或保健品的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述螺旋藻提取物作为治疗肿瘤药物或保健品的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。
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