CN106955301A - 一种中药益生菌制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种中药益生菌制剂及其制备方法，所述中药益生菌制剂由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.5～1:8～10的质量比复配而成，其中：所述清开灵方剂由1.2～1.6g胆酸、1.4～1.8g猪去氧胆酸、18～25g珍珠母粉、8～12g水牛角粉、32～38g金银花、8～12g栀子、75～85g板蓝根、1.8～2.5g黄芩苷组成；益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌组成。本发明将中药清开灵与益生菌进行复配制备成动物用中药益生菌制剂，充分发挥二者的协同作用优势，取得了对消化系统和呼吸系统疾病进行同时预防和治疗的效果，同时也避免了中药单方需要添加防腐剂等添加剂的问题，可作为动物保健品应用于养殖业。

Description

一种中药益生菌制剂及其制备方法
技术领域
本发明属于动物保健技术领域，涉及一种中药益生菌制剂及其制备方法，具体涉及一种清开灵方剂与益生菌制剂复配而成的新型制剂及其制备方法。
背景技术
益生菌是指能够改善宿主肠道菌群生态平衡，提高宿主健康水平和健康状态的活菌制剂及其代谢产物。益生菌能够在数量和种类上补充肠道内减少或缺乏的正常微生物，调整或维持肠道内微生物平衡，增强机体免疫功能，促进营养物质的消耗和吸收，从而达到防病治病的目地。
清开灵制剂对发热、咳嗽、咽痛、鼻塞流涕等症状的改善均有明显的效果，还具有较强的抗炎作用，对化学性和内毒素引起的发热具有明显解热作用。
发明人首次利用清开灵方剂治疗或预防动物流感时发现，清开灵方剂在与益生菌制剂混合使用时，二者具有协同作用，提高了预防及治疗效果。
发明内容
鉴于清开灵方剂与益生菌制剂混合使用时具有协同作用，本发明提供了一种中药益生菌制剂及其制备方法，将清开灵方剂与益生菌制剂进行复配，用于预防和治疗动物流感，以提高动物流感的治疗效果。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种中药益生菌制剂，由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.5～1:8～10的质量比复配而成，其中：所述清开灵方剂由1.2～1.6g胆酸、1.4～1.8g猪去氧胆酸、18～25g珍珠母粉、8～12g水牛角粉、32～38g金银花、8～12g栀子、75～85g板蓝根、1.8～2.5g黄芩苷组成；益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌组成。
一种上述中药益生菌制剂的制备方法，包括如下步骤：
一、清开灵方剂的制备：
1、将栀子和板蓝根加入到400～2000ml水中煎煮1～2小时，过滤，再将滤渣加入到400～2000ml水中煎煮0.5～1.5小时，过滤，合并两次过滤的滤液，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的栀子和板蓝根清膏；
2、将金银花加入到150～1000ml、40～60℃的水中浸泡0.5～1小时，然后煎煮1～2小时，过滤，再将滤渣加入到150～1000ml水中煎煮1～2小时，过滤，合并两次过滤的滤液，将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的金银花清膏；
3、将水牛角粉加入到30～150mL浓度为2～6mol/L氢氧化钡溶液中煎煮6～8小时，在80～100℃的条件下过滤，得到水牛角滤液，冷却至室温；将珍珠母粉加入到60～300mL浓度为2～6mol/L硫酸水溶液中煎煮6～8小时，在80～100℃的条件下过滤，得到珍珠母滤液，冷却至室温；将珍珠母滤液加入到水牛角滤液中，搅拌均匀后过滤，将滤液浓缩至10～100mL，冷却至室温，加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后用氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为5～7，在0～10℃的条件下冷藏12～48h，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的清膏，向清膏中加入1～10倍清膏质量的β-环糊精，再加入1～2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，用胶体磨研磨10～30分钟进行包合，然后在60～120℃喷雾干燥，得水牛角和珍珠母包合粉，或者在60～100℃的条件下减压干燥12～36小时、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、将胆酸和猪去氧胆酸加入到3～50ml乙醇中超声溶解，过滤，将1～10倍胆酸和猪去氧胆酸总质量的β-环糊精加入滤液中，再加入1～2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，然后用胶体磨研磨10～30分钟进行包合，然后在60～120℃喷雾干燥，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉，或者在60～100℃的条件下减压干燥12～36小时、再粉碎，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉；
5、将黄芩苷加入到10～50ml水中，在搅拌的条件下用氢氧化钠溶液调节pH值为7，得到黄芩苷溶液；
二、益生菌制剂的制备：
培养基：碳源0.5～10％、有机氮源0.2～3％、磷酸氢二钾或磷酸二氢钾0.01～1％、硫酸镁0.01～0.5％、碳酸钙0.03～1％，将培养基灭菌降温后接入芽孢杆菌种子液、乳酸菌种子液和酵母菌种子液，在温度为30～37℃的条件下培养24～48小时，终止发酵；
三、清开灵与益生菌剂复配：
将栀子和板蓝根清膏、金银花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、胆酸和猪去氧胆酸包合粉、黄芩苷溶液溶于水中润湿溶解，然后加入到益生菌制剂内，搅匀，灌装，即得中药益生菌制剂。
本发明将中药清开灵与益生菌进行复配制备成动物用中药益生菌制剂，充分发挥二者的协同作用优势，取得了对消化系统和呼吸系统疾病进行同时预防和治疗的效果，同时也避免了中药单方需要添加防腐剂等添加剂的问题，可作为动物保健品应用于养殖业。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
实施例1：
本实施例中，中药益生菌制剂由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.5～1:8～10的质量比复配而成，其中：所述清开灵方剂由1.2～1.6g胆酸、1.4～1.8g猪去氧胆酸、18～25g珍珠母粉、8～12g水牛角粉、32～38g金银花、8～12g栀子、75～85g板蓝根、1.8～2.5g黄芩苷组成；益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌组成，乳酸菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为任意比，优选为3～4∶1～2∶5～6。
一种上述中药益生菌制剂的制备方法，包括如下步骤：
一、清开灵方剂的制备：
1、将栀子和板蓝根加入到400～2000ml水中煎煮1～2小时，过滤，再将滤渣加入到400～2000ml水中煎煮0.5～1.5小时，过滤，合并两次过滤的滤液，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的栀子和板蓝根清膏；
2、将金银花加入到150～1000ml、40～60℃的水中浸泡0.5～1小时，然后煎煮1～2小时，过滤，再将滤渣加入到150～1000ml水中煎煮1～2小时，过滤，合并两次过滤的滤液，将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的金银花清膏；
3、将水牛角粉加入到30～150mL浓度为2～6mol/L氢氧化钡溶液中煎煮6～8小时，在80～100℃的条件下过滤，得到水牛角滤液，冷却至室温；将珍珠母粉加入到60～300mL浓度为2～6mol/L硫酸水溶液中煎煮6～8小时，在80～100℃的条件下过滤，得到珍珠母滤液，冷却至室温；将珍珠母滤液加入到水牛角滤液中，搅拌均匀后过滤，将滤液浓缩至10～100mL，冷却至室温，加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后用氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为5～7，在0～10℃的条件下冷藏12～48h，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的清膏，向清膏中加入1～10倍清膏质量的β-环糊精，再加入1～2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，用胶体磨研磨10～30分钟进行包合，然后在60～120℃喷雾干燥，得水牛角和珍珠母包合粉，或者在60～100℃的条件下减压干燥12～36小时、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、将胆酸和猪去氧胆酸加入到3～50ml乙醇中超声溶解，过滤，将1～10倍胆酸和猪去氧胆酸总质量的β-环糊精加入滤液中，再加入1～2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，然后用胶体磨研磨10～30分钟进行包合，然后在60～120℃喷雾干燥，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉，或者在60～100℃的条件下减压干燥12～36小时、再粉碎，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉；
5、将黄芩苷加入到10～50ml水中，在搅拌的条件下用氢氧化钠溶液调节pH值为7，得到黄芩苷溶液；
二、益生菌制剂的制备：
1、菌种制备：
芽孢杆菌种子液的制备：将营养肉汤培养基灭菌降温后，接入活化的芽孢杆菌(接种量2～10％)，培养条件：温度为30～37℃，通气量为1：0.5～1：1vvm，搅拌转速为100～200rpm，培养时间为18～24小时；
乳酸菌种子液的制备：培养基：碳源0.5～10％、有机氮源0.2～3％、磷酸氢二钾或磷酸二氢钾0.01～1％、硫酸镁0.01～0.5％、碳酸钙0.03～1％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的乳酸菌(接种量2～10％)，培养条件：温度为30～37℃，培养时间为24～48小时；
酵母菌种子液的制备：培养基：碳源0.5～10％、有机氮源0.2～3％、磷酸氢二钾或磷酸二氢钾0.01～1％、硫酸镁0.01～0.5％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的酵母菌(接种量1～5％)，培养条件：温度为26～32℃，培养时间为16～48小时；
2、益生菌制剂的复合培养：
培养基：碳源0.5～10％、有机氮源0.2～3％、磷酸氢二钾或磷酸二氢钾0.01～1％、硫酸镁0.01～0.5％、碳酸钙0.03～1％，将培养基灭菌降温后接入芽孢杆菌种子液、乳酸菌种子液和酵母菌种子液，在温度为30～37℃的条件下培养24～48小时，终止发酵；
所述碳源选自单糖、双糖、多糖的糖化液中的一种或几种；有机氮源选自蛋白胨、牛肉膏、玉米浆、鱼粉、酵母粉、酵母膏、酵母膏代用品(CN 1164763C)、菌体抽提物(CN100410385C)的一种或几种；
三、清开灵与益生菌剂复配：
将栀子和板蓝根清膏、金银花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、胆酸和猪去氧胆酸包合粉、黄芩苷溶液溶于水中润湿溶解，然后加入到益生菌制剂内，搅匀，灌装，即得中药益生菌制剂。
实施例2：
本实施例提供了一种中药益生菌制剂及其制备方法，所述中药益生菌制剂由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.8:9的质量比复配而成，其中：所述清开灵方剂由1.3g胆酸、1.5g猪去氧胆酸、20g珍珠母粉、10g水牛角粉、35g金银花、10g栀子、80g板蓝根、2.0g黄芩苷、组成；益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌按照3：1∶5的质量比组成。
上述中药益生菌制剂的制备步骤如下：
一、清开灵方剂的制备：
1、将栀子和板蓝根加入到1000ml水中煎煮1.5小时，过滤，再将滤渣加入到1000ml水中煎煮1小时，过滤，合并两次过滤的滤液，然后将滤液浓缩至相对密度为1.10的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置20小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.20的栀子和板蓝根清膏；
2、将金银花加入到500ml、50℃的水中浸泡0.5小时，然后煎煮1.5小时，过滤，再将滤渣加入到500ml水中煎煮1.5小时，过滤，合并两次过滤的滤液，将滤液浓缩至相对密度为1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置20小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.20的金银花清膏；
3、将水牛角粉加入到100mL浓度为4mol/L氢氧化钡溶液中煎煮7小时，在100℃的条件下过滤，得到水牛角滤液，冷却至室温；将珍珠母粉加入到200mL浓度为4mol/L硫酸水溶液中煎煮7小时，在100℃的条件下过滤，得到珍珠母滤液，冷却至室温；将珍珠母滤液加入到水牛角滤液中，搅拌均匀后过滤，将滤液浓缩至50mL，冷却至室温，加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置20小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后用质量浓度为20％的氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为6，在10℃的条件下冷藏24h，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.20的清膏，向清膏中加入5倍清膏质量的β-环糊精，再加入1.5倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，用胶体磨研磨20分钟进行包合，然后在100℃喷雾干燥，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、将胆酸和猪去氧胆酸加入到30ml乙醇中超声溶解，过滤，将5倍胆酸和猪去氧胆酸总质量的β-环糊精加入滤液中，再加入1.5倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，然后用胶体磨研磨20分钟进行包合，然后在100℃喷雾干燥，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉；
5、将黄芩苷加入到30ml水中，在搅拌的条件下用质量浓度为20％的氢氧化钠溶液调节pH值为7，得到黄芩苷溶液。
二、益生菌制剂的制备：
1、菌种制备：
芽孢杆菌种子液的制备：将营养肉汤培养基灭菌降温后，接入活化的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)cicc 20684，培养条件：温度为35℃，通气量为1∶0.5vvm，搅拌转速为150rpm，培养时间为20小时；
乳酸菌种子液的制备：培养基：碳源5％、有机氮源2％、磷酸氢二钾0.5％、硫酸镁0.1％、碳酸钙0.05％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的嗜酸乳酸菌(Lactobacillusacidophilus)，培养条件：温度为35℃，培养时间为30小时；
酵母菌种子液的制备：培养基：碳源5％、有机氮源2％、磷酸氢二钾0.5％、硫酸镁0.1％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的酵母菌，培养条件：温度为30℃，培养时间为24小时；
2、益生菌制剂的复合培养：
培养基：碳源5％、有机氮源2％、磷酸氢二钾0.5％、硫酸镁0.1％、碳酸钙0.05％，将培养基灭菌降温后接入地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳酸菌种子液和酵母菌种子液，在温度为305℃的条件下培养30小时，终止发酵；
所述碳源选自单糖，有机氮源选自蛋白胨。
三、清开灵与益生菌剂复配：
将栀子和板蓝根清膏、金银花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、胆酸和猪去氧胆酸包合粉、黄芩苷溶液溶于水中润湿溶解，然后加入到益生菌制剂内，搅匀，灌装，即得中药益生菌制剂。
实施例3：
本实施例提供了一种中药益生菌制剂及其制备方法，所述中药益生菌制剂由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.8:10的质量比复配而成，其中：所述清开灵方剂由1.3g胆酸、1.5g猪去氧胆酸、20g珍珠母粉、10g水牛角粉、35g金银花、10g栀子、80g板蓝根、2.0g黄芩苷组成；益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌按照4∶2∶6的质量比组成。
上述中药益生菌制剂的制备步骤如下：
一、清开灵方剂的制备：
1、将栀子和板蓝根加入到500ml水中煎煮1.5小时，过滤，再将滤渣加入到500ml水中煎煮1小时，过滤，合并两次过滤的滤液，然后将滤液浓缩至相对密度为1.10的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置15小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.10的栀子和板蓝根清膏；
2、将金银花加入到200ml、50℃的水中浸泡1小时，然后煎煮1小时，过滤，再将滤渣加入到200ml水中煎煮1小时，过滤，合并两次过滤的滤液，将滤液浓缩至相对密度为1.10的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置15小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.10的金银花清膏；
3、将水牛角粉加入到50mL浓度为2mol/L氢氧化钡溶液中煎煮6小时，在80℃的条件下过滤，得到水牛角滤液，冷却至室温；将珍珠母粉加入到100mL浓度为2mol/L硫酸水溶液中煎煮6小时，在80℃的条件下过滤，得到珍珠母滤液，冷却至室温；将珍珠母滤液加入到水牛角滤液中，搅拌均匀后过滤，将滤液浓缩至80mL，冷却至室温，加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置15小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后用氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为6，在0℃的条件下冷藏15h，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.10的清膏，向清膏中加入2倍清膏质量的β-环糊精，再加入1倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，用胶体磨研磨15分钟进行包合，然后在80℃的条件下减压干燥24小时、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、将胆酸和猪去氧胆酸加入到20ml乙醇中超声溶解，过滤，将2倍胆酸和猪去氧胆酸总质量的β-环糊精加入滤液中，再加入1倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，然后用胶体磨研磨15分钟进行包合，然后在80℃的条件下减压干燥24小时、再粉碎，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉；
5、将黄芩苷加入到20ml水中，在搅拌的条件下用质量浓度为20％的氢氧化钠溶液调节pH值为7，得到黄芩苷溶液。
二、益生菌制剂的制备：
1、菌种制备：
芽孢杆菌种子液的制备：将营养肉汤培养基灭菌降温后，接入活化的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)cicc 20684，培养条件：温度为32℃，通气量为1：1vvm，搅拌转速为100rpm，培养时间为20小时；
乳酸菌种子液的制备：培养基：碳源8％、有机氮源2％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.2％、碳酸钙0.1％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的嗜酸乳酸菌(Lactobacillusacidophilus)，培养条件：温度为32℃，培养时间为24小时；
酵母菌种子液的制备：培养基：碳源8％、有机氮源2％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.2％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的酵母菌，培养条件：温度为28℃，培养时间为32小时；
2、益生菌制剂的复合培养：
培养基：碳源8％、有机氮源2％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.2％、碳酸钙0.1％，将培养基灭菌降温后接入地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳酸菌种子液和酵母菌种子液，在温度为30℃的条件下培养30小时，终止发酵；所述碳源选自双糖，有机氮源选自牛肉膏。
三、清开灵与益生菌剂复配：
将栀子和板蓝根清膏、金银花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、胆酸和猪去氧胆酸包合粉、黄芩苷溶液溶于水中润湿溶解，然后加入到益生菌制剂内，搅匀，灌装，即得中药益生菌制剂。
实施例4：
本实施例提供了一种中药益生菌制剂及其制备方法，所述中药益生菌制剂由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.8:10的质量比复配而成，其中：所述清开灵方剂由1.3g胆酸、1.5g猪去氧胆酸、20g珍珠母粉、10g水牛角粉、35g金银花、10g栀子、80g板蓝根、2.0g黄芩苷组成；益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌按照4：1：5的质量比组成。
上述中药益生菌制剂的制备步骤如下：
一、清开灵方剂的制备：
1、将栀子和板蓝根加入到1500ml水中煎煮2小时，过滤，再将滤渣加入到1500ml水中煎煮1.5小时，过滤，合并两次过滤的滤液，然后将滤液浓缩至相对密度为1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.30的栀子和板蓝根清膏；
2、将金银花加入到800ml、60℃的水中浸泡1小时，然后煎煮2小时，过滤，再将滤渣加入到800ml水中煎煮2小时，过滤，合并两次过滤的滤液，将滤液浓缩至相对密度为1.30的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.30的金银花清膏；
3、将水牛角粉加入到150mL浓度为5mol/L氢氧化钡溶液中煎煮8小时，在100℃的条件下过滤，得到水牛角滤液，冷却至室温；将珍珠母粉加入到300mL浓度为5mol/L硫酸水溶液中煎煮8小时，在100℃的条件下过滤，得到珍珠母滤液，冷却至室温；将珍珠母滤液加入到水牛角滤液中，搅拌均匀后过滤，将滤液浓缩至100mL，冷却至室温，加入乙醇至乙醇的体积浓度为60％，静置24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后用氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为7，在5℃的条件下冷藏48h，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.30的清膏，向清膏中加入10倍清膏质量的β-环糊精，再加入2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，用胶体磨研磨30分钟进行包合，然后在120℃喷雾干燥，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、将胆酸和猪去氧胆酸加入到40ml乙醇中超声溶解，过滤，将10倍胆酸和猪去氧胆酸总质量的β-环糊精加入滤液中，再加入2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，然后用胶体磨研磨30分钟进行包合，然后在120℃喷雾干燥，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉；
5、将黄芩苷加入到40ml水中，在搅拌的条件下用质量浓度为20％的氢氧化钠溶液调节pH值为7，得到黄芩苷溶液。
二、益生菌制剂的制备：
1、菌种制备：
芽孢杆菌种子液的制备：将营养肉汤培养基灭菌降温后，接入活化的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)cicc 20684，培养条件：温度为37℃，通气量为1：1vvm，搅拌转速为200rpm，培养时间为24小时；
乳酸菌种子液的制备：培养基：碳源8％、有机氮源2.5％、磷酸氢二钾0.8％、硫酸镁0.4％、碳酸钙0.8％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的嗜酸乳酸菌(Lactobacillus acidophilus)cicc 6096，培养条件：温度为37℃，培养时间为48小时；
酵母菌种子液的制备：培养基：碳源8％、有机氮源2.5％、磷酸氢二钾0.8％、硫酸镁0.4％，将培养基灭菌降温后接入按常规活化的酵母菌，培养条件：温度为32℃，培养时间为48小时；
2、益生菌制剂的复合培养：
培养基：碳源8％、有机氮源2.5％、磷酸氢二钾0.8％、硫酸镁0.4％、碳酸钙0.8％，将培养基灭菌降温后接入地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳酸菌种子液和酵母菌种子液，在温度为37℃的条件下培养48小时，终止发酵；所述碳源选自单糖和双糖；有机氮源选自酵母粉；
三、清开灵与益生菌剂复配：
将栀子和板蓝根清膏、金银花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、胆酸和猪去氧胆酸包合粉、黄芩苷溶液溶于水中润湿溶解，然后加入到益生菌制剂内，搅匀，灌装，即得中药益生菌制剂。

Claims (6)

1.一种中药益生菌制剂，其特征在于所述中药益生菌制剂由清开灵方剂与益生菌制剂按照0.5～1:8～10的质量比复配而成。
2.根据权利要求1所述的中药益生菌制剂，其特征在于所述清开灵方剂由1.2～1.6g胆酸、1.4～1.8g猪去氧胆酸、18～25g珍珠母粉、8～12g水牛角粉、32～38g金银花、8～12g栀子、75～85g板蓝根、1.8～2.5g黄芩苷组成。
3.根据权利要求1所述的中药益生菌制剂，其特征在于所述益生菌制剂由乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌组成。
4.根据权利要求3所述的中药益生菌制剂，其特征在于所述乳酸菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为任意比。
5.根据权利要求3所述的中药益生菌制剂，其特征在于所述乳酸菌、酵母菌和芽孢杆菌的质量比为3～4：1～2：5～6。
6.一种权利要求1-5任一权利要求所述的中药益生菌制剂的制备方法，其特征在于所述方法步骤如下：
一、清开灵方剂的制备：
1、将栀子和板蓝根加入到400～2000ml水中煎煮1～2小时，过滤，再将滤渣加入到400～2000ml水中煎煮0.5～1.5小时，过滤，合并两次过滤的滤液，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的栀子和板蓝根清膏；
2、将金银花加入到150～1000ml、40～60℃的水中浸泡0.5～1小时，然后煎煮1～2小时，过滤，再将滤渣加入到150～1000ml水中煎煮1～2小时，过滤，合并两次过滤的滤液，将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的清膏，再加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的金银花清膏；
3、将水牛角粉加入到30～150mL浓度为2～6mol/L氢氧化钡溶液中煎煮6～8小时，在80～100℃的条件下过滤，得到水牛角滤液，冷却至室温；将珍珠母粉加入到60～300mL浓度为2～6mol/L硫酸水溶液中煎煮6～8小时，在80～100℃的条件下过滤，得到珍珠母滤液，冷却至室温；将珍珠母滤液加入到水牛角滤液中，搅拌均匀后过滤，将滤液浓缩至10～100mL，冷却至室温，加入乙醇至乙醇的体积浓度为50～70％，静置12～24小时，过滤，减压回收滤液中乙醇，然后用氢氧化钠溶液调节滤液的pH值为5～7，在0～10℃的条件下冷藏12～48h，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.05～1.40的清膏，向清膏中加入1～10倍清膏质量的β-环糊精，再加入1～2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，用胶体磨研磨10～30分钟进行包合，然后在60～120℃喷雾干燥，得水牛角和珍珠母包合粉，或者在60～100℃的条件下减压干燥12～36小时、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、将胆酸和猪去氧胆酸加入到3～50ml乙醇中超声溶解，过滤，将1～10倍胆酸和猪去氧胆酸总质量的β-环糊精加入滤液中，再加入1～2倍β-环糊精质量的水，搅拌均匀，然后用胶体磨研磨10～30分钟进行包合，然后在60～120℃喷雾干燥，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉，或者在60～100℃的条件下减压干燥12～36小时、再粉碎，得胆酸和猪去氧胆酸包合粉；
5、将黄芩苷加入到10～50ml水中，在搅拌的条件下用氢氧化钠溶液调节pH值为7，得到黄芩苷溶液；
二、益生菌制剂的制备：
培养基：碳源0.5～10％、有机氮源0.2～3％、磷酸氢二钾或磷酸二氢钾0.01～1％、硫酸镁0.01～0.5％、碳酸钙0.03～1％，将培养基灭菌降温后接入芽孢杆菌种子液、乳酸菌种子液和酵母菌种子液，在温度为30～37℃的条件下培养24～48小时，终止发酵；
三、清开灵与益生菌剂复配：
将栀子和板蓝根清膏、金银花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、胆酸和猪去氧胆酸包合粉、黄芩苷溶液溶于水中润湿溶解，然后加入到益生菌制剂内，搅匀，灌装，即得中药益生菌制剂。
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