CN106916739A - 一种提取单组织样本核酸以及测od值的自动提取仪 - Google Patents

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陈华云
丁渭
肖湘文
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张天海
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    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
    • C12N15/1006Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
    • C12N15/1013Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers by using magnetic beads

Abstract

本发明公开了一种提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪,包括提取仪的舱体及在舱体内底座上设置的用于提取单组织样本核酸的试管筒,试管筒包括8孔试管,正对试管筒的尾端设有微小孔装置和用于发射紫外光测OD值的紫外光装置。此提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪通过试管筒实现单组织样本核酸的提取,并且可以在提取完样本后,通过紫外光装置对提取的核酸进行测OD值,显示核酸浓度,更方便核酸后续的使用,具有效率高、成本低、重复性好、稳定性强等特点。本发明适用于生物学装置领域。

Description

一种提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪
技术领域
本发明涉及生物学装置领域,特别是涉及一种提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪。
背景技术
目前,生命体遗传特征的基本单元是核酸,在病毒、基因研究领域都离不开对核酸的检测,而针对对核酸检测,目前普遍有PCR、测序、分子杂交等技术。这些技术的运用的关键前提是提取出核酸。
传统手工提取组织样本核酸(如酚氯仿法),效率低、稳定性差、耗时长,且含有害性的化学物质。目前市场提取方法一般有柱提法、煮沸法。柱提法主要缺点在于人工操作时间长、样本交叉污染,不适用于大批量提取。煮沸法的主要缺点在于提取的样本核酸杂质多,影响下一步实验,且样本容易交叉污染。
所以,一种人工操作时间段、样本不容易交叉污染、准确、有效地提取出组织核酸的仪器设备非常重要。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供一种能实现提取单个组织样本的核酸并测得其OD值的自动提取仪。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪,包括提取仪的舱体及在舱体内底座上设置的用于提取单组织样本核酸的试管筒,试管筒包含8孔试管,正对试管筒的尾端设有微小孔装置和用于发射紫外光测OD值的紫外光装置。
进一步作为本发明技术方案的改进,试管筒包括依次排列的第一孔试管、第二孔试管、第三孔试管、第四孔试管、第五孔试管及第八孔试管。
进一步作为本发明技术方案的改进,第一孔试管用于放置环保脱蜡剂,第二孔试管内设有AL溶液和磁珠,第三孔试管内设有洗涤液Ⅰ,第四孔试管内设有洗涤液Ⅱ,第五孔试管内设有洗涤液Ⅱ,第八孔试管内设有洗脱液。
进一步作为本发明技术方案的改进,各试管底部均设有用于提高试管内液体温度的加热装置或者至少在第一孔试管和第八孔试管底部设有加热装置。
进一步作为本发明技术方案的改进,试管筒通过固定框固定,在固定框上设有与试管筒相匹配的卡位。
进一步作为本发明技术方案的改进,舱体内还设置磁铁装置,所述磁铁装置设有旋转头,且旋转头带有有磁性的磁芯。套上磁套棒后的旋转头,用于旋转混匀液体和转移磁珠。
进一步作为本发明技术方案的改进,磁铁装置包括X方向水平运动臂、Y方向水平运动臂及Z向垂直运动臂,所述旋转头通过X向水平运动臂、Y方向水平运动臂及Z向垂直运动臂可向X向、Y向、Z向运动。
进一步作为本发明技术方案的改进,舱体内还设置有用于移动枪头的吸头移动装置,吸取的枪头用于移动各试管中的液体并通过吹打混匀液体。
进一步作为本发明技术方案的改进,吸头移动装置包括X向水平运动臂、Y向水平运动臂及Z向垂直运动臂,吸取的枪头通过X向水平运动臂、Y向水平运动臂及Z向垂直运动臂可向X向、Y向、Z向运动。
进一步作为本发明技术方案的改进,舱体内还设有枪头放置区、蛋白酶K放置区、无水乙醇放置区、磁棒套放置区、ATL溶液放置区、弃置区和微小孔装置,舱体设有安全门。
本发明的有益效果:
此提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪通过试管筒实现单组织样本核酸的提取,并且可以在提取完样本后,通过紫外光装置对提取的核酸进行测OD值,显示核酸浓度,更方便核酸后续的使用。
人工操作时间大大减少(5min/12个样本),样本量越大,优势越明显。
不仅提高了工作效率,还减少了人工操作时间,降低人为错误,重复性好、稳定性强。
本发明还避免了现有技术中的提取仪枪头容易堵住,枪头掉落等缺点,大大提高了装置运行的稳定性。
附图说明
下面结合附图对本发明作进一步说明:
图1是本发明实施例整体结构示意图;
图2 为在提取相同组织样本核酸时:自动提取仪跟Qiagen公司的QIAamp DNA BloodMini Kit (50)-货号51104试剂盒作对比,得到的核酸进行琼脂糖电泳的结果。其中,共以8个样本进行提取对比:第1至第8泳道为Qiagen试剂盒提取的结果,第9泳道为100bpMarker,第10至第17泳道为自动提取仪的提取结果。
具体实施方式
以下将结合实施例和附图对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果进行清楚、完整地描述,以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然,所描述的实施例只是本发明的一部分实施例,而不是全部实施例,基于本发明的实施例,本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例,均属于本发明保护的范围。
参照图1,本发明为一种提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪,包括提取仪的舱体15及在舱体15内底座上设置的用于提取单组织样本核酸的试管筒7,试管筒7包含8孔试管,正对试管筒的尾端设有微小孔装置10和用于发射紫外光测OD值的紫外光装置11。
此提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪通过试管筒7实现单组织样本核酸的提取,并且可以在提取完样本后,通过紫外光装置11对提取的核酸进行测OD值,显示核酸浓度,更方便核酸后续的使用,具有效率高、成本低、重复性好、稳定性强等特点。
作为本发明优选的实施方式,试管筒7包括依次排列的第一孔试管71、第二孔试管72、第三孔试管73、第四孔试管74、第五孔试管75、第六孔试管76、第七孔试管77及第八孔试管78。
作为本发明优选的实施方式,第一孔试管71用于放置环保脱蜡剂,第二孔试管72内设有AL溶液和磁珠,第三孔试管73内设有洗涤液Ⅰ,第四孔试管74内设有洗涤液Ⅱ,第五孔试管75内设有洗涤液Ⅱ,第八孔试管78内设有洗脱液。
作为本发明优选的实施方式,各试管底部均设有用于提高试管内液体温度的加热装置9或者至少在第一孔试管71底部设有加热装置91和第八孔试管78底部设有加热装置92。
作为本发明优选的实施方式,试管筒7通过固定框8固定,在固定框8上设有与试管筒7相匹配的卡位。
作为本发明优选的实施方式,舱体15内还设置磁铁移动装置13,磁铁移动装置13设有旋转头131,且旋转头带有有磁性的磁芯,套上磁套棒后的旋转头,用于旋转混匀液体和转移磁珠。
旋转头131套上磁棒套。
作为本发明优选的实施方式,磁铁移动装置13包括X轴水平移动臂132、Y轴水平移动臂133及Z向垂直运动臂134, 旋转头131通过X向水平运动臂132、Y轴水平移动臂133及Z向垂直运动臂134可向X向、Y向、Z向运动。
作为本发明优选的实施方式,舱体15内还设置有用于移动吸枪头的吸头移动装置12,吸取的枪头用于移动各试管中的液体并通过吹打混匀液体。
作为本发明优选的实施方式,吸引头移动装置12包括X向水平运动臂121、Y向水平运动臂122及Z向垂直运动臂123,所述吸取的枪头通过X向水平运动臂121、Y向水平运动臂121及Z向垂直运动臂123可向X向、Y向、Z向运动。
作为本发明优选的实施方式,舱体15内还设有枪头放置区1、蛋白酶K放置区2、无水乙醇放置区3、磁套棒放置区4、ATL溶液放置区5、弃置区6和微小孔装置14,舱体15设有安全门14。
本发明优选实施例:试管筒一共设有八孔试管,分别是第一孔试管71、第二孔试管72、第三孔试管73、第四孔试管74、第五孔试管75、第六孔试管76、第七孔试管77及第八孔试管78。其中第一孔试管71用于放置环保脱蜡剂,第二孔试管72内设有AL溶液和磁珠,第三孔试管73内设有洗涤液Ⅰ,第四孔试管74内设有洗涤液Ⅱ,第五孔试管75内设有洗涤液Ⅱ,第八孔试管78内设有洗脱液,第六孔试管76和第七孔试管77作为备用暂时不使用。第一孔试管71底部设有加热装置91及第八孔试管78底部设有加热装置92,可以在提取的过程中加热。固定框8设有卡位,可以将试管筒卡住。
将组织样本加入到试管筒7的第一孔试管71中,再将试管筒7放到固定框8中卡好。
磁套棒装置13的旋转头131从磁棒套放置区4套上磁套棒,并运动到试管筒7的第一孔试管,旋转头131进行旋转脱蜡,同时加热装置91开始预设温度的加热。
脱蜡完毕后,磁套棒装置回到原位,吸头移动装置12运动到枪头放置区1吸取枪头,再运行到试管筒7的第一孔试管71,吸取孔内液体,运行到弃置区,连枪头一起丢弃,且加热装置91停止加热,。
吸头移动装置121运动到枪头放置区1吸取枪头,再运行到ATL溶液放置区5,吸取ATL溶液后,移动到试管筒7的第一孔试管71,将ATL溶液打进孔内并吹打混匀,再运行到弃置区,丢弃枪头,然后回到原位。
吸头移动装置12运动到枪头放置区1吸取枪头,再运行到蛋白酶K放置区2,吸取蛋白酶K溶液后,移动到试管筒7的第一孔试管71,将蛋白酶K溶液打进孔内并吹打混匀,再运行到弃置区,丢弃枪头,然后回到原位。
套上磁套棒的旋转头131移动到试管筒7的第一孔试管71,开始旋转混匀,进行组织样本的第一次裂解,同时加热装置91开始预设温度的加热。
组织样本的第一次裂解结束后,加热装置91停止加热,套上磁套棒的旋转头131回到原位。
吸头移动装置12运动到枪头放置区1吸取枪头,再运行到试管筒7的第二孔试管72并吹打混匀AL溶液和磁珠,然后吸取AL溶液和磁珠,移动到试管筒7的第一孔试管71,将其打进孔内并吹打混匀,再运行到弃置区,丢弃枪头,然后回到原位。
套上磁套棒的旋转头131移动到试管筒7的第一孔试管71,开始旋转混匀,进行组织样本的第二次裂解,同时加热装置91开始预设温度的加热。
组织样本的第二次裂解结束后,加热装置91停止加热,套上磁套棒的旋转头131回到原位,吸头移动装置12运动到枪头放置区1吸取枪头,再运行到无水乙醇放置区3,吸取无水乙醇后,移动到试管筒7的第一孔试管71,将其打进孔内并吹打混匀,再运行到弃置区,丢弃枪头,然后回到原位。
套上磁套棒的旋转头131移动到试管筒7的第一孔试管71,开始旋转混匀后,磁芯下降,将磁珠吸住在磁套棒底部,运行到试管筒7的第三孔试管73;磁芯上升,开始旋转混匀,将磁珠洗脱到试管筒7的第三孔试管73中并进行洗涤液Ⅰ的洗涤。
洗涤液Ⅰ的洗涤结束后,磁芯下降将磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋转头131运行到试管筒7的第四孔试管74,磁芯上升,开始旋转混匀,将磁珠洗脱到试管筒7的第四孔试管74中并进行洗涤液Ⅱ的第一次洗涤。
洗涤液Ⅱ的第一次洗涤结束后,磁芯下降将磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋转头131运行到试管筒7的第五孔试管75,磁芯上升,开始旋转混匀,将磁珠洗脱到试管筒7的第五孔试管75中并进行洗涤液Ⅱ的第二次洗涤。
洗涤液Ⅱ的第二次洗涤结束后,磁芯下降将磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋转头131运行到试管筒7的第八孔试管78,磁芯上升,磁套棒进行旋转混匀,将磁珠洗脱到试管筒7的第八孔试管78中并进行洗脱液的洗脱,同时加热块92开始预设温度的加热。
洗脱液的洗脱结束后,加热块92停止加热,磁芯下降将磁珠吸住在磁套棒底部;套上磁套棒的旋转头131运行到试管筒7的第四孔试管74,磁芯上升,磁套棒进行旋转混匀,将磁珠洗脱到试管筒7的第四孔试管74中,再运行到弃置区将磁套棒丢弃,接着回到原位。
吸头移动装置12运动到枪头放置区1吸取,再运行到试管筒7的第八孔试管78,吸取5μl提取得到的核酸,再运行到微小孔装置10,将核酸打进微小孔中;接着运行到弃置区6,丢弃枪头,再运行回原位。
紫外光装置11开始测核酸OD,得到核酸浓度。
整个提取流程结束,试管筒7的第八孔试管78中提取好的核酸可立即使用或移至-20℃保存。
以8份组织为样本,一份为二,同时用核酸自动提取仪和Qiagen公司的QIAampDNA Blood Mini Kit (50)-货号51104试剂盒进行提取对比,其提取的核酸的浓度如下表1所示:
从图2和表1的结果中可以肯定自动提取仪的提取效率。
本发明可以快速提取动植物的石蜡组织、新鲜组织等组织样品中的DNA 和RNA,广泛的应用于医疗、司法、高校、质量监督、试剂公司、疾控中心、研究所等领域。
当然,本发明创造并不局限于上述实施方式,熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可做出等同变形或替换,这些等同的变形或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (10)

1.一种提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪,其特征在于:包括提取仪的舱体(15)及在所述舱体(15)内底座上设置的用于放置提取单组织样本核酸试管筒(7)的固定框(8),所述试管筒(7)包含8孔试管,正对着所述试管筒的尾端设有微小孔装置(10)和用于发射紫外光测OD值的紫外光装置(11)。
2.根据权利要求1所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:所述试管筒(7)包括依次排列的第一孔试管(71)、第二孔试管(72)、第三孔试管(73)、第四孔试管(74)、第五孔试管(75)、第六孔试管(76)、第七孔试管(77)及第八孔试管(78)。
3.根据权利要求2所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:所述第一孔试管(71)用于放置环保脱蜡剂,所述第二孔试管(72)内设有AL溶液和磁珠,所述第三孔试管(73)内设有洗涤液Ⅰ,所述第四孔试管(74)内设有洗涤液Ⅱ,所述第五孔试管(175)内设有洗涤液Ⅱ,所述第八孔试管(78)内设有洗脱液。
4.根据权利要求2所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:各所述试管底部均设有用于提高试管内液体温度的加热装置(9)或者至少在第一孔试管(71)底部设有加热装置(91)、第八孔试管(78)底部设有加热装置(92)。
5.根据权利要求2所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:所述试管筒(7)通过固定框(8)固定,在所述固定框(8)上设有与试管筒(7)相匹配的卡位。
6.根据权利要求3所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:所述舱体(15)内还设置磁铁装置(13),所述磁铁装置(13)设有旋转头(131),且旋转头带有有磁性的磁芯,套上磁套棒后的旋转头,用于旋转混匀液体和转移磁珠。
7.根据权利要求4所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:所述磁铁装置(13)包括X方向水平运动臂(132)、Y方向水平运动臂(133)及Z向垂直运动臂(134),所述旋转头(131)通过X向水平运动臂(132)、Y方向水平运动臂(133)及Z向垂直运动臂(134)可向X向、Y向、Z向运动。
8.根据权利要求1~7中任意一项所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪,其特征在于:所述舱体(15)内还设置有用于移动枪头的吸头移动装置(12),所述吸头移动装置(12)通过吸取枪头用于移动各试管中的液体并通过吹打混匀液体。
9.根据权利要求8所述提取单样本核酸以及测OD值的提取仪 ,其特征在于:所述吸头移动装置(12)包括X向水平运动臂(121)、Y向水平运动臂(122)及Z向垂直运动臂(123),所述吸头移动装置(12)通过吸取枪头,然后通过X向水平运动臂(121)、Y向水平运动臂(122)及Z向垂直运动臂(123)可向X向、Y向、Z向运动。
10.根据权利要求1所述提取单组织样本核酸以及测OD值的自动提取仪 ,其特征在于:所述舱体(15)内还设有枪头放置区(1)、蛋白酶K放置区(2)、无水乙醇放置区(3)、磁棒套放置区(4)、ATL溶液放置区(5)、弃置区(6)和微小孔装置(10),所述舱体(15)设有安全门(14)。
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