CN106913712B - 一种具有抗血栓作用的藏药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗血栓作用的藏药组合物，在八味沉香丸基础上，增减配方药材，针对性加强了其对血栓性疾病的预防治疗效果。本发明通过体外、体内抗血栓实验发现，传统藏药八味沉香丸去掉乳香和石灰华后仍有较强的抗血栓效果，继续增加荜茇、阿魏、野牛心，尤其增加槟榔后抗血栓效果提升显著，明显优于八味沉香丸。

Description

一种具有抗血栓作用的藏药组合物

技术领域

本发明涉及一种具有抗血栓作用的藏药组合物，属于医药领域。

背景技术

血栓形成是目前心脑血管疾病的最主要原因之一，预防、减缓血栓形成可以大大减少中风等疾病的形成。目前对于血栓形成的药物治疗，主要有化药、生物酶解等，但其昂贵的费用和毒副作用一直备受诟病。传统的中药、藏药在血栓性疾病的治疗上效果明确，临床使用越来越多。

八味沉香丸为传统藏药，具有清心热、养心、安神、开窍功效。用于热病攻心，神昏谵语；主要用于心脏病，如冠心病、心绞痛的治疗。文献《八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响_》初步揭示了八味沉香配方具有一定抗血栓作用，本发明继续研究发现，在八味沉香配方基础上，部分配方药材增减替换形成的新组方体外、体内抗血栓效果更佳。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种具有抗血栓作用的藏药组合物。

本发明的技术方案如下：

一种具有抗血栓作用的藏药组合物，重量份组成如下：

沉香80-120份、肉豆蔻80-120份、广枣80-120份、木香160-200份、煨诃子80-120份、木棉花60-110份。

根据本发明优选的，所述藏药组合物，还包括荜茇10-20份、阿魏2-7份、野牛心8-12份；

进一步优选的，所述藏药组合物，包括荜茇10-20份、阿魏2-7份、野牛心8-12份，还包括槟榔40-60份。

本发明提供如下更为优选的技术方案：

一种具有抗血栓作用的藏药组合物，重量份组成如下：

沉香100份、肉豆蔻100份、广枣100份、木香175份、煨诃子100份、木棉花75份；或者：

沉香80份、肉豆蔻120份、广枣80份、木香160份、煨诃子80份、木棉花110份；

优选的，所述藏药组合物，还包括荜茇15份、阿魏5份、野牛心10份；或者：荜茇10份、阿魏7份、野牛心8份；

更优选的，所述藏药组合物，包括荜茇15份、阿魏5份、野牛心10份，还包括槟榔50份。

所述的藏药组合物，包括原料药配方组成按照常规工艺进一步制备的活性提取物及其常规药学制剂。

所述的藏药组合物，包括原料药配方组成按照常规工艺制备成的乙酸乙酯提取物和/或水提物。

有益效果

本发明通过体外、体内抗血栓实验发现，传统藏药八味沉香丸去掉乳香和石灰华后仍有较强的抗血栓效果，继续增加荜茇、阿魏、野牛心，尤其增加槟榔后抗血栓效果提升显著。

附图说明

图1为各组体外对纤维蛋白溶解活性对比图；

图中横坐标为各个样品组，1-7分别表示纯水空白组、复方丹参滴丸对照组、F0—水提物组、FW—水提物组、FA—水提物组、FB—水提物组、FB—酯提物组；纵坐标为纤维蛋白溶解活性(尿激酶单位/.g样品原药材)。

具体实施方式

实验例1、抗血栓作用的体外筛选实验

1、试验材料和仪器

1.1药物及试剂

复方丹参滴丸，天津天士力制药有限公司，批号：120413；尿激酶，杭州澳亚生物技术有限公司，批号：1301166；牛纤维蛋白(sigmaF8630)；凝血酶(sigmaT4648)；PBS缓冲溶液PH7·2-7·4；北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.2仪器

立式压力蒸汽灭菌锅(LDZX-50FBS，上海申安)；台式离心机(H3，Sigma)；电热恒温鼓风干燥箱(101，上海鹏顺科学仪器有限公司)；电子恒温水浴锅(DZKW-C型，黄骅市卸甲综合电器厂)；电热恒温培养箱(上海福玛实验设备有限公司)；量尺。

2、样品准备

2.1分组

实验样品分为4组，均由基础方(简称F0)加方组成，各组具体配比如下：

A、F0组＝沉香100g、肉豆蔻100g、广枣100g、木香175g、煨诃子100g、木棉花75g

B、FW组＝F0+乳香50g+石灰华50g

C、FA组＝F0+荜茇15g+阿魏5g+野牛心10g

D、FB组＝FA+槟榔50g

2.2给药方法和剂量

各组样品分别用药材8倍重量体积的水煎煮2次，每次1h，浓缩至每1ml含2g药材；其中FB组增加乙酸乙酯提取物组(简称FB-酯组)，即用8倍重量体积的乙酸乙酯加热提取2次，每次1h，浓缩至每1ml含2g药材，备用。

3、试验方法

3.1纤维蛋白平板的制备

取直径9cm无菌培养皿，置于超净工作台，向其加入0.5ml凝血酶(30BP/mL)铺满整个平板，然后加入预热的37℃纤维蛋白原溶液15ml，轻轻快速振荡混匀，静置30min，使之凝固成纤维蛋白平板，然后室温静置过夜，现用现配以防污染。

3.2试剂配制

牛纤维蛋白粉溶液的配制：取牛纤维蛋白原粉适量，用PH7·4的PBS溶液溶解，制成2.5mg/ml纤维蛋白原溶液。

凝血酶原粉：先用甘油和水各0.5ml混匀后溶解凝血酶，然后各取15μl分装-20℃保存，使用时用上述PBS溶液稀释至500μl，制成浓度为30U/ml的溶液。

3.3供试品溶液和阳性对照药的制备

供试品溶液：取前述各组样品提取液各5ml加纯水15mL超声处理30min，离心，过滤，取上清液待用。

阳性对照药：(1)复方丹参滴丸，取复方丹参滴丸20粒加水10mL溶解。

(2)尿激酶80IU/mL、60IU/mL、30IU/mL、20IU/mL、10IU/mL.

3.4各组样品溶栓酶活性的测定

取预先制备好的纤维蛋白平板，用微量加样器分别吸取纯水及各样品上清液20μL点在平板的不同位置，加盖；另取5个平板，分别吸取上述5个浓度的尿激酶样品点在平板的不同位置，加盖；所有平板置于37℃恒温培养箱中，每间隔1小时观察溶栓情况。12小时后取出，用量尺测量溶圈直径。

其中尿激酶平板数据整理后，绘制尿激酶的浓度-活性曲线。

3.5分组

每个样品平板均分别设试验组﹑纯水空白组和阳性对照组，以保证结果的可靠性和一致性。

4、试验结果与分析

4.1分析方法

所有数据以x±SD表示，采用SPSS17.0进行单因素方差及LSD统计分析，P<0.05为差异显著。

4.2实验结果

各组样品溶栓活性、纤维蛋白溶解活性结果见表1和图1，所得尿激酶的浓度-活性曲线为：

Y(活性单位，IU/mL)＝4.1576X(溶圈直径，mm)-27.5632(R＝0.9789)。

表1各组样品溶栓活性、纤维蛋白溶解活性结果

(

n＝5，其中纤维蛋白溶解活性单位为尿激酶单位/g样品原药材)

注：与阴性对照作对比，▲P＜0.01；

与阳性对照作对比，★P＜0.05；

与FW作对比，●P＜0.05，●●P＜0.01。

结果：表1表明，F0、FW、FA、FB—水、FB—酯各组样品都有纤溶活性，且均强于对照药复方丹参滴丸；基础方F0组与FW组无显著性差异；FA、FB均显著强于FW，尤其FB-水提物组差异极显著(P＜0.01)，表明基础方即有显著纤溶活性，增加乳香50g+石灰华50g(即八味沉香制剂配方)效果有提高趋势，但不显著，基础方增加荜茇15g、阿魏5g、野牛心10g，尤其增加槟榔50g，差异尤其显著，提示荜茇、阿魏、野牛心，尤其槟榔对溶栓活性有显著增强作用。FB的2种提取物，即水提物、乙酸乙酯提取物效果比较，反而水提物效果更佳，提示在抗血栓作用的药效基础偏于水溶性。

上述结果对临床常见的血栓性疾病的用药提供试验依据。

实验例2、对电刺激诱导的大鼠体内血栓形成的影响

一、试剂样品

复方丹参滴片，吉林金麦通制药有限公司，国药准字Z22025356；各样品组试液稀释至每1mL含0.2g原药材，同实验例1。BT87-Ⅲ型体内血栓形成测定仪,包头医学院心血管研究室。

二、动物及分组

取健康雌性Wistar大鼠70只，体重180-220g，适应性饲养3d，随机分为：空白组——灌胃给予等体积生理盐水；5个样品组，分别为F0组、FW组、FA组、FB-水组及FB-酯组——各样品组分别灌胃给予相应样品，剂量2g原药材/kg体重；阳性对照药组——灌胃给予复方丹参片水混悬液0.3g/kg体重(临用前现配置成每1mL含0.03g复方丹参片)。

各组均按1ml/100mg体重灌胃给药，连续给药14天，最后一天给药24h后，ip3％戊巴比妥钠麻醉，分离右侧颈动脉15mm，将BT87-Ⅲ型实验性血栓形成测定仪的刺激电极和温度传感器探头钩于动脉上，近心端置刺激电极，远心端置温度传感器。电刺激之前先用棉签蘸取生理盐水涂抹电极及动脉。刺激电流为1.5mV，刺激时间为7分钟。从刺激开始至仪器报警并自动记录时间，即血栓形成时间(OT)。以OT值和延长率作为判断药效的指标。延长率＝(给药组血栓形成时间-空白组血栓形成时间)/空白组血栓形成时间×100％。

表2各组样品对实验大鼠体内血栓形成的影响(

n＝10)

注：与阴性对照作对比，▲P＜0.01；

与阳性对照作对比，★P＜0.05；

与FW作对比，●P＜0.05，●●P＜0.01。

三、实验结果

上述结果表明，本发明的药物组合物对对电刺激诱导的大鼠体内血栓形成的影响显著，各组配方均不弱于对照药复方丹参滴丸；基础方F0组、FA与FW组无显著性差异；FB则显著强于FW，尤其FB-乙酸乙酯提物组差异极显著(P＜0.01)，表明基础方即有体内抗血栓活性，增加乳香50g+石灰华50g(即八味沉香制剂配方)效果有提高趋势，但不显著，基础方增加荜茇15g、阿魏5g、野牛心10g，再增加槟榔50g，效果提升显著，并且脂溶性的乙酸乙酯提取物效果尤其显著，提示荜茇、阿魏、野牛心、槟榔对体内抗血栓活性有显著增强作用，水提物、乙酸乙酯提取物均有效，但乙酸乙酯提取物效果更佳。

以下实施例用以进一步说明本发明，但并不对本发明构成任何限制。

实施例1、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香100g、肉豆蔻100g、广枣100g、木香175g、煨诃子100g、木棉花75g、荜茇15g、阿魏5g、野牛心10g、槟榔50g；将上述配方药材加入药材8倍重量体积的水煎煮2次，每次1h，浓缩至干得水提物。

实施例2、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香100g、肉豆蔻100g、广枣100g、木香175g、煨诃子100g、木棉花75g、荜茇15g、阿魏5g、野牛心10g、槟榔50g；将上述配方药材加入8倍重量体积的乙酸乙酯加热提取2次，每次1h，浓缩至干得乙酸乙酯提取物。

实施例3、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香80份、肉豆蔻120份、广枣80份、木香160份、煨诃子80份、木棉花110份。

实施例4、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香100g、肉豆蔻100g、广枣100g、木香175g、煨诃子100g、木棉花75g、荜茇15g、阿魏5g、野牛心10g。

实施例5、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香120g、肉豆蔻120g、广枣120g、木香160g、煨诃子100g、木棉花110g、荜茇10g、阿魏2g、野牛心8g，将上述配方药材常规水提后加入常规辅料进一步制成片剂。

实施例6、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香100g、肉豆蔻100g、广枣120g、木香200g、煨诃子100g、木棉花60g、荜茇20g、阿魏7g、野牛心12g。

实施例7、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香100g、肉豆蔻100g、广枣110g、木香160g、煨诃子100g、木棉花110g、荜茇20g、阿魏7g、野牛心12g、槟榔40份，将上述配方药材常规水提后加入常规辅料进一步制成胶囊。

实施例8、一种具有抗血栓作用的藏药组合物，组成如下：

沉香120g、肉豆蔻100g、广枣110g、木香160g、煨诃子80g、木棉花80g、荜茇20g、阿魏7g、野牛心12g、槟榔60份。

Claims (6)

1.一种具有抗血栓作用的藏药组合物，其特征在于，重量份组成如下：

沉香80-120份、肉豆蔻80-120份、广枣80-120份、木香160-200份、煨诃子80-120份、木棉花60-110份；

该藏药组合物原料药配方组成按照常规工艺制备成的乙酸乙酯提取物或水提物。

2.一种具有抗血栓作用的藏药组合物，其特征在于，重量份组成如下：

沉香80-120份、肉豆蔻80-120份、广枣80-120份、木香160-200份、煨诃子80-120份、木棉花60-110份、荜茇10-20份、阿魏2-7份、野牛心8-12份；

该藏药组合物原料药配方组成按照常规工艺制备成的乙酸乙酯提取物或水提物。

3.一种具有抗血栓作用的藏药组合物，其特征在于，重量份组成如下：

沉香80-120份、肉豆蔻80-120份、广枣80-120份、木香160-200份、煨诃子80-120份、木棉花60-110份、荜茇10-20份、阿魏2-7份、野牛心8-12份、槟榔40-60份；

该藏药组合物原料药配方组成按照常规工艺制备成的乙酸乙酯提取物或水提物。

4.根据权利要求1所述的藏药组合物，其特征在于，沉香100份、肉豆蔻100份、广枣100份、木香175份、煨诃子100份、木棉花75份；或者：

沉香80份、肉豆蔻120份、广枣80份、木香160份、煨诃子80份、木棉花110份。

5.根据权利要求2所述的藏药组合物，其特征在于，荜茇15份、阿魏5份、野牛心10份；或者：荜茇10份、阿魏7份、野牛心8份。

6.根据权利要求3所述的藏药组合物，其特征在于，槟榔50份。