CN106872460A - 一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒 - Google Patents

一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN106872460A
CN106872460A CN201710133415.XA CN201710133415A CN106872460A CN 106872460 A CN106872460 A CN 106872460A CN 201710133415 A CN201710133415 A CN 201710133415A CN 106872460 A CN106872460 A CN 106872460A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ochratoxin
sequence
detection
collaurum
detection kit
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710133415.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN106872460B (zh
Inventor
陈俊华
李定强
陈曼佳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Eco Environmental and Soil Sciences of Guangdong Academy of Sciens
Original Assignee
Guangdong Institute of Eco Environmental Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Institute of Eco Environmental Science and Technology filed Critical Guangdong Institute of Eco Environmental Science and Technology
Priority to CN201710133415.XA priority Critical patent/CN106872460B/zh
Publication of CN106872460A publication Critical patent/CN106872460A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106872460B publication Critical patent/CN106872460B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开一种赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒。本发明以赭曲霉素A的核酸适体为分子识别元件，如果待检测体系中含有赭曲霉素A时，通过赭曲霉素A的激活，形成具有催化功能的核酸，可不断循环切割底物序列，达到信号放大的目的。结合胶体金颜色变化，可实现肉眼直接观察来检测赭曲霉素A。本发明具有较高的灵敏度，对赭曲霉素A的检测限为10 pg/mL，检测具有很好的特异性，常见干扰物对检测不产生影响。本发明以胶体金为信号报告分子，检测结果直接肉眼可见，无需使用任何检测仪器，操作简单，成本低廉，适于大范围应用于基层筛查赭曲霉素A污染情况。

Description

一种赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒
技术领域
本发明属于生物毒素检测领域，涉及一种赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒。
背景技术
赭曲霉素A（Ochratoxin A，OTA）是一类真菌毒素，是曲霉素和青霉素的某些菌种产生的有毒代谢产物，具有很强的致畸、致癌、致突变性，广泛存在于各种食物中，包括谷类、豆类及豆制品、干果、咖啡及咖啡豆和酒类等。
鉴于赭曲霉素A的危害性和广泛分布，发展一种快速、灵敏的检测赭曲霉素A的方法在食品安全和环境健康等方面具有重要的意义。传统的检测方法主要包括薄层层析法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和质谱法等，但这些方法所使用仪器昂贵，费时，对样品的预处理时间长，难以实现快速检测。因此，迫切需要建立一种新型赭曲霉素A检测方法，并使检测过程无需使用检测仪器，简化操作，缩减成本，便于携带，以实现现场分析和高通量筛查。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明的目的在于利用具有催化功能的核酸循环放大信号，建立一种可视化赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒。
本发明所采取的技术方案是：
一种赭曲霉素A的检测试剂盒，包括以下成分：
茎环结构核酸序列H1：具有A 区域、B 区域和C区域，其中A是赭曲霉素A的核酸适体，能与赭曲霉素A特异性结合；B是具有催化功能的核酸序列，C与A的部分序列互补，形成茎环结构的茎结构；此时，B位于茎环结构的环结构中，其催化功能被抑制；在H1溶液中加入赭曲霉素A；赭曲霉素A与H1的A相互作用，打开H1的茎环结构，使H1的B暴露出来，形成具有催化功能的核酸；
底物序列H2：具有D 区域、识别位点和E区域，其中识别位点的核酸为TrAG，被B识别和切割，其中切割位点为rA；D和E临接识别位点的区域中各有至少6个碱基与H1的B互补，D和E远离识别位点的区域至少有6个碱基互补，形成茎环结构的茎结构；
F序列修饰的胶体金1：F序列与胶体金之间通过连接臂连接，F与E的一端互补；
G序列修饰的胶体金2：G序列与胶体金之间通过连接臂连接，G与E的另一端互补；
缓冲液中含有Mg2+和Ca2+。
其中，只有Mg2+存在，核酸才能发挥催化功能。只有Ca2+存在，赭曲霉素A才能与核酸适体相互作用。
优选的，H1茎环结构中，C与A的部分序列互补，互补的碱基数为8-11个，形成茎结构。
优选的，H1茎环结构中，C与A的部分序列互补，互补的碱基数为9个，形成茎结构。
优选的，H2茎环结构中，D和E互补的碱基数为6-10个，进一步优选为8个。
优选的，D区域的碱基数为16-22个。
优选的，D区域的碱基数为18个。
优选的，E区域的碱基数为18-22个。
优选的，E区域的碱基数为20个。
优选的，D和E临接识别位点的区域中与H1的B互补的碱基数为6-8个。
优选的，F和G与胶体金之间的连接臂序列为AAAAAA，连接臂末端通过巯基SH与胶体金相连。
其中AAAAAA可以防止胶体金的空间位阻效应影响核酸杂交。
优选的，F和G的碱基数为9-12个。
优选的，缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 包括下列成分120 mM NaCl, 5 mMKCl, 20 mM CaCl2，15 mM MgCl2。
优选的，所述的检测试剂盒包括下列成分：
茎环结构核酸序列H1：3'-ACAGGCTACGAGGGAAATGCGGTGGGTGTGGGCTAG-TCTCATTGTACCCAC TTGGACCAATTAGCGACTATAG-CTAGCCCAC-5'（SEQ ID NO：1）；
底物序列H2：5'-GCTGGACTATTCAGAGTA-TrAG-GATATCTAACTGAGTCCAGC-3'（SEQ ID NO：2）；
F序列修饰的胶体金1，其核酸序列为：3'-SH-AAAAAA-CTATAGATTG-5'（SEQ ID NO：3）；
G序列修饰的胶体金2，其核酸序列为：5'-SH-AAAAAA-GCTGGACTCA-3'（SEQ ID NO：4）；
缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 包括下列成分120 mM NaCl, 5 mM KCl, 20 mMCaCl2，15 mM MgCl2。
一种赭曲霉素A的检测方法，是利用前面任一项所述的检测试剂盒来进行赭曲霉素A的检测。
在H1溶液中加入待测溶液，如果待测溶液中存在赭曲霉素A；赭曲霉素A与H1的A相互作用，打开H1的茎环结构，使H1的B暴露出来，形成具有催化功能的核酸。
在反应体系中加入底物H2，H1的B在H2的识别位点（rA）切割底物H2，使H2的D和E序列分离。同时H1又可以循环进入下一轮的切割反应，不断切割H2，不断使H2的D和E序列分离。
加入F序列修饰的胶体金1（AuNPs1）和G序列修饰的胶体金2（AuNPs2），E序列与F和G互补，从而拉近AuNPs1和AuNPs2的距离，使红色的胶体金变成蓝色。通过观察颜色变化即可达到检测赭曲霉素A的目的。
如果体系中没有赭曲霉素A，催化功能的核酸序列无法暴露，H2无法被切割，胶体金无法变色。
本发明的有益效果是：
本发明通过赭曲霉素A的激活，形成具有催化功能的核酸，可不断循环切割底物序列，达到信号放大的目的。结合胶体金颜色变化，可实现肉眼直接观察来检测赭曲霉素A。
本发明具有较高的灵敏度，对赭曲霉素A的检测限为10 pg/mL，检测具有很好的特异性，常见干扰物对检测不产生影响。
本发明操作简单，无需任何检测仪器，检测结果直接肉眼可见，成本低廉，经济便宜，响应迅速，适于大范围应用于基层筛查赭曲霉素A污染情况。
附图说明
图1为本发明所述检测方法原理图；
图2为对不同浓度赭曲霉素A检测结果图；
图3为特异性实验结果图。
具体实施方式
一种赭曲霉素A的检测试剂盒，包括以下成分：
茎环结构核酸序列H1：具有A 区域、B 区域和C区域，其中A是赭曲霉素A的核酸适体，能与赭曲霉素A特异性结合；B是具有催化功能的核酸序列，C与A的部分序列互补，形成茎环结构的茎结构；此时，B位于茎环结构的环结构中，其催化功能被抑制；在H1溶液中加入赭曲霉素A；赭曲霉素A与H1的A相互作用，打开H1的茎环结构，使H1的B暴露出来，形成具有催化功能的核酸；
底物序列H2：具有D 区域、识别位点和E区域，其中识别位点的核酸为TrAG，被B识别和切割，其中切割位点为rA；D和E临接识别位点的区域中各有至少6个碱基与H1的B互补，D和E远离识别位点的区域至少有6个碱基互补，形成茎环结构的茎结构；
F序列修饰的胶体金1：F序列与胶体金之间通过连接臂连接，F与E的一端互补；
G序列修饰的胶体金2：G序列与胶体金之间通过连接臂连接，G与E的另一端互补；
缓冲液中含有Mg2+和Ca2+。
其中，只有Mg2+存在，核酸才能发挥催化功能。只有Ca2+存在，赭曲霉素A才能与核酸适体相互作用。
优选的，H1茎环结构中，C与A的部分序列互补，互补的碱基数为8-11个，形成茎结构。
优选的，H1茎环结构中，C与A的部分序列互补，互补的碱基数为9个，形成茎结构。
优选的，H2茎环结构中，D和E互补的碱基数为6-10个，进一步优选为8个，形成茎结构。
优选的，D区域的碱基数为16-22个。
优选的，D区域的碱基数为18个。
优选的，E区域的碱基数为18-22个。
优选的，E区域的碱基数为20个。
优选的，D和E临接识别位点的区域中与H1的B互补的碱基数为6-8个。
优选的，F和G与胶体金之间的连接臂序列为AAAAAA，连接臂末端通过巯基SH与胶体金相连。
其中AAAAAA可以防止胶体金的空间位阻效应影响核酸杂交。
优选的，F和G的碱基数为9-12个。
优选的，缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 包括下列成分120 mM NaCl, 5 mMKCl, 20 mM CaCl2，15 mM MgCl2。
优选的，所述的检测试剂盒包括下列成分：
茎环结构核酸序列H1：3'-ACAGGCTACGAGGGAAATGCGGTGGGTGTGGGCTAG-TCTCATTGTACCCAC TTGGACCAATTAGCGACTATAG-CTAGCCCAC-5'（SEQ ID NO：1）；
底物序列H2：5'-GCTGGACTATTCAGAGTA-TrAG-GATATCTAACTGAGTCCAGC-3'（SEQ ID NO：2）；
F序列修饰的胶体金1，其核酸序列为：3'-SH-AAAAAA-CTATAGATTG-5'（SEQ ID NO：3）；
G序列修饰的胶体金2，其核酸序列为：5'-SH-AAAAAA-GCTGGACTCA-3'（SEQ ID NO：4）；
缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 包括下列成分120 mM NaCl, 5 mM KCl, 20 mMCaCl2，15 mM MgCl2。
一种赭曲霉素A的检测方法，是利用前面任一项所述的检测试剂盒来进行赭曲霉素A的检测。
在H1溶液中加入待测溶液，如果待测溶液中存在赭曲霉素A；赭曲霉素A与H1的A相互作用，打开H1的茎环结构，使H1的B暴露出来，形成具有催化功能的核酸。
在反应体系中加入底物H2，H1的B在H2的识别位点（rA）切割底物H2，使H2的D和E序列分离。同时H1又可以循环进入下一轮的切割反应，不断切割H2，不断使H2的D和E序列分离。
加入F序列修饰的胶体金1（AuNPs1）和G序列修饰的胶体金2（AuNPs2），E序列与F和G互补，从而拉近AuNPs1和AuNPs2的距离，使红色的胶体金变成蓝色。通过观察颜色变化即可达到检测赭曲霉素A的目的。
如果体系中没有赭曲霉素A，催化功能的核酸序列无法暴露，H2无法被切割，胶体金无法变色（反应原理见图1）。
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
实施例1
一种赭曲霉素A的检测方法按照如下步骤进行：
（1）用缓冲液（10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 120 mM NaCl, 5 mM KCl, 20 mM CaCl2,15 mMMgCl2）充分溶解H1（500 nM），加入不同浓度的赭曲霉素A，充分混匀，室温反应30分钟。
（２）加入H2，充分混匀，室温反应90分钟。
（３）同时加入AuNPs1和AuNPs2，充分混匀，室温放置15分钟，观察颜色变化。通过颜色变化判断检测体系中是否存在赭曲霉素A。
实施例2
一种赭曲霉素A的检测试剂盒包括以下成分：
（１）茎环结构序列H1，序列如下：
H1：3'-ACAGGCTACGAGGGAAATGCGGTGGGTGTGGGCTAG（A）-TCTCATTGTACCCACTTGGACCAATTAGCGACTATAG（B）-CTAGCCCAC（C）-5'（SEQ ID NO：1）；
（２）底物序列H2，序列如下：
H2: 5'-GCTGGACTATTCAGAGTA（D）-TrAG-GATATCTAACTGAGTCCAGC（E）-3'（SEQ ID NO：2）；
（３）F序列修饰的胶体金1（AuNPs1）：
AuPNs1: 3'-SH-AAAAAA-CTATAGATTG（F）-5'（SEQ ID NO：3）；
（４）G序列修饰的胶体金2（AuNPs2）：
AuPNs2: 5'-SH-AAAAAA-GCTGGACTCA（G）-3'（SEQ ID NO：4）；
（５）缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 120 mM NaCl, 5 mM KCl, 20 mM CaCl2，15mM MgCl2。
实施例3
对不同浓度赭曲霉素A的检测：
配制赭曲霉素A标准溶液，浓度分别为10 pg/mL，100 pg/mL，1 ng/mL，10 ng/mL和100ng/mL，4℃避光保存。
将不同浓度的赭曲霉素A溶液分别加到实施例1中所述的反应体系中，充分反应后观察实验结果，如图2所示，10 pg/mL的赭曲霉素A可产生明显的蓝色变化，说明其检测限为10 pg/mL。随着赭曲霉素A浓度的增加，蓝色强度增加，并逐渐趋于饱和。
实施例4
特异性实验：
配制浓度为100 ng/mL的不同干扰物标准溶液，分别是赭曲霉素B，黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素M1，玉米赤霉烯酮和双酚A。
将100 ng/mL的不同干扰物标准溶液和1 npg/mL 赭曲霉素A标准溶液分别加到实施例1中所述的反应体系中，充分反应后观察颜色变化，如图3所示，100 ng/mL的赭曲霉素B，黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素M1，玉米赤霉烯酮和双酚A仍然保持红色，对检测不产生影响。只有当加入赭曲霉素A后才会产生蓝色变化，这证明该方法对赭曲霉素A的检测具有很好的特异性。
实施例5
回收率实验：
在玉米样品中添加不同浓度的OTA标准品（100 pg/mL，1 ng/mL, 10 ng/mL），充分混匀后用实施例1中所述的方法进行检测，检出浓度分别为96 pg/mL，0.94 ng/mL, 10.3 ng/mL，对应的回收率分别为96%、94%以及103%，回收率范围为94%-103%，能满足实际样品检测需求。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 广东省生态环境技术研究所
<120> 一种赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒
<130>
<160> 4
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 82
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
acaggctacg agggaaatgc ggtgggtgtg ggctagtctc attgtaccca cttggaccaa 60
ttagcgacta tagctagccc ac 82
<210> 2
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
gctggactat tcagagtatr aggatatcta actgagtcca gc 42
<210> 3
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
aaaaaactat agattg 16
<210> 4
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
aaaaaagctg gactca 16

Claims (10)

1.一种赭曲霉素A的检测试剂盒，其特征在于，包括以下成分：
茎环结构核酸序列H1：具有A 区域、B 区域和C区域，其中A是赭曲霉素A的核酸适体，能与赭曲霉素A特异性结合；B是具有催化功能的核酸序列，C与A的部分序列互补，形成茎环结构的茎结构；
底物序列H2：具有D 区域、识别位点和E区域，其中识别位点的核酸为TrAG，被B识别和切割，D和E临接识别位点的区域中各有至少6个碱基与H1的B互补，D和E远离识别位点的区域至少有6个碱基互补，形成茎环结构的茎结构；
F序列修饰的胶体金1：F序列与胶体金之间通过连接臂连接，F与E的一端互补；
G序列修饰的胶体金2：G序列与胶体金之间通过连接臂连接，G与E的另一端互补；
缓冲液中含有Mg2+和Ca2+。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：H1茎环结构中，C与A的部分序列互补，互补的碱基数为8-11个，形成茎结构。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：H2茎环结构中，D和E互补的碱基数为6-10个。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：D区域的碱基数为16-22个。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：E区域的碱基数为18-22个。
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：F和G与胶体金之间的连接臂序列为AAAAAA，连接臂末端通过巯基SH与胶体金相连。
7.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：F和G的碱基数为9-12个。
8.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH8.5, 包括下列成分120 mM NaCl, 5 mM KCl, 20 mM CaCl2，15 mM MgCl2。
9.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：包括下列成分：
茎环结构核酸序列H1：3'-ACAGGCTACGAGGGAAATGCGGTGGGTGTGGGCTAG-TCTCATTGTACCCAC TTGGACCAATTAGCGACTATAG-CTAGCCCAC-5'；
底物序列H2：5'-GCTGGACTATTCAGAGTA-TrAG-GATATCTAACTGAGTCCAGC-3'；
F序列修饰的胶体金1，其核酸序列为：3'-SH-AAAAAA-CTATAGATTG-5'；
G序列修饰的胶体金2，其核酸序列为：5'-SH-AAAAAA-GCTGGACTCA-3'；
缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 8.5, 包括下列成分120 mM NaCl, 5 mM KCl, 20 mMCaCl2，15 mM MgCl2。
10.一种赭曲霉素A的检测方法，其特征在于：利用权利要求1-9所述任一项的检测试剂盒来进行赭曲霉素A的检测。
CN201710133415.XA 2017-03-08 2017-03-08 一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒 Active CN106872460B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710133415.XA CN106872460B (zh) 2017-03-08 2017-03-08 一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710133415.XA CN106872460B (zh) 2017-03-08 2017-03-08 一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106872460A true CN106872460A (zh) 2017-06-20
CN106872460B CN106872460B (zh) 2019-10-18

Family

ID=59169935

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710133415.XA Active CN106872460B (zh) 2017-03-08 2017-03-08 一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106872460B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107643401A (zh) * 2017-10-13 2018-01-30 广东省生态环境技术研究所 一种双酚a的检测方法及检测试剂盒
KR20210000962A (ko) * 2019-06-26 2021-01-06 서울과학기술대학교 산학협력단 플렉시블 튜브를 포함하는 물질 검출용 휴대용 키트 및 그를 이용한 물질 검출방법

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61171500A (ja) * 1985-01-23 1986-08-02 Ube Ind Ltd 抗オクラトキシンａモノクロ−ナル抗体及びこれを用いるオクラトキシン類の測定方法
US20100015608A1 (en) * 2006-02-03 2010-01-21 Dmitry Kolpashchikov Binary deoxyribozyme probes for nucleic acid analysis
CN103575713A (zh) * 2013-11-01 2014-02-12 山西大学 基于核酸适配体荧光各向异性检测赭曲霉素a的方法
CN103728451A (zh) * 2014-01-23 2014-04-16 湖南大学 一种检测赭曲霉素a的胶体金免疫试剂盒及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61171500A (ja) * 1985-01-23 1986-08-02 Ube Ind Ltd 抗オクラトキシンａモノクロ−ナル抗体及びこれを用いるオクラトキシン類の測定方法
US20100015608A1 (en) * 2006-02-03 2010-01-21 Dmitry Kolpashchikov Binary deoxyribozyme probes for nucleic acid analysis
CN103575713A (zh) * 2013-11-01 2014-02-12 山西大学 基于核酸适配体荧光各向异性检测赭曲霉素a的方法
CN103728451A (zh) * 2014-01-23 2014-04-16 湖南大学 一种检测赭曲霉素a的胶体金免疫试剂盒及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GABRIELA CASTILLO ET AL.: "Impedimetric DNA Aptasensor for Sensitive Detection of Ochratoxin A in Food", 《ELECTROANALYSIS》 *
KONRAD SZACIŁOWSKI: "《Infochemistry: Information Processing at the Nanoscale》", 17 May 2012, JOHN WILEY AND SONS LTD *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107643401A (zh) * 2017-10-13 2018-01-30 广东省生态环境技术研究所 一种双酚a的检测方法及检测试剂盒
KR20210000962A (ko) * 2019-06-26 2021-01-06 서울과학기술대학교 산학협력단 플렉시블 튜브를 포함하는 물질 검출용 휴대용 키트 및 그를 이용한 물질 검출방법
KR102240340B1 (ko) 2019-06-26 2021-04-14 서울과학기술대학교 산학협력단 플렉시블 튜브를 포함하는 물질 검출용 휴대용 키트 및 그를 이용한 물질 검출방법

Also Published As

Publication number Publication date
CN106872460B (zh) 2019-10-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Blažková et al. Immunochromatographic strip test for detection of genus Cronobacter
Mehta et al. An efficient method for qualitative screening of phosphate-solubilizing bacteria
Baldrian Microbial enzyme-catalyzed processes in soils and their analysis
CN106916822B (zh) 一种利用适配体分子开关检测黄曲霉毒素b1的方法
CN106434902B (zh) 多重pcr检测蜡样芽孢杆菌毒力基因用引物组和试剂盒及其检测方法
Yao et al. Luminol-Eu-based ratiometric fluorescence probe for highly selective and visual determination of tetracycline
CN107937480B (zh) 一种荧光生物传感器、制备方法及其检测有机磷农药的应用
CN106872460A (zh) 一种赭曲霉素a的检测方法及检测试剂盒
Leng et al. Enzymatic repairing amplification-based versatile signal-on fluorescence sensing platform for detecting pathogenic bacteria
Wu et al. Development of double loop-mediated isothermal amplification to detect Listeria monocytogenes in food
CN103725686B (zh) 黄曲霉毒素b1的核酸适体afb1-20及其应用
CN107058498B (zh) 一种检测牛、羊、猪源性成分的三重实时荧光pcr方法
CN107129989A (zh) 检测黄曲霉毒素的核酸适配体、试剂盒及其检测方法
Bancirova Black and green tea—Luminol false-negative bloodstains detection
Vujanovic et al. Orchid seed viability testing by fungal bioassays and molecular phylogeny
Lee et al. A rapid and colorimetric loop-mediated isothermal amplification (LAMP) based on HRP-mimicking molecular beacon for the detection of major 6 Listeria species in enoki mushroom
Hu et al. A new fluorescent biosensor based on inner filter effect and competitive coordination with the europium ion of non-luminescent Eu-MOF nanosheets for the determination of alkaline phosphatase activity in human serum
Lin et al. Stimulus-responsive hydrogels: A potent tool for biosensing in food safety
Lee et al. Lateral flow biosensor based on LAMP-CRISPR/Cas12a for sensitive and visualized detection of Salmonella spp.
CN110438115A (zh) 一种提高铅DNAzyme稳定性的固定化酶方法及应用
CN108424973A (zh) 一种用于rna恒温扩增检测克罗诺杆菌的引物探针、试剂盒及检测方法
CN101555529A (zh) 基于环介导等温扩增技术的单核增生李斯特菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法
CN106086206A (zh) 绿色魏斯氏菌环介导恒温基因扩增快速检测试剂盒及检测方法
CA2419254C (en) Compositions and methods for detecting target microorganisms in a sample
CN104965074A (zh) 一种免标记胶体金比色法用于银离子的快速检测及检测试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CP03 Change of name, title or address

Address after: Tianhe District Tianyuan road Guangzhou City, Guangdong province 510650 No. 808

Patentee after: Institute of ecological environment and soil, Guangdong Academy of Sciences

Address before: Guangzhou City, Guangdong province 510650 Tianyuan Road No. 808

Patentee before: GUANGDONG INSTITUTE OF ECO-ENVIRONMENTAL SCIENCE & TECHNOLOGY

CP03 Change of name, title or address