CN106860743B - 一种治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物，其特征在于：它是由包含下述重量配比的原料药制备而成：红参56‑104份、蛤蚧28‑52份、三七56‑104份、川贝母28‑52份、甘草96‑144份、地龙28‑52份、川芎480‑720份。本发明还提供了该组合物的制备方法和用途。本发明提供的组合物，配伍合理，对慢性阻塞性肺疾病疗效显著，临床治愈率和有效率好；而且本发明组合物安全性好，无毒副作用，使用方便，为临床提供了一种新的药物选择。

Description

一种治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物及其制备方法和用途。

背景技术

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases，COPD)是一种进行性发展的气流受限为特征的疾病，与肺部对有害颗粒及气体的异常炎症反应相关，是呼吸系统疾病中的常见病和多发病，其发病率及患病率不断上升，严重影响患者的劳动力和生活质量，是倍受重视与广泛研究的疾病。

COPD的发病机制复杂且尚未完全阐明，目前认为肺部氧化/抗氧化失衡、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、慢性炎症等与COPD的发生发展密切相关，西医将COPD病程分为急性加重期与稳定期，对COPD的治疗一般采用给氧、消炎、解痉、祛痰等，但很多药物都有毒副作用，而且临床治疗效果不够理想。

COPD属中医的“肺胀”范畴，早在《内经》就有本病的论述，《灵枢.胀论》记载“肺胀者，虚满而喘咳。”隋·巢元芳《诸病源候论·咳逆短气侯》认为肺胀的发病机理是由于“肺虚为微寒所伤则咳嗽，嗽则气还于肺间则肺胀，肺胀则气逆，而肺本虚，气为不足，复为邪所乘，壅痞不能宣畅，故咳逆，短乏气也”，提出本病的病机为肺虚感寒，邪正相搏，气聚于肺，肺气胀满，气逆而上。肺胀主要病因为久病肺虚，痰湿、瘀血内阻，肺气壅滞，气不敛降，每因复感外邪诱使本病发作或加剧。治疗当标本兼顾，方可取得良好疗效。从中医药中研发能够有效治疗COPD的药物，尚且存在很大的挖掘潜力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物及其制备方法和用途。

本发明提供了一种治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物，它是由包含下述重量配比的原料药制备而成：

红参56-104份、蛤蚧28-52份、三七56-104份、川贝母28-52份、甘草96-144份、地龙28-52份、川芎480-720份。

其中，它是由下述重量配比的原料制备而成：

红参80份、蛤蚧40份、三七80份、川贝母40份、甘草120份、地龙40份、川芎600份。

其中，它是由红参、蛤蚧、三七、川贝母、甘草、地龙、川芎的原生粉或水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的口服制剂。

进一步的，所述口服制剂为胶囊剂、膏剂、口服液、颗粒剂、丸剂、片剂、散剂。

本发明还提供了上述组合物的制备方法，它包括如下步骤：

a、称取各重量配比的原料；

b、将甘草、川芎加水浸泡，煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩为清膏，烘干成干浸膏，备用；

c、将红参、蛤蚧、三七、川贝母、地龙五味药材粉碎，与步骤b的干浸膏混合，粉碎，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成。

本发明还提供了上述组合物在制备治疗或辅助治疗慢性阻塞性肺疾病的药物中的用途。

其中，所述慢性阻塞性肺疾病是指急性加重期和/或稳定期的慢性阻塞性肺疾病。

其中，所述慢性阻塞性肺疾病是指中医症候的气虚血瘀痰阻证型的慢性阻塞性肺疾病。

其中，所述慢性阻塞性肺疾病是指中医症候的肺气虚证型的慢性阻塞性肺疾病。

本发明还提供了上述组合物在制备降低MMP-2、MMP-9、和/或TNF-a的药物中的用途。

MMP-2：基质金属蛋白酶2；

MMP-9：基质金属蛋白酶9；

TNF-a：肿瘤坏死因子-a。

本发明提供的组合物，配伍合理，益肺补肾，化瘀祛痰。用于慢性阻塞性肺疾病所致的咳嗽、咯痰，慢性支气管炎、肺气肿、肺心病，支气管哮喘的缓解期。对慢性阻塞性肺疾病疗效显著，临床治愈率和有效率好；而且本发明组合物安全性好，无毒副作用，使用方便，为临床提供了一种新的药物选择。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为对照组MMP-2阳性细胞图(↑)，免疫组织化学染色(SABC法)，×400

图2为模型组MMP-2阳性细胞图(↑)，免疫组织化学染色(SABC法)，×400

图3为治疗组MMP-2阳性细胞图(↑)，免疫组织化学染色(SABC法)，×400

图4为对照组MMP-9阳性细胞图(↑)，免疫组织化学染色(SABC法)，×400

图5为模型组MMP-9阳性细胞图(↑)，免疫组织化学染色(SABC法)，×400

图6为治疗组MMP-9阳性细胞图(↑)，免疫组织化学染色(SABC法)，×400

图7为对照组TNF-a表达图(SP×400)

图8为模型组TNF-a表达图(SP×400)

图9为本发明药物低剂量组TNF-a表达图(SP×400)

图10为茶碱缓释组TNF-a表达图(SP×400)

图11为本发明药物高剂量组图(SP×400)

具体实施方式

下面以实施例作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。

实施例1本发明组合物的制备

处方：红参80g、蛤蚧40g、三七80g、川贝母40g、甘草120g、地龙40g、川芎600g。

制法：

(1)按处方称取各原料药；

(2)将甘草、川芎加7倍量水浸泡30分钟，煎煮二次，每次1小时；合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至5000ml，静至12小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20—1.25(80℃测)的清膏，100℃烘干成干浸膏，备用；

(3)将红参、蛤蚧、三七、川贝母、地龙五味药材粉碎成细粉，与步骤(2)的干浸膏混合，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒，即得。

性状：本品为硬胶囊，内容物为黄褐色粉末；气微腥，味微甜而后苦。

实施例2本发明组合物的制备

处方：红参56g、蛤蚧28g、三七56g、川贝母28g、甘草96g、地龙52g、川芎720g。

制备工艺：同实施例1的制备工艺。

实施例3本发明组合物的制备

处方：红参104g、蛤蚧52g、三七104g、川贝母52g、甘草144g、地龙28g、川芎480g。

制备工艺：同实施例1的制备工艺。

实施例4本发明组合物的制备

处方：同实施例1的处方。

制备工艺：按处方称取各原料药，粉碎，过筛，混合均匀，分装，即得。

以下用试验例的方式说明本发明的有益效果：

试验例1本发明组合物对COPD的功效

(一)对COPD大鼠肺MMP-2表达的影响

一、实验材料

本发明药物胶囊：实施例1制备的药物组合物，

本发明药物胶囊溶液：用生理盐水稀释的本发明药物胶囊，按生药计浓度为100g/L。

脂多糖(lipopolysaccharicle,LPS)(美国Sigma公司)，红河牌过滤嘴香烟(云南红河卷烟厂生产)，兔抗鼠MMP-2(基质金属蛋白酶2)、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒(棕黄色)，均为武汉博士德生物工程有限公司生产。

OLYMPUS Bx-50显微镜、DP12数码相机为日本OLYMPUS光学仪器有限公司生产，GD-8病理彩色图像分析系统为成都电子科技大学生产。

Wistar雄大鼠30只(220-250g)由四川泸州医学院动物科提供(为一级合格动物，许可证号：川实动管质第17号)。

二、实验方法

1、动物分组

将成年Wistar雄大鼠(220-250g)30只随机分为对照组、模型组和治疗组，各10只。

2、COPD大鼠动物模型的建立及取材

模型组大鼠于第1、14天气管内滴注LPS各200μg·(200μl)^－1，第2～13天、第15～28天每天上午在自制的54L密闭箱内熏体积分数为0.05的红河牌香烟雾0.5h。治疗组大鼠先制作COPD模型，然后于实验第29～56天用100g/L的本发明药物胶囊溶液灌胃(0.43g/㎏·日)，第57天乙醚麻醉大鼠，快速开胸，剪开气管，从气管内向肺内注射40g/L的中性甲醛溶液(使压力维持在1kPa左右，约10cmH₂O)，30分钟后取右肺中叶组织0.5mm³，置于40g/L的中性甲醛溶液继续固定12h。对照组大鼠于第1、14天用相同体积的生理盐水代替LPS作气管内滴注，但不熏烟，第29～56天用相同体积的生理盐水代替本发明药物胶囊溶液灌胃，余同治疗组。模型组经造模后用相同体积的生理盐水代替本发明药物胶囊溶液灌胃，余同治疗组。

3、石蜡切片与免疫组化

各大鼠肺组织行常规石蜡切片，片厚4μm。各切片脱蜡至水，常规SABC法进行MMP-2免疫组织化学反应(一抗浓度为(1﹕150)，DAB室温显色。阴性对照用0.01M的PBS代替一抗。

4、照相、图像分析

用DP12数码相机在400倍下照相，用GD-8病理彩色图像分析系统对各切片在400倍下进行图象分析，每张切片在有细支气管的周围随机选择2个计算机视野，测定各组有MMP-2阳性反应物质的光密度，结果以均数±标准差(x±s)表示。光密度反应某物质吸收光的程度，被测结构颜色越深，光密度值则越大。

5、统计学分析

组间比较用方差分析，两两比较用q检验。

三、实验结果

见表1、图1-3。

表1.三组大鼠肺组织MMP-2阳性细胞的光密度(x±s)

▲P<0.05，与对照组比；★P<0.05，与模型组比

MMPs是降解气道各种细胞外基质的主要酶类，其中，MMP-2主要降解弹力纤维、纤维连接素及I、Ⅳ、V、Ⅶ型胶原等，MMP-2的增多使气道结构细胞失去正常的支撑作用，是肺气肿形成的重要环节，参与了COPD病理过程中气道的重塑。

由表1、图1-3可知，三组大鼠肺组织MMP-2的表达均广泛且相似，主要位于Ⅱ型肺泡上皮细胞、肺泡巨噬细胞、血管内皮细胞、肺泡隔内的成纤维细胞及部分Ⅰ型肺泡上皮细胞，阳性细胞为胞质染棕色。

其中模型组大鼠肺组织MMP-2的表达较对照组显著增强(P<0.05)，且阳性的Ⅱ型肺泡上皮细胞、巨噬细胞增多；而治疗组大鼠肺组织MMP-2的表达较模型组显著减弱(P<0.05)。

可见，本发明组合物可以降低COPD大鼠肺组织中MMP-2的表达，有效地预防大鼠肺气肿的形成,可用于预防及治疗COPD。

(二)对COPD大鼠肺MMP-9表达的影响

一、实验材料

本发明药物胶囊：实施例1制备的药物组合物，

本发明药物胶囊溶液：用生理盐水稀释的本发明药物胶囊，按生药计浓度为100g/L。

脂多糖(lipopolysaccharicle,LPS)(美国Sigma公司)，红河牌过滤嘴香烟(云南红河卷烟厂生产)，兔抗鼠MMP-9、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒(棕黄色)，均为武汉博士德生物工程有限公司生产。

OLYMPUS Bx-50显微镜、DP12数码相机为日本OLYMPUS光学仪器有限公司生产，GD-8病理彩色图像分析系统为成都电子科技大学生产。

Wistar雄大鼠30只(220-250g)由四川泸州医学院动物科提供(为一级合格动物，许可证号：川实动管质第17号)。

二、实验方法

1、动物分组

将成年Wistar雄大鼠(220—250g)30只随机分为对照组、模型组和治疗组，各10只。

2、COPD大鼠动物模型的建立及取材

模型组大鼠于第1、14天气管内滴注LPS各200μg·(200μl)^－1，第2～13天、第15～28天每天上午在自制的54L密闭箱内熏体积分数为0.05的红河牌香烟雾0.5h。治疗组大鼠先制作COPD模型，然后于实验第29～56天用100g/L的本发明药物胶囊溶液灌胃(0.43g/㎏·日)，第57天乙醚麻醉大鼠，快速开胸，剪开气管，从气管内向肺内注射40g/L的中性甲醛溶液(使压力维持在1kPa左右，约10cmH₂O)，30分钟后取右肺中叶组织0.5mm³，置于40g/L的中性甲醛溶液继续固定12h。对照组大鼠于第1、14天用相同体积的生理盐水代替LPS作气管内滴注，但不熏烟，第29～56天用相同体积的生理盐水代替本发明药物胶囊溶液灌胃，余同治疗组。模型组经造模后用相同体积的生理盐水代替本发明药物胶囊溶液灌胃，余同治疗组。

3、石蜡切片与免疫组化

各大鼠肺组织行常规石蜡切片，片厚4μm。各切片脱蜡至水，常规SABC法进行MMP-9免疫组织化学反应(一抗浓度为(1﹕150)，DAB室温显色。阴性对照用0.01M的PBS代替一抗。

4、结果分析与判断

用DP12数码相机在400倍下照相，用GD-8病理彩色图像分析系统对各切片在400倍下进行图象分析，每张切片在有细支气管的周围随机选择2个计算机视野，测定各组有MMP-9阳性反应物质的光密度，结果以均数±标准差(x±s)表示。光密度反应某物质吸收光的程度，被测结构颜色越深，光密度值则越大。

5、统计学分析

组间比较用方差分析，两两比较用q检验。

三、实验结果

见表2、图4-6。

表2.三组大鼠肺组织MMP-9阳性细胞的光密度(x±s)

▲P<0.05，与对照组比；★P<0.05，与模型组比

MMPs是降解气道各种细胞外基质的主要酶类，其中，MMP-9主要降解弹力纤维、纤维连接素、层黏连蛋白及Ⅳ、V、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型胶原等，MMP-9的增多使气道结构细胞失去正常的支撑作用，是肺气肿形成的重要环节，参与了COPD病理过程中气道的重塑。

由表2、图4-6可知，

三组大鼠肺组织MMP-9的表达均广泛且相似，主要位于Ⅱ型肺泡上皮细胞、肺泡巨噬细胞、血管内皮细胞、肺泡隔内的成纤维细胞及部分Ⅰ型肺泡上皮细胞，阳性细胞为胞质染棕色。

其中模型组大鼠肺组织MMP-9的表达较对照组显著增强(P<0.05)，且阳性的Ⅱ型肺泡上皮细胞、巨噬细胞增多；而治疗组大鼠肺组织MMP-9的表达较模型组显著减弱(P<0.05)。

可见，本发明组合物可以降低COPD大鼠肺组织中MMP-9的表达，有效地预防大鼠肺气肿的形成,可用于预防及治疗COPD。

(三)对COPD肺气虚证大鼠肺组织TNF-a表达的影响

一、实验材料

本发明药物：实施例1制备的药物组合物，

兔抗鼠TNF-a(肿瘤坏死因子-a)多克隆抗体、SP免疫组化染色试剂盒、DAB显色试剂盒，均由武汉博士德生物工程有限公司提供。自制有机玻璃染毒箱:长×宽×高:60×40×40(cm)，箱体两侧均有换气孔。OLYMPUS Bx-50显微镜、DP12数码相机：日本OLYMPUS光学仪器有限公司生产，泸州医学院中心实验室提供。GD-8病理彩色图像分析系统：成都电子科技大学生产。茶碱缓释片，广州迈特兴华制药厂有限公司生产。脂多糖：美国sigma公司生产。天下秀过滤嘴卷烟：川渝中烟工业公司厂生产。

二、实验方法

1、实验动物

清洁级健康雄性SD大鼠50只，体重270士20g，由重庆滕鑫比尔实验动物销售有限公司提供。将50只大鼠随机分为对照组、模型组、茶碱缓释组、本发明药物低剂量组、本发明药物高剂量组，每组10只。

2、造模

制备COPD“肺气虚证”大鼠模型，具体方法如下：第1、14天分别向模型组、茶碱缓释组、本发明药物低剂量组、本发明药物高剂量组大鼠气管内滴脂多糖200ul(1mg/mL)，对照组予以等量的生理盐水；第2～13天，第15～28天(对照组除外)其余各组大鼠分次置于自制的有机玻璃染毒箱内被动吸烟，每次点燃8支香烟，每天1次，每次30分钟。

3、模型评价

造模期间观察记录大鼠的一般情况；造模结束后，从各组随机抽取1只大鼠处死，取右肺下叶行苏木精-伊红染色(HE染色)，光学显微镜下观察肺组织病理，判断造模是否成功。

4、给药

造模成功后，开始灌胃，灌胃剂量如下：对照组、模型组分别予以生理盐水2ml/d，茶碱缓释组予以茶碱缓释片0.04g/kg.d，本发明药物低剂量组、高剂量组分别予以本发明药物0.31g/kg.d、0.62g/kg.d，连续灌胃16天。

5、标本的采集

第45天，用1％戊巴比妥钠溶液(50mg/kg)麻醉大鼠，取右肺下叶组织置于10％福尔马林溶液中固定12小时，石蜡包埋、切片(每样本连续切3张)，切片厚约5μm，常规做HE染色和免疫组化染色。

6、观察指标及检测方法

6.1大鼠的一般情况

观察各组大鼠的活动度、饮食、皮毛光泽、对外反应灵敏度、咳嗽、呼吸、鼻分泌物，反应有无气虚及气虚的程度。

6.2计算平均肺泡数(MAN)

HE染色完后，在同一倍数下(10×10)，每张切片随机取3个视野，计算MAN，测量时避开大血管和支气管，测量方法如下：在每个视野正中心划十字交叉线，计算每个视野内的肺泡数(Na)，同时测出十字线总长(L)和每个视野面积(S)，按公式MAN＝Na/S，计算平均肺泡数，反映肺泡密度。病理组织读片采用双盲法。

6.3测量肺组织中TNF-a的表达

各切片脱蜡至水，常规SP法进行TNF-a免疫组织化学反应，DAB室温显色。阴性对照，用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗。阳性结果，细胞浆呈棕黄色颗粒。免疫组化染色完后，在同一高倍镜(10×40)下，每张切片随机取3个视野(避开大血管和支气管)，由摄像系统提取数值化细胞图像输入Image-proPlus6.0形态学图像分析系统，测量每视野阳性细胞的积分光密度值(IOD)和阳性细胞所占面积，按公式AOD＝IOD/area计算，取3个视野AOD的平均值作为每张切片的AOD值。

7、统计分析

实验数据采用SPSS17.0统计软件进行处理，多组间比较采用单因方差分析，组间两两比较采用LSD，实验数据用均数±标准差

表示，P＜0.05表示差异有统计学意义。

三、实验结果

实验过程中，4只大鼠在烟熏过程中死亡，5只因气管滴药时麻醉过量致死。

1、各组大鼠的一般情况

造模结束后，光镜下观察大鼠肺组织病理切片显示：支气管纤毛柱状上皮细胞脱落、坏死，气道管壁充血水肿，粘膜、粘膜下层可见大量的淋巴细胞、巨噬细胞及中性粒细胞浸润；肺泡结构紊乱、肺泡壁变薄或断裂，肺泡腔扩大，部分融合成肺大疱，MAN较正常对照组减少，符合人类慢性阻塞性肺疾病的病理表现。结合大鼠的一般情况，大鼠咳嗽、气喘逐渐加重，鼻分泌物增多，毛发萎黄、无光泽，活动量减少，行动迟缓，反应迟钝，说明COPD肺气虚证模型复制成功。

各组大鼠的一般情况如下：

对照组：大鼠皮毛光泽、活泼好动、外界反应灵敏、呼吸平稳、饮食正常。

模型组：大鼠毛发逐渐萎黄、无光泽、脱落，活动量、食量逐渐减少，反应迟钝、鼻分泌物增多、呼吸急促、咳嗽频繁、撮毛、蜷缩。

各治疗组：灌药前，各组大鼠情况同模型组，治疗过程中，各组大鼠的上述症状逐渐减轻，以本发明药物高剂量组改善最明显。

2、各组大鼠肺组织TNF-a的免疫组化结果

见图7-11：光镜下观察，大鼠肺组织中TNF-a阳性着色部位主要位于胞浆，呈棕黄色。对照组TNF-a呈弱阳性表达，阳性产物为淡黄色；模型组呈强阳性表达，阳性产物为棕褐色；各治疗组呈阳性表达，阳性产物为棕黄色。3、各组大鼠MAN、TNF-a平均光密度值的比较

见表3-4，其中：MAN：平均肺泡数；TNF-a：肿瘤坏死因子-a。

表3对照组、模型组MAN、TNF-a平均光密度值的比较

注：与对照组相比：▲P＜0.01；

表4模型组、各治疗组MAN、TNF-a平均光密度值的比较

注：与模型组相比：△P＜0.01，▽P＜0.05；

与茶碱缓释组相比：◆P＜0.05；

与本发明药物低剂量组相比：□P＜0.01。

近年来，大量研究证实，炎症介质在COPD发病中起重要作用，TNF-α是一种主要由单核-巨噬细胞产生的前炎症细胞因子，TNF-α的大量产生和释放则会破坏机体的免疫平衡，血清中TNF-α的变化可用于判断COPD病情及治疗效果。其中，急性加重期COPD患者痰液及气道上皮细胞中的TNF-a水平比缓解期明显升高，且与气道阻塞程度呈正相关。急性加重期TNF-a与COPD患者发病有密切关系，其与严重感染有关。

从表3-4可知：

(1)各组大鼠MAN结果显示：COPD模型组大鼠MAN较正常对照组显著减少(P＜0.01)；各治疗组MAN较模型组增加(P均＜0.05)；各治疗组组间比较，差异均有统计学意义(P均＜0.05)，以本发明药物高剂量组效果显著。

(2)各组大鼠肺组织TNF-a AOD值结果显示：模型组肺组织TNF-a的AOD值显著高于对照组(P＜0.01)；各治疗组肺组织中TNF-a的AOD值均低于模型组(P均＜0.01)；各治疗组组间比较，差异均有统计学意义(P均＜0.05)，以本发明药物高剂量组效果显著。

说明本发明药物可以降低大鼠肺组织中TNF-a的表达，减少炎症细胞趋化、聚集，达到预防及治疗COPD的目的。

综上，本发明组合物可以通过降低肺组织中MMP-2、MMP-9、TNF-a的表达，有效地预防肺气肿的形成,可用于预防及治疗COPD。

试验例2本发明组合物治疗COPD稳定期的临床观察

一、研究对象

选择2007年6月-2009年12月到我院就诊的COPD稳定期患者87例，均符合COPD诊治指南2007年修订版标准，病情分级为Ⅰ～Ⅱ级，慢性起病(病程在2年以上)，年龄40～75岁，中医辨证为气虚血瘀痰阻证，均签署知情同意书。利用投硬币的方法将研究对象随机分为2组，治疗组44例，男28例，女16例，平均年龄(64.11±10.83)岁，其中Ⅰ级27例，Ⅱ级17例；对照组43例，男26例，女17例，平均年龄(65.06±9.84)岁，其中Ⅰ级26例，Ⅱ级17例；2组性别构成(χ²＝0.093)、年龄(t＝0.428)及病情分级(χ²＝0.007)差异无统计学意义(均P＞0.05)，具有可比性。

二、实验方法

2.1试剂及治疗方法

本发明药物：实施例1制备的药物组合物，规格：48粒/瓶，0.4g/粒。

对照组按GOLD(COPD全球倡议)方案给药：Ⅰ级不用药，Ⅱ级使用支气管扩张剂茶碱缓释片，0.1g/次，2次/d，3个月为1个疗程。

治疗组在对照组用药的基础上，同时口服本发明药物，4粒/次，3次/d。

2.2检测指标及判定标准

(1)中医证候疗效标准根据《中药新药临床研究指导原则(试行)》进行评定，共分为4类：①临床控制：临床症状、体征消失或基本消失，证候积分减少≥95％。②显效：临床症状、体征明显改善，证候积分减少≥70％。③有效：临床症状、体征均有好转，证候积分减少≥30％。④无效：临床症状、体征均无明显改善，甚或加重，证候积分减少不足30％。证候积分计算：根据咳嗽、咯痰、喘息症状分为无、轻、中、重度，积分分别为0、1、2、3分；依据舌象、脉象正常、异常积分分别为0、1分；听哮鸣音或湿鸣音无、少、中(散在)、重(满布肺野)积分分别为0、1、2、3分；查肺气肿体征(分别计算望、扪、叩、听)：无、有，积分分别为0、1分。(2)肺通气功能检测：FEV₁％(第1秒用力呼气容积)、FEV₁/FVC(第1秒用力呼气容积/用力呼气量)均采用德国耶格公司生产的Master-screenPET肺功能仪进行检测。(3)BODE指数评分标准按照Celli BR.等提出的方法进行计算：①BMI(kg/m²)：体质指数＝体质量(kg)/[身高(m)]。②FEV₁％pred:第1秒用力呼气容积占预计值的百分比。③MRC分级(呼吸困难量表分级)：0级：除非剧烈活动，无明显呼吸困难。1级：当快走或上缓坡时有气短。2级：由于呼吸困难比同龄人步行得慢，或以自己的速度在平地上行走时需要停下来呼吸。3级：在平地上行走100米或数分钟后需要停下来呼吸。4级：明显的呼吸困难、不能离开住所或穿脱衣服时出现气短。④6MWD(6分钟行走距离实验)：在室内一条长35m的道路进行测定，操作规程符合6MWD标准测量方法。BODE指数评分表见表5。

表5 BODE指数评分表

2.3统计学分析

采用SPSS13.0统计分析软件进行计算，计量资料以

表示，2组间比较行两样本比较的t检验，治疗前后用配对t检验；计数资料以例(％)表示，行χ²检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

三、实验结果

3.1 2组中医证候疗效比较见表6。

表6 2组中医证候疗效比较例(％)

可见，治疗组中医证候疗效总有效率(88.64％)高于对照组(67.44％)，差异有统计学意义(χ²＝5.723，P＝0.017)，本发明药物可有效治疗COPD患者。

3.2 2组肺功能指标比较

见表7。

表7 2组治疗前后FEV₁％、FEV₁/FVC比较(％，

)

^*P<0.05，^**P<0.01

可见，治疗组在治疗后FEV₁％、FEV₁/FVC均呈现出不同程度的上升，治疗前后比较差异有统计学意义(P＜0.01)；对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)，本发明药物可有效改善COPD患者的肺功能。

3.3 2组BODE指数比较

见表8。

表8 2组治疗前后BODE指数比较(分，

)

^*P<0.05

BODE评分系统从患者的生理因素、气道阻塞程度、呼吸困难的程度及运动能力4个方面综合评价COPD患者的疾病状态，能全面反映COPD患者的呼吸和系统性特征；且BODE指数与COPD患者的生存质量密切相关，是评价慢性阻塞性肺疾病患者病情严重程度的重要指标。

可见，2组BODE指数在治疗后均降低，治疗组治疗前后比较差异有统计学意义(P＜0.05)，对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后2组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明本发明药物对COPD患者减轻病情严重程度，提高生活质量具有良好作用。

3.4安全性及不良反应

观察期间2组病人未发现肝、肾功能损害，治疗组有少数病人(3例)出现口干，对整个治疗过程未产生影响，余无其他不良反应。

可见，本发明药物使用安全可靠。

因此，本发明组合物对能有效提高COPD稳定期患者的中医证候疗效，缓解临床症状；延缓肺功能下降，减缓病情进展；降低BODE指数平均值,提高患者的生存质量，辅助治疗效果显著，使用安全。

综上所述，本发明组合物配伍合理，可降低COPD患者的MMP-2、MMP-9和TNF-a的表达，对COPD患者的疗效显著，临床治愈率高；而且本发明组合物安全性好，使用方便，为临床提供了一种新的药物选择。

Claims (10)

1.一种治疗慢性阻塞性肺疾病的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成：

红参56-104份、蛤蚧28-52份、三七56-104份、川贝母28-52份、甘草96-144份、地龙28-52份、川芎480-720份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制备而成：

红参80份、蛤蚧40份、三七80份、川贝母40份、甘草120份、地龙40份、川芎600份。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：它是由红参、蛤蚧、三七、川贝母、甘草、地龙、川芎的原生粉或水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的口服制剂。

4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于：所述口服制剂为胶囊剂、膏剂、口服液、颗粒剂、丸剂、片剂、散剂。

5.权利要求1-4任意一项所述的组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：

a、称取各重量配比的原料；

b、将甘草、川芎加水浸泡，煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩为清膏，烘干成干浸膏，备用；

c、将红参、蛤蚧、三七、川贝母、地龙五味药材粉碎，与步骤b的干浸膏混合，粉碎，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成。

6.权利要求1-4任意一项所述的组合物在制备治疗或辅助治疗慢性阻塞性肺疾病的药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述慢性阻塞性肺疾病是指急性加重期和/或稳定期的慢性阻塞性肺疾病。

8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述慢性阻塞性肺疾病是指中医症候的气虚血瘀痰阻证型的慢性阻塞性肺疾病。

9.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述慢性阻塞性肺疾病是指中医症候的肺气虚证型的慢性阻塞性肺疾病。

10.权利要求1-4任意一项所述的组合物在制备降低肺组织的MMP-2、MMP-9、和/或TNF-a的药物中的用途。

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