CN106794146A - 用于透粘膜递送的药物组合物以及用于在需要的受试者中治疗糖尿病的方法 - Google Patents

Abstract

本公开内容涉及用于口内给药的固体剂型的药物组合物，其通过透粘膜途径提供胰岛素和胰岛素类似物的有效递送。还提供了在有需要的受试者中治疗前驱糖尿病、糖尿病和代谢综合征的方法。

Description

用于透粘膜递送的药物组合物以及用于在需要的受试者中治 疗糖尿病的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2014年3月4日提交的美国临时专利申请No.61/947,678以及于2014年3月4日提交的美国临时专利申请No.61/947,698的权益，在法律允许的最大范围内通过引用将其全部内容并入本文。

技术领域

本发明涉及用于口内给药的固体剂型的药物组合物，其通过透粘膜途径提供胰岛素和胰岛素类似物的有效递送。还提供了该药物组合物在有需要的受试者中治疗前驱糖尿病、糖尿病和代谢综合征的方法。

背景技术

许多药物不能经口施用，因为药物会降解或无法口服生物利用。例如，许多药物在胃中经受酸催化水解，在胃肠道中经受降解，或遭受肝首过效应。特别是，由于胃肠道保护性地将外源肽降解为氨基酸结构单元，所以经口服的多肽和蛋白质药物在胃肠道中被降解。因此，需要一种能够经受胃肠道降解、肝首过效应和/或在胃肠道中具有低渗透性的口服药物制剂。

口腔粘膜已被确定为全身递送药物的理想部位。经口腔粘膜的渗透避免了胃肠道降解和肝首过效应。此外，经口腔粘膜的渗透解决了与胃肠道渗透性差相关的问题。因此，需要一种经口腔粘膜转运的有效制剂。

透粘膜渗透通过两个主要途径-细胞内和细胞间发生。当物质在全身递送之前穿过上皮细胞膜转移并进入细胞时发生细胞内渗透。被动或主动转运可引发细胞内渗透。当物质通过细胞间脂质扩散时，发生细胞间渗透。有两条与细胞间通路相关的途径。亲水途径在邻近膜脂质的极性头部基团的窄水性区域中进行。疏水途径在上皮细胞的脂质双层中进行。

糖尿病(diabetes)，也称为糖尿病(diabetas mellitus)，是导致血糖水平升高的代谢性疾病。当健康患者的血糖水平升高时，胰腺将作为胰岛素激素原前体的胰岛素原转化为称为C-肽的另一种蛋白质和胰岛素。胰岛素促进葡萄糖从血液中的吸收。血糖水平升高是由于不能产生足够的胰岛素或胰岛素抵抗的发展。未能产生足够的胰岛素导致I型糖尿病(青少年糖尿病)。2型糖尿病由胰岛素抵抗引起。第三种类型的糖尿病是妊娠糖尿病，指的是之前没有糖尿病史的孕妇，在妊娠期间血糖水平升高的情况。血糖水平升高引起的副作用包括多尿、多饮和多食。如果不进行治疗，高葡萄糖水平可能引起更严重的并发症，例如高血糖症、糖尿病性酮症酸中毒、非酮性高渗性昏迷、心脏病、中风、肾脏疾病和神经损伤。1型糖尿病通常用胰岛素或合成胰岛素类似物治疗。如果其他药物无法治疗，2型糖尿病可能需要胰岛素。除了最近批准的肺释放制剂外，需要胰岛素的患者必须胃肠外给药。

用于生物活性肽(特别是胰岛素)的非肠胃外剂型具有很大的需求。在胰岛素的不同非注射给药途径中，该肽的口服给药是最有前景的递送方法之一。制药产业已经寻找胰岛素的口服途径超过90年。实际上，人类的第一次口服胰岛素实验发生在1922年。从那时起，许多专利和出版物已经宣传了胰岛素施用的口服方法，并且许多制剂已经进入临床试验。尽管作出了巨大努力，但很少有产品进入市场或已经达到后期发展阶段。由于肽的性质，为了防止口服制剂中的胰岛素分子在胃肠道中被酶降解，就需要将蛋白酶抑制剂引入制剂中，然而这种抑制剂的长期使用可能引起严重的副作用。

由于市场接受不足，可吸入胰岛素制剂(例如，)从市场上撤出。口腔喷雾剂(例如，Oral-Lyn^TM)需要多次给药和昂贵且复杂的递送装置。鼻腔给药由于常常引起刺激和过敏而具有局限性。(Heinemann等，“Oral Insulin and Buccal Insulin：A CriticalReappraisal，”J.Diabetes Sci. Technol.，2009，3(3)：568-584；Soares，S.，“Novel Non-Invasive Methods of Insulin Delivery，”Expert Opin.Drug Deliv.，2012，9(12)：1539-1558)。

不同肽的口内递送途径在过去几十年中引起了极大的关注。作为可用于增强各种药物，包括肽，的递送的优秀部位，口腔粘膜具有良好的潜力。

含服和舌下粘膜对于小的，特别是疏水的分子(低于500道尔顿)是相对容易渗透的。为了克服粘膜对大亲水性肽分子的穿透阻力，已经开发了多种方法。这些方法包括使用渗透促进剂，例如极性溶剂-液体PEGs、丙二醇、二甲基亚砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮；脂质干扰剂-、癸基甲基亚砜；非离子表面活性剂-聚山梨酯、泊洛沙姆、烷基葡糖苷和其它糖酯；阴离子表面活性剂-月桂基硫酸钠(SLS)、脂肪酸盐；磷脂-卵磷脂、磷脂酰胆碱、其他磷脂；胆汁酸-胆酸钠、脱氧胆酸盐、牛磺胆酸盐及类似物；高浓度萜烯-薄荷醇、冰片(bomeol)、桉油醇；螯合剂-EDTA、柠檬酸等；脂质和酯-甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯、乙二醇酯，各种环糊精和其它化合物。(Kinesh等，“Novel Approaches for Oral Deliveryof Insulin and Current Status of Oral Insulin Products，”International Journalof Pharmaceutical Sciences and Nanotechnology，2010，3(3)：1057-1064)。此外，WO2012/104834指示了一种载有胰岛素和渗透促进剂的含服生物粘附聚合物膜；WO 2011/086093描述了一种用于口服递送基于极性溶剂和非离子表面活性剂组合的胰岛素酰化衍生物的液体自纳米乳化系统，并且，WO 2005/089722描述了与螯合剂(如EDTA)和柠檬酸组合以防止胰岛素聚集成六聚体的胰岛素的舌下组合物。

Cui等研究了各种渗透促进剂对膜流动性和胰岛素“体外”和“体内”递送的影响。(Cui等，“Sublingual delivery of insulin：effects of enhancers on the mucosallipid fluidity and protein conformation，transport，and in vivo hypoglycemicactivity，”Biol.Pharm.Bull.，2005，28(12)：2279-2288)。增强效应可能是由于一种或多种因素，例如增加粘膜脂质流动性，直接放松与上皮的紧密连接，以及其他参数。Cui等评估了促进剂对正常大鼠的粘膜脂质流动性和蛋白质构象、转运和降血糖活性的影响。制剂含有高水平的促进剂-液体组合物的5-10％。为了评估胰岛素的转运，使用人永生化口腔上皮细胞单层。使用的渗透促进剂包括羟丙基-β-环糊精(HP-beta-CD)、壳聚糖、聚乙烯-聚丙二醇、聚氧乙烯月桂基醚、聚山梨酯80、卵磷脂和油酸。

Aungst等测试了包括非离子表面活性剂、胆汁盐、脂肪酸、酶、极性溶剂和它们的组合的各种渗透佐剂在高浓度下的含服胰岛素递送效率。(Aungst等，“Comparison of theeffects of various transmucosal absorption promoters on buccal insulindelivery，”International Journal of Pharmaceutics，1989，53：227-235)。发现大多数这样的佐剂仅在高浓度(5-10％)使用时才是有效的。

为了提高透粘膜递送的肽的生物利用度，可以将肽引入纳米颗粒、微乳液和纳米乳液、胶束溶液或自乳化组合物中。各种固体、半固体和液体剂型以及加压喷雾剂、含膜和贴剂被提出用于口内进行肽施用。(Xu等，“Hypoglycaemic Effect of a Novel InsulinBuccal Formulation nn Rabbits，”Pharmacological Research，2002，46(5)：459-467；Elsayed等，“Formulation and Characterization of an Oily-Based System for OralDelivery of Insulin，”Eur.J.Pharm.Biopharm.，2009，73：269-279；S armento等，“OralInsulin Delivery by Means of Solid Lipid Nanoparticles，”Inter.J.Nanomed.，2007，2(4)：743-749)。

例如，美国专利No.6,290,987公开了作为喷雾口内递送的含有烷基硫酸盐的混合脂质体制剂。美国专利No.6,350,458表示使用混合胶束用于胰岛素的经口含化方式递送。所提出的口腔喷雾组合物含有高浓度的烷基硫酸盐，例如十二烷基硫酸钠，对口腔粘膜具有较大的刺激性。

此外，美国专利No.6,635,617指示了利用萜烯的支气管扩张性质，可以实现胰岛素与薄荷醇的组合肺递送。美国专利7,112,561描述了在鼻用制剂中大环渗透促进剂在酸性条件下用于胰岛素乳液的用途。另外，美国专利No.4,579,730描述了用于口服递送的胰岛素的胆酸盐复合物与蛋白酶抑制剂。

各种含有脱氧胆酸钠作为离子对试剂的复合物及可生物降解的纳米颗粒用于增强胰岛素递送的用途也已经被描述。(Sun等，“Hydrophobic Ion Pairing of an Insulin-Sodium Deoxycholate Complex for Oral Delivery of Insulin，”Int.J.Nanomed.，2011，6：3049-3056)。

各种渗透促进剂用于增加肽和蛋白质的透粘膜转运已经被提出：极性溶剂(PG、DMSO)；萜烯(薄荷醇、冰片)；表面活性剂(Brij、SLS)。例如，美国专利公开No.2004/0258623描述了含有胰岛素、卵磷脂、极性溶剂和冰片作为渗透促进剂的口腔喷雾。美国专利公开No.2009/0274758描述了使用亲水性聚合物基质或液体制剂口内递送不同类型的生物活性分子(包括胰岛素)的固体组合物，其包含脂质体或前脂质体组合以及作为渗透促进剂的薄荷醇和月桂基硫酸盐(SLS)和其他阴离子表面活性剂。由于含有非常高浓度的SLS和薄荷醇，这样的制剂可能具有严重的局部刺激性。Shojaei等教导了一种有效的经口含化增强剂。(Shojaei等，“Transbuccal Permeation of a Nucleoside Analog，Dideoxycytidine：Effects of Menthol as a Permeation Enhancer，”Int.J.Pharm.，1999，192：139-146)。

通过施用这种高浓度的促进剂，可以实现极性化合物的透皮或透粘膜渗透的显著提高。在大多数情况下，它能够引起严重的局部刺激，特别是对于鼻腔给药。施用具有高浓度渗透促进剂的制剂可能会引起组织损伤和脱脂、味觉和嗅觉的丧失。

各种微乳液和纳米乳液，特别是在自乳化预浓缩物中，作为用于口服递送肽(包括胰岛素)的递送系统被广泛研究。自发形成的胶体分散体在胃肠道中被吸收，并且在一些情况下可以增加药物吸收效率。如WO 2011/086093中所述，施用到十二指肠或肠远端的胰岛素和具有低含量脂质及高浓度含高HLB的表面活性剂的极性有机溶剂的组合改善了经胃肠道的胰岛素递送。

透粘膜递送的改善可以通过使用各种低共熔混合物来实现。低共熔混合物是两种或更多种物质的混合物，其在低于任何单一组分或它们的任何其它混合物的熔点的温度下熔融。简单的低共熔混合物由两种在液态下完全混溶但在固态下仅以非常有限的程度混合的化合物组成。(Remington：The Science And Practice of Pharmacy，2000，第20版，Lippincott Williams&Wilkins，Philadelphia，第177页)。基于分子结构和组分的组成不能预测低共熔混合物的形成。这种混合物的性质只能通过实验确定。

众所周知，用于药物研发的低共熔混合物是具有高溶解性的薄荷醇和樟脑的混合物，该混合物对非甾体抗炎化合物具有高溶解性(美国专利No.7,138,394)。苯酚或薄荷醇与各种化合物的组合，在药物制剂中会引起不相容性的问题；例如在与安替比林、水杨酸盐、对乙酰氨基酚和生物碱的混合物中。(Remington：The Science And Practice ofPharmacy，2000，第20版，Lippincott Williams&Wilkins，Philadelphia，第1045页)。

利多卡因和丙胺卡因的固体结晶基体的低共熔混合物在室温下为液体，并且已连续用于制备具有增强功效的局部麻醉霜。(的产品信息，可以在以下网址获得：http：//www.medicines.org.au/files/appemlac.pdf)。

薄荷醇被发现能与睾酮、胆固醇油酸酯、和神经酰胺形成低共熔混合物。薄荷醇和睾酮的低共熔混合物在体温 下是固体，但显示出显著的药物透皮渗透性。熔化温度的降低导致睾酮在含水乙醇载体中的溶解度增加2.8倍，这导致睾酮通量相应地增加2.8倍。皮肤通量进一步增加至基线的8倍，可归因于高浓度的薄荷醇对皮肤屏障性质的影响。(Kaplun-Frischoff等，“Testosterone SkinPermeation Enhancement by Menthol Through Formation of Eutectic with Drug andInteraction with Skin Lipids，”J.Pharm.Sci.，1997，86(12)：1394-1399)。

美国专利公开No.2007/024261描述了几种适用于微囊剂的液体低共熔组合物。美国专利No.8,790,723描述了可提高生物利用度的含有辅酶Q10的固体剂型的制备方法。

Goldberg发现，低共熔混合物也许可以提供一种增加溶解速率的独特方法。(Goldberg等，““Increasing Dissolution Rates and Gastrointestinal Absorption ofDrugs Via Solid Solutions and Eutectic Mixtures I.Theoretical Considerationsand Discussion of the Literature”，J.Pkarm.Sci.，1965，54(8)：1145-1148；Goldberg等，“Increasing Dissolution Rates and Gastrointestinal Absorption of Drugs ViaSold Solutions and Eutectic Mixtures II：Experimental Evaluation of a EutecticMixture：Urea-Acetaminophen System，”J.Pharm.Sci.，1966，55(5)：482-487)。Zhang等描述，脂肪酸的低共熔混合物在体温为液体。(Zhang等，“Thermal studies on the solid-liquid phase transition in binary systems of fatty acids”，ThermochimicaActa.，2001，369：157-160)。

胆汁酸及其盐广泛用作肽和蛋白质的渗透促进剂。Das等开发了优化的颊侧胰岛素负载Pluronic F-127凝胶。制备了用于含服和舌下递送的具有胰岛素、表面活性剂和胆汁酸衍生物的生物粘附凝胶。(N.Das等，“Development and in Vitro Evaluation ofInsulin-Loaded Bucal Pluronic F-127Gels，”Pharmaceutical Development andTechnology，2010，15(2)：192-208)。WO2010/118516中描述了含有壳聚糖和各种生物活性化合物，包括胰岛素和西地那非，的生物粘附舌下片剂。

然而，尽管进行了许多尝试，但是开发用于胰岛素的非侵入性递送系统的需要仍然未能满足，并且不得不开发稳定方便的口内胰岛素剂型。因此，需要治疗有效的口服胰岛素制剂。现有技术教导提供了通过口腔粘膜渗透药物的制剂。

发明概述

本公开涉及用于舌下或含服施用的口内固体药物组合物，其含有生物活性肽，例如胰岛素或胰岛素类似物。本发明的目的是提供用于胰岛素透粘膜递送的安全且方便的方法，提供葡萄糖降低作用的快速启动。

在一个实施方案中，本公开提供通过舌下施用固体剂型的生物活性多肽、例如胰岛素的有效透粘膜递送，所述固体剂型包含蛋白质和至少两种疏水性组分的低共熔混合物(eutectic mixture)。

在另一个实施方案中，低共熔混合物在体温为液体或具有显著低于任何单独组分熔点的熔点(melting point)。

在又另一个实施方案中，将低共熔混合物引入固体剂型中，例如压制片剂，锭剂或另一种口腔溶解形式。

根据本发明的实施方案，疏水性组分的低共熔混合物自身形成水包油乳液的油相，或者将低共熔混合物引入该乳液的疏水(例如，脂质)相中。

在另一个实施方案中，低共熔混合物可以溶解在乳液的疏水相中，并且这种疏水相可以包含低共熔混合物的组分或其它生理上可接受的化合物，例如食用油、甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯、精油、生育酚、生育三烯酚、以及脂肪酸和有机酸的脂肪族酯和芳香族酯。

在一个实施方案中，乳液在与唾液或湿粘膜表面接触后会自发形成。

在另一个实施方案中，所形成的乳液的液滴尺寸小于1微米，通常液滴尺寸在2-200nm之间。

在又另一个实施方案中，形成低共熔混合物的化合物是安全和生理学上可接受的。形成低共熔混合物的化合物选自脂肪酸、环状醇、生育酚衍生物、磷脂、甾醇和酚类化合物。这种低共熔混合物可以作为一部分引入形成乳液的油滴的疏水性组合物中，或者以其疏水性质通过自身形成疏水性乳液的这种液滴。

本发明的另一个实施方案涉及将相对低浓度的疏水低共熔混合物组分引入自发形成的纳米胶体(纳米乳液，混合胶束)的核中。这可以显著地改善多肽例如胰岛素和胰岛素类似物的透粘膜渗透性。令人惊讶地发现，向在舌下或含服口服剂型溶解后同时形成的乳液液滴疏水核中引入低共熔混合物中，显著增强了生物活性蛋白或肽、例如胰岛素或胰岛素类似物的透粘膜渗透性。这可能与粘膜内衬细胞的脂质膜的液化和流动性的改善相关。低共熔混合物组分与细胞膜的相互作用导致结构膜脂质的熔点降低。该过程可以由微小油滴的高渗透速率和这些脂质与低共熔混合物的组分相互作用而导致的细胞膜脂质熔点的降低共同引起。膜的较高流动性增加了与疏水性液滴相关的活性组分的透粘膜渗透性。将疏水低共熔混合物引入根据本发明的自乳化制剂中，与没有低共熔组分的类似乳液相比，能够更高程度地改善胰岛素的渗透性。

在又另一个实施方案中，在疏水性抗衡离子的帮助下，胰岛素分子与形成的乳液的油滴相缔合(associated with)。与多肽分子相关的抗衡离子的使用增加了多肽分子的疏水化以及与含有低共熔混合物的纳米乳液的疏水性核心部分的缔合(association)。此外，抗衡离子分子，例如有机酸，可以是低共熔混合物的组分。透粘膜递送的改善可以通过使用各种低共熔混合物，例如薄荷醇和维生素E琥珀酸酯，薄荷醇和氢化或纯化的卵磷脂，麝香草酚和维生素E琥珀酸酯，脂肪酸混合物例如月桂酸和硬脂酸或月桂酸和棕榈酸，胆固醇和油酸的组合来实现。使用用作疏水性抗衡离子的二酰基磷脂酰甘油衍生物，胆酸盐，脱氧胆酸盐，胆固醇硫酸酯获得各种片剂制剂。

在一个实施方案中，用于胰岛素和其它肽的口内透粘膜递送的剂型是压制片剂。另外，片剂可包含非离子表面活性剂，填充剂如药用级多元醇或糖(例如蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、赤藓醇)、粘合剂(PVP、纤维素酯、聚乙二醇)、崩解剂(交联羧甲纤维素、交联聚维酮)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸酯类、山梨酸、苯甲酸及其药学上可接受的盐)、润滑剂、助流剂、矫味剂、抗氧化剂等。将这些组分引入片剂基质中，通过制粒，混合和压制制备。根据本发明所述，压缩的舌下片剂含有与表面活性剂，低共熔混合物，抗衡离子和疏水相组合的胰岛素，该片剂在与唾液接触时自发形成纳米乳液。

根据一个实施方案，压缩片剂的硬度应在2-16kP或更高的范围内。

根据本发明的另一方面，用于舌下施用胰岛素和胰岛素类似物的剂型应在3-30分钟内溶于口中。

含有胰岛素和其它适于压缩的赋形剂的片剂基质颗粒可以通过湿法制粒，压实，研磨或干混制备。使用合适的压片机将片剂压制成圆形、椭圆形或其它所需形状的片剂。

在本发明的一个优选实施方案中，用于口内施用的固体剂型(压缩片剂)包含0.5-10mg胰岛素或胰岛素类似物，包埋在含有在37℃以下熔融的疏水低共熔混合物，生理上可接受的油相，抗衡离子，非离子表面活性剂，乳化剂，填充剂，助流剂，调味剂，润滑剂，抗微生物防腐剂的组合物中，并且胰岛素或胰岛素类似物肽至少部分地与在与唾液接触时从该剂型释放的“原位(in situ)”形成的乳液的油滴相缔合。

其他实施方案、目的、特征和优点将在以下实施例的详细描述中阐述，并且部分地将从描述中显而易见，或者可以通过实践所要求保护的发明而习得。这些目的和优点将通过本文描述和要求保护的组合物以及方法来实现和获得。前面的概要是基于这样的理解而做出的，即，其被认为是本文所公开的一些实施方案的简要和一般的纲要，仅为了读者的利益和方便而提供，并且不旨在以任何方式限制范围(scope)或等同物的范围(range)，所附权利要求书被合法地授予权利。本公开的其他特征及其变型将在以下内容中详细阐述。

附图说明

图1是舌下施用安慰剂片剂(虚线)和仅含有在山梨糖醇基质中的胰岛素(50单位)的片剂(实线)后葡萄糖水平随时间变化的图示。

图2是在舌下施用安慰剂片剂(虚线)和在包含有自乳化低共熔混合物(基于薄荷醇)、抗衡粒子、胆汁盐和矫味剂的基质中的胰岛素(50单位)的片剂(实线)之后平均葡萄糖水平随时间的相对变化的图示。

图3是与个体葡萄糖水平基线(虚线)相比，舌下施用在含有自乳化低共熔混合物(基于薄荷醇)和抗衡离子以中等时间溶解的基质中的胰岛素(50单位)的片剂(实线)之后个体葡萄糖水平随时间变化的图示。

图4是在舌下施用在包含有自乳化低共熔混合物(基于薄荷醇)、抗衡粒子、胆汁盐和矫味剂的基质中的胰岛素(50单位)的片剂(实线)之后，与相对个体葡萄糖水平基线(虚线)相比，相对个体葡萄糖水平随时间变化的图示。

图5是与安慰剂治疗组(菱形)葡萄糖水平相比，在舌下给予在包含有自乳化低共熔混合物(基于薄荷醇)、抗衡粒子、胆汁盐和矫味剂的基质中的胰岛素(50单位)的片剂(三角形)之后餐后葡萄糖水平随时间变化的图示。舌下胰岛素在标准化早餐膳食(710kCal)之前30分钟递送，并且明显降低餐后峰值葡萄糖。

图6是与安慰剂治疗组(菱形)中的C-肽血液浓度相比，在胰岛素(100单位)舌下施用(三角形)后C-肽浓度随时间变化的图示(线性)。舌下胰岛素在时间“0”递送，并且明显降低C-肽浓度，证实了外源胰岛素的透粘膜供应。

图7是与安慰剂治疗组中的C-肽血液浓度相比，胰岛素(100单位)舌下施用后C-肽浓度随时间变化的图示。舌下胰岛素在时间“0”递送，并且明显降低C-肽浓度，证实了外源胰岛素的透粘膜供应。

图8A和8B是在舌下施用根据本发明的不同胰岛素制剂后，空腹参与者(餐后2-6小时)葡萄糖的最大减少的图示。图8A是与初始水平相比的最大葡萄糖降低的图示，图8B显示了在减去葡萄糖降低的基线值(初始值的13％)后葡萄糖水平的最大下降。

图9显示在健康志愿者中4小时不同制剂的比较性葡萄糖降低活性。

图10显示了含有胰岛素、疏水性低共熔混合物、乳液油相的疏水组分、疏水抗衡离子和表面活性剂的压缩片剂自乳化后形成的水包油乳液的粒径分布的典型实例。

发明详述

尽管本发明能够以各种形式实施，但是以下对几个实施方案的描述是基于以下理解而做出的，本公开被认为是所要求保护的主题的示例，并且不旨在将所附权利要求限制到所示和/或描述的特定实施例，并且不应被解释为限制本公开的范围或宽度。所有本发明使用的标题仅为了方便理解发明，并不应被解释为以任何方式限制权利要求。其中任一标题下示出的实施方案可以与其他任一标题下示出的实施方案组合。

本发明描述了用于能够快速起效的生物活性蛋白质和肽、优选胰岛素的全身透粘膜递送的固体剂型。制剂含有与表面活性剂和疏水化合物的低共熔混合物相组合的肽，例如胰岛素、胰岛素类似物或前体，以及任一其他生理学上可接受的赋形剂。低共熔混合物作为高效渗透促进剂，有助于大白质分子的快速渗透。将低共熔混合物引入自乳化递送系统中，片剂与唾液或湿粘膜表面接触后，在“原位”形成乳液，改善了低共熔组分向粘膜细胞膜的转运。将低共熔混合物并入细胞膜的脂质双层中增加了膜流动性和柔性，增强了肽通过口内衬的转运。因为避免了不溶性组分的沉淀，溶解在纳米乳液的油滴中的低共熔组分可以比渗透促进剂的简单溶液更快地到达粘膜组织。

胰岛素或其它生物活性肽在经含服或舌下施用后，与形成的乳液的微小油滴相缔合，渗透进粘膜组织并进入血液循环而避免了酶促消化。在本发明的优选实施方案中，含胰岛素的制剂是压制片剂，从而通过舌下给药的方式控制葡萄糖水平。

令人惊讶地发现，当固体剂型符合以下要求时，能够实现最佳的葡萄糖降低效果：

·剂型(压制片剂)在与唾液接触后释放水包油乳液。

·片剂含有生理上可接受的低共熔混合物，其在体温为液体(熔点低于37℃)。低共熔混合物可以含有两种、三种或更多种组分(薄荷醇、脂肪酸、生育酚酯、磷脂等的组合)。

·低共熔混合物引入到形成的乳液的疏水核中，或者该核是低共熔混合物本身。

·制备的自乳化组合物含有相对低浓度的至少一种非离子表面活性剂。

·使用通常带负电荷的生理学上可接受的抗衡离子(胆酸根离子、甘草酸根离子、磷酸甘油酯、琥珀酸生育酚酯、油酸根离子等)可增强肽(例如胰岛素或胰岛素类似物)与乳液油滴的缔合。

·该片剂含有相对较低浓度的渗透促进剂(薄荷醇、胆酸盐)，以避免粘膜组织损伤。

·该组合物可能有益于前驱糖尿病和新诊断的糖尿病患者，特别是糖尿病(Diatebes Mellitus)(2型)。饭前施用舌下胰岛素片可防止由于对患者体内葡萄糖调节控制不充分而导致的血液中糖水平的过度升高。(图5)

由于降低了粘膜组织对药物扩散的阻力，极性亲水多肽或蛋白质分子在粘膜的转运过程得以减缓。口腔粘膜可以根据口腔中的主要区域进行细分，由口底(舌下)和颊粘膜(面颊)组成的所谓的非角质化区域，以及由牙龈(gum(gingiva))、腭粘膜和嘴唇内侧组成的角质化区域。相对于皮肤，上皮细胞能够实现更迅速的转运，这是口腔的重要特征，其通过不断改变渗透性来影响药物吸收。

颊上皮是厚度为500-600μm的非角质化鳞状细胞层，由成熟程度及类型均不同的细胞层组成。最上表面区域由分化细胞的扁平致密层组成，约150μm厚。颊上皮高度血管化，并且基底区域的乳头状突起也呈现出细胞的高度血管化。由于与唾液的接触，粘膜的水合可以强烈地促进药物渗透。无论如何，肽在通过颊粘膜过程中，相对于其他屏障，粘液层的阻碍作用较低。口腔粘膜组织包含大量的细胞外物质，其不仅赋予上皮其弹性，而且还被认为有助于渗透性屏障。渗透性的区域差异取决于上皮厚度，角质化上皮的最终存在以及由上皮上层中的膜包被颗粒伸出的细胞间物质的组织。颊粘膜主要包含极性脂质，例如磷脂，胆固醇硫酸盐和糖基神经酰胺。这可以导致流动性并且可以产生具有特定质的微域。非角质化区域比角质化区域对水和亲水性化合物具有更高的渗透性。(Veuilleza等，“Factorsand Strategies for Improving Buccal Absorption of Peptides，”Eur.J.Pharm.Biopharm.，2001，51：93-109)。

两种主要途径似乎与通过膜组织的肽转运相关：细胞内(透细胞)的途径是：肽穿过上皮跨过细胞；细胞间途径是：肽通过细胞间脂质扩散。透细胞途径可以涉及通过被动转运(扩散、pH、分配)或通过主动转运(促进和载体介导的扩散、内吞作用)穿过顶端细胞膜，细胞内空间和基底外侧膜的渗透。肽的透细胞渗透性是各种物理化学性质的复杂函数，包括大小，亲脂性，氢键电位，电荷和构象。小极性分子通过细胞内途径穿透颊上皮。低摩尔尺寸的物质通过上皮细胞膜中的水性孔进行转运也是可能的。可用于宽分子量范围的物质的第二种途径是细胞间(细胞旁)途径。在细胞间隙内，可能存在至少两个途径，一个基本上是通过脂质双层的疏水途径，而第二个更亲水并且与邻近脂质的极性头部基团的窄水性区域相关联。物质通过上述两种途径转运后，具有几乎相同的熔解度。假定肽通过水性途径渗透，即细胞旁和水性孔道。细胞间运输通过上皮的细胞间连接复合物的被动扩散发生在上皮细胞之间。还已知口腔粘膜包含用于小分子和短肽的载体介导的(主动)运输系统。(Veuillez等，“Factors and Strategies for Improving Buccal Absorption ofPeptides，”，Eur.J.Pkarm.Biopharm.，2001，51(2)：93-109)。

根据目前的范例，渗透促进剂通过改变粘液流变学，即降低粘液层的粘度和弹性，以及通过增加膜流动性并因此促进跨细胞转运来改善粘膜肽吸收。

使用极性有机分子(NMP、DMSO、DMA、氮酮、萜烯、丙二醇等)作为渗透促进剂，会引起粘膜刺激，局部或全身的毒性反应，以及散发上述组合物的混合臭味。还由于在水中的高溶解度，大多数这些化合物不能引入亲脂性膜中并且改变膜流动性。此外，用作渗透促进剂的一些表面活性剂(月桂基硫酸钠、月桂酸钠、酰基糖苷、壬苯醇醚、玻雷吉(Brij)、脂肪酸的碱性盐和水杨酸)可破坏细胞膜并引起刺激。

非表面活性剂(例如萜烯(薄荷醇、冰片))可以改变粘膜脂质的流动性，但是需要较高的浓度，从而引起刺激性以及散发臭味。

将胰岛素引入到胶体递送系统(例如纳米颗粒或脂质体中)可改善药物转运，但由于蛋白质的高水溶性，药物引入的效率较低。它可以通过添加适当的抗衡离子，增加蛋白质和肽的疏水性来改善。

可以假设，一些渗透促进剂在渗透到粘膜层中并形成某种低共熔混合物之后，可能会与脂质组分相互作用，从而导致脂质流动性的增加和目标组分的渗透性的改善。

意外地发现，预形成的低共熔混合物以相对低的量引入到胶体递送系统(例如乳液，纳米乳液或胶束)中，引起了肽和蛋白质渗透性的快速和有效改善。与仅含有高浓度的渗透促进剂和表面活性剂的制剂相比，含有低共熔混合物的制剂的肽的生物效应的发生更快。

I.定义

为了方便起见，在进一步描述本发明之前，在此收集本说明书，实施例和所附权利要求中采用的某些术语。这些定义应该根据本公开的其余部分和本领域普通技术人员所理解的来阅读。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常理解相同的含义。

A.一般术语

在本公开的上下文中(特别是在所附权利要求的上下文中)，术语“一(a)”，“一个(an)”和“所述(the)”以及类似引用的使用，应被解释为覆盖单数和复数，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾。除非本文另有说明或上下文明显矛盾，本文所述的所有方法可以以任何合适的顺序进行。本文中提供的任何和所有示例或示例性语言(例如，诸如，优选的，优选地)的使用仅旨在进一步说明本公开的内容，而不对权利要求的范围构成限制。说明书中的任伺语言不应被解释为指示任何未要求保护的元素对于实施本公开是必要的。

如本文所使用的短语“和/或”应当被理解为是指这样结合的元素中的“任一个或两个都”，即在一些情况下连接存在并在其它情况下分离存在的元素。除非明确指出相反，否则不是由“和/或”子句具体标识的元素的其他元素可以可选地存在，无论与具体标识的那些元素相关或无关。因此，作为非限制性示例，涉及“A和/或B”，当用于与开放式语言例如“包含(comprising)”连接使用时是指，在一个实施方案中，含有A不含有B(可选地包括除了B以外的其他元素)；在另一个实施方案中，含有B不含有A(可选地包括除了A以外的其他元素)；在又另一个实施方案中，含有A和B两者(可选地包括其他元素)。

如本文所使用的，“或”应当理解为具有与如上定义的“和/或”相同的含义。例如，当分离列表中的项目时，“或”或“和/或”应被解释为包括的，即包括列表中元素的多个或至少一个，但也包括多于一个，和可选地，附加的未列出项目。只有清楚地指示相反的术语，例如“仅一个”或“恰好一个”，或者当在权利要求中使用时，“由......组成”将指包括许多或列表中的恰好一个元素。一般来说，本文使用的术语“或”只有在前面有排他性术语例如“任一”、“其中之一”、“只有其中之一“或”恰好其中之一“时，应解释为指示排他性替代(即“一个或另一个但不是两者”)。当在权利要求中使用时，“基本上由...组成”应当具有在专利法领域中使用的普通含义。

如本文所使用的，关于一个或多个元素的列表的短语“至少一个”应当被理解为表示从元素列表中的元素的任何一个或多个中选择的至少一个元素，但不是必须包括在元素列表中具体列出的每个元素中的至少一个，并且不排除元素列表中的元素的任何组合。无论与具体标识的那些元素相关或不相关，除了短语“至少一个”涉及的元素列表中具体标识的元素，该定义还允许其他元素可以可选地存在。因此，作为非限制性实例，在一个实施方案中，“A和B中的至少一个”(或等同地，“A或B中的至少一个”或等同地“A和/或B中的至少一个”)可以指至少一个，可选地包括多于一个A，不存在B(并且可选地包括除B之外的元素)；在另一个实施例中，指至少一个，可选地包括多于一个B，不存在A(并且可选地包括除A之外的元素)；在又另一个实施方案中，指至少一个，可选地包括多于一个A，和至少一个，可选地包括多于一个B(并且可选地包括其它元素)；等等。

如本文所用，所有过渡短语如“包含”、“包括”、“携带”、“具有”、“含有”、“涉及”、“保持”、“关联”、“与...相关联”及类似的短语应被理解为开放式的，即意味着包括但不限于。

单独数值的使用被表述为近似值，就像该值之前有词“大约(about)”或“近似(approximately)”。类似地，除非另有明确说明，否则本申请中指定的各种范围中的数值被表示为近似值，如同在所述范围内的最小值和最大值之前都有词“大约”或“近似”。以这种方式，高于和低于所述范围的变化可以用于实现与该范围内的值基本相同的结果。如本文所使用的，当提及数值时，术语“大约”和“近似”应当具有对与所公开的主题最密切相关的技术或与所讨论的范围或元素相关的技术领域的普通技术人员来说最平常和普通的含义。从严格的数值边界扩展的量取决于许多因素。例如，可以考虑的一些因素包括元素的临界性和/或一个给定量的变化对所要求保护的主题的性能的影响，以及本领域技术人员已知的其他考虑。如本文所使用的，对不同数值使用不同数量的有效数字并不意味着限制词语“大约”或“近似”的使用如何用于拓宽特定数值或范围。因此，作为一般情况，“大约”或“近似”加宽数值。此外，范围的公开旨在作为连续范围，包括最小值和最大值之间的每个值加上通过使用术语“大约”或“近似”所提供的范围的加宽。因此，除非本文中另有说明，否则本文中的数值范围的详述仅旨在用作单独指代落入该范围内的每个单独值的简化方法，并且每个单独的值如同其在本文中单独引用被并入本说明书中。

B.本公开的组合物相关术语

如本文所用，“胰岛素”包括与天然胰岛素具有类似活性的天然胰岛素、胰岛素原、胰岛素前药、胰岛素类似物、胰岛素衍生物、重组胰岛素或任伺来源的胰岛素或其任何可接受的形式。

“颊粘膜”包括颊内衬的口腔粘膜的部分。

“口腔粘膜“包括衬在口内部的粘膜，并且由称为口腔上皮的分层鳞状上皮组成。

“低共熔混合物”是指两种或更多种物质的混合物，其在低于单独任何物质或物质的其他任何混合物的熔点的温度下熔融。不局限于理论，低共熔混合物比纯物质或其它混合物具有更弱的晶格，这就减少了在熔化过程中所需的能量。

如本文所用，“渗透促进剂”是指能够提高一种或多种药物通过上皮细胞的渗透性的化合物或化合物的混合物。渗透促进剂加快了一种或多种药物的全身递送。

“渗透”或“渗透性”是指物质进入或通过上皮细胞的运动。通过上皮细胞渗透系统地递送物质。渗透可以主动或被动转运的方式通过细胞内或细胞间途径发生。

“舌下粘膜”包括位于舌头下的口腔粘膜的部分。

“表面活性剂”是指既含有疏水基团又含有亲水基团的有机化合物。亲水基团通常称为头部，疏水基团称为尾部。表面活性剂将吸附在疏水性组合物，例如油，和亲水性组合物，例如水，之间的界面处，其中亲水性头部将延伸到水中，并且疏水性尾部将延伸到油中。本文所用的“阴离子表面活性剂”是在其亲水头部含有一个或多个阴离子官能团的表面活性剂。阴离子官能团的非限制性实例是硫酸盐、磺酸盐、磷酸盐和羧酸盐。本文所用的“非离子表面活性剂”是不合带电官能团的表面活性剂。非离子表面活性剂的非限制性实例是脂肪醇。

C.治疗方法相关术语

本文所用的“经口施用”是指通过口腔递送治疗有效的药物来治疗疾病或病症。药剂可以通过口腔粘膜或穿过胃肠道的任何地方进行渗透。经口施用包括但不限于固体剂型，例如片剂、咀嚼片、锭剂、粉剂、溶解膜、胶剂，以及均匀和非均质液体，包括乳液。

“受试者”或“患者”是指任何哺乳动物(例如人)，例如可能对疾病或病症例如糖尿病敏感的哺乳动物。实例包括人、非人灵长类动物、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫或啮齿动物如小鼠、大鼠、仓鼠或豚鼠。在各种实施方案中，受试者是指已经或将会是治疗、观察或实验的对象的受试者。例如，受试者可以是诊断为患有糖尿病或以其他方式已知患有糖尿病的受试者，或者是基于受试者中已知的糖尿病选择用于治疗，观察或实验的受试者。

如本文所用，“治疗(treat)”、”治疗(treatment)“、或”治疗(treating)“是指疾病或病症或其至少一种体征或症状的改善。在另一个实施方案中，“治疗(treatment)或”治疗(treating)”是指至少一个可测量的物理参数的改善，不是必须由患者辨别。在又另一个实施方案中，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指减少疾病或病症的进展，例如通过与在治疗前的受试者中具有相同疾病或降低程度或速率或体征或症状的进展的参考群体相比，降低疾病进展的速率。在又另一个实施方案中，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指例如与参考群体或如本领域技术人员已知的确定这样的参数的其它方法相比，延迟疾病或病症的发作。

本文所用的短语“治疗有效量”是指能有效产生预期治疗效果的治疗有效试剂的量。因此，治疗有效量治疗或预防疾病或病症，改善至少一种体征或症状，例如，降低糖尿病患者的葡萄糖水平。在各种实施方案中，所述疾病或病症是糖尿病。

术语“治疗效果”是本领域公认的，并且是指在动物，特别是哺乳动物，更特别是人体中的由药理活性物质引起的局部或全身效应。因此，该术语意指任何用于在动物或人中诊断、治愈、缓解、治疗或预防疾病或增强预期生理或心理发育和状况的物质。

术语“调节”是本领域公认的，并且是指响应的上调(即激活或刺激)、下调(即抑制或压制)、或组合或分开的两者。

术语“全身给药”、“全身施用”、“外周给药”和“外周施用”是本领域公认的，并且是指除直接进入中枢神经系统之外的施用组合物，治疗剂或其它物质，使得其进入患者系统，并因此经历代谢和其他类似过程，例如静脉内、皮下或经口给药。

术语“胃肠外给药”和“胃肠外施用”是本领域公认的，并且是指非肠内局部给药，通常是通过注射的给药模式，包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心脏内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内和胸骨内注射。

术语“口内递送途径”适用于想要在口内，例如颊、舌或牙周，递送药物物质的产品。(Guidance for Industry and Review Staff.Nonclinical Safety Evaluation ofReformulated Drug Products and Products Intended for Administration byAlternate Route.FDA2008，第6页)。

D.制药学相关术语

术语“药学上可接受的抗衡离子”是指药学上可接受的阴离子或阳离子。在各种实施方案中，本发明包含药学上可接受的抗衡离子。药学上可接受的抗衡离子是药学上可接受的离子。非限制性实例包括但不限于柠檬酸盐、草酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酒石酸盐、油酸盐、单宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和扑酸盐(即1，1′-亚甲基-二-(2-羟基-3-萘甲酸酯))。

术语“药学上可接受的盐”是指可存在于本发明组合物中使用的化合物中的酸性或碱性基团的盐。包含在本发明组合物中的性质为碱性的化合物能够与各种无机和有机酸形成很多种盐。可用于制备这类碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸是形成无毒酸加成盐的那些，即包含药学上可接受的阴离子的盐，包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、单宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和扑酸盐(即1，1′-亚甲基-二-(2-羟基-3-萘甲酸酯))的盐。除了上述酸之外，包括在本发明组合物中的包括氨基部分的治疗有效试剂可与各种氨基酸形成药学上可接受的盐。包含在本发明组合物中的治疗有效的药剂，本质上是酸性的，能够与各种药学上可接受的阳离子形成碱盐。这种盐的实例包括碱金属或碱土金属盐和铵盐。

此外，如果以酸加成盐获得本文所述的治疗有效的试剂，则可以通过碱化酸盐的溶液来获得游离碱。相反，如果产物是游离碱，加成盐，特别是药学上可接受的加成盐，可以通过将游离碱溶解在合适的有机溶剂中并根据从碱性化合物制备酸加成盐的常规方法用酸处理溶液来制备。本领域技术人员将认识到可用于制备无毒的药学上可接受的加成盐的各种合成方法。

药学上可接受的盐可以衍生自选自以下的酸、1-羟基-2-萘甲酸、2，2-二氯乙酸、2-羟基乙磺酸、2-氧代戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水杨酸、乙酸、乙二酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、羊蜡酸(癸酸)、羊油酸(己酸)、羊脂酸(辛酸)、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1，2-二磺酸、乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘-1，5-二磺酸、萘-2-磺酸、烟酸、硝酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、甲苯磺酸、三氟乙酸和十一碳烯酸。

术语“生物可利用性”是本领域公认的，并且是指本公开的形式，其允许其或所施用量的一部分被受试者或患者吸收，并入，或以其他，对于被施用的受试者或患者在生理上是可行的。

术语“药学上可接受的载体”是本领域公认的，并且是指涉及从一个器官或身体部分向另一个器官或身体部位携带或运输任何添加剂、组合物或其组分的药学上可接受的材料、组合物或载体，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料。每种载体在与制剂的其他成分相容并且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。

术语“溶解时间”是指舌下给药的片剂完全溶解所需的平均时间。

术语“短溶解时间“是片剂在小于3分钟内在口中溶解时。

术语“中等溶解时间”是片剂在3-15分钟内在口中溶解时。

术语“长溶解时间”是片剂在15至45分钟内在口中溶解时。

术语“非常长的溶解时间”是片剂在45至180分钟内在口中溶解时。

II.制剂组合物

本申请提供了通过经过口腔粘膜的透粘膜渗透来递送治疗有效量的一种或多种治疗有效试剂以治疗疾病或病症的制剂，以及使用这些制剂的方法。本发明的一个优点是治疗有效的物质避免了胃中的酸催化水解引起的降解和整个胃肠道的其它降解。本发明的另一个优点是制剂可以全身递送对于透过胃肠道具有有限渗透性的试剂。

在各种实施方案中，本公开内容通过口腔粘膜渗透治疗活性试剂。在各种实施方案中，本发明通过颊粘膜渗透治疗活性试剂。在各种实施方案中，制剂通过舌下粘膜渗透治疗活性试剂。本发明可以通过含服或舌下粘膜渗透1、2、3或4种具有治疗活性的试剂。

A.治疗活性试剂

本教导可用于多种已知的且可以通过它们的效果来鉴定的治疗剂。在一些实施方案中，活性试剂选自生物分子、生物活性试剂、小分子、药物、前药、药物衍生物、蛋白质、肽、疫苗、佐剂、显像剂(例如荧光基团)或多核苷酸。在各种实施方案中，治疗活性试剂形成药学上可接受的盐。在各种实施方案中，治疗活性试剂与药学上可接受的抗衡离子形成复合物。

在各种实施方案中，治疗活性试剂是肽。治疗活性肽的非限制性实例包括降钙素、血管加压素、亮丙瑞林、奥曲肽、胰高血糖素样肽、利拉鲁肽、普兰林肽、格拉替雷、催产素、生长抑素、艾替班特、水蛭素、皮质素、血管紧张素拮抗剂、胆囊收缩素类似物、齐考诺肽、缓激肽抑制剂、其它肽衍生物和类似物。

在各种实施方案中，治疗活性试剂是蛋白质或蛋白质衍生物。蛋白质的非限制性实例包括干扰素、白介素、肿瘤坏死因子、生长因子。在各种实施方案中，治疗活性试剂是胰岛素。

B.载体和抗衡离子

多种实施方案是用一种或多种药学上可接受的载体配制的。在各种实施方案中，载体是生物相容的，即当插入或注射到受试者中时其通常不诱导不良反应。不良反应可包括免疫系统的显著炎症和/或载体的急性排斥，例如通过T细胞应答。当然，众所周知，“生物相容性”是相对术语，并且即使对于与活组织高度相容的载体，一定程度的免疫应答也是被预期的。然而，如本文所使用的，“生物相容性”是指至少一部分免疫系统对材料产生急性排斥，即，植入受试者的非生物相容性材料在受试者中引发足够严重的免疫应答，使得免疫系统对材料的排斥不能被充分控制，并且通常具有使得材料必须从受试者中除去的程度。

在各种实施方案中，载体是一种或多种物质的液体混合物。在一些实施方案中，液体混合物是疏水性的并且与水溶液不混溶。在各种实施方案中，液体混合物溶解治疗活性试剂。在各种实施方案中，液体混合物溶解包含治疗活性试剂和药学上可接受的抗衡离子的复合物。在各种实施方案中，液体混合物溶解包含治疗活性试剂和药学上可接受的盐的复合物。在各种实施方案中，载体与水不混溶。药学上可接受的载体可包括但不限于粘合剂、填充剂、润滑剂、稀释剂、非泡腾崩解剂、泡腾崩解剂、矫味剂、甜味剂、分散剂、着色剂、掩味剂、释放控制聚合物及其组合。

在各种实施方案中，载体具有约-10℃至约70℃，约0℃至约60℃，约10℃至约50℃，约10℃至约40℃，约10℃至约35℃，约15℃至约40℃，约15℃至约35℃，约20℃至约35℃，约25℃至约35℃，约30℃至约35℃，或约25℃至约30℃之间的熔点。在各种实施方案中，固体材料具有约20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃的熔点。在各种实施方案中，固体载体与湿粘膜表面接触时熔化并变成液体载体。

在各种实施方案中，载体是低共熔混合物。低共熔混合物可以由2、3、4或5种化合物组成。

在一些实施方案中，载体是其中每种组分的低共熔浓度在约0.01％至20.0％，0.01％至15.0％，0.01％至10.0％，0.01％至8.0％，0.01％至7.0％，0.01％至6.0％，0.01％至5.0％，0.01％至4.0％，0.01％至3.0％，0.01％至2.0％或0.01％至1.0％(w/w)的化合物的混合物。例如，如果低共熔混合物包含50％的A和50％的B，则60％的A和40％的B将在10％以内。作为另一个实例，如果低共熔混合物包含50％的A、30％的B和20％的C，60％的A、20％的B和30％的C则在10％以内。

各种实施方案包含药学上的抗衡离子。不局限于理论，当抗衡离子与活性试剂形成复合物时，所述试剂亲水性较低且在疏水性溶剂中更易溶解。在一些实施方案中，抗衡离子复合物比非复合剂更疏水。在一些实施方案中，抗衡离子复合物使辛醇-水混合物的辛醇部分中的试剂的比例增加约1.25至约10，约10至约25，约25至约50，约50至约75，约75至约100，约100至约125，约125至约150，约150至约175，约175至约200，约200至约300，约300至约400，约400至约500，约500至约600，约600至约1000倍，约1000至约2000倍，约2000至约5000倍，约5000至约20000倍，约20000至约100000倍。

抗衡离子的非限制性实例是二酰基磷脂酰基甘油衍生物，例如二肉豆蔻基酰基磷脂酰基甘油、二油酰基磷脂酰基甘油、二棕榈酰基磷脂酰基甘油和二硬脂酰基磷脂酰基甘油，α-d-琥珀酸生育酚酯、二辛基磺基琥珀酸钠、单取代的和二取代的十六烷基磷酸酯、胆酸盐、脱氧胆酸盐、甘草酸铵、胆固醇半琥珀酸酯和胆固醇硫酸酯。

C.渗透促进剂

各种实施方案包含一种或多种渗透促进剂。渗透促进剂促进药物通过口腔粘膜的透细胞和/或细胞旁渗透。不局限于理论，渗透促进剂的建议机制包括降低粘液层的粘度和/或弹性，增加脂质双层膜的流动性或改变跨上皮细胞层的紧密连接。不幸的是，许多渗透促进剂是有毒的。另外，许多渗透促进剂必须以高浓度使用，例如大于制剂的5％(w/w)，以有效增强渗透，这可能会损伤上皮细胞。

本发明的各种实施方案包含1、2、3或4种渗透促进剂。在一些实施方案中，渗透促进剂包括化合物的混合物。渗透促进剂的非限制性实例包括：极性溶剂如液体聚乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜和N-甲基吡咯烷酮；脂质扰动剂如癸基甲基亚砜；非离子表面活性剂如聚山梨糖醇酯、泊洛沙姆、烷基葡糖苷和其它糖酯；阴离子表面活性剂如月桂基硫酸钠和脂肪酸盐；磷脂如卵磷脂、磷脂酰胆碱；低共熔混合物或其中每种化合物占低共熔混合物的1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％的混合物；胆汁酸盐如胆酸钠、脱氧胆酸盐、牛磺胆酸盐及其类似物；萜烯如薄荷醇、冰片和桉树脑；螯合剂如乙二胺四乙酸和柠檬酸；脂质如甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯；乙二醇酯和各种环糊精。

在一些实施方案中，渗透促进剂是一种或多种表面活性剂。在各种实施方案中，表面活性剂是聚山梨糖醇酯、泊洛沙姆、烷基葡糖苷、其它糖酯、月桂基硫酸钠(SLS)和脂肪酸盐。在另外的实施方案中，渗透促进剂是非离子表面活性剂。在各种实施方案中，非离子表面活性剂选自聚山梨酯、泊洛沙姆、烷基葡糖苷或其它糖酯的组。在另外的实施方案中，渗透促进剂是低浓度的非离子表面活性剂。这些教导的制剂的各种实施方案含有约0％至约20％(w/w)的一种或多种非离子表面活性剂。在各种实施方案中，本发明可包含一定量的一种或多种表面活性剂或非离子表面活性剂，其量为约0.00％、0.25％、0.50％、0.75％、1.00％、1.25％、1.50％、1.75％、2.00％2.25％、2.50％、2.75％、3.00％、3.25％、3.50％、3.75％、4.00％、4.25％、4.50％、4.75％、5.00％、5.25％、5.50％、5.75％、6.00％、6.25％、6.50％、6.75％、7.00％、7.25％、7.50％、7.75％、8.00％、8.25％、8.50％、8.75％、9.00％、9.25％、9.50％、9.75％、10.00％、10.50％、11.00％、11.50％、12.00％、12.50％、13.00％、13.50％、14.00％、14.50％、15.00％、15.50％、16.00％、16.50％、17.00％、17.50％、18.00％、18.50％、19.00％、19.50％、或20.00％(w/w)。

在各种实施方案中，渗透促进剂是2至5种化合物的混合物。一些实施方案包含2、3、4或5种化合物。渗透促进剂的非限制性实例包括薄荷醇、维生素E琥珀酸酯、氢化或纯化的卵磷脂、麝香草酚、维生素E琥珀酸酯、脂肪酸混合物的组合如月桂酸和硬脂酸或月桂酸、棕榈酸、胆固醇或油酸的组合。在各种实施方案中，化合物的混合物具有约-10℃至约70℃，约0℃至约60℃，约10℃至约50℃，约10℃至约40℃，约10℃至约35℃，约15℃至约40℃，约15℃至约35℃，约20℃至约35℃，约25℃至约35℃，约30℃至约35℃，或约25℃至约30℃之间的熔点。在各种实施方案中，化合物的混合物具有约20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃的熔点。在各种实施方案中，化合物的混合物在放置至患者口腔时熔化。

在一些实施方案中，渗透促进剂是低共熔混合物。在各种实施方案中，低共熔混合物包含2至5种化合物。低共熔混合物可以含有2、3、4或5种化合物。在其它实施方案中，渗透促进剂是化合物的混合物，其中每种组分占低共熔浓度的约0.01％至20.0％，0.01％至15.0％，0.01％至10.0％，0.01％至8.0％，0.01％至7.0％，0.01％至6.0％，0.01％至5.0％，0.01％至4.0％，0.01％至3.0％，0.01％至2.0％或0.01％至1.0％(w/w)之间。例如，如果低共熔混合物包含50％的A和50％的B，则60％的A和40％的B将在10％以内。作为另一个实例，如果低共熔混合物包含50％的A、30％的B和20％的C，60％的A、20％的B和30％的C则在10％以内。

在各种实施方案中，制剂包含含有低浓度化合物混合物的渗透促进剂。这些教导的制剂的各种实施方案含有约0％至约10％(w/w)的包含化合物的混合物的渗透促进剂。这些教导的制剂的各种实施方案含有约0％至约10％(w/w)的包含化合物的混合物的渗透促进剂。在各种实施方案中，本发明可以包含一定量含有约0.00％、0.25％、0.50％、0.75％、1.00％、1.25％、1.50％、1.75％、2.00％、2.25％、2.50％、2.75％、3.00％、3.25％、3.50％、3.75％、4.00％、4.25％、4.50％、4.75％、5.00％、5.25％、5.50％、5.75％、6.00％、6.25％、6.50％、6.75％、7.00％、7.25％、7.50％、7.75％、8.00％、8.25％、8.50％、8.75％、9.00％、9.25％、9.50％、9.75％或10.00％的化合物的混合物的渗透促进剂。

D.颗粒的制剂

在各种实施方案中，治疗试剂被配制成颗粒。在各种实施方案中，颗粒增加治疗活性试剂通过口腔粘膜的渗透。不局限于理论，颗粒可以增加治疗活性试剂的渗透，因为整个颗粒可以通过口腔粘膜渗透。或者，位于与口腔粘膜相邻的颗粒内的高浓度活性试剂，可以产生浓度梯度，从而驱动活性试剂穿过口腔粘膜。

在一些实施方案中，颗粒是微粒，纳米颗粒或皮质颗粒。在其他实施方案中，颗粒是乳液滴，脂质体，胶束，脂质复合物或复合物。各种实施方案包含至少部分疏水的基础组分。基础组分的疏水性质有助于在水性介质中形成颗粒。在各种实施方案中，基础组分是两性的，即具有亲水部分和疏水部分，或相对亲水部分和相对疏水部分。各种基础组分的疏水和/或亲水性质有助于在水性介质中形成颗粒。在一些实施方案中，基础组分包含一种或多种脂质，一种或多种聚合物或一种或多种油。

颗粒可以具有基本上为球形或非球形的构型(例如，在膨胀或收缩时)。颗粒可以包括聚合物共混物。在各种实施方案中，颗粒的基础组分包含聚合物，小分子或其混合物。基础组分可以是生物衍生的。例如，小分子可以是例如脂质。本文所用的“脂质”是指疏水性或两性小分子。在不试图限制本教导的范围的情况下，由于脂质的两性，脂质可以形成包括脂质体和胶束在内的颗粒。

在一些实施方案中，基础组分包含聚合物。例如，聚合物可以是生物聚合物。非限制性实例包括肽或蛋白质(即各种氨基酸的聚合物)、核酸如DNA或RNA。在某些实施方案中，聚合物是两性的，即具有亲水部分和疏水部分，或相对亲水部分和相对疏水部分。

在一些实施方案中，基础组分包含一种或多种油。如本文所用，“油”可以是在23℃下的固体或液体，但当处于液体状态时，油与水不混溶。如本文所用，“不混溶的”是指不能以所有比例混合以形成均匀溶液的化合物。当油和水混合时，两种物质可以分离形成两个单独的均匀层，形成多个水包油颗粒或其组合。在某些实施方案中，油是两亲的，即具有亲水部分和疏水部分，或相对亲水部分和相对疏水部分。

在各种实施方案中，基础组分是生物相容的，即当插入或注射到受试者中时，其通常不诱导不良反应。不良反应可包括免疫系统对聚合物的显著炎症和/或急性排斥，例如通过T细胞应答。当然，公知“生物相容性”是相对术语，并且即使对于与活组织高度相容的聚合物，一定程度的免疫应答也是被预期的。然而，如本文所使用的，“生物相容性”是指至少一部分免疫系统对材料的急性排斥，即，植入受试者的非生物相容性材料在受试者中引发足够严重的免疫应答，使得免疫系统对材料的排斥不能被充分控制，并且通常具有使得材料必须从受试者中除去的程度。

可用于本公开的各种实施方案中的生物相容性聚合物的非限制性实例包括聚二氧杂环己酮(PDO)、聚羟基链烷酸酯、聚羟基丁酸酯、聚(癸二酸甘油酯)、聚乙交酯(polyglycolide)、多糖、聚丙交酯(polylactide)、聚己内酯或包括这些和/或其它聚合物的共聚物或衍生物。例如，生物相容性聚合物是壳聚糖或其衍生物。

在各种实施方案中，基础组分包含生物活性物质(例如胰岛素)，低共熔混合物组分(例如L-薄荷醇与琥珀酸生育酚酯、癸酸和月桂酸的；L-薄荷醇和α-D-乙酸生育酚酯或α-D-生育酚琥珀酸酯、L-薄荷醇和卵磷脂)，一种或多种疏水组分如生物相容性油(例如中链甘油三酯，甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯，维生素E、精油、磷脂)；抗衡离子(例如α-D-生育酚琥珀酸酯、二肉豆蔻酰或二硬脂酰磷脂酰甘油、胆固醇硫酸酯、硫辛酸或磺基琥珀酸二辛酯)；一种或多种表面活性剂(例如聚山梨酯、生育酚、PEG硬脂酸酯、乙氧基化蓖麻油、糖酯、脂肪酸聚甘油酯、磷脂)。

可用于本公开的各种实施方案中的生物相容性油的非限制性实例包括甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯、精油、生育酚、生育三烯酚、脂肪酸和有机酸的脂肪族和芳香族酯。一些油实施方案包含低共熔混合物。在各种实施方案中，油具有约-10℃至约70℃，约0℃至约60℃，约10℃至约50℃，约10℃至约40℃，约10℃至约35℃，约15℃至约40℃，约15℃至约35℃，约20℃至约35℃，约25℃至约35℃，约30℃至约35℃，或约25℃至约30℃的熔点。在各种实施方案中，油材料具有约20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃的熔点。在各种实施方案中，固体载体在放置于患者口中时熔化并变成液体载体。

在各种实施方案中，本发明的制剂包含乳化剂。如本文所用，“乳化剂”是稳定颗粒形成的物质。可用于本公开的各种实施方案中的乳化剂的非限制性实例包括表面活性剂。

在各种实施方案中，本发明的制剂包含少量的一种或多种表面活性剂。在一些实施方案中，表面活性剂为基础组分重量的约0.10％至约50％，约0.1％至约45.0％，约0.1％至约30％，约0.1％至25％。在其它实施方案中，表面活性剂为基础组分重量的约0.10％、0.50％、0.75％、0.10％、1.25％、1.50％、1.75％、2.0％、2.25％、2.50％、2.75％、3.00％、3.25％、3.50％3.75％、4.50％、4.75％、5.0％、5.25％、5.50％、5.75％、6.00％、6.25％、6.50％、6.75％、7.00％、7.25％、7.50、7.75％8.00％、8.25％、8.50％、8.75％、9.00％、9.25％、10.00％、11.00％、12.00％、13.00％、14.00％、15.00％、16.00％、17.00％、18.00％、19.00％、20.00％、22.50％、25.00％、27.50％、30％、35％、40％或50％。

在各种实施方案中，当本发明的制剂被加入到水性介质中时，颗粒自形成。如本文所使用的，“自形成”是指没有经过基础混合的颗粒的形成。在各种实施方案中，颗粒于在水性介质中混合制剂时形成。例如，混合可以通过咀嚼，舌头运动或唾液运动在体内发生。

在各种实施方案中，颗粒包含一种或多种治疗活性试剂。一些颗粒实施方案进一步包含由治疗活性试剂和抗衡离子形成的复合物。其它颗粒实施方案包含由治疗活性试剂和药学上可接受的盐形成的复合物。在一些实施方案中，至少一种治疗活性试剂包含在本教导的颗粒内。术语“包含在其中”可以表示“位于腔中”、“完全嵌入”或“部分嵌入”。例如，至少一种治疗活性试剂可以位于颗粒中形成的空腔中。在某些实施方案中，至少一种治疗活性试剂位于颗粒的空腔中。在某些实施方案中，至少一种治疗活性试剂完全嵌入在颗粒中。在某些实施方案中，至少一种化合物部分嵌入在颗粒中。

在各种实施方案中，大量的至少一种治疗活性试剂包含在本教导的颗粒内。在一些实施方案中，本发明的制剂中包含的至少一种治疗活性试剂的总量的约90％或更多，约80％或更多，约70％或更多，或约60％或更多包含在颗粒内。在某些实施方案中，包含在本发明的制剂中的至少一种治疗活性制剂的总量的约80％或更多包含在颗粒内。在某些实施方案中，包含在本发明制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约90％或更多包含在颗粒内。在某些实施方案中，包含在本发明制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约95％或更多包含在颗粒内。

在各种实施方案中，包含在本教导的制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约50％和更多，约40％或更多，约30％或更多，约20％或更多，或约10％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本发明的制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约10％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约20％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本发明的制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约30％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本发明制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约40％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本发明制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的约50％或更多包含在颗粒内。

在各种实施方案中，包含在本发明的制剂中的至少一种治疗活性试剂的总量的50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、100％包含在颗粒内。

在各种实施方案中，在形成多个颗粒之前，治疗活性试剂与溶液中的基础组分的比例可以影响颗粒中治疗活性试剂的载量百分比和/或颗粒的平均尺寸。例如，治疗活性试剂的重量百分比增加到基础组分的重量百分比可以增加治疗活性试剂在颗粒内的载量百分比。然而，形成的颗粒中的化合物的载量百分比可以或可以不与在颗粒形成期间提供的治疗活性试剂的重量百分比相关。

在一些实施方案中，在包含治疗活性试剂和基础组分的混合物中提供的至少一种治疗活性试剂的重量百分比为至少约1％，至少约5％，至少约10％，在至少约20％，至少约30％，至少约40％，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约100％的基础组分，或更多。在某些实施方案中，重量百分比为约1％至约10％之间，约1％至约5％之间，约5％至约90％之间，约5％至约80％之间，约5％至约50％之间，约5％至约30％，约5％至30％之间，约50％至约90％之间或其中的任何范围。在具体实施方案中，重量百分比为约1％至约30％或约5至约20％。例如，重量百分比可以为约10％。

不局限于理论，颗粒的尺寸可以改变本发明的化合物从颗粒的递送(例如，有效载荷，药物流出，聚集，递送到预期位置等)。递送系统中使用的颗粒的尺寸可以基于应用来选择。

在各种实施方案中，在本教导的颗粒内包含大量的载体。在一些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体的总量的90％或更多，约80％或更多，约70％或更多，或约60％或更多包含在颗粒内。在某些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体的总量的约80％或更多包含在颗粒内。在某些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约90％或更多包含在颗粒内。在某些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体的总量的约95％或更多包含在颗粒内。

在各种实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约50％和更多，约40％或更多，约30％或更多，约20％或更多，或约10％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约10％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约20％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约30％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约40％或更多包含在颗粒内。在一些实施方案中，包含在本教导的制剂中的载体总量的约50％或更多包含在颗粒内。

在各种实施方案中，颗粒包含一种或多种渗透促进剂。在一些实施方案中，渗透促进剂是一种或多种表面活性剂。在一些实施方案中，包含表面活性剂和基础组分的混合物中提供的一种或多种表面活性剂的重量百分比小于约1％，小于约5％，小于10％，小于约15％或小于约20％。在各种实施方案中，渗透促进剂为基础组分重量的约0.10％、0.50％、0.75％、0.10％、1.25％、1.50％、1.75％、2.0％、2.25％、2.50％、2.75％、3.00％、3.25％、3.50％3.75％、4.00％、4.25％、4.50％、4.75％、5.0％、5.25％、5.50％、5.75％、6.00％、6.25％、6.50％、6.75％、7.00％、7.25％、7.50、7.75％、8.00％、8.25％、8.50％、8.75％、9.00％、9.25％、10.00％。

在各种实施方案中，颗粒可以是纳米颗粒，即该颗粒具有小于约1微米的特征尺寸，其中颗粒的特征尺寸是与颗粒具有相同体积的完美球体的直径。多个颗粒可以用平均直径(例如，多个颗粒的平均直径)来表征。在一些实施方案中，颗粒的直径可以具有高斯型分布。在一些实施方案中，多个颗粒具有小于约300nm，小于约250nm，小于约200nm，小于约150nm，小于约100nm，小于约50nm，小于约30nm，小于约10nm，小于约3nm或小于约1nm的平均直径。在一些实施方案中，颗粒的平均直径为至少约5nm，至少约10nm，至少约30nm，至少约35nm，至少约40nm，至少约45nm，至少约50nm，至少约65nm，至少约100nm，至少约150nm或更大。在某些实施方案中，多个颗粒具有约10nm，约25nm，约50nm，约75nm，约100nm，约150nm，约200nm，约250nm，约300nm，约500nm等的平均直径。在一些实施方案中，多个颗粒的平均直径为约10nm至约500nm之间，约50nm至约400nm之间，约100nm至约300nm之间，约150nm至约250nm之间，约175nm至约225nm之间，等等。在一些实施方案中，多个颗粒具有约10nm至约500nm之间，约20nm至约400nm之间，约30nm至约300nm之间，约30nm至约200nm之间，约30nm至约175nm之间，约30nm至约150nm之间，约30nm至约120nm之间，约30nm和约100nm之间等的平均直径。例如，平均直径可以在约50nm至80nm之间。

在一些实施方案中，颗粒具有小于约500nm、400nm、300nm、250nm、200nm、180nm、150nm、120nm、100nm、90nm、80nm、70nm、60nm、50nm、40nm、30nm或20nm的平均表征直径。在其它实施方案中，颗粒具有10nm、20nm、30nm、40nm、50nm、60nm、70nm、80nm、90nm、100nm、120nm、150nm、180nm、200nm、250nm或300nm的平均表征直径。在另外的实施方案中，颗粒的平均表征直径为10-500nm，10-400nm，10-300nm，10-250nm，10-200nm，10-150nm，10-100nm，10-75nm，10-50nm，50-500nm，50-400nm，50-300nm，50-200nm，50-150nm，50-100nm，50-75nm，100-500nm，100-400nm 100-300nm，100-250nm，100-200nm，100-150nm，150-500nm，150-400nm，150-300nm，150-250nm，150-200nm，200-500nm，200-400nm，200-300nm，200-250nm，200-500nm，200-400nm或200-300nm。

其他实施例、目的、特征和优点将在以下实施例的详细描述中阐述，并且部分地将从描述中明显的了解到，或者可通过实践所要求保护的公开内容而习得。这些目的和优点将通过本文描述和要求保护的组合物和方法来实现和获得。前面的概要是基于这样的理解而做出的，即，其被认为是本文所公开的一些实施方案的简述和一般概要，仅为了读者的利益和方便而提供，并且不旨在以任何方式限定范围或等同物的范围，所附权利要求书被合法地授予权利。应当认识到，上述实施方案可以另外包含填料、助流剂、调味剂、润滑剂和防腐剂。

E.治疗疾病和病症的方法

在另外的方面，本公开内容特征在于在有需要的受试者中治疗病症例如糖尿病、高血糖症、肥胖症、代谢综合征或其他病症的方法，所述方法包括向受试者口内施用治疗有效量的上述各种药物制剂中的活性试剂。

在一些实施方案中，制剂作为固体药物制剂施用，例如片剂、咀嚼片、锭剂、粉末、溶解膜或胶。在各种实施方案中，固体药物制剂具有低于37℃的熔点，因此在患者口中熔融以形成液体制剂。在一些实施方案中，制剂作为液体制剂给药。

在各种实施方案中，制剂与口腔含水环境不混溶。在一些实施方案中，制剂包含一种或多种乳化剂。在另外的实施方案中，制剂乳化以形成颗粒。在各种实施方案中，活性试剂或抗衡离子复合物和载体在颗粒内部聚集。在一些实施方案中，一种或多种渗透促进剂在颗粒内部聚集。在一些实施方案中，邻近口腔粘膜的颗粒的存在产生了扩散的理想环境，因为颗粒具有比口腔粘膜上衬的上皮细胞更高浓度的治疗活性试剂或抗衡离子复合物。在各种实施方案中，渗透促进剂促进治疗活性试剂或抗衡离子复合物通过口腔粘膜的渗透。在其他实施方案中，渗透促进剂促进整个颗粒通过口腔粘膜的渗透。在各种实施方案中，颗粒逐渐释放治疗活性试剂或抗衡离子复合物。在其他实施方案中，颗粒崩解并立刻释放大部分治疗活性试剂或抗衡离子复合物。

III.实施例

以下实施例旨在说明本发明的某些实施方案，但没有囊括本发明的全部范围，因此不应被解释为限制本发明的范围。

A.低共熔混合物的研究

研究了由生理学上可接受的组分形成并且可经口给予的几种低共熔混合物。下表1包括这种低共熔组合物的一些非限制性示例。

表1.生理学上可接受的化合物的低共熔混合物

所述的低共熔组合物可以通过与组分进行组合的方式制备，或必要的时候进行轻微加热以加速混合。低共熔混合物的形成在一些情况下可以通过组分的研磨来加速。一些被测试的低共熔混合物由于熔点较低(低于37℃)而在口中液化。所形成的低共熔混合物可以引入固体剂型如压制片剂、锭剂或含膜中。

B.胰岛素效价

一个国际单位(IU)的人胰岛素等同于0.0347mg的干晶人胰岛素(28.8IU/mg)。另一方面，1个USP单位的牛(Bovine(beef))胰岛素等同于0.0342mg的纯胰岛素，1个USP单位的猪(Pork(swine))胰岛素等同于0.0345mg的纯胰岛素，1个USP单位的人胰岛素等同于0.0347mg的纯胰岛素。

出于非限制性说明的目的，在下文中给出了压制片剂组合物的示例。未包衣的片剂通过本领域技术人员已知的标准制剂方法(例如干混、直接压制、压实、制粒等)制备。

C.含有胰岛素的舌下片剂

实施例1：比较剂

将山梨糖醇20.0g(P，Cerestar，美国或P 150DC，Roquette，法国)小心地与196mg结晶胰岛素(胰岛素USP，水含量9.5％，27.7单位/mg的干材料)混合。加入500mg细粉末的PEG-3350NF并充分混合，然后使用单冲压片机压制圆形凹片(207mg重，8mm直径)。所形成的片剂的硬度为10-14kP，并且片剂在4-7分钟内在口中熔解。

安慰剂片剂以类似但不含胰岛素的方式制备。所形成的片剂(205mg重量，8mm直径)的硬度为10-13kP。片剂在4-7分钟内在口中溶解。表2显示含有胰岛素但不含低共熔混合物的压制片剂中每片的组合物(以mg计)。

表2.不含低共熔混合物的胰岛素压制片剂(每片的组成，mg)

实施例2：含有磷脂的舌下胰岛素片剂

使用木糖醇(DC，Cerestar)、微晶纤维素(102)、胶体二氧化硅和纯化大豆卵磷脂制备片剂。在与结晶胰岛素和三氯蔗糖结合后，将共混物小心地混合，过筛，然后与PEG-3350共混并压制成圆形(8mm)凹形片(硬度8-10kP)。所形成的片剂在8-10分钟内在口中溶解。

实施例3：含有大豆卵磷脂和非离子表面活性剂的舌下胰岛素片剂

如实施例2所述制备的片剂，但含有卵磷脂和选择的非离子表面活性剂的组合。

实施例4：含有卵磷脂和生物粘附聚合物的舌下胰岛素片剂

将甘露醇(M200，Merck)、微晶纤维素(102)、低分子量壳聚糖(Sigma-Aldrich，USA)和胶态二氧化硅混合并与卵磷脂合并。在添加结晶胰岛素和甜味剂之后，将混合物小心地混合，过筛，与谷氨酸和PEG-3350共混，并压制成椭圆形(6×16mm)凹形片(重量307mg，硬度4-6kP)。所形成的片剂在15-25分钟内在口中溶解。

实施例5：

类似地制备含有卡波姆974P NF(Lubrizol Corp.)的制剂，但不加入氨基酸。合并甘露醇(M200，Merck)、微晶纤维素(102)、卡波姆974P NF(FubrizolCorp.)、卵磷脂、聚乙烯吡咯烷酮和胶体二氧化硅。在加入结晶胰岛素和甜味剂后，将共混物混合，过筛，然后将8mm的片剂(大约重量257mg)压制成5-9kP硬度的片剂。所形成的片剂在20-35分钟内在口中溶解。

实施例6：

将甘露醇(M200，Merck)、胶体二氧化硅与卵磷脂、PEG硬脂酸酯和聚乙烯吡咯烷酮混合。在加入结晶胰岛素和甜味剂后，混合物过筛，然后将圆形8mm片剂(大约重量213mg)压制成硬度为7-10kP硬度的片剂，其在15-20分钟内在口中溶解。

实施例7：

甘露醇(M200，Merck)、胶体二氧化硅与卵磷脂、PEG硬脂酸酯和聚乙烯吡咯烷酮充分混合。加入结晶胰岛素，然后加入疏水抗衡离子组分的钠盐(Dimirystoylphosphatidylglycerol)和甜味剂；进一步混合，过筛，然后将椭圆形片剂(大约重量218mg)压制成5-9kP硬度的片剂。所形成的片剂在10-18分钟内在口中溶解。

下一组实施例描述了含有低共熔混合物的制剂。以与实施例7中所述类似的方式制备实施例8-13的片剂；但是，组合物中加入低共熔混合物的组分。这些制剂示于下表3中。

表3.含有卵磷脂、薄荷醇和维生素E的低共熔混合物的胰岛素压制片剂(每片的组成，mg)

	实施例8	实施例9	实施例10	实施例11	实施例12	实施例13	实施例14
								胰岛素	2.2	2.0	2.2	2.1	2.2	2.2	2.0
卵磷脂(NLT 80％PC)	5	7.5	7.5	7.5	7.5	7.5	5
								PEG硬脂酸酯	20	20	20	20	20	20	10
聚乙烯吡咯烷酮(K-90)	15	15					10
								聚乙烯吡咯烷酮(K-30)			10	10	10	10
薄荷醇	1	1.2	4.8	5	5	5	5
								D-α-生育酚琥珀酸酯	0.3	0.3	1.2	1.2	1.2	1.2	1.2
脱氧胆酸钠				5		5	5
								二辛基磺基琥珀酸钠(多库酯钠)					10
二肉豆蔻酰磷脂酰甘油钠盐		7.5	7.5	7.5	7.5	7.5	7.5
								甘草酸铵		10	10	10	10	10	10
壳聚糖乳酸盐(低分子量)						30
								聚氧乙烯(polyox)WSR COAG 7mln							50
酒石酸					2
								琥珀酸						2
柠檬酸							2.5
								维生素E乙酸酯			2	2	2	2	2
三氯蔗糖	1	1	1	1	1	1	1
								二氧化硅	10	10	10	10	10	10	10
PEG 3350(润滑剂)	5	5	5	5	5	5	5
								甘露醇	100	150
山梨糖醇			130	130	130	110	100

实施例8：

低共熔混合物(薄荷醇、维生素E琥珀酸酯和卵磷脂)的组分与甘露醇(M200，Merck)、胶体二氧化硅、PEG硬脂酸酯和聚乙烯吡咯烷酮组合。加入结晶胰岛素，然后加入甜味剂和润滑剂(PEG-3350)；进一步混合，过筛，然后将圆形片剂(大约重量160mg)压制成硬度为4-5kP的片剂，并且其在4-9分钟内在口中溶解。

实施例9-14

这些实施例以与实施例8中所述类似的方式制备；但是，实施例9-14具有更高含量的低共熔组分，并另外含有不同的抗衡离子和阴离子表面活性剂(甘草酸铵、脱氧胆酸钠、琥珀酸二辛酯磺酸钠)和生物粘附聚合物。在一些制剂中，使用山梨糖醇代替木糖醇。实施例13的制剂另外含有生物粘附聚合物(壳聚糖)。

实施例15-30

这些实施例证明了将各种低共熔组分、抗衡离子、表面活性剂和其它成分引入用于口内(舌下或含服)给药的压片中的可能性。这些制剂列于下表4中。

D.与自乳化组合物相关的胰岛素的测定

研究了几种含有低共熔混合物、抗衡离子和表面活性剂的自乳化组合物与乳液的油滴相缔合的胰岛素的水平，所述乳液在溶解于模拟唾液(12mmol磷酸二氢钾、40mmol氯化钠、1.5mmol氯化钙)后形成。使用具有膜分子量截留值50,000道尔顿的离心过滤装置(，Millipore Corporation，美国)在片剂的溶液中测定与胶体递送系统相关的胰岛素的水平。

将安慰剂片剂和含有胰岛素的片剂分别在37℃下溶解在等量的模拟唾液中。将400mcl获得的胶体转移到离心过滤装置中并在4000g下离心30分钟。使用适当的分析方法测定澄清滤液中胰岛素的浓度。模拟唾液中的的胰岛素溶液用作对照。

根据获得的结果，与形成的胶体系统(水包油乳液的液滴)相缔合的胰岛素对于不同的组合物在50-95％的范围内。

葡萄糖控制实验

在标准化液体早餐(2x235mL Nutri-total^TM，含有34g糖、40g淀粉(总碳水化合物108g)、19g总脂肪、26g蛋白质；能量-710Cal)后进行餐后葡萄糖监测。每个参与者在标准化液体早餐前30分钟接受胰岛素或安慰剂片剂。在30、60、120、180和240分钟时采集用于C-肽和葡萄糖试验的血样。

使用校准的葡萄糖计(Aviva，Roche Diagnostics GmbH，德国)和合适的试纸条测定葡萄糖血液浓度。使用合适的人C-肽ELISA试剂盒(Millipore，美国)和比色仪测定血浆中的C-肽浓度。

在另一组实验中，在早餐后2小时舌下施用胰岛素片剂，并持续高达6小时观察葡萄糖水平(表5)。

如表5所示，图8A和图8B所示，在自乳化组合物中引入低共熔混合物改善了胰岛素的透粘膜渗透。当使用低共熔混合物、合适的表面活性剂、二酰基磷酸甘油抗衡离子和胆汁酸的组合时，达到最好的结果。一些组分例如生物粘附性聚合物可能降低生物活性肽的作用，可能是由于延长了片剂在口中的溶解时间和降低了药物浓度梯度。磺化抗衡离子的使用(例如磺基琥珀酸二辛酯)，始终抑制片剂中胰岛素的功效。然而，在大多数情况下，使用低共熔混合物显著改善剂型的肽渗透和葡萄糖的降低。参见图1-5和9。

压制片剂中的自乳化组合物中含有的胰岛素和各种组分，形成低共熔混合物和其他化合物，通过舌下给药方式形成适当的水包油乳液，并且其中胰岛素可与乳液的油滴相缔合，显著降低了空腹或餐后条件下血糖人类参与者的血糖水平。血液中C-肽浓度的显著降低，提供了成功的胰岛素透粘膜递送的明确证据(图6和图7)。所形成的乳液之一的液滴尺寸显示在图10上。

Claims (63)

1.一种用于生物活性多肽和蛋白质的口内透粘膜递送的固体药物组合物，所述组合物包含至少一种生物活性多肽或蛋白质、生理上可接受的低共熔混合物和至少一种生理上可接受的表面活性剂或表面活性剂混合物；其中所述组合物在与含水介质接触时形成并释放乳液。

2.权利要求1的固体药物组合物，其中所述生物活性多肽或蛋白质选自哺乳动物胰岛素、胰岛素类似物、胰高血糖素样肽、GLP-1和GLP类似物、C-肽和胰岛素原。

3.权利要求1的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物以约1至约30％的量存在，所述低共熔混合物包含至少两种疏水性化合物，其选自环醇、有机酸、磷脂、甘油单酯、生育酚衍生物和酚类化合物。

4.权利要求1的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物包含至少两种脂肪族酸的组合。

5.权利要求4的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物包含月桂酸和棕榈酸或月桂酸和硬脂酸的组合。

6.根据权利要求1的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物包含甘油单辛酸酯和薄荷醇。

7.权利要求1的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物包含磷脂和环醇。

8.权利要求7的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物包含磷脂和薄荷醇。

9.权利要求8的固体药物组合物，其中所述磷脂是卵磷脂。

10.权利要求1的固体药物组合物，其中所述组合物在与唾液或含水介质接触后形成乳液。

11.权利要求10的固体药物组合物，其中低共熔混合物被引入所形成的乳液的疏水相中。

12.权利要求10的固体药物组合物，其中胰岛素至少部分与乳液的疏水相相缔合。

13.权利要求1的固体药物组合物，其进一步包含至少一种生理上可接受的疏水性组分。

14.权利要求13的固体药物组合物，其中所述生理上可接受的疏水性组分选自脂肪、油、精油、甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯、脂肪族酯、芳族酯及其混合物，并且其形成乳液的疏水相。

15.权利要求1的固体药物组合物，其进一步包含至少一种选自有机酸、有机磷酸盐、带负电荷的磷脂和胆汁酸中的生理上可接受的疏水性抗衡离子。

16.权利要求3的固体药物组合物，其中所述疏水化合物是生育酚衍生物。

17.权利要求16的固体药物组合物，其中所述生育酚衍生物是生育酚酯。

18.权利要求17的固体药物组合物，其中所述生育酚酯是琥珀酸生育酚酯或乙酸生育酚酯。

19.权利要求3的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物中的所述环醇选自薄荷醇、冰片和麝香草酚。

20.根据权利要求19所述的固体药物组合物，其中所述环醇是L-薄荷醇或外消旋薄荷醇。

21.权利要求15的固体药物组合物，其中所述抗衡离子是带负电荷的二酰基磷酸甘油，优选二硬脂酰磷脂酰甘油或二肉豆蔻酰磷脂酰甘油。

22.权利要求16的固体药物组合物，其包含琥珀酸生育酚酯和L-薄荷醇。

23.权利要求3的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物中的酚类化合物选自酚类、甲酚类和麝香草酚。

24.权利要求23的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物含有麝香草酚。

25.权利要求1的固体药物组合物，其中所述固体剂型是锭剂、舌下片剂或口腔溶解片剂。

26.权利要求25的固体药物组合物，其中所述片剂在约3至约45分钟的范围内在口中溶解，优选约5至约15分钟之间。

27.权利要求1的固体药物组合物，其中所述表面活性剂选自生理学上可接受的非离子、两亲或阴离子表面活性剂及其混合物。

28.权利要求27的固体药物组合物，其不含月桂基硫酸盐或其它烷基磺酸或其盐。

29.权利要求1的固体药物组合物，其中所述低共熔混合物的熔点低于60℃，优选低于45℃，最优选低于37℃。

30.权利要求25的固体药物组合物，其进一步包含生理上可接受的甜味剂、崩解剂、抗菌防腐剂、填充剂、调味剂、粘合剂、助流剂、乳化剂、着色剂和润滑剂，其中所述组合物制备成压制片剂的形式。

31.权利要求30的压制片剂，其中所述片剂具有不小于2kP，优选约4至约20kP的硬度。

32.权利要求1的固体药物组合物，其中所述组合物包含胰岛素或胰岛素类似物、疏水低共熔混合物、疏水抗衡离子、油相疏水组分和用于自乳化的表面活性剂，并且其中所述组合物被制备为用于口内施用的口腔溶解压制片剂或锭剂。

33.一种固体药物组合物，其中所述组合物包含：每剂型约25至约600IU量的动物或人重组胰岛素；疏水低共熔混合物，其在体温为液体，其量为每剂型约1至约300mg；每剂型约0.5至约100mg量的疏水抗衡离子；至少一种油相疏水性组分，其量为每剂型约0.5至约50mg；用于自乳化的至少一种生理上可接受的非离子型或两性表面活性剂，其量为每剂型约2至约200mg；并且其中所述组合物被制备为用于口内施用的口腔溶解压制片剂或锭剂，并且在与唾液接触时释放具有约1至约1000nm，优选约10至约200nm的油滴尺寸的水包油乳液。

34.一种治疗前驱糖尿病、糖尿病、高血糖症、肥胖症、代谢综合征的方法，包含向需要的人施用用于口内透粘膜递送的生理上可接受的固体组合物，其中所述组合物含有疏水低共熔混合物、胰岛素或胰岛素类似物、抗衡离子和至少一种表面活性剂或表面活性剂的混合物，并且其中所述组合物在与唾液或含水介质接触后释放乳液。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述组合物提供胰岛素或胰岛素类似物的有效透粘膜递送。

36.根据权利要求34所述的方法，其中所述低共熔混合物具有低于37℃的熔点，并且在体温为液体。

37.根据权利要求34所述的方法，其中组合物以固体剂型施用。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述固体剂型是压制片剂、咀嚼片、锭剂、粉剂或颗粒剂。

39.根据权利要求38所述的方法，其中固体剂型含有约0.5至约20mg，优选约1至约10mg，更优选约1至约8mg量的胰岛素或胰岛素类似物。

40.根据权利要求34所述的方法，其中所述释放的乳液是水包油乳液。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述释放的水包油乳液具有约10至约200nm的平均液滴尺寸。

42.根据权利要求40所述的方法，其中胰岛素或胰岛素类似物至少部分地与所释放的水包油乳液的油滴相缔合。

43.根据权利要求42所述的方法，其中至少5％的胰岛素与油滴相缔合。

44.根据权利要求42所述的方法，其中至少30％的胰岛素与油滴相缔合。

45.根据权利要求42所述的方法，其中至少50％的胰岛素与油滴相缔合。

46.根据权利要求42所述的方法，其中至少70％的胰岛素与油滴相缔合。

47.根据权利要求34所述的方法，其中所述方法允许在有需要的人口内给药后实现血糖的有效降低。

48.根据权利要求34所述的方法，其中其允许在对有需要的人口内给药后实现C-肽水平的有效降低。

49.根据权利要求36所述的方法，其中所述低共熔混合物包含至少两种选自环醇、脂肪酸、甘油酯、生育酚酯和磷脂的组分的组合。

50.根据权利要求49所述的方法，其中所述低共熔混合物的组分以约1∶10至约10∶1之间，优选约1∶3至约3∶1之间的重量比存在。

51.根据权利要求49所述的方法，其中所述低共熔混合物包含L-薄荷醇和乙酸生育酚酯或琥珀酸生育酚酯。

52.根据权利要求49所述的方法，其中所述低共熔混合物包含L-薄荷醇和磷脂酰胆碱或卵磷脂。

53.根据权利要求49所述的方法，其中所述低共熔混合物包含L-薄荷醇和甘油单辛酸酯。

54.根据权利要求49所述的方法，其中所述低共熔混合物包含月桂酸和棕榈酸。

55.根据权利要求49所述的方法，其中所述低共熔混合物包含L-薄荷醇、卵磷脂和琥珀酸生育酚酯。

56.根据权利要求34所述的方法，其中所述组合物包含以重量计约1％至约30％的低共熔混合物，优选约2至约10％。

57.根据权利要求38所述的方法，其中所述压制片剂从约1至约45分钟在口腔中溶解，优选从约3至约30分钟，最优选从5至15分钟。

58.根据权利要求47所述的方法，其中当以约50IU至约100IU的剂量在餐前口内施用所述组合物之后，测得得餐后葡萄糖的峰值水平降低平均至少约10％。

59.根据权利要求48所述的方法，其中当以约100IU的剂量在餐前口内施用所述组合物之后，测得的C-肽的峰值水平降低平均约35％。

60.根据权利要求34所述的方法，其中葡萄糖降低活性的发生从口内施用所述组合物后约15分钟至约60分钟开始。

61.根据权利要求34所述的方法，其中所述组合物不含有月桂基硫酸盐、其它烷基硫酸盐、烷基磺酸盐及其盐。

62.根据权利要求34所述的方法，其中所述含有胰岛素的组合物在餐前和/或就寝前以每次给药约25IU至约600IU胰岛素的剂量、优选约50IU至约200IU胰岛素的剂量口内施用。

63.根据权利要求34所述的方法，其中需要的人在口内接受组合物，所述口内组合物包含每剂型约25至约300IU量的胰岛素；在体温为液体的疏水低共熔混合物，其量为每剂型约1至约300mg；每剂型约0.5至约100mg量的疏水抗衡离子；至少一种油相疏水性组分，其量为每剂型约0.5至约50mg；用于自乳化的至少一种生理上可接受的非离子或两性表面活性剂，其量为每剂型约2至约200mg；并且其中所述组合物被制备为用于口内施用的口腔溶解的压制片剂或锭剂，并且在与唾液接触时释放具有约1至约1000nm，优选约10至约200nm的油滴尺寸的水包油乳液。