CN106730015A - 一种用于美容的制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种用于美容的制剂，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为1～3:1～4，通过体外分离，培养和扩增外周血液的细胞，并刺激这些细胞大量分泌细胞因子，和脐带血混合后，再次输入机体内以实现修复。

Description

一种用于美容的制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及医学整形美容技术领域，特别涉及一种用于美容的制剂及其制备方法。
背景技术
对于皮肤组织损伤和缺损的整形美容治疗，主要是采用软组织填充的方法进行修复。目前，在临床上用于软组织整形的填充材料，大多是人工合成材料：凝胶植入体、硅树脂等。一般人工合成材料分为临时性和永久性的材料，永久性材料缺点是其和人体组织相容性差，长期在人体组织会成为异物，并且产生慢性炎症、硬化等诸多问题；临时性材料在体内维持时间短，在半年到一年左右会被机体吸收，只能产生短期效果。近年来，在临床的实际应用中使用自体脂肪移植，用自体脂肪组织作为填充材料，但是存在自体脂肪组织存活率低的现象。
细胞因子是人体外周血产生的，对促进成纤维细胞的代谢和胶原蛋白的形成发挥着重要功能。细胞生长因子能促进皮肤组织的生长繁殖，它通过与细胞表面特异受体结合，调控皮肤上皮，内皮和基质细胞的分裂、繁殖和生长分化，促进细胞代谢，增强氧化作用；能促进与皮肤损伤有关细胞的迅速生长繁殖，并调节细胞间基质的合成、分泌及分解；能促进角质层细胞的再生，加速皮肤角质层和基质层的修复，促进人体皮肤细胞的生长；能增强皮肤细胞的蛋白质的合成和细胞代谢，具有延缓皮肤细胞衰老、促进表皮细胞的修复和生长作用，使皮肤光滑丰润，但是，单纯从外周血中分离出细胞因子数量量较少，难以满足修复皮肤组织损伤和缺损的需要。
发明内容
有鉴于此，为了克服现有技术的不足，本发明提供一种用于美容的制剂及其制备方法。能增强皮肤细胞的蛋白质的合成和细胞代谢，促进表皮细胞的修复和生长。
为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种用于美容的制剂，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为1～3:1～4。
进一步，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为1.5:2。
进一步，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为2:2.5。
进一步，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为2:3.5。
进一步，所述含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.3ml～0.8ml。
本发明还提供一种细胞因子的制备方法，包括以下步骤：
ⅰ)血细胞的采集：
1)用血细胞分离机采集血细胞80ml～100ml；
2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞；
3)采用无血清培养液洗涤2～5次，获得纯度在90％以上的细胞，细胞数量需达到1x108个～3x108个；
ⅱ)细胞的培养
a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至1x106ml～4x106ml，置于培养瓶内；
b)37度，5％CO2培养箱中孵育2h，以使细胞贴壁；
c)收集悬浮细胞，用无血清培养液调整细胞浓度至1～2x106毫升；
d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养，刺激细胞的生长和增殖；
e)在培养的第7天，收获细胞，此细胞数量应达到1x109个以上；
f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子，增加细胞因子的分泌量。
本发明的有益效果为：通过体外分离，培养和扩增外周血液的细胞，并刺激这些细胞大量分泌细胞因子，和脐带血混合后，再次输入机体内以实现修复。
1)本发明细胞因子体外扩增和富集技术，通过和脐带血的配方设计，完成体外扩增自体细胞因子在整形美容的使用，实现了自体细胞因子治疗技术的突破。操作方法简单、安全，患者易于接受，避免了细胞因子活性的损失，可获得永久性的整形，疗效显著且持续时间长。
2)本发明使用了脐带血，将体外扩增自体细胞因子混于脐带血中，填充到治疗部位。细胞因子可以促进皮肤下缺损和损伤的组织再生，而脐带血可以为再生的组织提供一个生长的微环境。由于皮肤下缺损和损伤的组织的再生，因此效果是永久性的。
3)本发明采用体外扩增自体细胞因子进行整形美容治疗，其促进机体再生的作用，无排斥反应，疗效显著。
4)自体细胞因子可以进行体外大量扩增，来源充足，而脐带血可以从脐带血库获得。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例一
一种用于美容的制剂，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为1.5:2。
其中，剂带血来源于健康新生儿的脐带。
此外，含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.4ml。
一种细胞因子的制备方法，包括以下步骤：
ⅰ)血细胞的采集：此血细胞采集患者自身的外周血细胞。
1)用血细胞分离机采集血细胞80ml；
2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞；
3)采用无血清培养液洗涤2次，获得纯度在90％以上的细胞，细胞数量需达到1x108个；
ⅱ)细胞的培养
a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至1x106ml，置于培养瓶内；
b)37度，5％CO2培养箱中孵育2h，以使细胞贴壁；
c)收集悬浮细胞，用无血清培养液调整细胞浓度至1x106毫升；
d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养，刺激细胞的生长和增殖；
e)在培养的第7天，收获细胞，此细胞数量应达到1x109个以上；
f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子，增加细胞因子的分泌量。
实施例二
一种用于美容的制剂，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为2:2.5。
含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.6ml。
一种细胞因子的制备方法，包括以下步骤：
ⅰ)血细胞的采集：
1)用血细胞分离机采集血细胞90ml；
2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞；
3)采用无血清培养液洗涤3次，获得纯度在90％以上的细胞，细胞数量需达到2x108个；
ⅱ)细胞的培养
a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至2x106ml，置于培养瓶内；
b)37度，5％CO2培养箱中孵育2h，以使细胞贴壁；
c)收集悬浮细胞，用无血清培养液调整细胞浓度至1.5x106毫升；
d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养，刺激细胞的生长和增殖；
e)在培养的第7天，收获细胞，此细胞数量应达到1x109个以上；
f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子，增加细胞因子的分泌量。
实施例三
一种用于美容的制剂，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为2:3.5。
一种用于美容的制剂，含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.8ml。
一种细胞因子的制备方法，包括以下步骤：
ⅰ)血细胞的采集：
1)用血细胞分离机采集血细胞100ml；
2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞；
3)采用无血清培养液洗涤4次，获得纯度在90％以上的细胞，细胞数量需达到3x108个；
ⅱ)细胞的培养
a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至4x106ml，置于培养瓶内；
b)37度，5％CO2培养箱中孵育2h，以使细胞贴壁；
c)收集悬浮细胞，用无血清培养液调整细胞浓度至2x106毫升；
d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养，刺激细胞的生长和增殖；
e)在培养的第7天，收获细胞，此细胞数量应达到1x109个以上；
f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子，增加细胞因子的分泌量。
使用方法：将上述美容制剂注射在缺损部位的皮下，注射1-2mL，使缺损部位充盈恢复。
18例面部皮肤组织缺损者使用上述方法注射该美容制剂,结果如下：
1)其中6例：年龄为30岁的女性，面部皮肤组织缺损较严重，使用该美容制剂后，缺损部位饱满，且融合度高，且为永久性；
2)其中6例：年龄为50岁的女性，面部皮肤松弛，使用该美容制剂后，皮肤明显出现光滑，表皮细胞的修复和生长速度明显加快；
3)其中6例：年龄为50岁的男性，面部皮肤松弛且皱纹较深，使用该美容制剂后，皱纹逐渐变浅且角质层细胞再生速度明显加快。
以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (6)

1.一种用于美容的制剂，其特征在于，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为1～3:1～4。
2.根据权利要求1所述的一种用于美容的制剂，其特征在于，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为1.5:2。
3.根据权利要求1所述的一种用于美容的制剂，其特征在于，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为2:2.5。
4.根据权利要求1所述的一种用于美容的制剂，其特征在于，包含如下按体积比计的组分：含细胞因子的生理盐水混悬液：脐带血为2:3.5。
5.根据权利要求1所述的一种用于美容的制剂，其特征在于：所述含细胞因子的生理盐水混悬液中的细胞因子为0.3ml～0.8ml。
6.一种细胞因子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
ⅰ)血细胞的采集：
1)用血细胞分离机采集血细胞80ml～100ml；
2)采用细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化血细胞；
3)采用无血清培养液洗涤2～5次，获得纯度在90％以上的细胞，细胞数量需达到1x 108个～3x 108个；
ⅱ)细胞的培养
a)将获得的纯化细胞用无血清培养液调整细胞浓度至1x 106ml～4x 106ml，置于培养瓶内；
b)37度，5％CO2培养箱中孵育2h，以使细胞贴壁；
c)收集悬浮细胞，用无血清培养液调整细胞浓度至1～2x 106毫升；
d)加入1000U/ml的重组细胞生长因子培养，刺激细胞的生长和增殖；
e)在培养的第7天，收获细胞，此细胞数量应达到1x 109个以上；
f)再次加入500U/ml的重组细胞刺激因子，增加细胞因子的分泌量。
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