CN106701839A - 一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法 - Google Patents

一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及酒精酿造技术领域，提供了一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，包括酵母菌种的准备和发酵；所述发酵包括三个阶段。本发明提高次淀粉浆和木薯原料利用率和发酵效率，可实现高浓度酒精发酵生产。

Description

一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法
技术领域
本发明属于酒精酿造技术领域，涉及一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法。
背景技术
酒精，又称乙醇，是广泛应用于食品、医药、化工、科研等各个领域的重要工业原料。酒精的生产方式主要有合成和酿造两种。合成法生产成本较低，但甲醇含量高；酿造法也叫发酵法，生产成本较合成法高，但酒精品质高，乙醇含量大于或等于95%，甲醇含量低于0.01%。我国目前发酵法生产酒精的主要原料是各类淀粉质原料，生产过程主要包括液化、糖化、发酵、蒸馏等工序。
木薯为直立灌木，块根为圆柱状。木薯适应性强，耐旱耐瘠，在年平均温度18℃以上，无霜期8个月以上的山地、平原等地区均可种植。木薯的块根富含淀粉，是重要的工业淀粉原料。木薯块根经过液化、糖化等处理后，含有丰富的五碳糖、六碳糖，是发酵法生产酒精的优良原料。
高浓度酒精发酵是以提高单位体积内发酵醪液中淀粉的含量，在适量的酿酒酵母菌作用下，在一定的时间内力求得到最多的发酵终产物——酒精。一般酒精发酵生产的淀粉质原料可溶性固形物含量为20%-25%（w/v），30%（w/v）（每1L发酵液中含300g）或者更高的可溶性固形物的酒精发酵常常被定义为高浓度发酵。
发明内容
本发明目的在于提供一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法。
为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，包括酵母菌种的准备和发酵；
所述酵母菌种的准备包括下列步骤：
第一步：将酵母菌种在无菌操作的条件下，在35-40℃的糖化醪中复水15-20分钟，然后将所述糖化醪温度降至25-34℃、培养1-2小时得到活化后的液体菌种液；其中，所述糖化醪的糖锤度为4-5。Bx；
第二步：使用无菌水将所述液体菌种液稀释得到稀释度为1：108的稀释菌种液，然后将所述稀释菌种液接种到第一固体培养基上，在28-32℃恒温培养箱中培养20~28小时后收集菌落；
第三步：将第二步得到的菌落接种到第二固体培养基中培养70~74小时后收集菌落后再接种到第三培养基中，所述第三固体培养基培养70~74小时后收集菌落后再接种到第四培养基中，所述第五固体培养基培养70~74小时后收集菌落后再接种到第六培养基中，所述第六固体培养基培养70~74小时后收集菌落后再接种到第七培养基中，所述第七培养基培养70~74小时后收集菌落；
所述第二固体培养的由下列质量比例的材料组成：
木糖 2.0%；
硫酸铵 0.5%；
尿素 0.5%；
酵母膏 0.2%；
牛肉粉 0.2%；
磷酸二氢钾 0.2%；
七水合硫酸镁 0.1%；
琼脂 1.4%；
酒精 20%；
余量为纯化水；
所述第三培养基中的木糖质量百分比含量为3.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第四培养基中的木糖质量百分比含量为4.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第五培养基中的木糖质量百分比含量为5.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第六培养基中的木糖质量百分比含量为6.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第七培养基中的木糖质量百分比含量为7.0%，其它部分与第二培养基相同；
第四步：将第三步得到的菌种接种到斜面YPX培养基，在0-4℃条件下保存；所述YPX培养基由下列质量比例的材料组成：
木糖 2.0%；
酵母膏 1.0%；
蛋白胨 2.0%；
琼脂 2.0%；
余量为纯化水；
第五步：将第四步得到的菌种接种到扩培培养基，在温度30-36℃、转速150转/min条件下，培养菌种进入对数生长期，得到酵母种子液；所述扩培培养基由下列质量比例的材料组成：
葡萄糖 1.0%；
木糖 1.0%；
蛋白胨 2.0%；
酵母膏 1.0%；
余量为纯化水；
所述发酵包括三个阶段：
第一阶段：将所述第五步得到的酵母种子液按10%的体积接种量接种到木薯发酵培养基中发酵生产，发酵温度33~35℃，发酵时间20~28小时；所述木薯发酵培养基由下列质量比例的材料组成：
木薯糖化液 10%；
硫酸铵 0.5%；
磷酸二氢钾 0.1%；
七水合硫酸镁 0.05%；
酵母膏 0.05%；
余量为纯化水；
第二阶段：匀速流加Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度33-35℃，发酵时间20~28小时，流加总量为木薯培养基的四分之一；
所述Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基由下列质量比例的材料组成：
木薯糖化液 47.5%；
次淀粉浆 47.5%；
硫酸铵 3%；
磷酸二氢钾 1%；
七水合硫酸镁 0. 5%；
酵母膏 0.5%；
第三阶段，匀速流加Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度33-35℃，发酵时间20~28小时，流加总量为木薯培养基的四分之一；
所述Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基由下列质量比例的材料组成：
木薯糖化液 23.75%；
次淀粉浆 71.25%；
硫酸铵 3%；
磷酸二氢钾 1%；
七水合硫酸镁 0. 5%；
酵母膏 0.5%。
优选的技术方案为： 所述木薯糖化液的制备方法为：将干木薯粉碎到50-80目，加3倍质量的纯化水混合均匀，按30mg/g木薯粉比例加入纤维素酶，20mg/g木薯粉比例加入木聚糖酶，10U/g木薯粉比例加入液化酶，调节pH值至4，加热维持温度93197℃，处理2h；然后按150U/g木薯粉比例加入糖化酶，调节pH值至4，温度保持在33±35℃，处理30min得到木薯糖化液。
优选的技术方案为：所述次淀粉浆为小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后得到的副产物。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：
本发明利用小麦面粉在生产谷朊粉和淀粉中产生的废液浆进行酒精发酵，实现了废弃物综合利用。
本发明的三个阶段发酵。第一阶段，以木薯糖化液为主要碳源，碳源浓度为10%，经第三步木糖强化培养后的酵母菌在该碳源环境中得以快速增殖，迅速达到酒精生产所需的生物量。第二阶段，以木薯糖化液、次淀粉浆按1:1比例为主要碳源，酵母菌已经适应了木薯糖化液的生产环境，得以继续快速增殖和代谢；同时，酵母菌可以逐步适应次淀粉浆的碳源环境，丰富的碳源结构，使得酵母菌获得更强的代谢活力。第三阶段，以木薯糖化液、次淀粉浆按1:3比例为主要碳源，酵母菌在已经适应的木薯糖化液、次淀粉浆复合碳源中生长代谢，生产活力得以保持；木糖糖化液、次淀粉浆组成的复合碳源，五碳糖、六碳糖配比合理，能够显著降低单底物葡萄糖浓度对酵母菌的抑制，实现高浓度发酵生产。同时，该三个阶段发酵技术，充分利用了小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后的副产物——次淀粉浆，提高了综合效益。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
实施例一：一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法。
（1）酵母菌种为酿酒干酵母（耐高温），购自安琪酵母股份有限公司。
将酵母菌种在无菌操作下，放置在37℃4.5Bx的稀糖化醪中复水15分钟，然后温度降至34℃培养1.5小时。
（2）使用无菌水，10倍递增稀释步骤（1）中复水活化后的液体菌种液，经8次稀释得到稀释度为1：108的菌种液；将菌种液接种到第一固体培养基上，在32℃恒温培养箱中培养24h；挑选出生长茁壮的菌落。
（3）第二~七固体培养基培养基组成为：2.0~7.0m%木糖、0.5m%硫酸铵、25.0m%酒精、0.5m%尿素、0.2m%酵母膏、0.2m%牛肉粉、0.2m%磷酸二氢钾、0.lm%七水合硫酸镁、1.4m%琼脂、其余为纯化水；培养方法为，将酵母菌接种到木糖浓度为2.0m%的培养基上培养72h，挑选生长茁壮的菌落接种，接种到木糖浓度为3.0m%的培养基培养72h，再挑选生长茁壮的菌落接种到木糖浓度为4.0m%的培养基继续培养，如此重复操作，直到培养基的木糖浓度达到7.0m%，培养后挑选出茁壮菌落，得到酵母菌。
（4）将步骤（3）中在7.0m%木糖浓度培养基中生长茁壮的菌种接种到斜面YPX培养基，在2±1℃保存备用；所述的YPX培养基组成为：2.0m%木糖、1.0m%酵母膏、2.0m%蛋白胨、2.0m%琼脂、其余为纯化水。
（5）将步骤（4）中菌种接种到扩培培养基，采用摇瓶培养，温度33±1℃、转速150转/min，培养菌种进入对数生长期，得到酵母种子液；扩培培养基组成为：1.0m%葡萄糖、1.0m%木糖、2.0m%蛋白胨、1.0m%酵母膏、其余为纯化水。
（6）将干木薯粉碎到80目，加3倍质量的纯化水混合均匀，按30mg/g木薯粉比例加入纤维素酶，20mg/g木薯粉比例加入木聚糖酶，10U/g木薯粉比例加入液化酶，调节Ph=4，加热维持温度95±2℃，处理2h；然后进行糖化处理，即按150U/g木薯粉比例加入糖化酶，调节Ph=4，温度保持在34±1℃，处理30min，得到木薯糖化液。
（7）采用三个阶段发酵生产。第一个阶段，将步骤（5）的酵母种子液按10%的体积接种量接种到木薯发酵培养基中发酵生产，发酵温度34±1℃，发酵时间24h；第二阶段，匀速流加Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度34±1℃，发酵时间24h，流加总量为木薯培养基的25m%；第三阶段，匀速流加Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度34±1℃，发酵时间24h，流加总量为木薯培养基的25m%。所述的木薯发酵培养基组成为：10m%木薯糖化液、0.5m%硫酸铵、0.1m%磷酸二氢钾、0.05m%七水合硫酸镁，0.05m%酵母膏、其余为纯化水。所述的Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养组成为：45m%木薯糖化液、50%次淀粉浆、3m%硫酸铵、1m%磷酸二氢钾、0.5m%七水合硫酸镁，0.5m%酵母膏。所述的Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养组成为：25m%木薯糖化液、70%次淀粉浆、3m%硫酸铵、1m%磷酸二氢钾、0.5m%七水合硫酸镁，0.5m%酵母膏。所述的次淀粉浆为小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后得到的副产物。所述的高浓度发酵制备酒精，指发酵过程中淀粉质原料可溶性固形物含量高于20m%。
该实施例步骤（6）中干木薯粉为500g，采用10L摇瓶发酵生产，经蒸馏后得到纯度95%的酒精205g。
实施例二：一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法。
（1）酵母菌种为酿酒干酵母，购自安琪酵母股份有限公司。
将酵母菌种在无菌操作下，放置在35℃4.0Bx的稀糖化醪中复水20分钟，然后温度降至30℃培养2小时。
（2）使用无菌水，10倍递增稀释步骤（1）中复水活化后的液体菌种液，经8次稀释得到稀释度为1：108的菌种液；将菌种液接种到固体培养基上，在29℃恒温培养箱中培养24h；挑选出生长茁壮的菌落。
（3）第二~七固体培养基培养基组成为：2.0~7.0m%木糖、0.5m%硫酸铵、25.0m%酒精、0.5m%尿素、0.2m%酵母膏、0.2m%牛肉粉、0.2m%磷酸二氢钾、0.lm%七水合硫酸镁、1.4m%琼脂、其余为纯化水；培养方法为将酵母菌接种到木糖浓度为2.0m%的培养基上培养72h，挑选生长茁壮的菌落接种，接种到木糖浓度为3.0m%的培养基培养72h，再挑选生长茁壮的菌落接种到木糖浓度为4.0m%的培养基继续培养，如此重复操作，直到培养基的木糖浓度达到7.0m%，培养后挑选出茁壮菌落，得到酵母菌。
（4）将步骤（3）中菌种接种到扩培培养基，采用摇瓶培养，温度31±1℃、转速150转/min，培养菌种进入对数生长期，得到酵母种子液；扩培培养基组成为：1.0m%葡萄糖、1.0m%木糖、2.0m%蛋白胨、1.0m%酵母膏、其余为纯化水。
（5）将干木薯粉碎到60目，加3倍质量的纯化水混合均匀，按30mg/g木薯粉比例加入纤维素酶，20mg/g木薯粉比例加入木聚糖酶，10U/g木薯粉比例加入液化酶，调节Ph=4，加热维持温度95±2℃，处理2h；然后进行糖化处理，即按150U/g木薯粉比例加入糖化酶，调节Ph=4，温度保持在34±1℃，处理30min，得到木薯糖化液。
（6）采用三个阶段发酵生产。第一个阶段，将步骤（5）的酵母种子液按10%的体积接种量接种到木薯发酵培养基中发酵生产，发酵温度34±1℃，发酵时间24h；第二阶段，匀速流加Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度34±1℃，发酵时间24h，流加总量为木薯培养基的25m%；第三阶段，匀速流加Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度34±1℃，发酵时间24h，流加总量为木薯培养基的25m%。所述的木薯发酵培养基组成为：10m%木薯糖化液、0.5m%硫酸铵、0.1m%磷酸二氢钾、0.05m%七水合硫酸镁，0.05m%酵母膏、其余为纯化水。所述的Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养组成为：45m%木薯糖化液、50%次淀粉浆、3m%硫酸铵、1m%磷酸二氢钾、0.5m%七水合硫酸镁，0.5m%酵母膏。所述的Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养组成为：25m%木薯糖化液、70%次淀粉浆、3m%硫酸铵、1m%磷酸二氢钾、0.5m%七水合硫酸镁，0.5m%酵母膏。所述的次淀粉浆为小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后得到的副产物。所述的高浓度发酵制备酒精，指发酵过程中淀粉质原料可溶性固形物含量高于20m%。
该实施例步骤（5）中干木薯粉为700kg，采用4T发酵罐生产，经蒸馏后得到纯度95%的酒精285kg。
实施例三：一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法。
一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，包括酵母菌种的准备和发酵；
所述酵母菌种的准备包括下列步骤：
第一步：将酵母菌种在无菌操作的条件下，在35-40℃的糖化醪中复水15-20分钟，然后将所述糖化醪温度降至25-34℃、培养1-2小时得到活化后的液体菌种液；其中，所述糖化醪的糖锤度为4-5。Bx；
第二步：使用无菌水将所述液体菌种液稀释得到稀释度为1：108的稀释菌种液，然后将所述稀释菌种液接种到第一固体培养基上，在28-32℃恒温培养箱中培养20~28小时后收集菌落；
第三步：将第二步得到的菌落接种到第二固体培养基中培养70~74小时后收集菌落后再接种到第三培养基中，所述第三固体培养基培养70~74小时后收集菌落后再接种到第四培养基中，所述第五固体培养基培养70~74小时后收集菌落后再接种到第六培养基中，所述第六固体培养基培养70~74小时后收集菌落后再接种到第七培养基中，所述第七培养基培养70~74小时后收集菌落；
所述第二固体培养的由下列质量比例的材料组成：
木糖 2.0%；
硫酸铵 0.5%；
尿素 0.5%；
酵母膏 0.2%；
牛肉粉 0.2%；
磷酸二氢钾 0.2%；
七水合硫酸镁 0.1%；
琼脂 1.4%；
酒精 20%；
余量为纯化水；
所述第三培养基中的木糖质量百分比含量为3.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第四培养基中的木糖质量百分比含量为4.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第五培养基中的木糖质量百分比含量为5.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第六培养基中的木糖质量百分比含量为6.0%，其它部分与第二培养基相同；所述第七培养基中的木糖质量百分比含量为7.0%，其它部分与第二培养基相同；
第四步：将第三步得到的菌种接种到斜面YPX培养基，在0-4℃条件下保存；所述YPX培养基由下列质量比例的材料组成：
木糖 2.0%；
酵母膏 1.0%；
蛋白胨 2.0%；
琼脂 2.0%；
余量为纯化水；
第五步：将第四步得到的菌种接种到扩培培养基，在温度30-36℃、转速150转/min条件下，培养菌种进入对数生长期，得到酵母种子液；所述扩培培养基由下列质量比例的材料组成：
葡萄糖 1.0%；
木糖 1.0%；
蛋白胨 2.0%；
酵母膏 1.0%；
余量为纯化水；
所述发酵包括三个阶段：
第一阶段：将所述第五步得到的酵母种子液按10%的体积接种量接种到木薯发酵培养基中发酵生产，发酵温度33~35℃，发酵时间20~28小时；所述木薯发酵培养基由下列质量比例的材料组成：
木薯糖化液 10%；
硫酸铵 0.5%；
磷酸二氢钾 0.1%；
七水合硫酸镁 0.05%；
酵母膏 0.05%；
余量为纯化水；
第二阶段：匀速流加Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度33-35℃，发酵时间20~28小时，流加总量为木薯培养基的四分之一；
木薯糖化液 47.5%；
次淀粉浆 47.5%；
硫酸铵 3%；
磷酸二氢钾 1%；
七水合硫酸镁 0. 5%；
酵母膏 0.5%；
第三阶段，匀速流加Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度33-35℃，发酵时间20~28小时，流加总量为木薯培养基的四分之一；
所述Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基由下列质量比例的材料组成：
木薯糖化液 23.75%；
次淀粉浆 71.25%；
硫酸铵 3%；
磷酸二氢钾 1%；
七水合硫酸镁 0. 5%；
酵母膏 0.5%。
所述木薯糖化液的制备方法为：将干木薯粉碎到50-80目，加3倍质量的纯化水混合均匀，按30mg/g木薯粉比例加入纤维素酶，20mg/g木薯粉比例加入木聚糖酶，10U/g木薯粉比例加入液化酶，调节pH值至4，加热维持温度93197℃，处理2h；然后按150U/g木薯粉比例加入糖化酶，调节pH值至4，温度保持在33±35℃，处理30min得到木薯糖化液。
所述次淀粉浆为小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后得到的副产物。
本实施方式的三个阶段发酵。第一阶段，以木薯糖化液为主要碳源，碳源浓度为10%，经第三步木糖强化培养后的酵母菌在该碳源环境中得以快速增殖，迅速达到酒精生产所需的生物量。第二阶段，以木薯糖化液、次淀粉浆按1:1比例为主要碳源，酵母菌已经适应了木薯糖化液的生产环境，得以继续快速增殖和代谢；同时，酵母菌可以逐步适应次淀粉浆的碳源环境，丰富的碳源结构，使得酵母菌获得更强的代谢活力。第三阶段，以木薯糖化液、次淀粉浆按1:3比例为主要碳源，酵母菌在已经适应的木薯糖化液、次淀粉浆复合碳源中生长代谢，生产活力得以保持；木糖糖化液、次淀粉浆组成的复合碳源，五碳糖、六碳糖配比合理，能够显著降低单底物葡萄糖浓度对酵母菌的抑制，实现高浓度发酵生产。同时，该三个阶段发酵技术，充分利用了小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后的副产物——次淀粉浆，提高了综合效益。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (4)

1.一种次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，其特征在于：包括酵母菌种的准备和发酵；
所述酵母菌种的准备包括下列步骤：
第一步：将酵母菌种在无菌操作的条件下，在35-40℃的糖化醪中复水15-20分钟，然后将所述糖化醪温度降至25-34℃、培养1-2小时得到活化后的液体菌种液；其中，所述糖化醪的糖锤度为4-5。Bx；
第二步：使用无菌水将所述液体菌种液稀释得到稀释度为1：108的稀释菌种液，然后将所述稀释菌种液接种到第一固体培养基上，在28-32℃恒温培养箱中培养20～28小时后收集菌落；
第三步：将第二步得到的菌落接种到第二固体培养基中培养70～74小时后收集菌落后再接种到第三培养基中，所述第三固体培养基培养70～74小时后收集菌落后再接种到第四培养基中，所述第五固体培养基培养70～74小时后收集菌落后再接种到第六培养基中，所述第六固体培养基培养70～74小时后收集菌落后再接种到第七培养基中，所述第七培养基培养70～74小时后收集菌落；
所述第二固体培养的由下列质量比例的材料组成：
所述第三培养基中的木糖质量百分比含量为3.0％，其它部分与第二培养基相同；所述第四培养基中的木糖质量百分比含量为4.0％，其它部分与第二培养基相同；所述第五培养基中的木糖质量百分比含量为5.0％，其它部分与第二培养基相同；所述第六培养基中的木糖质量百分比含量为6.0％，其它部分与第二培养基相同；所述第七培养基中的木糖质量百分比含量为7.0％，其它部分与第二培养基相同；
第四步：将第三步得到的菌种接种到斜面YPX培养基，在0-4℃条件下保存；所述YPX培养基由下列质量比例的材料组成：
第五步：将第四步得到的菌种接种到扩培培养基，在温度30-36℃、转速150转/min条件下，培养菌种进入对数生长期，得到酵母种子液；所述扩培培养基由下列质量比例的材料组成：
所述发酵包括三个阶段：
第一阶段：将所述第五步得到的酵母种子液按10％的体积接种量接种到木薯发酵培养基中发酵生产，发酵温度33～35℃，发酵时间20～28小时；所述木薯发酵培养基由下列质量比例的材料组成：
第二阶段：匀速流加Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度33-35℃，发酵时间20～28小时，流加总量为木薯培养基的四分之一；
所述Ⅰ型次淀粉浆并木薯培养基由下列质量比例的材料组成：
第三阶段，匀速流加Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基，发酵温度33-35℃，发酵时间20～28小时，流加总量为木薯培养基的四分之一；
所述Ⅱ型次淀粉浆并木薯培养基由下列质量比例的材料组成：
2.根据权利要求1所述的次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，其特征在于：所述木薯糖化液的制备方法为：将干木薯粉碎到50-80目，加3倍质量的纯化水混合均匀，按30mg/g木薯粉比例加入纤维素酶，20mg/g木薯粉比例加入木聚糖酶，10U/g木薯粉比例加入液化酶，调节pH值至4，加热维持温度93197℃，处理2h；然后按150U/g木薯粉比例加入糖化酶，调节pH值至4，温度保持在33±35℃，处理30min得到木薯糖化液。
3.根据权利要求1所述的次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，其特征在于：所述次淀粉浆为小麦面粉加工淀粉、谷朊粉后得到的副产物。
4.根据权利要求1所述的次淀粉浆并木薯高浓度发酵制备酒精的方法，其特征在于：所述的高浓度发酵制备酒精，指发酵过程中淀粉质原料可溶性固形物含量高于20m％。
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