CN1066444C - 榄香烯含氮衍生物及其用作抗癌药物 - Google Patents

Abstract

一种榄香烯含氮衍生物以下结构式表示

其中R₁＝R₂为含氮化合物官能团：脂肪氨基、芳香氨基、取代氨基、杂环氨基。该化合物以榄香烯与次氯酸盐进行氯化反应得到的中间产物再与含氮有机物反应制得相应的衍生物。通过药效试验证明该榄香烯含氮衍生物较榄香烯具有更有效的抗癌作用，可用于制备抗癌新药物。

Description

榄香烯含氮衍生物及其用作抗癌药物

本发明涉及一种有机化合物榄香烯含氮衍生物，并提供了该衍生物的合成方法及其用作抗癌药物。

在抗癌药物的研究中，曾报导过含氮生物碱类和萜烯类化合物具有抗癌作用，我国新研制的倍半萜烯类化合物榄香烯就是其中的一种。榄香烯是我国的一种中药抗癌药物，其分子式为C₁₅H₂₄，结构式如(1)：

榄香烯作为中药现已用于临床，但它水溶性极差，如何进一步提高其抗癌作用，还有待研究。

本发明的目的是提供一种榄香烯含氮衍生物，同时提供合成这种衍生物的方法。本发明的另一目的是以榄香烯含氮衍生物作为药物，应用于癌症的冶疗。

本发明的榄香烯含氮衍生物，其特征在于分子式为C₁₅H₂₂R₁R₂，结构式为(2)：

其中1)：R₂(或R₁)为H,R₁或者当R₂为H时R₁为含氮化合物官能团：脂肪氨基、芳香氨基如、二甲氨基、二乙氨基、氨基乙基氨基、苯氨基，取代氨基如、二氯乙基氨基，羟乙基氨基，氮丙啶基、杂环氨基如，咪唑基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、嘧啶基或嘌呤基；或者2)：R₁=R₂为上述含氮化合物官能团。

本发明的榄香烯含氮衍生物的合成过程是按下述步骤：

1．榄香烯用次氯酸盐进行氯化反应得到榄香烯氯代物中间产物；

2．用中间产物与含氮化合物反应得相应的榄香烯含氮衍生物。

上述步骤1中所用次氯酸盐可用次氯酸钠，钾或钙盐，也可用漂白粉或漂白精。次氯酸盐的用量(或有效氯含量)与榄香烯的摩尔比为1.0～3.0，反应加入水和有机溶剂氯代烃，如氯仿、二氯甲烷，氯乙烷或二氯乙烷、有机溶剂与水的体积比为3～5，有机溶剂的加入量为榄香烯重的2～10倍，有机溶剂的加入量过少，不利于反应进行，但加入量过多，又不利反应后溶剂的分离。反应在常温、常压下进行。步骤2中，可用步骤1制成提纯的中间产物榄香烯氯代物，也可将步骤1进行氯化反应后的混合物直接用于步骤2的反应。反应物含氮有机物的分子与榄香烯分子的摩尔比为1～5。反应物含氮化合物包括脂肪族，芳香族伯胺，仲胺、如二甲胺、二乙胺，乙二胺，苯胺；取代胺类如氯乙基胺，乙醇胺；氮丙啶；含氮杂环如，吗啉，哌啶，哌嗪，嘧啶，咪唑；以及嘌呤化合物。合成在甲醇、乙醇、丙醇、甲醚，乙醚或丙酮的溶剂中，采用巡流反应进行1～15小时完成反应。反应物混合物浓缩后，经硅胶柱层析用石油醚和极性溶剂依次进行冲洗得到产品。

本发明所提供的榄香烯含氮衍生物可用于制备抗癌药物，其抗癌药效试验表现出明显的效果。

下面通过实施例对本发明的技术给予进一步地说明。

实施例1．β-榄香烯氯化物中间物的制备

在装有搅拌器回流冷凝器的500ml四颈瓶中，加入20.4克β-榄香烯，300ml二氯甲烷和80ml水，通入CO₂，搅拌下于4小时内分批加入漂白精(含次氯酸钙34％)共20克，加料完毕后继续反应半小时，然后抽滤，滤液分出有机相，用4×20ml二氯甲烷萃取水相，合并有机相，加入无水硫酸镁干燥过夜，蒸除溶剂，得黄色油状物，经硅胶柱分离，石油醚洗脱得10.2克β榄香烯氯代物。

实施例2．二乙氨基-β-榄香烯的制备

将0.91克实例1反应后的β-榄香烯和氯代物的混合物，0.50克二乙胺和3ml无水乙醇搅拌回流8小时，蒸除未反应的二乙胺和乙醇，将残液进行硅胶柱层析。先用石油醚洗脱，回收未反应物，再用乙醚洗脱得0.33克无色油状产物，即为二乙氨基衍生物。

实施例3．二丙氨基-β-榄香烯的制备

将1.22克实例1反应后的β-榄香烯和氯代物的混合物，0.94克二丙胺和5ml无水乙醇搅拌回流8小时，蒸除掉乙醇和未反应的二丙胺，残液进行硅胶柱分离。先用石油醚洗脱，再用乙醚洗脱得0.35克无色油状产物，即为二丙氨基β-榄香烯。

实施例4 氨基乙基氨基-β-榄香烯的制备

将1.05克实例1反应后的β-榄香烯氮代物，1.5ml乙二胺和5.5ml无水乙醇搅拌回流反应8小时，蒸除乙醇后，残液进行硅胶柱层析。先用石油醚洗脱未反应物，再用95％乙醇洗脱得0.66克淡黄色粘稠状产物。

实施例5 β-榄香烯氮芥衍生物的制备

将7.49克实例1反应后的β-榄香烯的氯代物混合物300克二乙醇胺0.15克碘化钾和12ml无水乙醇搅拌回流8小时，蒸除乙醇，加入10ml饱和氯化钠水溶液，用4×10ml石油醚萃取，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥后蒸除溶剂，得黄色粘稠物。在硅胶层析柱上进行分离，先用石醚洗脱未反应物，再用1∶2石油醚-乙醚混合溶剂洗出2.7克淡黄色粘稠液。取其中0.70克溶于5ml三氯甲烷中，缓慢滴加0.52克亚硫酰氯，室温搅拌半小时，再回流半小时，用IN氢氧化钠溶液调至中性，用4×10ml三氯甲烷萃取，萃取液用无水硫酸钠干燥。减压除溶剂，得棕红色液体。硅胶柱分离用1∶5乙醚/石油混合液，洗脱，得0.65克淡黄色油状物，为β-榄香烯氮芥衍生物。

实施例6 β-榄香烯哌啶衍生物的制备

将3.41克哌啶，10.68克实例1反应后的榄香烯氯代混合物在20ml无水乙醇中反应，并加入少许碘化钾，回流10余小时后，冷却静置，出现结晶沉淀。过滤，过滤浓缩进行硅胶柱分离，先用石油醚中洗出未反应物，再用乙醚-石油醚混合液冲洗出淡黄色液，除去溶剂得产物4.12克。

实施例7 β-榄香烯哌嗪衍生物的制备

将0.94克实例1反应后的β-榄香烯氯代物，1.36克含水哌嗪在6ml无水乙醇中回流反应6小时，除去乙醇和水后，残液进行硅胶柱分离，先用石油醚洗脱未反应物，再用乙醚洗出后馏馏从中得出0.2克白色固体和0.60克淡黄色粘稠液体，前者鉴定为双榄香烯哌嗪，后者为单榄香烯哌嗪衍生物。

实施例8 β-榄香烯咪唑衍生物的制备

将0.8克榄香烯和氯代物的混合物与0.59克咪唑在5毫升丙酮中巡流反应7小时，蒸除丙酮，剩余物经硅胶柱层析分离，先用石油醚洗脱未反应物，再用乙醚洗脱得0.43克浅黄色油状物，好为榄香烯咪唑衍生物。

实施例9 体外抗癌活性试验

选用人官颈癌细胞Hela，人红白血病细胞K₅₆₂，人β淋马白血病细胞Raji和人单核样白血病细胞J_6-2作为靶细胞，取处于指数生长期的细胞，调浓度为3×10⁵个/毫升备用。将β-榄香烯哌嗪衍生物用RPMI1640完全培养液溶解(1‰DMSO助溶)，设三个剂量组。

β-榄香烯哌嗪衍生物对体外建株癌细胞增殖抑制试验结果

抑 瘤制 株剂 率量    ％	Hela	K562	Raij	J6-2
					100μg/ml	100	98	100	100
10	58	70	57	0
					1	25	19	3	0

*β-榄香烯的对照试验，均无抑制作用。

实施例10 β-榄香烯哌嗪衍生物对体外建株Hela与K₅₆₂细胞增殖抑制活性

测得其半数抑制浓度IC₅₀(95％可信限)为：

Hela：9.03(8.27-9.87)

K562：5.91(5.21-6.70)

由上述实例，本发明的榄香烯含氮衍生物与榄香烯相比具有更好的抗癌活性，可用于制备抗癌药物。同时该衍生物的合成方法简便，反应条件温和，易于实现工业化生物。

Claims (5)

1．一种榄香烯含氮衍生物，其特征在于可由下分子结构式表示：

其中R₁=R₂为含氮化合物官能团：二甲氨基、二乙氨基、氨基乙基氨基、苯氨基，二氯乙基氨基，羟乙基氨基，氮丙啶基、咪唑基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、嘧啶基或嘌呤基。

2．一种如权利要求1所述榄香烯含氮衍生物的制备方法，包括下述步骤：

1)榄香烯用次氯酸盐进行氯化反应得到榄香烯氯代物中间产物，反应中加入有机溶剂氯代烃和水；

2)用中间产物与含氮有机物反应得到相应的含氮衍生物，所谓含氮有机物为二甲胺、二乙胺、乙二胺、苯胺；二氯乙基胺，乙醇胺；氮丙啶；吗啉、哌啶、哌嗪、嘧啶，咪唑或嘌呤，反应在回流条件下进行。

3．按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤1所用的次氯酸盐为次氯酸钠、钾或钙盐、漂白粉或者漂白精，次氯酸盐的用量与榄香烯的摩尔比为1.0～3.0。

4．按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤2)用步骤1)制成提纯的中间产物或将步骤1)进行氯化反应后的混合物直接用于步骤2)与含氮有机物反应，反应物含氮有机物分子与榄香烯分子的摩尔比为1～5。

5．一种如权利要求1所述榄香烯含氮衍生物在制备抗癌药物中的用途。