CN106561976B - 一种微生态制剂制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生态制剂技术领域，尤其是一种微生态制剂制备方法，采用魔芋胶作为包合剂，魔芋胶是水凝胶状多糖，是一种高分子量、非离子型KGM，其具有亲水性、增稠性、稳定性、乳化性、悬浮性、凝胶性和成膜性等多种特性，能够使得微生态制剂在添加如饲料中后，其口感得到改善，延长饲料保质、保鲜期，避免微生态成分被氧化和水解，提高微生态制剂的品质，降低毒副作用，控制微生态制剂成分的释放，提高生物利用率。
Description
技术领域
本发明涉及微生态制剂技术领域，尤其是一种微生态制剂制备方法。
背景技术
在抗生素的使用中，推动了畜牧业快速发展；随着科学与生活水平的不断提高，对于抗生素的危害已经得到普遍的认可，其长期使用在饲料、药物中，将会导致生物体中的病原菌的抗药性增强，并且使得抗生素在生物体中逐渐累积，造成对畜牧业产品的感染和二次污染，使得动物机体免疫力下降，动物胃肠道菌群失调，同时还会通过食物链，对人类的健康造成危害。对于抗生素，目前在欧美一些国家已经遭受到禁止或者限制使用。
微生态制剂是无公害、无残留的绿色添加剂，其具有促进动物生长，提高动物免疫力，降低动物产品生产对环境的污染程度等。为此，有研究者采用微生态制剂替代抗生素，有效的避免了抗生素给环境带来的污染，提高了动物肉制品等产品的品质。目前，对于微生态的制剂的研究技术较多，我国早在上个世纪70年代就已经开始了微生态制剂的研究，但是由于对微生态制剂的制备和处理过程不恰当，致使获得的微生态制剂的品质较差，如稳定性、保质期等均较差，而且生物利用率也较低，导致微生态应用成本较高。
在现有技术中，有采用β环糊精进行包合微生态制剂的报道，而未见有任何采用魔芋胶进行包合制备微生态制剂的报道。
发明内容
为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种微生态制剂制备方法。
具体是通过以下技术方案得以实现的：
一种微生态制剂，该微生态制剂采用的是魔芋胶作为包合剂包合而成。采用魔芋胶作为包合剂，魔芋胶是水凝胶状多糖，是一种高分子量、非离子型KGM，其具有亲水性、增稠性、稳定性、乳化性、悬浮性、凝胶性和成膜性等多种特性，能够使得微生态制剂在添加如饲料中后，其口感得到改善，延长饲料保质、保鲜期，避免微生态成分被氧化和水解，提高微生态制剂的品质，降低毒副作用，控制微生态制剂成分的释放，提高生物利用率。
尤其是在将魔芋胶添加到饲料中后，能够有效的改善饲料的品质，提高饲料稳定性，颗粒分散性，尤其能够确保饲料在加水后依然具有一定的韧性和弹性，提高饲料的适口性。
所述的包合剂，其中含有占魔芋胶质量0.1-5％的纳米碳粉，通过包合剂中加入纳米碳粉，能够使得包合剂包合微生态成分后，能够有效的改善微生态存在的环境，并且在将其添加入饲料中后，能够使得饲料的功能增强，提高动物机体免疫力，降低动物体发病率。
上述的微生态制剂，其制备方法是将乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、粪肠球菌分别培养后，再混合菌液培养，并采用包合剂包合得到。
所述的混合菌液培养，在混合前，乳酸菌含活菌数为3.5×108CFU/g～2.1×1010CFU/g；枯草芽孢杆菌活菌数为4.5×108CFU/g～1.7×1010CFU/g；酵母菌活菌数为3.2×108CFU/g～1.3×1010CFU/g；粪肠球菌活菌数为2.1×108CFU/g～0.5×1010CFU/g。
所述的混合菌液培养，混合比按照体积比为乳酸菌：枯草芽孢杆菌：酵母菌：粪肠球菌＝1.1-2.3:3.4-5.1:0.3-1.6:2。
上述的微生态制剂制备方法，包括如下步骤：
(1)将乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、粪肠球菌的菌粉分别配制成质量百分比为3-7％的液体，并分别取0.1mL接种于培养基上，乳酸菌接种在MRS液体培养基上，枯草芽孢杆菌接种在肉汤液体培养基上，酵母菌接种在马铃薯葡萄糖液体培养基上，粪肠球菌接种在MRS液体培养基上，并置于温度为33-36℃下培养20-23h，得到乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液；
(2)将乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液按照体积比为1.1-2.3:3.4-5.1:0.3-1.6:2混合，加入麸皮和玉米粉，置于温度为34-36℃的培养箱中培养21-22h，得到微生物培养剂；其中麸皮和玉米粉按照质量比为1:3混合，加入量为混合菌液总质量的230-250倍；
(3)将微生物培养剂置于包合槽中，加入包合剂，在温度为-10至75℃，搅拌处理2.5-3.7h，包合剂加入量占微生物培养剂质量的15-27％，干燥，得到微生态制剂。
所述的步骤(3)，加入包合剂后，在温度为25℃，搅拌处理3h。
上述微生态制剂应用于猪饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加0.1-7.5％。
上述微生态制剂应用于鸡饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加2.1-6.5％。
上述微生态制剂应用于鸭饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加3.5-9.5％。
上述微生态制剂应用于牛饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加11-23％。
上述微生态制剂应用于马饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加0.7-19％。
上述微生态制剂应用于羊饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加0.8-17.5％。
上述微生态制剂应用于鹅饲料作为添加剂；添加量为每千克猪饲料添加0.9-6.3％。
通过将采用魔芋胶包合的微生态成分根据动物体的不同配入饲料，能够有效的使得微生态制剂的利用率得到提高，降低在畜牧业中微生态制剂利用的成本，而且能够有效的改善动物体肠道环境，降低动物体的抗药性，提高动物体免疫力，降低环境污染。
本发明创造的MRS液体培养基采用现有技术中的液体培养基进行配制和处理后，即可应用；例如：MRS液体培养基按照蛋白胨10.0g、牛肉浸取物10.0g、酵母提取液5.0g、葡萄糖20.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二胺2.0g、吐温-80 1.0g、磷酸氢二钾0.4g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.29g、碳酸钙20.0g、琼脂15.0g依次加入蒸馏水并将蒸馏水补充到1000mL，pH调至6.3，搅拌后加热，煮沸2min，在121℃、0.1Mpa下灭菌30min等。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定，但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。
实施例1
一种微生态制剂制备方法，包括如下步骤：
(1)将乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、粪肠球菌的菌粉分别配制成质量百分比为3％的液体，并分别取0.1mL接种于培养基上，乳酸菌接种在MRS液体培养基上，枯草芽孢杆菌接种在肉汤液体培养基上，酵母菌接种在马铃薯葡萄糖液体培养基上，粪肠球菌接种在MRS液体培养基上，并置于温度为33℃下培养20h，得到乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液；
(2)将乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液按照体积比为1.1:3.4.1:0.3:2混合，加入麸皮和玉米粉，置于温度为34℃的培养箱中培养21h，得到微生物培养剂；其中麸皮和玉米粉按照质量比为1:3混合，加入量为混合菌液总质量的230倍；
(3)将微生物培养剂置于包合槽中，加入魔芋胶，在温度为75℃，搅拌处理2.5h，魔芋胶加入量占微生物培养剂质量的15％，干燥，得到微生态制剂。
实施例2
一种微生态制剂制备方法，包括如下步骤：
(1)将乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、粪肠球菌的菌粉分别配制成质量百分比为7％的液体，并分别取0.1mL接种于培养基上，乳酸菌接种在MRS液体培养基上，枯草芽孢杆菌接种在肉汤液体培养基上，酵母菌接种在马铃薯葡萄糖液体培养基上，粪肠球菌接种在MRS液体培养基上，并置于温度为36℃下培养23h，得到乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液；
(2)将乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液按照体积比为2.3:5.1:1.6:2混合，加入麸皮和玉米粉，置于温度为36℃的培养箱中培养22h，得到微生物培养剂；其中麸皮和玉米粉按照质量比为1:3混合，加入量为混合菌液总质量的250倍；
(3)将微生物培养剂置于包合槽中，加入魔芋胶，并在魔芋胶中加入纳米碳粉占魔芋胶质量的5％，在温度为-10℃，搅拌处理3.7h，魔芋胶加入量占微生物培养剂质量的27％，干燥，得到微生态制剂。
实施例3
一种微生态制剂制备方法，包括如下步骤：
(1)将乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、粪肠球菌的菌粉分别配制成质量百分比为5％的液体，并分别取0.1mL接种于培养基上，乳酸菌接种在MRS液体培养基上，枯草芽孢杆菌接种在肉汤液体培养基上，酵母菌接种在马铃薯葡萄糖液体培养基上，粪肠球菌接种在MRS液体培养基上，并置于温度为34℃下培养22h，得到乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液；
(2)将乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液按照体积比为2:4.5:1.1:2混合，加入麸皮和玉米粉，置于温度为35℃的培养箱中培养21.5h，得到微生物培养剂；其中麸皮和玉米粉按照质量比为1:3混合，加入量为混合菌液总质量的240倍；
(3)将微生物培养剂置于包合槽中，加入魔芋胶，并在魔芋胶中加入纳米碳粉占魔芋胶质量的0.1％，在温度为25℃，搅拌处理5.7h，包合剂加入量占微生物培养剂质量的21％，干燥，得到微生态制剂。
实施例4
一种微生态制剂制备方法，包括如下步骤：
(1)将乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、粪肠球菌的菌粉分别配制成质量百分比为7％的液体，并分别取0.1mL接种于培养基上，乳酸菌接种在MRS液体培养基上，枯草芽孢杆菌接种在肉汤液体培养基上，酵母菌接种在马铃薯葡萄糖液体培养基上，粪肠球菌接种在MRS液体培养基上，并置于温度为33℃下培养23h，得到乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液；
(2)将乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液按照体积比为1.1:5.1:0.3:2混合，加入麸皮和玉米粉，置于温度为34℃的培养箱中培养22h，得到微生物培养剂；其中麸皮和玉米粉按照质量比为1:3混合，加入量为混合菌液总质量的250倍；
(3)将微生物培养剂置于包合槽中，加入魔芋胶，并在魔芋胶中加入纳米碳粉占魔芋胶质量的3％，在温度为35℃，搅拌处理4.7h，包合剂加入量占微生物培养剂质量的23％，干燥，得到微生态制剂。
实施例5
测定实施例1-实施例4中乳酸菌培养液、枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、粪肠球菌培养液中的活菌数量(CFU/g)：
首先分别取培养液10ml，稀释100倍，再取0.1mL涂布接种在相应菌种培养基的固体培养基上，每组选取3各重复，并置于温度为34℃下培养22h，取出，计量各组中的活菌菌落数量(CFU/g)，即得，如表1所示：
表1
以上实施例，仅限于对本发明创造的技术方案做出进一步的解释和说明，以便于本领域技术人员对本发明创造的技术方案做出正确的理解，并不是对本发明创造的技术方案做出进一步的限定，本领域技术人员在此基础上做出的非突出的实质性特征和非显著进步的改进，均属于本发明创造的保护范围。
Claims (6)
1.一种微生态制剂， 其特征在于， 该微生态制剂采用的是魔 芋胶作为包合剂包合而成； 所述的包合剂， 其中含有占魔芋胶质 量 0.1-5％的纳米碳粉； 所述的微生态制剂，是将 乳酸菌、 枯草芽孢杆菌、 酵母菌、粪肠球菌分别培养后， 再混合菌液培养， 并采用包合剂包合得到; 所述的微生态制剂的制备方法，包括如下步骤： (1)将乳酸菌、 枯草芽孢杆菌、 酵母菌、 粪肠球菌的菌粉分别配制成质量百分比为 3-7％ 的液体， 并分别取0.1mL 接种于培养基上，乳酸菌接种在MRS 液体培养基上，枯草芽孢杆菌接种在肉汤液体培养基上， 酵母菌接种在马铃薯葡萄糖液体培养基上， 粪肠球菌接种在 MRS 液体培养基上， 并置于温度为 33-36℃下培养 20-23h， 得到乳酸菌培养液、 枯草芽孢杆菌培养液、酵母菌培养液、 粪肠球菌培养液； (2)将乳酸菌培养液、 枯草芽孢杆菌培养液、 酵母菌培养液、 粪肠球菌培养液按照体积比为 1.1-2.3:3.4-5.1:0.3-1.6:2 混合， 加入麸皮和玉米粉， 置于温度为 34-36℃的培养箱 中培养 21-22h， 得到微生物培养剂； 其中麸皮和玉米粉按照质量比为 1:3 混合， 加入量为混合菌液总质量的230-250 倍； (3)将微生物培养剂置于包合槽中， 加入包合剂， 在温度为-10 至 75℃ ， 搅拌处理 2.5- 3.7h， 包合剂加入量占微生物培养剂质量 的 15-27％， 干燥， 得到微生态制剂。
2.如权利要求 1 所述的微生态制剂的制备方法， 其特征在于， 所述的混合菌液培养， 在混合前， 乳酸菌含活菌数为 3.5× 108CFU/g～ 2.1× 1010CFU/g； 枯草芽孢杆菌活菌数为 4.5×108CFU/g～ 1.7×1010CFU/g； 酵母菌活菌数为 3.2× 108CFU/g～1.3×1010CFU/g； 粪肠球菌活菌数为 2.1× 108CFU/g～0.5× 1010CFU/g。
3.如权利要求 2 所述的微生态制剂的制备方法， 其特征在于，所述的混合菌液培养，混合比按照体积比为乳酸菌： 枯草芽孢杆菌： 酵母菌： 粪肠球菌＝1.1-2.3:3.4-5.1:0.3-1.6:2。
4.如权利要求 1 所述的微生态制剂的制备方法， 其特征在于， 所 述的步骤(3)， 加入包合剂 后， 在温度为 25℃， 搅拌处理 3h。
5.如权利要求1所述的微生态制剂或权利要求2-4任一项所述的制备方法制备的微生态制剂作为添加剂在制备牛饲料中的用途。
6.如权利要求1所述的微生态制剂或权利要求2-4任一项所述的制备方法制备的微生态制剂作为添加剂在制备鸡饲料中的用途。
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