CN106399151B - 一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌ba-7 - Google Patents

一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌ba-7 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA‑7，其特征在于，所述萎缩芽孢杆菌的分类命名为Bacillus atrophaeus BA‑7，于2015年12月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2015765。本发明菌株在低浓度下对十字花科作物根肿病具有显著防治效果，培养24小时候的1000倍稀释液对油菜根肿病的防治效果可高达87.2％。

Description

一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7
技术领域
本发明属于生物农药技术领域，具体涉及一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7。
背景技术
根肿病是目前在农作物特别是蔬菜中流行的一种病害，由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae Woron.)侵染引起。在我国主要危害油菜、大白菜、青菜和芥菜等十字花科蔬菜。农作物受根肿菌侵染后，在根部形成大小不一、光滑或龟裂粗糙的肿瘤。而植株的地上部份生长迟缓、缺水蔫萎。根肿病主要由土壤中的休眠孢子，通过菜株病苗、水流携带菌土等方式传播。酸性、潮湿土壤有利于病菌萌发侵入危害。近些年来，蔬菜根肿病有加速蔓延的趋势。
目前，已有不少研究利用生防菌株来防治根肿病，然而，现有技术还存在不少缺点。首先，现有的针对十字花科根肿病的生防菌株过少，且防治效果参差不齐；其次，生防菌剂的施用剂量过多，存在潜在的环境和人畜健康安全隐患；最为重要的是，现有菌株的菌属过于单一，主要集中在枯草芽孢杆菌(如枯草芽孢杆菌XF-1和枯草芽孢杆菌M3)和解淀粉芽孢杆菌(如解淀粉芽孢杆菌Bam22)，是否存在其它可高效防治十字花科根肿病的生防菌种，是本领域研究人员的重大研究课题。
发明内容
针对现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7，该萎缩芽孢杆菌BA-7的分类命名为Bacillus atrophaeus BA-7，于2015年12月21日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉市武昌珞珈山中国典型培养物保藏中心(武汉大学)，邮编：430072)，保藏号为CCTCC NO：M 2015765。
如本发明实施例所示，将本发明菌株培养24小时之后，1000倍的稀释液具有高达87.2％(5组平行实验平均值)的油菜根肿病防治效果。实现上述效果的机制在于，本发明菌株本身对于病原菌具有很好的抑菌和灭杀作用，使得油菜根肿病的发生率大为降低。另外，如实验例1所示，本发明菌株对于农地中的秸秆或其它作物废弃物具有很好的腐熟作用，施用本发明菌株培养稀释液后，可在常温下有效分解秸秆或其它作物废弃物，并将藏身其中的病原菌释放出来，通过病原菌和萎缩芽孢杆菌的直接接触进一步实现本发明菌株对土壤中病原菌的全面作用。同时，分解后的秸秆或其他作物废弃物还能为下一季作物如油菜的生长提供更多的有机质，促进农作物的健康生长。
一般而言，农作物秸秆的腐熟发酵多采用厌氧方式进行堆沤发酵，不仅费时费力，而且容易对周边环境造成污染。本发明菌株可在有氧条件下，对秸秆进行腐熟，无需将收割后的秸秆进行集中收集和进行堆沤，仅需将本发明发酵菌液撒施入农田中，让菌液接触农作物秸秆便可实现对秸秆的腐熟及其后续利用。同时，当施用外源秸秆时，即使外源秸秆中带有病原菌，根据上述说明，可以理解，本发明同样能实现很好的防治效果。
因此，本领域人员不难理解，本发明菌株不仅具有很好的对病原菌的抑制杀灭作用，同时还可以在有氧条件下实现对秸秆的快速腐熟，使得下一季油菜大幅度免于病原菌的再次侵染并促进油菜的生长。
值得指出的是，对于其它十字花科根肿病的防治效果也十分优秀。
现有技术中被公众熟知的生防菌株枯草芽孢杆菌XF-1的施用浓度十分高，且一旦施用浓度过低，其防治效果将大为降低，极大的限制了其实际应用。
其它常见的生防菌株也多为枯草芽孢杆菌。虽然本发明的发明人此前发现了一株对十字花科作物根肿病具有很好防治效果的解淀粉芽孢杆菌Bam22，拓宽了该领域十字花科生防菌株的菌种范围，然而在本发明前，现有技术还未出现可从萎缩芽孢杆菌中寻求高效防治十字花科作物根肿病的菌株的报道和相应的指示。
综上所述，本发明对于现有技术的贡献在于：(1)、提供了一株在低浓度下对十字花科作物根肿病具有优秀防治效果的萎缩芽孢杆菌BA-7；(2)、扩宽了十字花科作物根肿病生防菌的菌种范围。
需要指出的是，本发明菌株对于油菜根肿病的防治最为显著，但不限于对油菜根肿病的防治。
具体实施方式：
下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
(1)菌株的培养
将萎缩芽孢杆菌BA-7在固体培养基培养之后，挑取单菌落，置于液体培养基中，于30-32℃震荡培12小时，转速为220rpm，作为种子液；所述液体培养基的成分按质量百分数计包括：酵母提取物0.3％、牛肉浸膏0.2％、蛋白胨0.8％、NaCl 0.3-0.6％、余量为水，pH＝7.0-7.2；
将步骤1)所得物置入发酵罐中进行发酵24小时，罐温为30℃，发酵罐搅拌速度为250rpm；发酵罐中的培养基的成分按质量百分数计包括：豆粉4.5％、蛋白胨0.12％、葡萄糖0.6％、淀粉2.5％、硫酸锰0.1％、硫酸亚铁0.06％、磷酸氢二钾0.2％、碳酸钙0.1％、消泡剂0.01％、余量为水，pH＝7.0-7.4。
(2)生防效果试验
将步骤(1)所得培养物稀释1000倍，利用浇根法，移栽时对每株作物浇100ml，隔7天浇一次，隔14天再浇一次。注：未稀释菌液的菌液浓度约为6-8×109cfu/ml。受试作物为油菜、白菜和青花菜。各实验组设5个平行组，取平均值。
病情分级：
0级：根部无肿瘤，根系发育正常；
1级：1-30％的根着少许肿瘤，有小的结节状肿块，相互不连接；
2级：31-60％的根着生肿瘤，有大的结节状或球状肿块，相互连接；
3级：61-100％的根着生肿瘤，膨大到形成纺锤形瘤，大的瘤块一直延伸到下胚轴，植株矮小，停止生长。
病情指数＝[∑(各级病株数×相对级数值)/最高级别×调查总株数]×100。
相对防效＝(对照病情指数-处理病情指数)×100/对照病情指数。
实验结果如表1所示。
表1
注：清水对照的病情指数为62％。
实验例1
农田：油菜田；
在秸秆收割机上安装一排菌剂喷洒装置，用于在收割秸秆的同时将菌剂喷洒至农田。
收割粉碎农田中的秸秆，并向农田施用萎缩芽孢杆菌BA-7菌剂，施用量为20000亿个细菌/亩。所述菌剂为萎缩芽孢杆菌BA-7发酵液，菌浓为1×109cfu/ml。
处理45天之后，进行秸秆失重率(全称为秸秆生物量失重率)的检测，失重率为61.3％。

Claims (2)

1.一株用于防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7，其特征在于，所述萎缩芽孢杆菌的分类命名为Bacillus atrophaeus BA-7，于2015年12月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2015765。
2.根据权利要求1所述的一株用于防治十字花科根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7，其特征在于，所述十字花科作物为油菜。
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