CN106367470B - 一种冷冻乳制品菌含量的检测方法 - Google Patents

一种冷冻乳制品菌含量的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于食品安全技术领域，具体涉及一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：（1）称取一定量的冷冻乳制品，置于去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；（2）取1～2ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35～36℃培养2～3小时，同时进行间断的超声波处理；（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释3～5倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数。本发明菌含量检测方法能最大程度地唤醒损伤菌群，快速准确地检测到活菌总数。

Description

一种冷冻乳制品菌含量的检测方法
技术领域
本发明属于食品安全技术领域，具体涉及一种冷冻乳制品菌含量的检测方法。
背景技术
乳制品，指的是使用牛乳或羊乳及其加工制品为主要原料，加入或不加入适量的维生素、矿物质和其它辅料，使用法律法规及标准规定所要求的条件，加工制作的产品。乳制品包括液体乳（巴氏杀菌乳、灭菌乳、调制乳、发酵乳）；乳粉（全脂乳粉、脱脂乳粉、部分脱脂乳粉、调制乳粉、牛初乳粉）；其它乳制品等。
由于新鲜乳制品易腐坏变质，须以冷冻保存，以延长货架期。而冷冻乳制品中的微生物有其自身的特点，在冷冻的过程中，细菌在生存和死亡两种状态之外，还有可能存在受到一定损伤而不致死的状态，损失一部分正常的生物特征，或者说处于休眠状态，并逐渐适应了超低温的环境。在检测时既要对这些受伤的细菌进行修复，又要使其在常规的培养温度下快速充分生长并准确计数，这是目前亟待解决的问题。
发明内容
本发明提供一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，能最大程度地唤醒损伤菌群，快速准确地检测到活菌总数。
为解决以上技术问题，本发明通过以下技术方案实现：
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）称取一定量的冷冻乳制品，置于30～35℃的去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理。
所述去离子水为所述冷冻乳制品重量的10～12倍。
（2）取1～2ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35～36℃培养2～3小时，同时进行间断的超声波处理。
所述间断的超声波程序为：20～25KHz作用5s，间隔10s，如此循环；试验证明，高频超声波具有杀菌作用，而低频短时超声波能使休眠中的微生物躁乱，重启新陈代谢，有较好的唤醒作用。
所述微生物培养基包括牛肉膏15～20wt%、葡萄糖2～5wt%、改性凹凸棒土6～9wt%，余量为去离子水。
所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得。
本方法通过高频超声波的空化作用，不仅能将钠离子送入凹凸棒土的内部通道，起到吸附作用，还能除去凹凸棒土表面粘着成分，避免给培养基中带入杂质。
由于冷冻乳制品中微生物多种多样，对于渗透压要求各异，且休眠微生物细胞内含水量较少，不宜一次性将培养基内渗透压提高；改性凹凸棒土中的氯化钠随着超声波作用，缓慢从孔洞中释放，慢速改变溶液浓度，使各种微生物渗透压逐渐平衡，防止休眠微生物在超声波和渗透压的双重压迫下难以生存，影响计数准确性。
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释3～5倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数。
本发明具有以下积极有益效果：
本发明安全检测方法能最大程度地唤醒损伤菌群，快速准确地检测到活菌总数。
（1）高频超声波具有杀菌作用，而发明所用低频短时超声波能使休眠中的微生物躁乱，启动新陈代谢，有较好的唤醒作用。
（2）本方法通过高频超声波的空化作用，不仅能将钠离子送入凹凸棒土的内部通道，起到吸附作用，还能除去凹凸棒土表面粘着成分，避免给培养基中带入杂质。
（3）由于冰淇淋内微生物多种多样，对于渗透压要求各异，且休眠微生物细胞内含水量较少，不宜一次性将培养基内渗透压提高；改性凹凸棒土中的氯化钠随着超声波作用，缓慢从孔洞中释放，慢速改变溶液浓度，使各种微生物渗透压逐渐平衡，防止休眠微生物在超声波和渗透压的双重压迫下难以生存，影响计数准确性。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）称取25g的冷冻冰淇淋，置于30℃的250g去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养3小时，同时进行间断的超声波处理；所述间断的超声波程序为：20KHz作用5s，间隔10s，如此循环；所述微生物培养基包括牛肉膏15wt%、葡萄糖5wt%、改性凹凸棒土6wt%，余量为去离子水；所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释3倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1。
实施例2
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）称取25g的冷冻冰淇淋，置于35℃的300g去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；
（2）取2ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于36℃培养2小时，同时进行间断的超声波处理；所述间断的超声波程序为： 25KHz作用5s，间隔10s，如此循环；所述微生物培养基包括牛肉膏20wt%、葡萄糖2wt%、改性凹凸棒土9wt%，余量为去离子水；所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释5倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1。
实施例3
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）称取25g的冷冻冰淇淋，置于32℃的280g去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养2小时，同时进行间断的超声波处理；所述间断的超声波程序为：23KHz作用5s，间隔10s，如此循环；所述微生物培养基包括牛肉膏18wt%、葡萄糖3wt%、改性凹凸棒土8wt%，余量为去离子水；所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释4倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1。
实施例4
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）称取25g的冷冻冰淇淋，置于32℃的280g去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养2小时，同时进行间断的超声波处理；所述间断的超声波程序为：23KHz作用10s，间隔5s，如此循环；所述微生物培养基包括牛肉膏18wt%、葡萄糖3wt%、改性凹凸棒土8wt%，余量为去离子水；所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释4倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1，因为超声波持续时间较长，导致部分敏感菌的死亡，较实施例1～3偏少。
实施例5
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）称取25g的冷冻冰淇淋，置于32℃的280g去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养2小时，同时进行间断的超声波处理；所述间断的超声波程序为：23KHz作用5s，间隔10s，如此循环；所述微生物培养基包括牛肉膏18wt%、葡萄糖3wt%、氯化钠0.85wt%，余量为去离子水；所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释4倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1，因为培养基盐浓度一步到位，导致部分低渗敏感菌的死亡，较实施例1～3偏少。
对比例1
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）无菌条件下称取25g的冷冻冰淇淋，置于280g的0.85%生理盐水中自然融化，进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养2小时；液体培养基包括牛肉膏18wt%、葡萄糖3wt%、氯化钠0.85wt%，余量为去离子水；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释4倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1。
对比例2
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）无菌条件下称取25g的冷冻冰淇淋，置于280g的0.85%生理盐水中自然融化，进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养2小时，同时进行间断的超声波处理；35KHz作用5s，间隔10s，如此循环；微生物培养基包括牛肉膏18wt%、葡萄糖3wt%、改性凹凸棒土8wt%，余量为去离子水；改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释4倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1。
对比例3
一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）无菌条件下称取25g的冷冻冰淇淋，置于30℃ 280g的去离子水中自然融化，进行均质处理；
（2）取1ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35℃培养2小时，同时进行间断的超声波处理；20KHz作用5s，间隔10s，如此循环；微生物培养基包括牛肉膏18wt%、葡萄糖3wt%、氯化钠0.85wt%，余量为去离子水；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释4倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数，检测结果见表1。
表1 以上实例所得相关检测结果对比
。
对所公开实施例的上述说明，使本领域技术人员能够实现或使用本发明，但显然所描述的实施例仅为本发明示意性的部分具体实施方式，并非用以限定本发明的范围，任何本领域的技术人员在不脱离本发明构思和原则的前提下所做出的等同变化与修改，均应属于本发明保护的范围。

Claims (2)

1.一种冷冻乳制品菌含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）称取一定量的冷冻乳制品，置于30～35℃的去离子水中使其自然融化，然后进行均质处理；
（2）取1～2ml均质后所得液体，接种到微生物培养基中，于35～36℃培养2～3小时，同时进行间断的超声波处理；
（3）将步骤（2）所得微生物培养基过滤后稀释3～5倍，取2ml加入微生物快速检测仪中进行检测，然后根据稀释倍数，即可计算出单位样品中活菌总数；
步骤（2）所述间断的超声波程序为：20～25KHz作用5s，间隔10s，如此循环；
步骤（2）所述微生物培养基包括牛肉膏15～20wt%、葡萄糖2～5wt%、改性凹凸棒土6～9wt%，余量为去离子水；所述改性凹凸棒土由以下步骤制成：将凹凸棒土用去离子水浸没，并加入所述凹凸棒土重量15%的NaCl，混合均匀后，进行超声处理10分钟，超声波频率为45KHz，然后过滤、烘干，即得。
2.根据权利要求1所述冷冻乳制品菌含量的检测方法，其特征在于：步骤（1）所述去离子水为所述冷冻乳制品重量的10～12倍。
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