CN106366189A - 一种抗人肺癌干细胞的单克隆抗体 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗人肺癌干细胞的单克隆抗体。具体地，本发明涉及一种新的能特异识别、并能抑制人肺癌干细胞的单克隆抗体，及其生产的杂交瘤细胞系，以及该抗体在制备可用于治疗人肺癌复发药物中的应用。该单抗体外可以显著抑制人肺癌干细胞的自我更新、侵袭、迁移，体内显著抑制人肺癌移植瘤的生长和复发，延长荷瘤小鼠的生存期。本发明还提供了保藏号为CGMCC No.10898该单克隆抗体的生产细胞系小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6。

Description

一种抗人肺癌干细胞的单克隆抗体

技术领域

本发明涉及一种抗人肺癌干细胞的抗体及其生产的杂交瘤细胞系，以及该抗体在治疗肺癌生长和复发中的应用。具体而言，本发明提供了一种可与人肺癌干细胞天然膜抗原结合的单克隆抗体，及其在制备可用于治疗人肺癌的药剂中的应用。

背景技术

肺癌是严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居恶性肿瘤的首位，且呈上升趋势。尽管肺癌的临床诊断和治疗较以前有了很大进步，但手术切除无力于大部分的多发、转移或复发的肺癌，而相当数量的病人对化疗药物产生耐药，放疗受到胸腔重要脏器的限制，因此现有的三大治疗手段治疗肺癌的效果仍不理想，5年生存率仍然很低。

已有的研究表明肺癌组织和细胞系中存在有肿瘤干细胞，它们具有自我更新和不定向分化潜能，能被诱导分化、高运动侵袭性、抵抗放化疗和高致瘤性等生物学特性。目前临床的肿瘤治疗手段，如手术切除、放化疗、靶向治疗癌细胞的生物治疗，均不能有效杀灭和清除肿瘤干细胞，最终导致抵抗放化疗的肿瘤干细胞反而被筛选富集，比例大大提高，迅速生长，扩散、转移至全身各器官继续分化形成新的转移病灶，进而导致肿瘤的转移复发和耐药，因此靶向肿瘤干细胞治疗有望治疗肿瘤的转移复发，延长生存期改善预后，成为目前肿瘤研究的新热点。

肿瘤靶向药物主要包括小分子化学药、蛋白多肽药、基因治疗药 和单抗药物等，目前在临床上广泛应用的主要是单抗药物和少数几种小分子药物，现已有10余种肿瘤靶向抗体药物上市在临床应用。十几年的临床应用结果表明，单抗药物选择性强，临床疗效显著，安全有效，在靶向药物中具有明显优势，而且其规模化生产技术也已成熟，因此成为靶向治疗生物药物开发的首选，这些也决定了研发靶向肿瘤干细胞的靶向药物，单抗药物是首选品种。目前有关靶向肿瘤干细胞的抗体药物仍未见报道。

发明内容

因此，为了克服现有临床治疗现状及抗肺癌抗体药物研发中的不足，本发明提供一种单克隆抗体，其由于2015年06月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号)保藏，保藏号为CGMCC No.10898的小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6产生。

所述的单克隆抗体为小鼠IgG1型单克隆抗体。

本发明还提供一种由保藏号为CGMCC No.10898的小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6产生的单克隆抗体在制备用于治疗人肺癌生长和复发的药物中的应用。

本发明还提供一种小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6的杂交瘤细胞株，其于2015年06月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号)保藏，保藏号为CGMCC No.10898其特征在于分泌产生如权利要求1所述的单克隆抗体。

换言之，本发明的第一个方面在于提供一种新的能与人肺癌干细胞结合，并可在体内抑制肺癌生长和复发的单克隆抗体，该抗体在体外具有抑制人肺癌干细胞的自我更新、侵袭和迁移，在体内可以显著抑制肺癌荷瘤小鼠的生长和复发。目前，国内外尚未关于抗肺癌干细胞单抗抑制肺癌生长和复发的报道。

本发明的第二个方面在于提供上述单克隆抗体在制备可用于治疗人肺癌及其转移的药剂中的应用。

本发明的第三个方面在于提供可分泌产生上述单克隆的小鼠杂交瘤细胞系。

根据本发明的第一个方面，本发明提供了一种新的抗人肺癌干细胞的单克隆抗体。使用该单克隆抗体，可在体外抑制人肺癌干细胞的自我更新、侵袭、迁移，体内抑制肺癌组织的生长和复发。

首先，本发明提供的新的抗人肺癌干细胞的单克隆抗体可用于治疗肺癌的生长和复发。通过将该单克隆抗体以适宜的注射方式，例如静脉注射、腹腔注射等方式注射入机体内，使其进入血液循环扩散至全身，该单克隆抗体可特异识结合肺癌干细胞发挥生物学功能，抑制肺癌干细胞的自我更新、迁移、侵袭，从而抑制体内肺癌生长，从而达到治疗肺癌并抑制复发的作用。

根据本发明的一个实施方式，本发明提供的单克隆抗体是由小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6(保藏号CGMCC No.10898)分泌产生，而该杂交瘤细胞系是由融合小鼠骨髓瘤细胞SP2/0和免疫人肺癌组织中分离获得的人肺癌细胞来源的单细胞的小鼠的脾细胞融合后经筛选、鉴定获得的。具体地，采用酶消化法和原代结合短暂传代培养从人肺癌组织中分离含人肺癌干细胞的连续传代细胞，在无血清培养基中悬浮成球培养富集。将该细胞洗涤固定后免疫正常BALB/c小鼠。采用间接免疫荧光实验监测免疫小鼠抗血清中的抗人肺癌干细胞的滴度，待特异性抗体滴度超过1:50000后冲击免疫一次，3天后处死小鼠，取脾制备单细胞悬液并与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，采用甲基纤维素平板法制备抗肺癌干细胞单克隆抗体库。待克隆生长后将其分别挑取至96孔板培养。将肺癌干细胞接种于96孔板，用无血清培养基培养30小时后，采用细胞免疫荧光双染色法，检测单抗库中杂交瘤单抗上清与人肺癌干细胞的反应，筛选出识别肺癌干细胞。以流式细胞术检测 杂交瘤单抗识别的抗原与肿瘤干细胞标志物CD133在人肺癌干细胞中的表达情况。裸鼠致瘤实验检测单抗所识别细胞的裸鼠致瘤能力。ELISA鉴定单克隆抗体的类和亚类。

根据本发明的提供的多个实施方式，能够识别肺癌干细胞的克隆被进一步采用CCK-8测定法，检测单抗库中杂交瘤单抗上清对人肺癌干细胞增殖的影响；采用包被Matrigel基质的Transwell小室侵袭实验，检测单抗对肺癌干细胞侵袭能力的影响；采用肿瘤干细胞成球培养法，将人肺癌干细胞接种于无血清培养基中进行成球培养，检测杂交瘤单抗对肺癌干细胞成球能力的抑制作用。采用动物体内致瘤实验，进一步证明杂交瘤单抗能够识别肺癌干细胞。采用抗体治疗实验，证明单抗对移植瘤生长及生存期的影响。根据本领域公知的知识可以判断，由于肿瘤干细胞是肿瘤生长和复发的根源，因而可以推知杂交瘤细胞系LC-5A6产生的单克隆抗体将可能在体内治疗肺癌生长和复发中具有显著作用。

进一步，采用仅含杂交瘤细胞系LC-5A6产生的单克隆抗体的PBS溶液注射入荷有人肺癌移植瘤的小鼠体内进行靶向肺癌干细胞的单抗治疗实验，观察其治疗肺癌的疗效，探讨靶向肺癌干细胞是否能治疗肺癌的生长和复发，以期为靶向肺癌干细胞治疗肺癌提供有应用价值的候选单抗药物，且为设计靶向肿瘤干细胞的抗体治疗方案提供科学的实验依据。LC-5A6单抗靶向肺癌干细胞治疗肺癌的动物体内实验研究结果显示，高剂量、中剂量、组LC-5A6抗体在裸鼠体内能够明显抑制人肺癌移植瘤的生长，高、中、低三个剂量组的抑制率分别是75.0％、43.4％和16.3％，实验组与对照组相比，移植瘤体积均有显著差异(P<0.05)。经过20周对高剂量治疗组及对照组的观察发现，抗体治疗可以明显延长裸鼠的生存期。这些结果表明LC-5A6单抗靶向肺癌干细胞，不仅能明显抑制肿瘤生长，而且还能治疗肺癌的复发。

因此，本发明提供了一种新的抗肺癌干细胞的单克隆抗体，该单克隆抗体可在体内抑制肺癌的生长和复发。

本发明涉及的单克隆抗体的优越之处在于：

1)抑制肺癌干细胞这一与肺癌生长和复发移密切相关的肿瘤细胞。具有上述作用的单抗尚未见到报道。

2)可在动物模型的体内抑制人肺癌的生长和复发。

3)由自行制备的小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6(保藏号CGMCC No.10898)分泌产生，并非产生自已有的杂交瘤细胞系。

根据本发明的第二个方面，本发明提供了由上述单克隆抗体在制备可用于治疗人肺癌生长和复发的药剂中的应用。根据本发明第一个方面提供的单克隆抗体及其在动物模型体内可以抑制人肺癌生长和复发的特性，并根据本领域内公知的知识，将很容易推知当将足够浓度的纯化的该单克隆抗体的溶液注射入人体，这些抗体将能通过血液循环进入到肺癌组织，并与肺癌干细胞结合，通过与在人体外和动物实验中相同的机制抑制人肺癌干细胞在肺癌组织中的增殖、迁移和侵袭的功能，即可能起到治疗人肺癌生长和复发的药效。因此，该单克隆抗体可用于直接制备可用于治疗人肺癌生长和复发的药剂溶液。另外，根据本领域内公知的知识，将很容易推知将其他化疗药物有效成分与该单克隆抗体制成复方或联合使用，仍然可以发挥治疗人肺癌生长和复发的药效。

根据本发明的第三方面，本发明还提供了可分泌产生上述单克隆的小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6(保藏号CGMCC No.10898)。该细胞系可以用来生产本发明涉及的单克隆抗体。具体的但不仅限于，可以采用各种现有的杂交瘤培养基培养该杂交瘤细胞，收获培养上清，从上清中采用公知的各种纯化方法获得纯化的单克隆抗体。

下面将结合实施例来说明如何实施本发明所述的新的抗肺癌干细胞的单克隆抗体，如何将其用于制备可用于治疗人肺癌生长和复发 的药剂，以及如何采用本发明提供的可分泌产生上述单克隆的小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6(保藏号CGMCC No.10898)生产该单克隆抗体。

通过参考在此给出的一些具体实施例可获得对本发明的进一步的理解，这些实施例仅用于说明本发明，其无意于对本发明的范围做出任何限制。显然，可以对本发明作出多种改动和变化而不脱离本发明的实质，因此，这些改动和变化同样在本申请要求保护的范围内。

附图说明

图1为LC-5A6单克隆抗体抑制肺癌移植瘤生长情况说明图；

图2为LC-5A6单克隆抗体治疗肺癌荷瘤小鼠的生存期情况说明图；

图3为纯化的LC-5A6单克隆抗体的电泳图。

具体实施方式

实施例1 制备与人肺癌干细胞膜表面抗原结合的鼠单克隆抗体

采用一种原代培养结合短暂传代培养的新方法，从人肺癌组织中分离可产生肺癌干细胞的连续传代细胞系，并建立一种可有效富集肺癌干细胞的体外无血清悬浮培养技术。将获得的肺癌干细胞采用多聚甲醛固定，免疫Balb/c鼠，直至免疫小鼠血清抗人肺癌干细胞的滴度达到1:50,000后，取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合形成杂交瘤。采用甲基纤维素平板法制备杂交瘤克隆，待克隆生长后将其分别挑取至96孔板培养。从96孔板中收集每个杂交瘤克隆的培养上清，该上清中含有这个克隆分泌的单克隆抗体。将人肺癌干细胞以2000/孔接种96孔板，用SFM培养基培养30h后，细胞经含1％BSA的PBS洗涤后，每孔中分别加入一个杂交瘤克隆的培养上清100ul，室温孵育2小时；1％BSA的PBS洗涤五次后，加入生物素标记二抗室温反应30分钟；再次1％BSA的PBS洗涤五次后Cy3标记Avidin室温反 应30分钟；1％BSA的PBS洗涤五次后，荧光显微镜镜检判断单抗库中的杂交瘤单抗上清与肺癌干细胞的反应，获得能与肺癌干细胞膜表面抗原结合的鼠单克隆抗体。

实施例2 筛选特异识别人肺癌干细胞膜表面抗原的鼠单克隆抗体

将经无血清悬浮培养的A549球形细胞，轻柔吹散成单细胞，以2000/孔接种96孔板，用无血清培养基培养24h后，细胞经含1％BSA的PBS洗涤后，每孔中分别加入一个杂交瘤克隆的培养上清100ul，室温孵育2小时；1％BSA的PBS洗涤五次后，加入生物素标记二抗室温反应30分钟；再次1％BSA的PBS洗涤五次后Cy3标记Avidin室温反应30分钟；1％BSA的PBS洗涤五次后，荧光显微镜镜检判断单抗库中的杂交瘤单抗上清与肺癌干细胞的反应，获得能与肺癌干细胞膜表面抗原结合的鼠单克隆抗体。同时我们还选择已证明含有肺癌干细胞的细胞系A549(标志物CD133)为细胞模型，对单抗LC-5A6(5.0μg/ml)进行进一步鉴定：消化A549细胞后重悬细胞浓度为1×10⁷个/ml，PBS洗1遍后，加入LC-5A6抗体，37℃孵育1h，PBS洗2遍，加入Percp-羊抗小鼠IgG和FITC-CD133，37℃避光孵育30min，PBS洗2遍，用1％多聚甲醛固定后上流式仪检测。结果显示，CD133⁺细胞表达比例为1.8％，单抗LC-5A6识别的细胞比例为3.1％，两者共染比例为1.5％，提示交瘤单抗LC-5A6能够特异识别肺癌干细胞。

实施例3 鉴定杂交瘤细胞LC-5A6分泌的单抗所识别细胞的致瘤性

采用胰酶消化方法，将A549制备成单个细胞，加入LC-5A6抗体(5.0μg/ml)，37℃孵育1h，PBS洗2遍，加入Percp-羊抗小鼠IgG，37℃避光孵育30min，经流式细胞术分选LC-5A6⁺细胞、LC-5A6^-细胞，接种于每只裸鼠后背部右侧皮下，每组6只。表面标志物阴性 组及未分选组作为对照。每周测皮下移植瘤长径和短径两次，用公式V＝(π/6)×(长径×短径×短径)计算瘤体积。结果所示，接种LC-5A6⁺细胞1×10³个在1个月时即可形成肿瘤，2个月时成瘤率6/6，而接种LC-5A6^-细胞1×10⁵个在3个月时都不能形成肿瘤，LC-5A6⁺细胞的成瘤性较LC-5A6^-细胞至少高100倍，表明LC-5A6⁺细胞具有高致瘤能力，单克隆抗体LC-5A6能够识别肺癌干细胞(表1)。

表1：LC-5A6单克隆抗体识别细胞的动物体内成瘤情况

实施例4 鉴定杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗对肺癌干细胞自我更新的影响

将经无血清悬浮培养的A549球形细胞，轻柔吹散成单细胞，用单抗LC-5A6(100μg/ml)与细胞共孵育，37℃孵育2h，以500个细胞/孔接种于低粘附24孔板中，进行无血清悬浮培养，在37℃，5％CO2孵箱中培养14天后计算成球率。结果显示，单抗LC-5A6处理组的成球数量为(51±12)个，而阴性对照组的成球数量为(108±11)个，明显高于抗体处理组，抑制率达52.8％(P＝0.023)，有统计学差异，说明单抗LC-5A6能够抑制肺癌干细胞的自我更新能力(表2)。

表2：LC-5A6单克隆抗体对肺癌干细胞成球能力的影响

(*p<0.05)

实施例5 鉴定杂交瘤细胞LC-5A6分泌的单抗对肺癌干细胞增殖的影响

将经无血清悬浮培养的A549球形细胞，轻柔吹散成单细胞，按2,000个细胞/孔接种在96孔细胞培养板(100μl/孔)中，同时分别加入等体积含不同浓度单抗HC-5A6(4.0μg/ml，20.0μg/ml，100.0μg/ml)设3个平行孔和2个空白对照孔。96h后，加入10％体积的CCK-8试剂，37℃，5％CO₂培养箱中培养1小时，震荡混匀，酶标仪测定OD450值。抑制率按照以下公式计算：抑制率＝[1-(实验组OD-空白对照)]/(SP2/0组OD–空白对照)]％。结果显示高、中、低剂量的单抗LC-5A6(100.0μg/ml，20.0μg/ml，4.0μg/ml)，均能显著抑制肺癌干细胞的增殖，其抑制率分别为62.8％、41.2％、19.3％。

实施例6 鉴定杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗对肺癌干细胞迁移的影响

将经无血清悬浮培养的A549球形细胞，轻柔吹散成单细胞，用不含血清的培养基稀释；上室加100μL细胞悬液(4×10⁴个细胞/孔)接种于Transwell上室中，同时加入单抗LC-5A6(100μg/ml)，Transwell下室加600μL 10％FBS的培养基，每组细胞设3个副孔，37℃、5％CO2继续培养24小时；取出上室，用干棉球擦去上室的细胞；室温 甲醇固定10分钟；用PBS洗2次，用刀片将膜割下，用1μg/mL DAPI、50％甘油的PBS将膜封片；荧光显微镜拍照计数，每个培养孔随机选择3个视野拍照，IPP5.1plus计算每个视野的细胞数。参见表3，结果显示，无关抗体对照组的侵袭细胞数为178±21，LC-5A6单抗组(100μg/ml)的迁移的细胞数为69±19。LC-5A6单抗显著抑制了肺癌干细胞细胞的侵袭能力，抑制率为61.2％(p＝0.016)，表明LC-5A6单抗具有抑制肺癌干细胞侵袭能力的功能性单抗。

表3：LC-5A6单克隆抗体对肺癌干细胞迁移能力的影响

实施例6 鉴定杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗对肺癌干细胞侵袭的影响

将经无血清悬浮培养的A549球形细胞，轻柔吹散成单细胞，用不含血清的培养基稀释；将Matrigel用不含血清的培养基在冰上操作稀释成1μg/μL；Transwell上室加入100μL稀释胶，室温固化1小时，弃稀释液，培养基洗2次；Transwell下室加600μL 10％FBS的培养基，上室加100μL细胞悬液(4×10⁴个细胞/孔)接种于预先包被好Matrigel的Transwell上室中，同时加入单抗LC-5A6(100μg/ml)每组细胞设3个副孔，37℃、5％CO2继续培养24小时；取出上室，用干棉球擦去上室的细胞；室温甲醇固定10分钟；用PBS洗2次，用刀片将膜割下，用1μg/mL DAPI、50％甘油的PBS将膜封片；荧光显微镜拍照计数，每个培养孔随机选择3个视野拍照，IPP5.1plus计算每个视野的细胞数。参见表4，结果显示，无关抗体对照组的侵袭细胞数为148±18，LC-5A6单抗组的侵袭细胞数为82±15。LC-5A6单抗显著抑制了肺癌干细胞细胞的侵袭能力，抑制率为44.6％ (p＝0.005)，表明LC-5A6单抗具有抑制肺癌干细胞侵袭能力的功能性单抗。

表4：LC-5A6单克隆抗体对肺癌干细胞侵袭能力的影响

实施例7 小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗抑制人肺癌组织在裸鼠体内生长

采用裸鼠体内进行靶向肺癌干细胞的单抗治疗实验，幷观察比较单用化疗药，单用单抗LC-5A6向肺癌干细胞治疗肺癌的疗效，探讨靶向肺癌干细胞是否能治疗肺癌的生长和复发。

具体举例，肿瘤细胞接种裸鼠当天开始进行抗体治疗实验，共分为4个组，每组6只裸鼠，分别为：LC-5A6抗体高剂量组(20mg/kg)、LC-5A6抗体中剂量组(10mg/kg)、LC-5A6抗体低剂量组(5mg/kg)、mIgG、PBS组。实验组以及对照组通过腹腔注射进行治疗，治疗开始前7d每天一次，以后每周两次直至实验结束。治疗进行44d后停止治疗，每周测皮下移植瘤长径和短径两次，用公式V＝(π/6)×(长径×短径×短径)计算瘤体积。实验结果显示：高、中、低三个剂量单抗LC-5A6与mIgG相比均能显著肺癌移植瘤的生长，抑制率分别是75.0％、43.4％和16.3％(参见图1)。为了进一步研究单抗是否能延长荷瘤小鼠的生存期，抗体停止治疗手，我们继续观察小鼠的生存状况，结果显示经过12周的观察发现，抗体治疗可以明显延长肺癌荷瘤裸鼠的生存期，并且HE染色观察显示，肿瘤细胞在各器官中发生转移可能是造成裸鼠死亡的直接原因(参见图2)。

实施例8 小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗亚类的鉴定

采用单克隆抗体分型试剂盒鉴定LC-5A6分泌的单克隆抗体Ig亚类。具体举例：使用SouthernBiotech公司的isotyping试剂盒鉴定LC-5A6单抗的类和亚类。将捕获抗体(2.5μg/ml)加入96孔酶标板，4℃下孵育16h。用1％BSA/PBS室温下封闭酶标板1h。加入杂交瘤上清(1:2)，室温下作用1h。加入HRP标记的各种类型二抗(HRP-labeled goat anti-mouse IgM，IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3，IgA，κorλ，1:2000)，室温下作用1h，显色，测OD 450值。根据个亚型OD 450大小判断LC-5A6分泌的单克隆抗体为IgG1类单抗，轻链为κ型。

实施例9 小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗的生产

培养小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6可以生产LC-5A6单克隆抗体。培养方式可以采用培养瓶培养与可以采用发酵罐等方法，培养液可以采取有血清培养基或无血清培养基。具体举例：用培养瓶培养小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6，培养基采用Gibco公司的无血清培养基。小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6悬浮在无血清培养基中培养，培养条件为37℃，5％的二氧化碳。到细胞密度达到1×10⁶/ml后，离心收取培养上清，LC-5A6单克隆抗体就存在于培养上清中。

实施例10 小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单抗纯化

采用亲和纯化等方法可以从小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6培养的上清中纯化小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6分泌的单克隆抗体。具体举例：采用Protein G亲和纯化的方法。将小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6培养的上清通过Protein G亲和柱，LC-5A6被结合到亲和柱上，用10倍柱床体积的PBS(pH7.4)洗柱。以0.1M的甘氨酸(PH2.5)洗脱层析柱上LC-5A6单克隆抗体，即可得到纯化的LC-5A6单克隆抗体。纯化的抗体进行SDS-PAGE电泳，在还原电泳中可以看到LC-5A6单克隆抗体在55KD左右的重链，25KD处的轻链(参见图3)。

Claims (4)

1.一种单克隆抗体，其由于2015年06月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.10898的小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6产生。

2.如权利要求1所述的单克隆抗体，其中所述的单克隆抗体为小鼠IgG1型单克隆抗体。

3.一种如权利要求1所述的单克隆抗体在制备用于治疗人肺癌生长和复发的药物中的应用。

4.一种小鼠杂交瘤细胞系LC-5A6的杂交瘤细胞株，其于2015年06月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.10898其特征在于分泌产生如权利要求1所述的单克隆抗体。