CN106361703A - 非那雄胺纳米脂质体、凝胶及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种非那雄胺纳米脂质体及其制备方法，该非那雄胺纳米脂质体包括非那雄胺、磷脂、柔性材料和PBS溶液；其中非那雄胺占磷脂的重量百分比的2.5‑10％，柔性材料占磷脂的重量百分比的20‑50％，PBS溶液占磷脂的重量百分比的2.5‑10％。上述非那雄胺纳米脂质体改善了非那雄胺的皮肤渗透性差的不足，利用磷脂与柔性材料作载体系统，制得非那雄胺纳米脂质体，操作简单、重现性好、避免使用毒性大的有机溶剂，通过利用柔性纳米脂质体的高度形变性与高效渗透性，将药物传递至皮肤深层，更好的发挥疗效。

Description

非那雄胺纳米脂质体、凝胶及其制备方法
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种非那雄胺纳米脂质体、凝胶及其制备方法。
背景技术
雄性激素性脱发(AGA)是病理性脱发中最主要的类型，其病理表现为进行性毛发稀疏，伴有毛囊萎缩，脱发分布主要累及患者头顶部及额颞部。流行病学研究显示，我国男性雄性激素性脱发的总发病率超过20％，随着年龄增长患病率稳步上升，该病会造成患者(尤其年轻患者)的心理负担与精神压力，影响患者社会行为积极性。雄性激素性脱发与患者体内雄性激素的量有关，脱发机理为：睾酮通过5α-还原酶转化为双氢睾酮，受体亲和力和生物活性高于睾酮，与特异性受体结合后可产生引起脱发的生物因子，因此通过抑制5α-还原酶活性可有效预防和治疗雄性激素性脱发。
非那雄胺是一种4-氮杂甾体激素类药物，为Ⅱ型5α-还原酶的特异性抑制剂，可竞争性抑制Ⅱ型5α-还原酶活性，从而抑制患者体内睾酮向双氢睾酮的转化，降低双氢睾酮的水平。非那雄胺由美国Merk公司研制开发，我国于1994年批准该药进口，主要剂型有片剂和胶囊，是目前临床用于治疗雄性激素性脱发的主要药物之一，一般连续服药3个月以上或更久才能发挥疗效，3927例男性患者对非那雄胺口服片剂治疗雄性激素性脱发安全性评价研究中，药物治疗组的945例患者中有1.7％因不良反应终止治疗，1.8％患者出现性欲减退，非那雄胺片剂上市后报告的不良事件有：过敏反应(皮疹、瘙痒、荨麻疹和口唇肿胀)、乳房触痛、睾丸疼痛、射精异常。
人体中的Ⅱ型5α-还原酶主要分布于前列腺、精囊、毛囊及毛囊周围组织，因此，可考虑将非那雄胺制成经皮给药制剂，直接涂抹于患处，以降低药物的血液浓度，增加皮肤局部药物浓度，从而减少患者长期口服非那雄胺带来的副作用。由于非那雄胺几乎不溶于水，具有强亲脂性，制成外用制剂易滞留皮肤角质层中，导致皮肤深部药物浓度难以达到起效浓度，常用的化学/物理促渗手段，会改变皮肤结构或造成皮肤不可逆的损伤，长期使用将破坏患者皮肤组织。
因此，需要开发一种新的剂型以改善非那雄胺皮肤渗透性差的缺陷。
发明内容
基于此，本发明的目的是提供一种皮肤渗透性优良的非那雄胺纳米脂质体。
具体的技术方案如下：
一种非那雄胺纳米脂质体，包括非那雄胺、磷脂、柔性材料和PBS溶液；其中非那雄胺占磷脂的重量百分比的2.5-10％，柔性材料占磷脂的重量百分比的20-50％，PBS溶液占磷脂的重量百分比的2.5-10％。
在其中一些实施例中，所述磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、脑磷脂、二棕榈酸磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二月桂酸磷脂酰胆碱或二肉豆蔻磷脂酰胆碱中的一种或几种。
在其中一些实施例中，所述磷脂选自大豆卵磷脂。
在其中一些实施例中，所述柔性材料选自胆固醇和/或膜软化剂。
在其中一些实施例中，所述膜软化剂选自吐温80、司盘80、胆酸钠或去氧胆酸钠中的一种或几种。
本发明的另一目的是提供上述非那雄胺纳米脂质体的制备方法。
具体的技术方案如下：
非那雄胺纳米脂质体的制备方法，包括如下步骤：
(1)将磷脂、胆固醇、非那雄胺溶解于有机溶剂中，于20-50℃，0.06-0.09mPa，20-100rpm条件下旋转蒸发除去有机溶剂；
非那雄胺占磷脂的重量百分比的2.5-10％；
(2)加入溶解有膜软化剂的PBS溶液，于30-60℃水浴下，常压旋转15-90min，得非那雄胺纳米脂质体的初乳液；
胆固醇和膜软化剂的重量总和占磷脂的重量百分比的20-50％；PBS溶液占磷脂的重量百分比的2.5-10％；
(3)将所述初乳液进行探头超声2-5min，2000-6000rpm离心，微孔过滤后即得所述非那雄胺纳米脂质体。
在其中一些实施例中，所述磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、脑磷脂、二棕榈酸磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二月桂酸磷脂酰胆碱或二肉豆蔻磷脂酰胆碱中的一种或几种；所述膜软化剂选自吐温80、司盘80、胆酸钠或去氧胆酸钠中的一种或几种；所述有机溶剂为无水乙醇。
本发明的另一目的是提供一种非那雄胺纳米脂质体凝胶的制备方法。
非那雄胺纳米脂质体凝胶的制备方法，包括如下步骤：
将权利要求6-7任一项制备方法制备得到非那雄胺纳米脂质体加入到凝胶基质中，搅拌均匀，即得所述非那雄胺纳米脂质体凝胶。
在其中一些实施例中，所述凝胶基质由如下方法制备得到：以8-12重量份卡波姆为基质，45-55重量份甘油为润湿剂，0.5-1.5重量份苯甲酸钠为防腐剂，12-15重量份三乙醇胺为pH调节剂，加入14-21重量份水，搅拌即得。
本发明的另一目的是提供一种非那雄胺纳米脂质体凝胶。
上述制备方法制备得到的非那雄胺纳米脂质体凝胶。
上述非那雄胺柔性纳米脂质体及其凝胶，改善了非那雄胺的皮肤渗透性差的不足。利用磷脂与柔性材料作载体系统，制得非那雄胺的柔性纳米脂质体，操作简单、重现性好、避免使用毒性大的有机溶剂，通过利用柔性纳米脂质体的高度形变性与高效渗透性，将药物传递至皮肤深层，更好的发挥疗效。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
实施例1-3
一种非那雄胺纳米脂质体，包含如下原料(重量份)组分，见表1：
表1主药和柔性脂质材料处方
制备方法如下：
(1)将大豆卵磷脂、胆固醇和非那雄胺以无水乙醇(用量以能溶解上述原料为准)溶解，置于茄形烧瓶中；
(2)将茄形烧瓶置于旋转蒸发器上，于37℃恒温水浴中，减压旋转蒸发除去无水乙醇，在瓶壁上形成均匀的类脂薄膜；
(3)配制去氧胆酸钠的PBS溶液，将该溶液加入至步骤(2)形成薄膜的茄形瓶中，40℃水浴下，常压旋转，水合时间60min，制得非那雄胺纳米脂质体的初乳液；
(4)将步骤(3)的非那雄胺纳米脂质体的初乳液进行探头超声，时间为3min，低速离心5min，最后挤压经过0.45μm微孔滤膜，得到非那雄胺纳米脂质体。
实施例4
上述实施例1-3制备的非那雄胺纳米脂质体的理化性质。
对实施例1-3制备的非那雄胺纳米脂质体进行如下评价：
(1)平均粒径及PDI：
用移液枪吸取适量非那雄胺的柔性纳米脂质体混悬液，加入至石英测量池中，纯水稀释至1mL，采用激光散射粒径仪测定样品的平均粒径及多分散性指数(PDI)。
(2)包封率的测定：
采用超滤离心法分离柔性纳米脂质体与未包封的游离药物，高效液相色谱法测定含量。精密量取非那雄胺的柔性纳米脂质体混悬液500μL至50KD的超滤管中，低速离心15min，取被截留的非那雄胺的柔性纳米脂质体，加入甲醇定容5mL，超声破乳，0.22μm微孔滤膜过滤，进样分析，得到柔性纳米脂质体中包封的药量。
取非那雄胺的柔性纳米脂质体混悬液500μL，直接加入甲醇定容5mL，超声破乳，0.22μm微孔滤膜过滤，进样分析，得到总药量。
包封率＝(包封的药量/总药量)×100％
结果如表2所示：
表2理化性质表
实施例5
非那雄胺纳米脂质体凝胶的体外经皮渗透性研究：
将实施例1的非那雄胺纳米脂质体制成凝胶，制备方法如下：
凝胶基质的配制：以10重量份卡波姆为基质，50重量份甘油为润湿剂，1重量份苯甲酸钠为防腐剂，13.5重量份三乙醇胺为pH调节剂，加入17.5重量份水，搅拌即得凝胶基质；
向上述凝胶基质中，加入实施例1制备得到非那雄胺纳米脂质体，加入适量水，搅拌均匀，即得非那雄胺纳米脂质体凝胶(样品A)。
分别配制非那雄胺柔性纳米脂质体凝胶(样品A)、非那雄胺普通脂质体凝胶(样品B，该样品配方中不含本发明的柔性材料)与非那雄胺普通凝胶(样品C，该样品直接将非那雄胺分散于凝胶基质中)，每g凝胶含非那雄胺均为约0.25mg。取用于经皮渗透性实验的乳猪腹部猪皮，采用改良型Franz扩散池进行实验，将猪皮角质层朝上，安装于扩散池上，分别涂抹0.2g；接收液为20％PEG400-生理盐水，实验温度32±1℃，搅拌速度200rpm，在规定时间点取出接收液，并补充同体积的新鲜接收液，最后一个时间点取接收液后，计算24h药物累计皮肤渗透量(Q24)，除去角质层上的凝胶并擦拭干净，将角质层与表皮真皮层分离，分别剪碎至糜状，以甲醇提取，并检测提取液中非那雄胺的含量，分别为角质层滞留量(Qsc)与表皮真皮层滞留量(Qep)。结果如表3所示：
表3体外经皮渗透性结果表
结果表明，非那雄胺纳米脂质体确实有良好的皮肤透过性能，且可显著提高活性成分在皮肤表皮真皮层的滞留量。
本发明的意义在于将非那雄胺制备成柔性纳米脂质体凝胶，用于外用给药，促进非那雄胺渗透进入皮肤深层，为脂溶性药物外用制剂提供了思路及方法参考，有着很大发展前景。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种非那雄胺纳米脂质体，其特征在于，包括非那雄胺、磷脂、柔性材料和PBS溶液；其中非那雄胺占磷脂的重量百分比的2.5-10％，柔性材料占磷脂的重量百分比的20-50％，PBS溶液占磷脂的重量百分比的2.5-10％。
2.根据权利要求1所述的非那雄胺纳米脂质体，其特征在于，所述磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、脑磷脂、二棕榈酸磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二月桂酸磷脂酰胆碱或二肉豆蔻磷脂酰胆碱中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的非那雄胺纳米脂质体，其特征在于，所述磷脂选自大豆卵磷脂。
4.根据权利要求1-3任一项所述的非那雄胺纳米脂质体，其特征在于，所述柔性材料选自胆固醇和/或膜软化剂。
5.根据权利要求4所述的非那雄胺纳米脂质体，其特征在于，所述膜软化剂选自吐温80、司盘80、胆酸钠或去氧胆酸钠中的一种或几种。
6.非那雄胺纳米脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将磷脂、胆固醇、非那雄胺溶解于有机溶剂中，于20-50℃，0.06-0.09mPa，20-100rpm条件下旋转蒸发除去有机溶剂；
非那雄胺占磷脂的重量百分比的2.5-10％；
(2)加入溶解有膜软化剂的PBS溶液，于30-60℃水浴下，常压旋转15-90min，得非那雄胺纳米脂质体的初乳液；
胆固醇和膜软化剂的重量总和占磷脂的重量百分比的20-50％；PBS溶液占磷脂的重量百分比的2.5-10％；
(3)将所述初乳液进行探头超声2-5min，2000-6000rpm离心，微孔过滤后即得所述非那雄胺纳米脂质体。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、脑磷脂、二棕榈酸磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二月桂酸磷脂酰胆碱或二肉豆蔻磷脂酰胆碱中的一种或几种；所述膜软化剂选自吐温80、司盘80、胆酸钠或去氧胆酸钠中的一种或几种；所述有机溶剂为无水乙醇。
8.非那雄胺纳米脂质体凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将权利要求6-7任一项制备方法制备得到非那雄胺纳米脂质体加入到凝胶基质中，搅拌均匀，即得所述非那雄胺纳米脂质体凝胶。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述凝胶基质由如下方法制备得到：以8-12重量份卡波姆为基质，45-55重量份甘油为润湿剂，0.5-1.5重量份苯甲酸钠为防腐剂，12-15重量份三乙醇胺为pH调节剂，加入14-21重量份水，搅拌即得。
10.权利要求8-9任一项制备方法制备得到的非那雄胺纳米脂质体凝胶。
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