CN106360101A - 一种提高肉仔鸡免疫功能的饲料添加剂及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于饲料添加剂领域，涉及一种提高肉仔鸡免疫功能的饲料添加剂及其制备方法。该饲料添加剂由中药原料经过微生物发酵制成，所述中药原料按照质量份数由以下物质组成：臭梧桐叶1～2，葎草1～2。该饲料添加剂对前期和后期的体液免疫具有明显的促进作用，并且对细胞免疫的作用效果也非常显著。

Description

一种提高肉仔鸡免疫功能的饲料添加剂及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于饲料添加剂领域，具体涉及一种提高肉仔鸡免疫功能的饲料添加剂及其制备方法。

技术背景：

在现代化的肉鸡养殖业中，由于受环境中诸多因素的影响，很容易造成机体免疫机能的下降，抗病力降低，从而影响肉仔鸡的生产性能，甚至影响疫苗的免疫效果，导致免疫失败，造成巨大的经济损失。因此研制出既能提高机体免疫机能，又廉价易得的本发明饲料添加剂，具有重要的现实意义。

发明人收集、整理、总结了大量民间验方，在经过多次的试验研究后发现，采用本发明饲料添加剂可以有效提高肉仔鸡免疫力，又经临床验证，效果良好。

臭梧桐叶的原植物为海州常山，地方名为臭梧桐，是江苏省连云港市海州区的特色药草，为马鞭草科，生于山坡灌丛中，药用部位为叶。叶表面多皱缩、卷曲。臭梧桐叶含海州常山黄酮苷，内消旋肌醇，生物碱，刺槐素-7-双葡萄糖醛酸苷，植物血凝素，臭梧桐素A和B，海州常山苦素A和B，洋丁得酚苷。

葎草，拉丁名：Humulus japonicus，又称勒草、黑草、麻葛蔓 、葛葎蔓、葛勒蔓、来毒草、葛葎草、涩萝蔓、苦瓜藤、锯锯藤、拉拉藤、五爪龙、大叶龙五爪蛇干藤、蛇割藤、割人藤、拉拉秧、拉拉藤、拉拉蔓、五爪龙、洋涩巴蔓、涩巴勒秧、涩涩秧，多年生茎蔓草本植物。株长1～5米，雌雄异株，通常群生，茎和叶柄上有细倒钩，叶片呈掌状，茎喜缠绕其它植物生长。3、4月间出苗，雄株7月中、下旬开花，花序圆锥状，花被5，绿色。雌株8月上、中旬开花，花序为穗状。9月中、下旬成熟。耐寒，抗旱，喜肥、喜光。夏、秋季采收。嫩茎和叶可做食草动物饲料。中国除新疆、青海外，其他各省区均有分布；尤其在江苏省连云港市有广泛的分布。

在现有技术中，专利名称：一种蛋鸡饲料添加剂，申请号：201510353982.7，提供了一种蛋鸡饲料添加剂，按重量计由以下原料制备而成：香椿叶55～60份、可可粉6～9份、潘泻叶10～12份、伏龙肝18～22份、葎草7～10份、鱼鳞粉22～30份、金樱根6～10份、老鼠拉冬瓜5～8份、葎草4～6份、石榴皮9～11份、续断3～5份、徐长卿3～4份、雪里红10～15份、海带22～30份、花蛤8～10份。该蛋鸡饲料添加剂制备方法简单，营养均衡，可以提高鸡的抗病性，提升鸡的产蛋量，而且鸡蛋的营养价值提升。

专利名称：一种蛋鸡饲料，申请号：201510354037.9，提供了一种蛋鸡饲养方法，在蛋鸡长至15周，使用混合饲料喂养，混合饲料按重量计由以下原料制备而成：玉米35～40份、麦麸18～22份、硫酸锌1.2～1.5份、食盐1～2份、石粉2.2～2.5份、香椿叶5.5～6份、可可粉0.6～0.9份、潘泻叶1～1.2份、伏龙肝1.8～2.2份、葎草0.7～1份、鱼鳞粉22～30份、金樱根0.6～1份、葎草0.4～0.6份、石榴皮0.9～1.1份、续断0.3～0.5份、徐长卿0.3～0.4份、雪里红1～1.5份、海带2.2～3份、花蛤0.8～1份。本该蛋鸡饲养方法简单，提供特制的饲料营养均衡，可以提高鸡的抗病性，提升鸡的产蛋量。

发明人在实践中，也采用上述公开的饲料进行研究，发现了两个突出的问题，一是现有的饲料中，药味原料数量太多，采集或采购这些药味原料是一件非常繁琐的事情；二是现有的这些饲料对于提高肉仔鸡免疫功能效果并不理想。

发明内容：

本发明的目的是提供一种饲料添加剂。

本发明的另一目的是提供该饲料添加剂的制备方法。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种提高肉仔鸡免疫功能的饲料添加剂，该饲料添加剂由中药原料经过微生物发酵制成，所述中药原料按照质量份数由以下物质组成：臭梧桐叶1～2，葎草1～2。

所述的生物中药饲料添加剂，其特征在于：所述中药原料按照质量份数由以下物质组成：臭梧桐叶1，葎草2。

所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）将臭梧桐叶、葎草混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂；

（2）制备微生态制剂：微生态制剂由芽孢杆菌、酵母菌和基质组成，活菌总数大于3×120个/mL，芽孢杆菌与酵母菌活菌个数比为：4：1；

（3）制备发酵液：将红糖溶入微生态制剂，再加入清水和所述混合粉剂混匀，微生态制剂、红糖、混合粉剂和水的质量比为1：1：1200：500；

（4）在发酵温度为35～37℃下，厌氧发酵，发酵时间为36～60h，制得中药饲料添加剂。

所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，优选为，步骤（1）中所述中药原料混合粉碎后过120目筛。

所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，优选为，步骤（4）中发酵时间为48h。

所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，优选为，步骤（4）中发酵温度为36℃。

通过如下实验研究验证本发明的技术效果：

实验一：饲料添加剂对肉仔鸡免疫功能的影响

本试验主要通过饲料添加剂对肉仔鸡体液免疫和细胞免疫的影响，来探讨其对肉仔鸡的提高免疫的作用效果。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康15日龄，北京艾维茵AA肉仔鸡100只。

1.2 饲料添加剂

1.2.1 甲饲料添加剂：

（1）将臭梧桐叶333g，葎草666g混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂；

（2）制备微生态制剂：微生态制剂由芽孢杆菌、酵母菌和基质组成，活菌总数大于3×120个/mL，芽孢杆菌与酵母菌活菌个数比为：4：1；

（3）制备发酵液：将红糖溶入微生态制剂，再加入清水和所述混合粉剂混匀，微生态制剂、红糖、混合粉剂和水的质量比为1：1：1200：500；

（4）在发酵温度为36℃下，厌氧发酵，发酵时间为48h，制成甲中药饲料添加剂。

1.2.2 乙饲料添加剂：将臭梧桐叶333g，葎草666g混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂，即得甲中药饲料添加剂。

1.2.3 丙饲料添加剂：取香椿叶570g、可可粉80g、潘泻叶120g、伏龙肝210g、贯众80g、鱼鳞粉290g、金樱根90g、老鼠拉冬瓜70g、葎草50g、石榴皮90g、续断35g、徐长卿32g、雪里红120g、海带260g、花蛤100g，混合，粉碎， 制成丙中药饲料添加剂。

1.2.4 丁饲料添加剂：取玉米380g、麦麸220g、硫酸锌1.50g、食盐1.40g、石粉2.40g、香椿叶60g、可可粉8g、潘泻叶1.20g、伏龙肝21g、贯众8.5g、鱼鳞粉270g、金樱根8.5g、葎草4.5g、石榴皮10.5g、续断4g、徐长卿3.2g、雪里红13g、海带25g、花蛤10g，混合，粉碎，制成丁中药饲料添加剂。

1.3 实验药品

克隆-30弱毒苗Lasota活苗（华中农业大学微生物实验室提供）；α-醋酸萘酯，甲基绿，戊二醛，副品红，购自启东市名成化工有限公司。

1.4 试验分组与免疫方法

将100只15日龄北京艾维茵AA肉仔鸡，随机分为5组，每组20只。

对照组正常饲喂不添加任何饲料添加剂，实验甲组饲料中添加甲饲料添加剂，实验乙组饲料中添加乙饲料添加剂，实验丙组饲料中添加丙饲料添加剂，实验丁组饲料中添加丁饲料添加剂。

所有受试AA肉仔鸡采用滴鼻点眼的方式进行新城疫免疫，用克隆-30弱毒苗于15日龄首免，30日龄时用IV系弱毒苗二免。

1.5血清抗体效价测定

分别于首免和二免后第5d，10d，15d和20d，每组随机抽取10只，翅静脉采血0.5mL，分离血清，用β-微量血抑实验测HI抗体效价。

1.6外周T淋巴细胞值的检测——α-醋酸萘酯酶法

二免后第5d，10d，20d，每组随机抽取10只，翅静脉采血作涂片。自然干燥后，置于25mL/L的戊二醛中，4℃固定10min，取出后流水冲洗，置于孵育液中，37℃染色3h，流水冲洗，再用10g/L的甲基绿复染30min，流水冲洗，用滤纸吸干水分。在10×40倍显微镜下镜检200个淋巴细胞，ANAE阳性细胞呈棕色或灰绿色，胞浆内有大小不等，数量不一，界限分明的红黑色颗粒或斑块。ANAE阴性细胞呈棕黄色，无着色颗粒。然后计算出染色阳性率，并以组为单位求其平均值。

1.7数据分析

对所有数据运用SAS软件包ANOVA过程进行组间单因素方差分析，差异显著时则用DUNCAN氏检验法进行组间的多重比较。

2 结果

2.1 添加剂对ND首免后HI抗体效价的影响

由表1可见，首免后第10d，甲饲料添加剂组、乙饲料添加剂组、丙饲料添加剂组、丁饲料添加剂组的HI抗体效价与对照组相比，均有差异显著（P<0.05），但甲饲料添加剂组显著高于乙饲料添加剂组、丙饲料添加剂组、丁饲料添加剂组（P<0.05）。

首免后第15d，甲饲料添加剂组、乙饲料添加剂组、丙饲料添加剂组、丁饲料添加剂组的HI抗体效价与对照组相比，均有差异显著（P<0.05），但甲饲料添加剂组依然显著高于乙饲料添加剂组、丙饲料添加剂组、丁饲料添加剂组（P<0.05）。

首免后第20d，甲饲料添加剂组、乙饲料添加剂组、丙饲料添加剂组、丁饲料添加剂组的HI抗体效价与对照组相比，均有差异显著（P<0.05），但甲饲料添加剂组依然显著高于乙饲料添加剂组、丙饲料添加剂组、丁饲料添加剂组（P<0.05）。甲饲料添加剂组始终处于较高水平，始终高于其他饲料添加剂组。

表1 饲料添加剂对ND首免后HI抗体效价的影响

注：与对照组比较，*p<0.05，与甲饲料添加剂组比较#p<0.05。

2.2 添加剂对ND二免后HI抗体效价的影响

由表2可见，二免后，甲饲料添加剂组的抗体效价与对照组相比，抗体效价具有显著差异（P<0.05）；其他各实验组的抗体效价均有升高的趋势，但与对照组相比抗体效价差异不显著。结果表明甲饲料添加剂明显提高了肉仔鸡机体的抗体水平。

表2饲料添加剂对ND二免后HI抗体效价的影响

注：与对照组比较，*p<0.05，与甲饲料添加剂组比较#p<0.05。

2.3 添加剂对外周血T淋巴细胞的影响

由表3可知，二免后，第5d，各个实验组与对照组相比差异不显著，二免后第10d和第20d，甲饲料添加剂、乙饲料添加剂和对照组相比，差异显著（P<0.05），尤其是甲饲料添加剂组不仅显著高于对照组，而且显著高于乙饲料添加剂组。其他各实验组均有升高的趋势，但与对照组相比，差异不显著。结果表明甲饲料添加剂明显提高了肉仔鸡机体的抗体水平。

表3 添加剂对外周血T淋巴细胞阳性率的影响

注：与对照组比较，*p<0.05，与甲饲料添加剂组比较#p<0.05。

3 结论

甲饲料添加剂使首免后第10d和20d的HI抗体效价水平显著提高（P<0.05），说明甲饲料添加剂含有调节机体体液免疫的多糖活性成分，影响了抗体形成细胞的数量。

甲饲料添加剂和作用于T淋巴细胞，因此增强了机体的细胞免疫功能，提高了抗病力。

甲饲料添加剂对前期和后期的体液免疫具有明显的促进作用，并且对细胞免疫的作用效果也非常显著，且甲饲料添加剂优于乙饲料添加剂、丙饲料添加剂、丁饲料添加剂。

而且，甲饲料添加剂中的药味原料比丙饲料添加剂、丁饲料添加剂中的原料少很多，甲饲料添加剂中的两种药味原料——臭梧桐叶和葎草，在发明人所在地江苏省连云港市具有广泛的分布，药味原料容易取得，且价格低廉。

具体实施方式：

实施例1：

（1）将臭梧桐叶333g，葎草666g混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂；

（2）制备微生态制剂：微生态制剂由芽孢杆菌、酵母菌和基质组成，活菌总数大于3×120个/mL，芽孢杆菌与酵母菌活菌个数比为：4：1；

（3）制备发酵液：将红糖溶入微生态制剂，再加入清水和所述混合粉剂混匀，微生态制剂、红糖、混合粉剂和水的质量比为1：1：1200：500；

（4）在发酵温度为36℃下，厌氧发酵，发酵时间为48h，制成甲中药饲料添加剂。

实施例2：

（1）将臭梧桐叶666g，葎草333g混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂；

（2）制备微生态制剂：微生态制剂由芽孢杆菌、酵母菌和基质组成，活菌总数大于3×120个/mL，芽孢杆菌与酵母菌活菌个数比为：4：1；

（3）制备发酵液：将红糖溶入微生态制剂，再加入清水和所述混合粉剂混匀，微生态制剂、红糖、混合粉剂和水的质量比为1：1：1200：500；

（4）在发酵温度为36℃下，厌氧发酵，发酵时间为48h，制成甲中药饲料添加剂。

实施例3：

（1）将臭梧桐叶500g，葎草500g混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂；

（2）制备微生态制剂：微生态制剂由芽孢杆菌、酵母菌和基质组成，活菌总数大于3×120个/mL，芽孢杆菌与酵母菌活菌个数比为：4：1；

（3）制备发酵液：将红糖溶入微生态制剂，再加入清水和所述混合粉剂混匀，微生态制剂、红糖、混合粉剂和水的质量比为1：1：1200：500；

（4）在发酵温度为36℃下，厌氧发酵，发酵时间为48h，制成甲中药饲料添加剂。

Claims (7)

1.一种提高肉仔鸡免疫功能的饲料添加剂，其特征在于：该饲料添加剂由中药原料经过微生物发酵制成，所述中药原料按照质量份数由以下物质组成：臭梧桐叶1～2，葎草1～2。

2.如权利要求1所述的生物中药饲料添加剂，其特征在于：所述中药原料按照质量份数由以下物质组成：臭梧桐叶1，葎草2。

3.权利要求1所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）将臭梧桐叶、葎草混合粉碎，过120目筛，制成混合粉剂；

（2）制备微生态制剂：微生态制剂由芽孢杆菌、酵母菌和基质组成，活菌总数大于3×120个/mL，芽孢杆菌与酵母菌活菌个数比为：4：1；

（3）制备发酵液：将红糖溶入微生态制剂，再加入清水和所述混合粉剂混匀，微生态制剂、红糖、混合粉剂和水的质量比为1：1：1200：500；

（4）在发酵温度为35～37℃下，厌氧发酵，发酵时间为36～60h，制得中药饲料添加剂。

4.如权利要求3所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述中药原料混合粉碎后过120目筛。

5.如权利要求3所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）中发酵时间为48h。

6.如权利要求3所述的生物中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）中发酵温度为36℃。

7.一种饲料添加剂在制备预防鸡白痢病的饲料添加剂中的应用，其特征在于：该饲料添加剂由中药原料经过微生物发酵制成，所述中药原料按照质量份数由以下物质组成：臭梧桐叶1～2，葎草1～2。