CN106319013A - 一种抗氧化沙棘多肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种抗氧化沙棘多肽的制备方法。制备步骤:将沙棘籽清洗浸泡处理后,用胃蛋白酶酶解提取两次,再经减压浓缩干燥,得沙棘籽多肽。总抗氧化能力(AOV)的测定表明,该多肽溶液在20mg/mL时,羟自由基清除率高达91.35%,超氧阴离子自由基清除率高达64.33%,具有很强抗氧化性,在抗氧化食品和化妆品方面具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及沙棘多肽的制备,具体涉及一种抗氧化沙棘多肽的制备方法。
背景技术
沙棘是一种珍贵的药食两用的作物,研究表明沙棘中含有维C、胡萝卜素、维E、维B1、维B2、叶酸等多种维生素,还有丰富的黄酮类、原花青素和异鼠李素等生物活性物质。过去人们对沙棘资源的开发主要集中在提取果汁、沙棘油和提取总黄酮等方面,加工后的残渣一般被弃置或作为粗饲料来处理。虽然沙棘籽中含有25%~28%的蛋白质,但是这些蛋白质大多被木质纤维包裹,蛋白消化利用率很低。如果能够将这些蛋白质有效地水解加工成小分子的多肽,不但可以大大提高消化吸收效率,而且还有许多保健作用。目前关于大豆多肽的抗氧化方面有过不少的报道,抗氧化多肽作为一种具有特殊功能的肽类物质,能够清除体内的自由基,保护一些易被氧化的物质。对比大豆与沙棘籽中的蛋白质组成与氨基酸配比能够发现沙棘与大豆一样具有良好的氨基酸配比,具有人体人体必须的八种氨基酸。目前国内关于沙棘籽多肽的研究较少,对其功能性研究更少,基本没有关于沙棘籽多肽抗氧化实验方面的报道。国外对于沙棘的研究主要在沙棘的药用价值方面,主要为沙棘油、沙棘黄酮等方面,关于沙棘蛋白及沙棘多肽的研究较少。
本发明对沙棘籽多肽在抗氧化和清除自由基等方面进行了研究,为开发抗氧化食品和化妆品奠定基础。
发明内容
本发明的目的在于提供的一种抗氧化沙棘多肽的制备方法,为开发沙棘籽多肽抗氧化食品和化妆品奠定基础。
为实现上述发明目的,本发明采取的技术方案是:该一种抗氧化沙棘多肽的制备方法,是沙棘籽为原料,低温提取多肽,其制备方法包括:处理匀浆,细胞破碎、酶解,提取过滤,浓缩后喷雾干燥,得沙棘多肽。
一种抗氧化沙棘多肽的制备方法按如下工艺步骤:
(1). 将沙棘籽清洗、淋水、浸泡5-6 小时;
(2). 将软化的沙棘籽加入其重量的5-10 倍40-60℃的蒸馏水,于高压均质机中,破碎植物细胞5-10 分钟,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值2-4,底物质量浓度为0.5-1%,酶液用量占沙棘籽重量10-20%,高压均质5-10 分钟,冷却至室温,3000r/min 离心5 分钟,上清液70-90℃灭酶30-50 分钟,减压浓缩,得到多肽浓缩液;
(3). 将离心剩余残渣加入3-5 倍的40-60℃蒸馏水,进行2 次高压均质,方法与以上步骤相同;
(4). 将多肽浓缩液喷雾干燥,得沙棘籽多肽。
所述酶优选为胃蛋白酶。
沙棘籽多肽溶液在20mg/mL浓度条件下,总抗氧化能力(AOV)的测定表明,羟自由基清除率 91.35%, 超氧阴离子自由基清除率64.33%,具有很强抗氧化性,在抗氧化食品和化妆品方面具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面的实施例用来进一步说明本发明,而不应该是对本发明范围的限制:
实施例1
取20g沙棘籽(蛋白含量为25%)清洗、淋水、浸泡5小时,加入40℃100ml蒸馏水,于高压均质机中,破碎植物细胞10 分钟,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值2,加入胃蛋白酶2g,高压均质10 分钟,冷却至室温,3000r/min 离心5 分钟,上清液70℃灭酶50 分钟,减压浓缩,得到多肽浓缩液;将离心剩余残渣加入40℃60ml蒸馏水,进行2 次高压均质,方法与以上步骤相同;将合并的多肽浓缩液喷雾干燥,得沙棘籽多肽。
将以上沙棘籽多肽配制成20mg/ml溶液,总抗氧化能力(AOV)的测定表明,该多肽溶液在20mg/mL时,羟自由基清除率 91.35%, 超氧阴离子自由基清除率64.33%。
实施例2
取100g沙棘籽(蛋白含量为25%)清洗、淋水、浸泡5小时,加入60℃1000ml蒸馏水,于高压均质机中,破碎植物细胞5 分钟,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值4,加入胃蛋白酶20g,高压均质5分钟,冷却至室温,3000r/min 离心5分钟,上清液90℃灭酶30 分钟,减压浓缩,得到多肽浓缩液;将离心剩余残渣加入60℃500ml蒸馏水,进行2 次高压均质,方法与以上步骤相同;将合并的多肽浓缩液喷雾干燥,得沙棘籽多肽。
将以上沙棘籽多肽配制成20mg/ml溶液,总抗氧化能力(AOV)的测定表明,该多肽溶液在20mg/mL时,羟自由基清除率 90.04%, 超氧阴离子自由基清除率64.10%。
实施例3
取500g沙棘籽(蛋白含量为25%)清洗、淋水、浸泡6小时,加入50℃4000ml蒸馏水,于高压均质机中,破碎植物细胞8 分钟,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值3,加入胃蛋白酶75g,高压均质8分钟,冷却至室温,3000r/min 离心5 分钟,上清液80℃灭酶40 分钟,减压浓缩,得到多肽浓缩液;将离心剩余残渣加入50℃2000ml蒸馏水,进行2 次高压均质,方法与以上步骤相同;将合并的多肽浓缩液喷雾干燥,得沙棘籽多肽。
将以上沙棘籽多肽配制成20mg/ml溶液,总抗氧化能力(AOV)的测定表明,该多肽溶液在20mg/mL时,羟自由基清除率 91.12%, 超氧阴离子自由基清除率64.16%。
Claims (2)
1.一种抗氧化沙棘多肽的制备方法,是以沙棘籽为原料,低温提取多肽,其制备方法包括:处理匀浆,细胞破碎、酶解,提取过滤,浓缩后喷雾干燥得沙棘籽多肽,具体按如下方法步骤:
将沙棘籽清洗、淋水、浸泡5-6 小时;
将软化的沙棘籽加入其重量的5-10 倍40-60℃的蒸馏水,于高压均质机中,破碎植物细胞5-10 分钟,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值2-4,底物质量浓度为0.5-1%,酶液用量占沙棘籽重量10-20%,高压均质5-10 分钟,冷却至室温,3000r/min 离心5 分钟,上清液70-90℃灭酶30-50 分钟,减压浓缩,得到多肽浓缩液;
将离心剩余残渣加入3-5 倍的40-60℃蒸馏水,进行2 次高压均质,方法与以上步骤相同;
将合并的多肽浓缩液喷雾干燥,得沙棘籽多肽。
2.据权利要求1 所述一种抗氧化沙棘多肽的制备方法,其特征是所述酶为胃蛋白酶。
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