CN106317236A - 一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其主要包括下列步骤：⑴精选黄芪药材；⑵加入黄芪药材质量6-10倍的水，不断搅拌，在100℃煎煮过滤；⑶减压浓缩；⑷接种乳酸菌，培养；⑸加入无水乙醇，4℃放置12小时，取出，离心；⑹将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖产品。本发明的黄芪药材可为个子、饮片、粉末、超微粉，利用市场上常用的嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、干酪乳杆菌等乳酸菌或从动物肠道中分离的乳酸菌进行发酵，黄芪多糖得到提高，值得开发利用。
Description
技术领域
本发明涉及的是一种提高黄芪多糖的方法，尤其涉及一种利用生物发酵技术提高黄芪多糖的方法。
背景技术
黄芪是传统中药学中一味重要的药材，目前我国药典中规定药用的黄芪为豆科植物蒙古黄芪和膜荚黄芪的干燥根。据记载，黄芪具有补气升阳、益气固表、生津止渴、托毒生肌和利水消肿等功效，其主要起作用的有效成分为黄芪多糖，而目前一直探索黄芪多糖提取的方法，如水煮法、碱水提取法、碱醇沉法、微波辅助萃取技术、纤维素酶法、超声波法等。不论利用何种方法提取，最终的目的是尽可能提取出多的黄芪多糖来为人类所用。但黄芪多糖市场仍供不应求，本发明利用生物发酵技术，以“生物转化理论”为指导，对黄芪进行生物转化处理来提高黄芪多糖的产量。
乳酸菌是一种存在人体和动物体内的一类有益菌，是发酵糖类的一类无芽孢、革兰氏阳性细菌的总称。目前大约有18个属，200多种，目前已被国内外生物学家所证实，肠内乳酸菌与健康长寿有非常密切的关系。
发明内容
以“生物转化理论”为指导，在水提的基础上，进行乳酸菌发酵黄芪以提高黄芪多糖的产量。
本发明提高黄芪多糖的方法，由下述步骤组成：
⑴精选黄芪药材，进行相应的加工；
⑵加入黄芪超微粉质量6-10倍的水，不断搅拌，在100℃煎煮30-60min过滤，滤渣以同样方式再煎煮提取2次，合并各次的水提滤液；
⑶减压浓缩至以生药黄芪重量计的水提液的浓度为0.1g/mL-2g/mL；
⑷按照1.0×104-1.0×108cfu/mL的量接种乳酸菌，于30-40℃、0-200rpm培养1-5天；
⑸向⑷中加入无水乙醇至乙醇浓度为65％-85％，4℃放置12小时，取出，离心；
⑹将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖产品。
本发明提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑴中黄芪药材包括个子、饮片、粉末、超 微粉；
本发明提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑵中加水量是黄芪质量的8倍；
本发明提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑵中煎煮时间为45min；
本发明提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑷中乳酸菌包括市场上用的嗜酸乳酸菌、植物乳杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、干酪乳杆菌等乳酸菌和从动物肠道中分离的乳酸菌；
本发明提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑷中接种量为1.0×106cfu/mL，温度为37℃，培养60小时；
本发明提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑸中所加乙醇浓度至75％。
本发明的有益效果是：
本发明改变传统的黄芪多糖提取工艺，利用乳酸菌，在特定的条件下对中药黄芪进行发酵处理，再通过常规的方法获得黄芪多糖，是一种既能提高黄芪多糖产量的方法，又能提升黄芪多糖的保健功能。本发明不仅能降低生产成本而且还是节能环保的生产方式。
具体实施方式
实施例1
⑴精选黄芪药材，分别准确称取黄芪个子1kg2份；
⑵分别加入黄芪个子质量6kg的水，不断搅拌，在100℃煎煮30min过滤，滤渣以同样方式再煎煮提取2次，合并各次的水提滤液；
⑶分别减压浓缩至以生药黄芪重量计的水提液的浓度为0.1g/mL；
⑷其中一份按照1.0×104cfu/mL的量接种植物乳杆菌，于30℃、静置培养1天；
⑸向⑷中加入无水乙醇至乙醇浓度为65％，4℃放置12小时，取出，离心；另一份没有经过⑷处理的也加入无水乙醇至乙醇浓度为65％，4℃放置12小时，取出，离心；
⑹经过步骤⑷将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖为258.2g，利用硫酸-蒽酮法，测得其纯度为85％；而没有经过步骤⑷真空冷冻干燥得到的黄芪多糖为202.2g，测得其纯度为63％。
实施例2
⑴精选黄芪药材，加工为饮片，分别准确称取黄芪饮片1kg2份；
⑵分别加入黄芪饮片质量10kg水，不断搅拌，在100℃煎煮60min过滤，滤渣以同样方式再煎煮提取2次，合并各次的水提滤液；
⑶分别减压浓缩至以生药黄芪重量计的水提液的浓度为2g/mL；
⑷其中一份按照1.0×108cfu/mL的量接种干酪乳杆菌，于40℃、200rpm培养5天；
⑸向⑷中加入无水乙醇至乙醇浓度为85％，4℃放置12小时，取出，离心；另一份没有经过⑷处理的也加入无水乙醇至乙醇浓度为85％，4℃放置12小时，取出，离心；
⑹经过步骤⑷将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖为252.5g，利用硫酸-蒽酮法，测得其纯度为86％；而没有经过步骤⑷真空冷冻干燥得到的黄芪多糖为199.5g，测得其纯度为61％。
实施例3
⑴精选黄芪药材，将黄芪药材用超微粉碎机粉碎，分别准确称取黄芪超微粉1kg2份；
⑵分别加入黄芪超微粉质量8kg水，不断搅拌，在100℃煎煮45min过滤滤渣以同样方式再煎煮提取2次，合并各次的水提滤液；
⑶分别减压浓缩至以生药黄芪重量计的水提液的浓度为1g/mL；
⑷其中一份按照1.0×106cfu/mL的量接种嗜酸乳杆菌，于37℃、100rpm培养60小时；
⑸向⑷中加入无水乙醇至乙醇浓度为75％，4℃放置12小时，取出，离心；另一份没有经过⑷处理的也加入无水乙醇至乙醇浓度为75％，4℃放置12小时，取出，离心；
⑹经过步骤⑷将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖为265.2g，利用硫酸-蒽酮法，测得其纯度为86.6％；而没有经过步骤⑷真空冷冻干燥得到的黄芪多糖为211.3g，测得其纯度为63％。
实施例4增强免疫力保健功能评价
取一定量实施例3中的黄芪多糖，分别经口给予小鼠0.25g/kg·d剂量的黄芪多糖，15d后进行试验，在小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验中，与对照组相比，实施例3对照有显著差异，实施例3有极显著差异(见表1)；在溶血素试验中，与对照组相比，实施例3对照有显著差异，实施例3有极显著差异(见表2)。依据评价标准可认为该黄芪多糖具有增强免疫力的保健功能。
表1黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能表
注：和模型组相比*p＜0.05，**p＜0.01
表2黄芪多糖对小鼠血清溶血素OD值表
注：和模型组相比*p＜0.05，**p＜0.01。
Claims (7)
1.一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，是由下述步骤组成：
⑴精选黄芪药材，进行加工；
⑵加入黄芪药材质量6-10倍量的水，不断搅拌，在100℃煎煮30-60min过滤，滤渣以同样方式再煎煮提取2次，合并各次的水提滤液；
⑶减压浓缩至以生药黄芪重量计的水提液的浓度为0.1g/mL-2g/mL；
⑷按照1.0×104-1.0×108cfu/mL的量接种乳酸菌，于30-40℃、0-200rpm培养1-5天；
⑸向⑷中加入无水乙醇至乙醇浓度为65％-85％，4℃放置12小时，取出，离心；
⑹将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖产品。
2.如权利要求1所述的一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑴中黄芪药材为个子、饮片、粉末、超微粉形式。
3.如权利要求1所述的一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑵中的加水量是黄芪质量的8倍。
4.如权利要求1所述的一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑵中煎煮时间为45min。
5.如权利要求1所述的一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑷中乳酸菌为嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、干酪乳杆菌、从动物肠道中分离的乳酸菌中的一种。
6.如权利要求1所述的一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑷中乳酸菌接种量为1.0×106cfu/mL，温度为37℃，培养60小时。
7.如权利要求1所述的一种利用发酵技术提高黄芪多糖的方法，其特征是步骤⑸中所加乙醇浓度至75％。
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