CN106309278A

CN106309278A - 用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN106309278A
Application number: CN201610777349.5A
Authority: CN
Inventors: 吴惠城; 练英铎; 夏树敏
Original assignee: Opal Cosmetics Huizhou Co Ltd
Current assignee: Opal Cosmetics Huizhou Co Ltd
Priority date: 2016-08-31
Filing date: 2016-08-31
Publication date: 2017-01-11
Anticipated expiration: 2036-08-31
Also published as: CN106309278B

Abstract

本发明涉及天然产物提取及发酵技术领域、化妆品领域。一种用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物，其发酵原料含有以下重量百分比的组分：龙舌兰麻 50‑98%，尿素0.5‑2%，酵母菌 0.5‑2%，乳酸菌 0.5‑1.5%，去离子水补足至100%。本发明用发酵工艺对龙舌兰植物进行发酵处理，提高龙舌兰植物原料的利用率，同时提高活性物成分在皮肤上的吸收率，并且联同丙酮萃取方法和酶分离工艺，避免了原料的浪费，提高了超氧化歧化酶的含量，抗衰老效果更好，重复性好，同时制备出来的发酵物本身具有防腐效果，不需另添加防腐剂，保证产品的安全性、功效性和稳定性。

Description

用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及天然产物提取及发酵技术领域、化妆品领域。

背景技术

随着人们生活水平的不断提高，人们在得到基础物质水平的满足之后，还追求享受资料消费，特别是对于个人形象方面，追求比如美白，抗衰老等功效的化妆品，这为抗衰老的功能性个人护理品提供了宽广的市场前景。

现有的抗衰老用品中，较多的是选用某种含有抗衰老功能的植物进行植物提取和纯化，但这种方式会造成植物原料的浪费，同时因为植物提取出来的物质中具有大量的分子物质，难以在较短时间内被皮肤吸收，活性物吸收率较低。并且为了使提取液具有一定的保质期，需要往里添加防腐剂，增加了提取物的刺激性，适用范围低。

龙舌兰麻是龙舌兰科龙舌兰属多年生草本植物的总称。叶纤维作物，纤维硬长，质地优良，是重要的工业用料。其中，剑麻、灰叶剑麻、马盖麻、假菠萝麻、番麻均为多年生草本，圆锥花序，花轴高大，原产墨西哥。龙舌兰麻具有抗衰老功效，主要含有甾体皂苷、甾体皂苷元，尚含有 β-谷甾醇，三十四烷醇，十六烷酸三十四烷醇酯，5-羟基-7-甲氧基-2-三十三烷基-4-H-苯并吡喃-4-酮，龙舌兰黄烷酮，胡萝卜苷，β-谷甾醇-3-O-阿拉伯呋喃糖基-( 1→4) -α -L-鼠李糖吡喃糖基-( 1→4) -β-D-葡萄吡喃糖苷等活性物质，使其具有抗衰老、抗辐射的效果。

但是，如果直接对龙舌兰麻进行植物提取纯化，并将其提取液直接应用于个人护理品中，由于其活性成分分子量较大的缘故，使得其活性成分在皮肤上的吸收率较低，造成大量浪费，同时直接提取的植物提取液，剩余的料渣较多，其中同样含有诸多可利用的成分，同样造成原料的浪费。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物，还提供其制备方法及应用。

本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：

一种用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物，所述发酵物的发酵原料含有以下重量百分比的组分：龙舌兰麻 50-98%，尿素0.5-2%，酵母菌 0.5-2%，乳酸菌 0.5-1.5%，去离子水补足至100%。

优选的，所述发酵物由以下重量百分比的原料发酵而成：龙舌兰麻 86%，尿素0.8%，酵母菌1.8%，乳酸菌 0.9%，去离子水补足至100%。

进一步优选的，所述龙舌兰麻优选龙舌兰的块茎部分，次选为龙舌兰的叶，或者叶与块茎的混合。

上述龙舌兰发酵物的制备方法，制备步骤如下：

1）、将龙舌兰麻进行清洗，清洗之后加入去离子水，进行粗粉碎，得到混合的龙舌兰原浆；

2）、将乳酸菌和酵母菌分别进行活化，分别得到乳酸菌二级种子液、酵母菌二级种子液；

3）、将步骤2所得的乳酸菌二级种子液、酵母菌二级种子液接种进入步骤1所得的龙舌兰原浆中，进行粗发酵，过程中补加尿素，得到龙舌兰粗发酵物；

4）、将步骤3所得的龙舌兰粗发酵物进行搅拌离心过滤，除去鞣质、纤维等滤渣，得到龙舌兰粗发酵物滤液；

5）、将步骤4所得到的龙舌兰粗发酵物滤液加入萃取剂进行萃取，充分搅拌均匀，静置分层，下层为萃取剂沉淀溶解液，上层为其余滤液；

6）、将步骤5得到的萃取剂沉淀溶解液用缓冲液洗脱，提纯收集其酶液；

7）、将步骤5所得到的其余滤液，经过高温热变性，离心分离去除杂蛋白，得到多糖类提取物；

8）、将步骤7得到多糖类提取物进行降温处理，之后先经过超滤膜分离、再经过纳米膜分离提纯后，加入多元醇，得到龙舌兰精细发酵物；该步骤中加入多元醇可提高最终产品的稳定性和易用性，并且提升天然防腐剂的防腐效果，使用任一种多元醇都可以，优选1，3-丁二醇。

9）、将步骤6所得的酶液，按一定比例与步骤8所得的龙舌兰精细发酵物进行混合，得到用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物。

进一步的，步骤3中，粗发酵时长为6-10天，粗发酵温度为25-28℃，粗发酵气压为0.08-0.1Mpa。

进一步的，步骤5中，萃取操作所用的萃取剂为丙酮，缓冲液为0.003-0.007mol·L^-1 pH 7.0-7.5 的Tris-HCl溶液，萃取分离温度为2-5℃。

进一步的，步骤6中，缓冲液为0.003-0.007mol·L^-1 pH 7.0-7.5 的Tris-HCl溶液，洗脱速率为流速为4.2-4.6mL/4min，提纯收集方法为Sephadex凝胶过滤法，收集两个蛋白吸收峰的酶液。

进一步的，步骤8中，超滤膜分离温度为30℃，超滤膜分离压力0.1-0.13Mpa，超滤膜透过率为48-52%；纳米膜分离温度为30℃，纳米膜分离压力为0.4-0.6Mpa，纳米膜透过率为85-95%。

上述制备方法制备的龙舌兰发酵物的个人护理组合物。

所述个人护理组合物为膏霜、乳液、凝胶、洗剂、爽肤水中的任意一种。

本发明具有如下有益效果：

1、本发明用发酵工艺对龙舌兰植物进行发酵处理，提高龙舌兰植物原料的利用率，同时提高活性物成分在皮肤上的吸收率，并且联同丙酮萃取方法和酶分离工艺，避免了原料的浪费，超氧化岐化酶含量较一般的提取液更多，具有更好的单一针对清除自由基的功能，抗氧化抗衰老效果更加明显，重复性好。

2、通过发酵得到的龙舌兰发酵物具有大小分子结合的活性物分子，更容易被吸收，辅助超氧化岐化酶的抗氧化效果，同时补充皮肤营养物质，使抗衰老效果更加地明显。

3、酵母菌和乳酸均共生协同，减少菌类的用量，提高发酵速率，降低能耗。

4、通过发酵得到的龙舌兰发酵物本身具有防腐的物质，不需另外添加防腐剂也能存放较长时间，因此刺激性低，适用范围广，保证产品的安全性、功效性和稳定性。

附图说明

图1为实施例2、实施例3、实施例4、对比例3、对比例4和空白对照在志愿者眼角区皮肤的细纹深度数值随使用时间的变化趋势图。

图2为实施例2、实施例3、实施例4、对比例3、对比例4和空白对照在志愿者眼角区皮肤的细纹总面积数值随使用时间的变化趋势图。

图3为实施例2、实施例3、实施例4、对比例3、对比例4和空白对照在志愿者眼角区皮肤弹性数值随使用时间的变化趋势图。

具体实施方式

下面结合试验例及具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。

除非另外指明，所有的百分比、份数和比例均基于与所列成分相关的含量重量计，并因此不包括可能包含在可商购获得的原料中的载体和副产物。

实施例1

含超氧化歧化酶的用于化妆品抗衰老的龙舌兰发酵物的制备工艺：

1、将占全部发酵原料重量百分比86%的龙舌兰麻进行清洗，清洗之后加入占全部发酵原料重量百分比10.5%的去离子水，进行粗粉碎，得到混合的龙舌兰原浆；

2、将占全部发酵原料重量百分比0.9%的乳酸菌和1.8%的酵母菌分别进行活化， 37℃培养24h分别得到乳酸菌二级种子液、酵母菌二级种子液；

3、将步骤2所得的乳酸菌二级种子液、酵母菌二级种子液接种进入步骤1所得的龙舌兰原浆中，进行粗发酵，粗发酵时长为7天，粗发酵温度为26℃，粗发酵气压为0.1Mpa，过程中补加占全部发酵原料重量百分比0.8%的尿素，得到龙舌兰粗发酵物；

4、将步骤3所得的龙舌兰粗发酵物进行搅拌离心过滤，除去鞣质、纤维等滤渣，得到龙舌兰粗发酵物滤液；

5、将步骤4所得到的龙舌兰粗发酵物滤液用丙酮进行萃取操作，充分搅拌均匀，静置分层，下层为萃取剂沉淀溶解液，上层为其余滤液；

6、将步骤5得到的萃取剂沉淀溶解液用0.005mol·L^-1 pH 7.2 的Tris-HCl溶液缓冲液洗脱，提纯收集其酶液；

7、将步骤4所得到的其余滤液，经过高温65℃热变性，离心分离去除杂蛋白，得到多糖类提取物；

8、将步骤7得到多糖类提取物进行降温处理，之后先经过超滤膜分离、再经过纳米膜分离提纯后，加入1，3-丁二醇，得到龙舌兰精细发酵物；

9、将步骤6所得的酶液按酶液66%、龙舌兰精细发酵物34%的比例混合得到用于化妆品抗衰老的龙舌兰发酵物。

对比例1 的制备工艺与实施例1相同，但对比例1不在过程中补加尿素。

对比例2的制备工艺与实施例1相同，但对比例2直接去掉乳酸菌。

表1为实施例1、对比例1-2的成分组成；表2为所制发酵物的蛋白含量测试。

表1：实施例1、对比例1-2的成分组成比例

表2：实施例1、对比例1-2发酵物蛋白检测结果

注：a、b、c在同一列字母中，相同表示差异不显著，不同则表示差异显著（p<0.05）

实施例2

含龙舌兰发酵物的膏霜的制备：

（1）将辛酸/癸酸甘油三酯、碳酸二辛酯、硬脂酸甘油酯/peg-100硬脂酸酯称量在一起作为油相，加热至75℃；

（2）将卡波、1，3-丁二醇混合分散，加入纯水，搅拌加热至75℃，作为水相；

（3）将油相倒入水相中，均质机均质5min，均质速率为3000rpm；

（4）冷却降温至40~45℃，用pH调节剂调节至5.8；

（5）冷却降温至30~35℃加入实施例1制备的龙舌兰发酵物；继续搅拌，降温至室温停止搅拌。

实施例3的制备方法与实施例2相同；

对比例3的制备方法与实施例2相同，但用龙舌兰提取物代替龙舌兰发酵物；

对比例4的制备方法与实施例2相同，但用市售的抗衰老组合物代替龙舌兰发酵物；

实施例2为含龙舌兰发酵物的膏霜，实施例3为含龙舌兰发酵物的凝胶，实施例4为含龙舌兰发酵物的爽肤水，制备方法使用本领域公知方法，在此不作详细说明。

表3为实施例2-3、对比例3-4的配方组成。

表3 实施例2、实施例3、对比例3、对比例4的配方组成

功效评估测试，随机挑选志愿者，并进行入组筛选，最终每组35人，用多功能皮肤测试仪分析受试者皮肤，并进行数据分析，得表4的功效测试结果。

表4实施例2-4、对比例3-4的功效测试结果

对比实施例1和对比例1，可以得知在发酵过程中添加了尿素的发酵物，其真蛋白含量明显高于未在发酵过程中添加尿素的发酵物；对比实施例1和对比例2可以知道，乳酸菌和酵母菌协同发酵，同样具有提高发酵产物中真蛋白含量的作用；从图1到图3可得知，添加了龙舌兰发酵物的膏霜的抗衰老效果明显高于添加了龙舌兰植物提取物的膏霜，并且皮肤不适人数更少，说明了经过发酵后并且提高超氧化岐化酶的龙舌兰发酵物具有更好的抗氧化、抗衰老效果，适用范围更广；对比例4为市面上销售较好的抗衰老组合物，抗衰老效果一般，皮肤不适人数较多，适用范围较小。

对本发明中术语的任何含义或定义与以引用方式并入的文件中术语的任何含义或定义矛盾时，应当服从在本发明中赋予该术语的含义或定义。尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，但是对那些本领域的技术人员显而易见的是，在不背离本发明的精神和范围的情况下可作出许多其它的更改和修改。因此，随附权利要求书旨在涵盖本发明范围内的所有这些改变和变型。

Claims

1.一种用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物，其特征在于，所述发酵物的发酵原料含有以下重量百分比的组分：龙舌兰麻 50-98%，尿素0.5-2%，酵母菌 0.5-2%，乳酸菌 0.5-1.5%，去离子水补足至100%。

2.根据权利要求1所述的龙舌兰发酵物，其特征在于，所述发酵物由以下重量百分比的原料发酵而成：龙舌兰麻 86%，尿素0.8%，酵母菌1.8%，乳酸菌 0.9%，去离子水补足至100%。

3.根据权利要求1~2任意一项所述的龙舌兰发酵物，其特征在于，所述龙舌兰麻优选龙舌兰的块茎部分。

4.一种权利要求1~2任一项所述龙舌兰发酵物的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：

8）、将步骤7得到多糖类提取物进行降温处理，之后先经过超滤膜分离、再经过纳米膜分离提纯后，加入多元醇，得到龙舌兰精细发酵物；

5.根据权利要求4所述的龙舌兰发酵物的制备方法，其特征在于，步骤3中，粗发酵时长为6-10天，粗发酵温度为25-40℃，粗发酵气压为0.08-0.1Mpa。

6.根据权利要求4所述的龙舌兰发酵物的制备方法，其特征在于，步骤5中，萃取操作所用的萃取剂为丙酮，缓冲液为0.003-0.007mol·L^-1 pH 7.0-7.5 的Tris-HCl溶液，萃取分离温度为2-5℃。

7.根据权利要求4所述的龙舌兰发酵物的制备方法，其特征在于，步骤6中，缓冲液为0.003-0.007mol·L^-1 pH 7.0-7.5 的Tris-HCl溶液，洗脱速率为流速为4.2-4.6mL/4min，提纯收集方法为Sephadex凝胶过滤法，收集两个蛋白吸收峰的酶液。

8.根据权利要求4所述的龙舌兰发酵物的制备方法，其特征在于，步骤8中，超滤膜分离温度为30℃，超滤膜分离压力0.1-0.13Mpa，超滤膜透过率为48-52%；纳米膜分离温度为30℃，纳米膜分离压力为0.4-0.6Mpa，纳米膜透过率为85-95%。

9.一种含有权利要求4所述制备方法制备的龙舌兰发酵物的个人护理组合物。

10.根据权利要求9所述的个人护理组合物，其特征在于：所述个人护理组合物为膏霜、乳液、凝胶、洗剂、爽肤水中的任意一种。