CN106235312B - 一种控制胆固醇的组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种控制胆固醇的组合物及其制备方法。该组合物包括大豆干细胞培养物、鱼油和磷脂。本发明所述的组合物可以从减少外源胆固醇吸收，降低内源胆固醇合成、防止体内胆固醇堆积等方面控制体内胆固醇水平，使人体保持健康身体状况。
Description
技术领域
本发明属于保健品加工技术领域，涉及一种控制胆固醇的组合物，及使用它们的保健品。
背景技术
人体成分主要包含碳水化合物、脂肪、蛋白质三大类，三种成分在身体内的含量及其组成发生变化均可以引起身体代谢异常，引发一些疾病。当今社会上由于脂肪代谢异常引发的惨痛事件频繁出现，已经引起社会大众的高度重视。脂类物质主要分为脂肪和类脂两大类，脂肪为人类能量主要来源之一，在人体含量最多。类脂是构成人体生物膜的基本成分，占人体的5％左右，类脂主要分为磷脂、糖脂以及胆固醇。近期，由于体内胆固醇比例增多引起的疾病越来越多，体内胆固醇过多很容易在血管壁堆积就会将内膜撑起导致内膜面积变小，血液流通受到阻碍，久而久之将会引发一些疾病，如：动脉粥样硬化、高血脂、冠心病、脑血栓等疾病。人体内胆固醇主要来源为食物摄入以及自身合成，当体内胆固醇含量高于正常水平就会产生一些症状，中国心血管病报告2013统计数据中显示，每年约350万人死于心脏病也就是说每天有9590人，每小时有400人，每10秒钟就有1人死于心血管疾病。由此可见，合理有效控制体内胆固醇成为重要的任务。
体内胆固醇主要有两个来源，一是由机体自身肝脏合成而来，即为内源胆固醇；另一个途径是通过食物摄取，即为外源胆固醇。当机体内胆固醇含量超过正常范围，胆固醇很容易在体内堆积，导致血管变形，从而增加心血管类疾病的发病率。如果限制胆固醇的两个来源就可以有效地控制体内胆固醇水平，降低心血管疾病的发生率。与此同时，为达到多重控制体内胆固醇水平的目的，及时清除体内堆积的胆固醇，保证体内胆固醇水平处于健康水平也是至关重要的一部分，从一定程度上增加机体的安全系数。
现有技术中，降低胆固醇的组合物大约有两种，一种通过搭配低脂低糖原料控制胆固醇摄入，另一种则通过生物制剂抑制体内G-CoA还原酶来干扰胆固醇合成。两者均是从单一方面降低胆固醇的含量，而且此类产品中功效性成分含量有限，导致其降低胆固醇的作用并不是很明显。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种控制胆固醇的组合物，该组合物可以从减少外源胆固醇吸收，降低内源胆固醇合成、防止体内胆固醇堆积等方面控制体内胆固醇水平，使人体保持健康身体状况。
本发明的另一个目的是提供一种包括上述组合物的保健品，该保健品使用方便，稳定性好。
为达到上述目的，本发明采用下述技术方案：
本发明提供一种控制胆固醇的组合物，它包括大豆干细胞培养物、鱼油和磷脂。优选地，所述大豆干细胞培养物50-90重量份(例如50、60、70、80或90重量份等)、鱼油8-33重量份(例如8、10、20、30或33重量份等)、磷脂1-10重量份(例如1、5、8或10重量份等)。
本发明所述的大豆干细胞培养物是应用植物干细胞培养技术，协同高温胁迫与稳定磁场技术获得的富含植物甾醇的大豆干细胞培养物。具体地：
(1)将大豆种子用乙醇溶液浸泡，无菌水冲洗后，再用次氯酸钠溶液浸泡，然后无菌水冲洗，获得无菌大豆；
(2)取上述无菌大豆的下胚轴，将其切成长度为1.5-2.5mm，获取无菌大豆组织；
(3)将获得的无菌大豆组织，接种于诱导培养基进行诱导培养，获得愈伤组织，其中，1g无菌大豆组织接种于25-35mL的诱导培养基；
(4)将上述获得的愈伤组织，接种于增殖培养基，摇床培养，同时于第2天开始进行稳态磁场干预，即可获得富含植物甾醇的大豆干细胞培养物；
所述诱导培养基为含8-28mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、15-17mol/L柠檬酸铵和0.1-0.5mg/L萘乙酸的MS培养基，pH调至6.3-6.0；
所述增殖培养基为含8-28mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、1.5-2.5mg/L的蔗糖和0.1-0.5mg/L水解酪蛋白的MS培养基，pH调至6.8-7.0。
进一步地，上述方法中，所述乙醇溶液的质量浓度为75-90％，次氯酸钠溶液的质量浓度为2-10％。
进一步地，所述诱导培养为暗培养，温度为30-32℃，6-7天为一个培养周期，优选培养2-3个培养周期。
进一步地，所述增殖培养温度为30-32℃，光照10-12h/d，摇床培养转速为110-130r/min，7天为一个培养周期，优选培养2-3个培养周期。
进一步地，在增殖培养中，稳态磁场干预具体参数为每个培养周期中加载稳态磁场5-6天，每天曝磁6-8h，强度为0.9-3T。
鱼油主要成分为(DHA)、(EPA)可以抑制肝脏内SREBP-2、HMG-COA还原酶mRNA、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的表达，并且可以抑制HMG-COA还原酶的活性，从而可以保证体内胆固醇水平，限制胆固醇合成量。
磷脂被誉为“血管清道夫”，具有亲水性和亲脂性的功效，其内部脂肪酸成分主要有亚油酸和亚麻酸，调节体内脂肪的吸收与代谢，避免胆固醇在血管壁的沉积，同时可清除部分沉积物，从一定程度上进一步防止胆固醇引起的一些疾病，增加人体的安全系数。
本发明通过上述三种物质的协同作用，更加有效、严格地控制体内胆固醇的水平。
本发明还提供了一种控制胆固醇的保健品，该保健品包括上述组合物和制剂学上可接受的辅料。为了使用方便，本发明所述的保健品优选制成水溶性和脂溶性两种剂型。
在本发明的一个实施方案中，所述水溶性的控制胆固醇的保健品是通过下述方法制备的：
(1)梯度混匀：将鱼油、大豆干细胞培养物和磷脂梯度混合，得混合物1；
(2)包埋：将所述混合物1与浓度为1.4％-1.6％的海藻酸钠溶液按照质量比为(6-8):(0.5-3)的比例混合均匀，搅拌，然后加入辛烯基琥珀酸淀粉钠，继续搅拌，得混合物2，其中辛烯基琥珀酸淀粉钠添加量为混合物2质量的5-8％；
(3)喷雾定型：将上述混合物2喷到浓度为1.0-3.0％的氯化钙溶液中定型；
(4)漂洗、预干、烘干、即得。
进一步地，预干的具体方法是在35-40℃的条件下，将漂洗后的混合液干燥至水分含量为5-10％。通过漂洗可以去除颗粒表面多余的钙质，低温预干避免结块成团。
进一步地，烘干的温度为50-55℃。
在本发明的另一个实施方案中，脂溶性的控制胆固醇的保健品是通过下述方法制备的：
(1)梯度混匀：将鱼油、大豆干细胞培养物和磷脂梯度混合，得混合物1；
(2)包埋：将所述混合物1与浓度为1.4％-1.6％的海藻酸钠溶液按照质量比为(6-8):(0.5-3)比例混合均匀，搅拌，得混合物2；
(3)喷雾定型：将上述混合物2喷到浓度为1.0-3.0％的氯化钙溶液中定型；
(4)漂洗、预干、烘干、即得。
进一步地，预干的具体方法是在35-40℃的条件下，将漂洗后的混合液干燥至水分含量为5-10％。
进一步地，烘干的温度为50-55℃。
另外注意的是，如果没有特别说明，本发明所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及以端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。
本发明的有益效果如下：
富含植物甾醇的大豆干细胞培养物与鱼油两种原料组合，与单独使用控制机体内胆固醇水平物质相比，可以从外源食物摄取、内源自身合成两个根本途径中减少胆固醇摄入，表里兼顾。同时，本组合物中的磷脂可以将机体内堆积的胆固醇清除，多重防护，强效控制体内胆固醇水平，使该组合物控制体内胆固醇的功效更佳。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1
组合物配方：大豆干细胞培养物90重量份，鱼油8重量份，磷脂2重量份
辅助配料:海藻酸钠0.34重量份
制备方法：
(1)梯度混匀：精选鱼油、大豆干细胞培养物，取四分之一的鱼油加入到一半的大豆干细胞培养物中，搅拌均匀，得混合物A，称取四分之一的鱼油加入至混合物A中，搅拌均匀，得混合物B，将剩余的大豆干细胞培养物加至混合物B中，充分搅拌，得混合物C，将四分之一的鱼油加入至混合物C中，搅拌均匀，得混合物D，最后，将剩余的四分之一的鱼油与混合物D搅拌均匀，将磷脂混入，搅拌均匀，得鱼油、大豆干细胞培养物和磷脂的混合物1。
(2)包埋：将上述混合物1和浓度为1.4％-1.6％的海藻酸钠溶液按照8:2的比例混合，经高速搅拌机充分搅拌均匀，得混合物2。
(3)喷雾定型：将上述混合物2放入喷雾器内，将其以雾状液滴形式喷到浓度为2.5％的氯化钙溶液中定型6-9min。
(4)漂洗：为去除颗粒表面多余的钙特进行此步骤。采用纯净水漂洗，反复漂洗2-3次之后，沥去水分备用；
预干：为避免干燥后的组合物结团、结块、分散不均匀等影响特进行此步，将漂洗后的混合液于烘箱中在40℃的条件下将其干燥至水分含量为5-10％；
烘干：为保证产品为均一、稳定的状态特进行此步，其中为保证原料活性成分最大可能的保留，将干燥温度控制在50-55℃之间，将产品烘干至恒重即得到脂溶性控制胆固醇的保健品。
实施例2
组合物配方：大豆干细胞培养物90重量份，鱼油8重量份，磷脂2重量份
辅助配料：海藻酸钠0.6重量份，辛烯基琥珀酸淀粉钠8.6重量份
制备方法：
(1)梯度混匀：精选鱼油、大豆干细胞培养物，取四分之一的鱼油加入到一半的大豆干细胞培养物中，搅拌均匀，得混合物A，称取四分之一的鱼油加入至混合物A中，搅拌均匀，得混合物B，将剩余的大豆干细胞培养物加至混合物B中，充分搅拌，得混合物C，将四分之一的鱼油加入至混合物C中，搅拌均匀，得混合物D，最后，将剩余的四分之一的鱼油与混合物D搅拌均匀，将磷脂混入，搅拌均匀，得鱼油、大豆干细胞培养物和磷脂的混合物1。
(2)包埋：将上述混合物1和浓度为1.4％-1.6％的海藻酸钠溶液按照7:3的比例混合，经高速搅拌机充分搅拌均匀，然后加入辛烯基琥珀酸淀粉钠，继续搅拌，得混合物2，其中辛烯基琥珀酸淀粉钠添加量为混合物2的6％。
(3)喷雾定型：将上述混合物2放入喷雾器内，将其以雾状液滴形式喷到浓度为2.5％的氯化钙溶液中定型6-9min。
(4)漂洗：为去除颗粒表面多余的钙特进行此步骤。采用纯净水漂洗，反复漂洗2-3次之后，沥去水分备用；
预干：为避免干燥后的鱼油、大豆干细胞培养物结团、结块、分散不均匀等影响特进行此步，将漂洗完成的混合液于烘箱中在40℃的条件下将其干燥至水分含量为5-10％；
烘干：为保证产品为均一、稳定、便捷的状态特进行此步，其中为保证原料活性成分最大可能的保留，将干燥温度控制在50-55℃之间，将产品烘干至恒重即得到水溶性控制胆固醇的保健品。
实施例3
组合物配方：大豆干细胞培养物66重量份，鱼油32重量份，磷脂2重量份
辅助配料：海藻酸钠0.35重量份
按照实施例1制备方法制得产品。
实施例4
组合物配方：大豆干细胞培养物66重量份，鱼油32重量份，磷脂2重量份
辅助配料：海藻酸钠0.6重量份，辛烯基琥珀酸淀粉钠8.6重量份
按照实施例2制备方法制得产品。
实施例5
为验证本发明组合物控制胆固醇能力，特对本发明制备的组合物以及鱼油、植物甾醇分别进行验证试验。
本实验通过建立数学模型，全方位对各组分中的有效成分效果进行分析，其中，特别针对三种功效成分对体内胆固醇水平的影响以及各原料之间对体内胆固醇水平的影响。
1、验证试验设计
1.1研究对象
调查对象为在职工作人员，通过个人体检结果筛选血清总胆固醇水平高于5.2mol/L的人员为本次受试人群。
1.2研究方法
将筛选出的符合试验要求的人员分为七组，第一组为空白对照组正常喂养，未食用任何样品，第二组为每天食用2g鱼油(含DHA240mg，EPA360mg)、第三组为每天食用7.3g大豆干细胞培养物(含植物甾醇450mg)，第四组为每天食用20mg磷脂，第五组为每天食用10g按照实施例1制法制得的脂溶性产品(DHA 129mg，EPA 194mg，植物甾醇450mg)，第六组为每天食用10g按照实施例2制得的水溶性产品(DHA 121mg，EPA 181mg，植物甾醇423mg)，第七组为每天食用10g按照实施例3制法制得的脂溶性产品(DHA240mg，EPA360mg，植物甾醇250mg)，第八组为每天食用10g按照实施例4制得的水溶性产品(DHA226mg，EPA338mg，植物甾醇235mg)，试验持续60天后，对试验人群进行胆固醇测定。
参与本次试验的共计210人，其中女性共105人，男性共计105人，将以上人群分为七组，其中，每组女性15人，男性15人。
1.3结果
经过为期60天的试验，七组试验人群的测试结果如表1所示：
表1试验人群总胆固醇、甘油三酯指标变化
由表1可知，经60天试验之后，除第一组和第四组外，其他六组实验中的受试人员总胆固醇水平、甘油三脂水平均有所降低，第一组受试人群甘油三脂水平稍有下降，而总胆固醇水平却呈小幅度升高趋势；第四组受试人群总胆固醇水平稍有下降趋势，而甘油三酯水平未发生变动。第一组即对照组总胆固醇水平升高了0.33％，甘油三酯水平降低了0.82％；第二组即食用鱼油实验组总胆固醇水平下降了3.16％，甘油三酯水平降低了2.89％；第三组即食用大豆干细胞培养物实验组总胆固醇水平下降了4.30％，甘油三酯水平降低了3.6％；第四组即食用磷脂实验组总胆固醇水平下降了1％，甘油三酯未发生变化；第五组即食用按照实施例1制得的脂溶性产品实验组总胆固醇水平下降了6.80％，甘油三酯水平降低了4.35％；第六组即食用按照实施例2制得的水溶性产品实验组总胆固醇水平下降了6.07％，甘油三酯水平降低了4.21％；第七组即食用按照实施例3制得的脂溶性产品实验组总胆固醇水平下降了7.05％，甘油三酯水平降低了4.67％；第八组即食用按照实施例4制得的水溶性产品实验组总胆固醇水平下降了6.20％，甘油三酯水平降低了3.80％。从以上结果可以看出，鱼油、大豆干细胞培养物、磷脂三者之间搭配后对胆固醇以及甘油三酯的控制作用明显高于三者各自降胆固醇效果，可见三种原料之间有一定的协同作用，增加了该组合物控制胆固醇的功效，与此同时，该实验结果也验证本发明选用将此三种原料搭配降低胆固醇的合理性。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
Claims (9)
1.一种控制胆固醇的组合物，其特征在于，它包括大豆干细胞培养物50-90重量份、鱼油8-33重量份、磷脂1-10重量份；
其中，所述大豆干细胞培养物通过下述方法制备：
（1）将大豆种子用乙醇溶液浸泡，无菌水冲洗后，再用次氯酸钠溶液浸泡，然后无菌水冲洗，获得无菌大豆；
（2）取上述无菌大豆的下胚轴，将其切成长度为1.5-2.5mm，获取无菌大豆组织；
（3）将获得的无菌大豆组织，接种于诱导培养基进行诱导培养，获得愈伤组织，其中，1g无菌大豆组织接种于25-35 mL的诱导培养基；
（4）将上述获得的愈伤组织，接种于增殖培养基，摇床培养，同时于第2天开始进行稳态磁场干预，即可获得富含植物甾醇的大豆干细胞培养物；
所述诱导培养基为含8-28mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、15-17mol/L柠檬酸铵和0.1-0.5mg/L 萘乙酸的MS培养基，pH调至6.3-6.0；
所述增殖培养基为含8-28 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、1.5-2.5 mg/L的蔗糖和0.1-0.5mg/L水解酪蛋白的MS培养基，pH调至6.8-7.0；
所述诱导培养为暗培养，温度为30-32℃，6-7天为一个培养周期；
所述增殖培养温度为30-32℃，光照10-12h/d，摇床培养转速为110-130r/min，7天为一个培养周期；在增殖培养中，稳态磁场干预具体参数为每个培养周期中加载稳态磁场5-6天，每天曝磁6-8h，强度为0.9-3T。
2.一种控制胆固醇的保健品，其特征在于，包括权利要求1所述的组合物和制剂学上可接受的辅料。
3.根据权利要求2所述的保健品，其特征在于，所述保健品的剂型为水溶性的或脂溶性的。
4.根据权利要求3所述的保健品，其特征在于，水溶性的控制胆固醇的保健品是通过下述方法制备的：
（1）梯度混匀：将鱼油、大豆干细胞培养物和磷脂梯度混合，得混合物1；
（2）包埋：将所述混合物1与浓度为1.4%-1.6%的海藻酸钠溶液按照质量比为6-8: 0.5-3比例混合均匀，搅拌，然后加入辛烯基琥珀酸淀粉钠，继续搅拌，得混合物2，其中辛烯基琥珀酸淀粉钠添加量为混合物2质量的5-8%；
（3）喷雾定型：将上述混合物2喷到浓度为1.0-3.0%的氯化钙溶液中定型；
（4）漂洗、预干、烘干、即得。
5.根据权利要求4所述的保健品，其特征在于，预干的具体方法是在35-40℃的条件下，将漂洗后的混合液干燥至水分含量为5-10%。
6.根据权利要求4所述的保健品，其特征在于，烘干的温度为50-55℃。
7.根据权利要求3所述的保健品，其特征在于，脂溶性的控制胆固醇的保健品是通过下述方法制备的：
（1）梯度混匀：将鱼油、大豆干细胞培养物和磷脂梯度混合，得混合物1；
（2）包埋：将所述混合物1与浓度为1.4%-1.6%的海藻酸钠溶液按照质量比为6-8: 0.5-3的比例混合均匀，搅拌，得混合物2；
（3）喷雾定型：将上述混合物2喷到浓度为1.0-3.0%的氯化钙溶液中定型；
（4）漂洗、预干、烘干、即得。
8.根据权利要求7所述的保健品，其特征在于，预干的具体方法是在35-40℃的条件下，将漂洗后的混合液干燥至水分含量为5-10%。
9.根据权利要求7所述的保健品，其特征在于，烘干的温度为50-55℃。
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