CN106176623A - 盐酸二甲双胍plga微球及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种盐酸二甲双胍PLGA微球及其制备方法和应用，所述盐酸二甲双胍PLGA微球的载体包括PLGA。盐酸二甲双胍PLGA微球包封率高，重复性好，稳定性高，能够丰富二甲双胍的给药方式。

Description

盐酸二甲双胍PLGA微球及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种盐酸二甲双胍PLGA微球及其制备方法和应用。
背景技术
微球制剂作为一种优良的缓控释制剂，不仅能够有效延长药物在体内的半衰期，还能保护药物，减少降解，能有效提高病人的顺应性。随着材料科学和高分子科学的快速发展，作为载体的高分子聚合物材料也不再局限于传统的淀粉、壳聚糖、聚乳酸、明胶等。同时，在传统的高分子聚合物材料上加以化学修饰，增加制剂的靶向性，提高生物利用度。
PLGA因其生物相容性好，降解速度可控等优点，是药物制剂领域的优良辅料。自1986年第一个微球制剂曲普瑞林(triptorelin)PLGA微球上市以来，PLGA微球制剂一直是研究热门。多年以来，多肽、蛋白类药物的PLGA微球制剂的制备及应用已趋于成熟，但对于小分子高水溶性的药物，PLGA微球的制备一直以来难以克服包封率低的缺点。
盐酸二甲双胍是一种应用于治糖尿病的药物，目前市场上还未出现盐酸二甲双胍PLGA微球。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种盐酸二甲双胍PLGA微球及其制备方法和应用，用于解决现有技术的不足。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种盐酸二甲双胍PLGA微球，所述盐酸二甲双胍PLGA微球的载体包括PLGA。
所述PLGA是指聚乳酸-羟基乙酸共聚物。
优选地，所述盐酸二甲双胍PLGA微球中盐酸二甲双胍和PLGA的质量比例范围是1：(1～1000)。
本发明的另一方面提供了一种盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，所述制备方法至少包括以下步骤：
(1)制备盐酸二甲双胍混悬液：将PLGA、盐酸二甲双胍以及有机溶剂混合、搅拌；
(2)制备连续相溶液；
(3)制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将步骤(1)中制备的盐酸二甲双胍混悬液加入步骤(2)制备的连续相溶液，搅拌，过滤，洗涤去除有机溶剂，即得。
所述步骤(3)中连续相溶液加入的量根据加入的盐酸二甲双胍混悬液的量而调节。
所述步骤(3)中去除有机溶剂，本领域的技术人员可以根据现有技术获得，也可以采用本发明所述的方法。
优选地，所述步骤(1)还包括以下特征中的任意一种或几种：
(1)所述PLGA的0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度范围是0.1dl/g～2.0dl/g；
(2)所述PLGA中乳酸和羟基乙酸摩尔比例范围是10：90～90：10；
(3)所述PLGA的浓度范围是10mg/ml～200mg/ml。
优选地，所述步骤(1)中搅拌采用的是高剪切乳化分散机搅拌9000～11000rpm下，搅拌15～30秒。
优选地，所述步骤(1)中的有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙腈或乙酸乙酯中的任意一种或几种。
优选地，所述步骤(1)中的盐酸二甲双胍和PLGA的质量比例范围是1：(1～1000)。
优选地，所述步骤(2)中连续相溶液包括有机溶剂，所述有机溶剂选选自中性油脂、低级酮或卤代烃中的任意一种或几种。
所述中性油脂可以选自大豆油，玉米油，蓖麻油，亚麻油等。
所述低级酮可以选自甲乙酮，丙酮，环己酮等，
所述卤代烃可以选自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，1-氯丙烷等。
优选地，所述连续相溶液还包括表面活性剂，所述步骤(3)：制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将步骤(1)中制备的盐酸二甲双胍混悬液加入步骤(2)制备的连续相溶液，去除有机溶剂和表面活性剂，即得；
优选地，所述表面活性剂为非离子表面活性剂，
所述非离子表面活性剂可以选自司盘-20，司盘-40，司盘-60，司盘-80等。
更优选地所述非离子表面活性剂和所述步骤(2)中有机溶剂的体积比为0.1～20:100。
优选地，所述连续相溶液还包括二甲基硅油，所述步骤(3)：制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将步骤(1)中制备的盐酸二甲双胍混悬液加入步骤(2)制备的连续相溶液，去除有机溶剂和二甲基硅油，即得；
更优选地，所述硅油和所述步骤(2)有机溶剂的体积比为75～85:100。
本发明的另一方面提供了所述的盐酸二甲双胍PLGA微球用于制备治疗糖尿病药物的用途。
如上所述，本发明的盐酸二甲双胍PLGA微球及其制备方法，具有以下有益效果：
克服了常规微球制备方法的缺点，涉及设备装置简单常见，辅料单一，药质比范围广， 包封率高，重复性好，稳定性高，能够丰富二甲双胍的给药方式。
附图说明
图1：实施例1中研磨细盐酸二甲双胍
图2：实施例2中盐酸二甲双胍PLGA微球扫描电镜图
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
须知，下列实施例中未具体注明的工艺设备或装置均采用本领域内的常规设备或装置。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。此外应理解，本发明中提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还可以存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤，除非另有说明；还应理解，本发明中提到的一个或多个设备/装置之间的组合连接关系并不排斥在所述组合设备/装置前后还可以存在其他设备/装置或在这些明确提到的两个设备/装置之间还可以插入其他设备/装置，除非另有说明。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更技术内容的情况下，当亦视为本发明可实施的范畴。
本发明中，缩写符号表示如下：
缩写名称 中文全称
PLGA 聚乳酸-羟基乙酸共聚物
HPLC 高效液相色谱仪
DMSO 二甲基亚
实施例1
1.盐酸二甲双胍微球的制备与获得
(1)制备盐酸二甲双胍混悬液：称取50mg PLGA，加入1ml混合溶剂(二氯甲烷与等量的乙腈)溶解，加入研磨细的盐酸二甲双胍(如图1)10mg，使用高剪切乳化分散机11000rpm下剧烈搅拌15s，得盐酸二甲双胍混悬液；所述PLGA为0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性 粘度范围是0.1dl/g，乳酸和羟基乙酸摩尔比例10:90，PLGA的浓度范围是10mg/ml；
(2)制备连续相溶液：取0.05～1g司盘-80，例如0.2g、5g大豆油，混匀，得连续相溶液；
(3)制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将所得盐酸二甲双胍混悬液，在高剪切乳化分散机1000rpm剧烈搅拌下加入所得连续相溶液中，转移入磁力搅拌器中，减压搅拌，过滤，沉淀用400ml正己烷洗涤，除去表面活性剂和有机溶剂，得盐酸二甲双胍PLGA微球。
2.粒径测定
仪器：FEI COMPANY Sirion 200SEM
方法：取干燥粉末扫描电镜拍照。
3.包封率测定
(1)具体测定方法如下：
色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18，5μm，4.6×150mm
流动相：10mM十二烷基硫酸钠和10mM磷酸二氢钠：甲醇：异丙醇(40：50：10)
流速：1ml/min
柱温：25℃
检测波长：236nm
进样体积：5μl
(2)标准曲线制备
样品溶剂的制备：将DMSO与超纯水按1：1.5混合，即得。
盐酸二甲双胍系列梯度溶液的制备：称取一定量的无定型态盐酸二甲双胍，加样品溶剂溶解并制成浓度为0.001、0.005、0.01、0.02、0.04和0.05mg/mL的溶液。
分别取盐酸二甲双胍系列对照品溶液进样分析，以峰面积对浓度作图，制作标准曲线。
(3)微球制剂包封率测定
取PLGA微球适量，精密称定，加适量DMSO溶解，以1.5倍体积超纯水稀释，沉淀PLGA，13,000rpm离心5分钟，取上清液，0.22μm有机滤膜过滤，按(1)项下高效液相方法进样分析。
(4)结果分析
样品名称 粒径(μm) 包封率(％)
1 32.54 82.2
2 28.75 80.1
3 36.22 85.3
由上述分析可知，本发明制备的的粒径32.50μm，包封率82.5％。该制剂呈规则的圆球形，粒径分布较均一，包封效果好，重复性高，有进一步放大试验的潜力。
实施例2
1.盐酸二甲双胍微球的制备与获得
(1)制备盐酸二甲双胍混悬液：称取10mg PLGA，加入1ml二氯甲烷溶解，加入研磨细的盐酸二甲双胍10mg，使用高剪切乳化分散机10000rpm下剧烈搅拌20s，得盐酸二甲双胍混悬液；所述PLGA为0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度范围是2.0dl/g，乳酸和羟基乙酸摩尔比例90:10，PLGA的浓度范围是200mg/ml；
(2)制备连续相溶液：取0.75～1.25ml二氯甲烷,例如1ml、5g二甲基硅油，混匀，得连续相溶液；
(3)制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将所得盐酸二甲双胍混悬液，在高剪切乳化分散机10000rpm剧烈搅拌下加入所得连续相溶液中，倒入500ml石油醚，搅拌桨4℃搅拌10min，过滤，沉淀用1000ml石油醚洗涤，除去有机溶剂和二甲基硅油，得盐酸二甲双胍PLGA微球。
2.粒径测定
仪器：FEI COMPANY Sirion 200SEM
方法：取干燥粉末扫描电镜拍照。
3.包封率测定
(1)具体测定方法如下：
色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18，5μm，4.6×150mm
流动相：10mM十二烷基硫酸钠和10mM磷酸二氢钠：甲醇：异丙醇(40：50：10)
流速：1ml/min
柱温：25℃
检测波长：236nm
进样体积：5μl
(2)标准曲线制备
样品溶剂的制备：将DMSO与超纯水按1：1.5混合，即得。
盐酸二甲双胍系列梯度溶液的制备：称取一定量的无定型态盐酸二甲双胍，加样品溶剂溶解并制成浓度为0.001、0.005、0.01、0.02、0.04和0.05mg/mL的溶液。
分别取盐酸二甲双胍系列对照品溶液进样分析，以峰面积对浓度作图，制作标准曲线。
(3)微球制剂包封率测定
取2.1项下制备微球适量，精密称定，加适量DMSO溶解，以1.5倍体积超纯水稀释，沉淀PLGA，13,000rpm离心5分钟，取上清液，0.22μm有机滤膜过滤，按2.3.1项下高效液相方法进样分析。
(4)结果分析
样品名称 粒径(μm) 包封率(％)
1 74.34 96.5
2 59.82 91.3
3 83.23 93.9
由上述分析可知，本发明制备的的粒径72.46μm，包封率93.9％，该制剂呈规则的圆球形，粒径分布较均一，包封效果好，重复性高，有进一步放大试验的潜力。
实施例3
1.盐酸二甲双胍微球的制备与获得
(1)制备盐酸二甲双胍混悬液：称取200mg PLGA，加入1ml丙酮溶解，加入研磨细的盐酸二甲双胍0.2mg，使用高剪切乳化分散机9000rpm下剧烈搅拌30s，得盐酸二甲双胍混悬液；
(2)制备连续相溶液：取1ml丙酮、5g二甲基硅油，混匀，得连续相溶液；所述PLGA为0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度范围是1.0dl/g，乳酸和羟基乙酸摩尔比例50:50，PLGA的浓度范围是100mg/ml；
(3)制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将所得盐酸二甲双胍混悬液，在高剪切乳化分散机1000rpm剧烈搅拌下加入所得连续相溶液中，倒入500ml石油醚，搅拌桨4℃搅拌10min，过滤，沉淀用1000ml石油醚洗涤，除去有机溶剂和二甲基硅油，得盐酸二甲双胍PLGA微球。2.粒径测定
仪器：FEI COMPANY Sirion 200SEM
方法：取干燥粉末扫描电镜拍照。
3.包封率测定
(1)具体测定方法如下：
色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18，5μm，4.6×150mm
流动相：10mM十二烷基硫酸钠和10mM磷酸二氢钠：甲醇：异丙醇(40：50：10)
流速：1ml/min
柱温：25℃
检测波长：236nm
进样体积：5μl
(2)标准曲线制备
样品溶剂的制备：将DMSO与超纯水按1：1.5混合，即得。
盐酸二甲双胍系列梯度溶液的制备：称取一定量的无定型态盐酸二甲双胍，加样品溶剂溶解并制成浓度为0.001、0.005、0.01、0.02、0.04和0.05mg/mL的溶液。
分别取盐酸二甲双胍系列对照品溶液进样分析，以峰面积对浓度作图，制作标准曲线。
(3)微球制剂包封率测定
取2.1项下制备微球适量，精密称定，加适量DMSO溶解，以1.5倍体积超纯水稀释，沉淀PLGA，13,000rpm离心5分钟，取上清液，0.22μm有机滤膜过滤，按2.3.1项下高效液相方法进样分析。
(4)结果分析
样品名称 粒径(μm) 包封率(％)
1 68.92 93.6
2 74.65 89.7
3 54.36 96.4
由上述分析可知，本发明制备的的粒径65.98μm，包封率93.2％，该制剂呈规则的圆球形，粒径分布较均一，包封效果好，重复性高，有进一步放大试验的潜力。
以上的实施例是为了说明本发明公开的实施方案，并不能理解为对本发明的限制。此外，本文所列出的各种修改以及发明中方法、组合物的变化，在不脱离本发明的范围和精神的前提下对本领域内的技术人员来说是显而易见的。虽然已结合本发明的多种具体优选实施例对本发明进行了具体的描述，但应当理解，本发明不应仅限于这些具体实施例。事实上，各种如上所述的对本领域内的技术人员来说显而易见的修改来获取发明都应包括在本发明的范围内。

Claims (11)

1.一种盐酸二甲双胍PLGA微球，其特征在于，所述盐酸二甲双胍PLGA微球的载体包括PLGA。
2.如权利要求1所述的盐酸二甲双胍PLGA微球，其特征在于，所述盐酸二甲双胍PLGA微球中盐酸二甲双胍和PLGA的质量比例范围是1：1～1000。
3.如权利要求1～2任意一项所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于，所述制备方法至少包括以下步骤：
(1)制备盐酸二甲双胍混悬液：将PLGA、盐酸二甲双胍以及有机溶剂混合、搅拌；
(2)制备连续相溶液；
(3)制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将步骤(1)中制备的盐酸二甲双胍混悬液加入步骤(2)制备的连续相溶液，搅拌，过滤，洗涤去除有机溶剂，即得。
4.根据权利要求3所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)还包括以下特征中的任意一种或几种：
(1)所述PLGA的0.5％氯仿溶液特性粘度范围是0.1dl/g～2.0dl/g；
(2)所述PLGA中乳酸和羟基乙酸摩尔比例范围是10：90～90：10；
(3)所述PLGA的浓度范围是10mg/ml～200mg/ml。
5.根据权利要求3所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中搅拌采用的是高剪切乳化分散机搅拌，9000～11000rpm，搅拌15～30秒。
6.根据权利要求3所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙腈或乙酸乙酯中的任意一种或几种。
7.根据权利要求3所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的盐酸二甲双胍和PLGA的质量比例范围是1：1～1000。
8.根据权利要求3所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中连续相溶液包括有机溶剂，所述有机溶剂选选自中性油脂、低级酮或卤代烃中的任意一种或几种。
9.根据权利要求8所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述连续相溶液还包括表面活性剂，所述步骤(3)：制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将步骤(1)中制备的盐酸二甲双胍混悬液加入步骤(2)制备的连续相溶液，去除有机溶剂和表面活性剂，即得；
优选地，所述表面活性剂为非离子表面活性剂，
更优选地所述非离子表面活性剂和所述步骤(2)中的有机溶剂的体积比为0.1～20:100。
10.根据权利要求8所述的盐酸二甲双胍PLGA微球的制备方法，其特征在于：所述连续相溶液还包括二甲基硅油，所述步骤(3)：制备盐酸二甲双胍PLGA微球：将步骤(1)中制备的盐酸二甲双胍混悬液加入步骤(2)制备的连续相溶液，去除有机溶剂和二甲基硅油，即得；
优选地，所述硅油和所述步骤(2)有机溶剂的体积比为75～85:100。
11.根据权利要求1～2任意一项所述的盐酸二甲双胍PLGA微球用于制备治疗糖尿病药物的用途。
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