CN106172002A - 一种艾草组培苗的生产方法 - Google Patents

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    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008Methods for regeneration to complete plants

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Abstract

本发明公开了一种艾草组培苗生产方法,包括如下步骤:外植体的建立;外植体处理;初代培养;继代培养;生根培养;炼苗和移栽步骤。本发明的艾草组培苗生产方法具有成苗量多,繁殖系数高的优点,比传统的广西地区艾草种植方法能够提高成活率15‑20%,能够在短期内快速繁殖大量野艾草,具有成活率高,生长迅速,能够快速实现规模化种植和生产的特点。

Description

一种艾草组培苗的生产方法
技术领域
本发明涉及植物种植技术领域,具体为一种艾草组培苗的生产方法。
背景技术
艾草(Artemisia argyi)属菊科蒿属多年生草本植物,因其具有重要的药用价值和生态效应,长期以来,一直受到人们青睐。尽管艾蒿是一种分布较为广泛、数量较多的植物,但由于每年端午节人们大量的拔取,使很多地区的艾蒿已经濒危灭绝。王艳等对艾蒿进行了组织培养及试管苗培养的研究,已建立起艾蒿的无性系,获得的试管苗容易移栽、移植成活,但却存在着试管苗繁殖速度较慢等问题;同时发明人用上述方法对广西地区的野生艾草组织培养繁殖多次,并未获得成功,这可能与野艾草当地的生活环境有关。
广西壮族自治区南宁地区气候湿润多雨,野生艾蒿生长迅速,发明人对广西壮族自治区南宁市的野生艾蒿尽心了详细研究,发现其虽然与北方大多数地区的野生艾蒿外形大致类似,但其生长条件却与之不同,这可能与南北方气候、土质不同有关。众所周知,目前保护野生艾蒿资源已经成为国家的重要课题,不仅因为其作为药用植物有巨大的潜在价值,更因为其繁殖条件苛刻,在不同地域均有不同的生长繁殖条件。组织培养(TissueCulture)是在无菌条件下,分离并在培养基中培养离体植物组织的技术,它具有以下重要意义:(1)促进优良遗传材料的快速繁殖;(2)脱毒良种苗的培养和无病毒苗的大量繁殖;(3)特殊育种材料的快速繁殖;(4)基因工程植株的快速繁殖;(5)离体保存种质的快速繁殖。研究南宁地区的野生艾蒿组培生长条件,对于保护广西地区野生艾蒿资源,利用植物组织培养方法建立起起无性再生系,满足社会需求,具有重要的实践意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种艾草组培苗的生产方法,旨在解决目前广西地区艾草只能自然种植,不能无性繁殖的问题;从而达到保护野艾草资源,使其优良性状得以保持并最终得到有效利用,满足社会需求的目的。
本发明的技术方案是这样实现的:
本发明的艾草组培苗生产方法,包括如下步骤:
①外植体的建立:选择在广西壮族自治区南宁市武鸣县里建镇生长的野艾草,在其叶片长至收获时,取无病虫害侵染的艾草嫩茎作为外植体;
②外植体处理:步骤①得到的外植体先用无菌水冲洗4-5次,沥干水,再用75%的酒精浸泡30S,最后置于0.1%的升汞溶液中消毒5-10min,再用无菌水冲洗4-5 次,处理完毕后,晾干备用;
③初代培养:将步骤②处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基,初代培养基成分为:MS+NAA1.2mg/L+GA3 0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+糖蜜15g/L,培养基pH6.3;光照强度2000Lux,培养温度23±2℃,培养时间22±2天;
④继代培养:将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后,继续进行继代培养,培养基成分为:N6+IAA0.1mg/L+蔗糖20g/L;培养温度25±2℃,光照时间22h/d,培养基pH5.8-6.0;每25天扩繁一次试管苗;
⑤生根培养:待步骤④扩繁的试管苗取出,转入生根培养,生根培养基成分为:1/4MS+IBA0.2mg/L+6-BA 0.02mg/L+15%糖蜜;光照强度为3000Lux,培养温度25±2℃,培养至25天,根长至3-5cm,苗长高3cm时出瓶;
⑥炼苗:选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土:椰糠配比为1:3 的营养基质中,保持空气湿度50-60%,光照8000lux;
⑦移栽:炼苗15天后移到露天培养,建立艾草组培苗生产基地。
本发明的有益效果是:
一、本发明具有成苗量多,繁殖系数高的优点,比传统的广西地区艾草种植方法能够提高成活率15-20%,能够在短期内快速繁殖大量野艾草。
二、采用合理化炼苗措施,使艾草在出瓶后能够迅速适应露地环境,成活率高,生长迅速,能够快速实现规模化种植和生产。
具体实施方式
以广西地区野生艾草为组培繁殖对象,所开发的组培苗生产技术,包括如下步骤:
①外植体的建立:选择在广西壮族自治区南宁市武鸣县里建镇生长的野艾草,在其叶片长至收获时,取无病虫害侵染的艾草嫩茎作为外植体;
②外植体处理:步骤①得到的外植体先用无菌水冲洗4-5次,沥干水,再用75%的酒精浸泡30S,最后置于0.1%的升汞溶液中消毒5-10min,再用无菌水冲洗4-5 次,处理完毕后,晾干备用;
③初代培养:将步骤②处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基,初代培养基成分为:MS+NAA1.2mg/L+GA3 0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+糖蜜15g/L,培养基pH6.3;光照强度2000Lux,培养温度23±2℃,培养时间22±2天;
④继代培养:将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后,继续进行继代培养,培养基成分为:N6+IAA0.1mg/L+蔗糖20g/L;培养温度25±2℃,光照时间22h/d,培养基pH5.8-6.0;每25天扩繁一次试管苗;
⑤生根培养:待步骤④扩繁的试管苗取出,转入生根培养,生根培养基成分为:1/4MS+IBA0.2mg/L+6-BA 0.02mg/L+15%糖蜜;光照强度为3000Lux,培养温度25±2℃,培养至25天,根长至3-5cm,苗长高3cm时出瓶;
⑥炼苗:选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土:椰糠配比为1:3 的营养基质中,保持空气湿度50-60%,光照8000lux;
⑦移栽:炼苗15天后移到露天培养,建立艾草组培苗生产基地。
上述本发明实施例的艾草组培苗生产的方法具有成苗量多,繁殖系数高的优点,比传统的广西地区艾草种植方法能够提高成活率15-20%,能够在短期内快速繁殖大量野艾草,具有成活率高,生长迅速,叶子宽大,能够快速实现规模化种植和生产的特点。

Claims (1)

1.一种艾草组培苗生产方法,其特征在于:包括如下步骤:
①外植体的建立:选择在广西壮族自治区南宁市生长的野艾草,在其叶片长至收获时,取无病虫害侵染的艾草嫩茎作为外植体;
②外植体处理:步骤①得到的外植体先用无菌水冲洗4-5次,沥干水,再用75%的酒精浸泡30S,最后置于0.1%的升汞溶液中消毒5-10min,再用无菌水冲洗4-5 次,处理完毕后,晾干备用;
③初代培养:将步骤②处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基,初代培养基成分为:MS+NAA1.2mg/L+GA3 0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+糖蜜15g/L,培养基pH6.3;光照强度2000Lux,培养温度23±2℃,培养时间22±2天;
④继代培养:将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后,继续进行继代培养,培养基成分为:N6+IAA0.1mg/L+蔗糖20g/L;培养温度25±2℃,光照时间22h/d,培养基pH5.8-6.0;每25天扩繁一次试管苗;
⑤生根培养:待步骤④扩繁的试管苗取出,转入生根培养,生根培养基成分为:1/4MS+IBA0.2mg/L+6-BA 0.02mg/L+15%糖蜜;光照强度为3000Lux,培养温度25±2℃,培养至25天,根长至3-5cm,苗长高3cm时出瓶;
⑥炼苗:选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土:椰糠配比为1:3 的营养基质中,保持空气湿度50-60%,光照8000lux;
⑦移栽:炼苗15天后移到露天培养,建立艾草组培苗生产基地。
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